血清粒細(xì)胞集落刺激因子與鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原輔助診斷宮頸鱗狀細(xì)胞癌的意義

舒麗紅，丁顯平

1.四川大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院(成都 610041)；2.成都市第七人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科(成都 610041)

·論 著·

血清粒細(xì)胞集落刺激因子與鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原輔助診斷宮頸鱗狀細(xì)胞癌的意義

舒麗紅1，2，丁顯平1△

1.四川大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院(成都 610041)；2.成都市第七人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科(成都 610041)

目的 通過分析血清中粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCC)的表達(dá)水平,探索G-CSF、SCC對(duì)輔助診斷宮頸癌的意義。方法 收集2011年4月至2016年2月在成都市第七人民醫(yī)院行G-CSF、 SCC、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)的臨床資料共1 250例。其中，經(jīng)病理確診的宮頸鱗癌患者358例(宮頸癌組)，宮頸良性病變患者425例(宮頸良性病變組)，健康體檢者467例(健康對(duì)照組)。收集其G-CSF、 SCC、CEA和AFP檢測(cè)值。采用方差分析組間各檢測(cè)值差異，回歸分析檢測(cè)值在惡性腫瘤中的表達(dá)意義，SROC曲線分析SCC和G-CSF在診斷宮頸癌中的意義。結(jié)果 方差分析結(jié)果顯示：宮頸癌組各檢測(cè)值水平、檢測(cè)值升高百分率均高于宮頸良性病變組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；G-CSF診斷宮頸癌SROC曲線下面積AUC=0.994，具有較高診斷準(zhǔn)確性；SCC診斷宮頸癌SROC曲線下面積AUC=0.745，具有一定診斷準(zhǔn)確性。STATA軟件回歸分析結(jié)果顯示：G-CSF、SCC水平在良惡性腫瘤患者中比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其余指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 宮頸癌患者G-CSF、SCC水平高于宮頸良性病變患者或健康人群，G-CSF、SCC可作為宮頸癌的輔助診斷指標(biāo)。

G-CSF；SCC；宮頸癌；輔助診斷

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率位居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤首位[1-2]。流行病學(xué)研究顯示，近年來宮頸癌發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，且傾向于年輕化[3]。早期篩選、預(yù)測(cè)和診斷宮頸癌是目前關(guān)注的熱點(diǎn)。早期發(fā)現(xiàn)和診斷宮頸癌可降低患者死亡率，早期行手術(shù)根治宮頸癌患者可延長(zhǎng)其生存期。目前，用于篩查和輔助診斷宮頸癌的方法較多，血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是一種較簡(jiǎn)便且重要的方法[4]。粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)在正常情況下主要由白細(xì)胞介素(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF-α)刺激后的纖維母細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生[5]。研究[6-7]報(bào)道，惡性腫瘤細(xì)胞也可以產(chǎn)生G-CSF，但有關(guān)宮頸癌與G-CSF之間關(guān)系的研究尚少，且樣本較少。本研究通過探討宮頸癌患者、宮頸良性病變患者和健康體檢者血清G-CSF、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCC)及其他腫瘤標(biāo)志物如癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)與宮頸癌的相關(guān)性，分析其對(duì)宮頸癌輔助診斷的意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2011年4月至2016年2月于成都市第七人民醫(yī)院婦科就診，且經(jīng)病理確診的宮頸鱗癌患者358例(宮頸癌組)，宮頸良性病變者425例(宮頸良性病變組)，健康體檢者467例(健康對(duì)照組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)宮頸癌組：宮腔鏡及病理學(xué)檢查證實(shí)診斷為宮頸癌，并確診其惡性程度，局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，未行手術(shù)及放化療治療。2)宮頸良性病變組：既往無婦科及其他惡性腫瘤病史，宮腔鏡及病理學(xué)檢查證實(shí)為宮頸良性病變?nèi)鐚m頸糜爛、上皮內(nèi)瘤變等。3)健康體檢者：既往無宮頸癌及宮頸良性疾病病史，無合并其他腫瘤病史；宮腔鏡及宮頸刮片檢查未見異常組織。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)合并子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、外陰癌等其他婦科惡性病變的患者；2)合并食道、肺等其他鱗狀細(xì)胞癌的患者；3)合并皮膚炎性病變患者；4)合并肝腎功能不全者；5)已行放化療治療者。 3組平均年齡依次為(47.6±9.8)歲、(47.3±10.2)歲、(42.0±11.7)歲。宮頸癌組：214例宮頸癌患者行宮頸癌根治性手術(shù)，144例不宜手術(shù)行放化療治療；其中非角化鱗癌234例、角化鱗癌124例；高分化49例、中分化172例、低分化137例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移120例、無轉(zhuǎn)移238例。宮頸良性病變組：156例宮頸良性病變患者行宮頸環(huán)形錐切術(shù)，269例行保守治療。所有入組患者均行腫瘤標(biāo)志物、血常規(guī)、血生化、肝腎功能及心電圖等常規(guī)檢查，測(cè)定血清G-CSF濃度、SCC-Ag濃度及行HPV檢測(cè)、宮頸刮片檢查。入組手術(shù)患者術(shù)后均行病理檢查。

1.2 儀器與試劑

G-CSF、SCC、CEA、AFP 均采用美國(guó)雅培公司ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

3組患者均采集5 mL靜脈血于促凝管中，于離心機(jī)中以1 370×g的相對(duì)離心力離心5 min，吸取樣本血清檢測(cè)G-CSF、SCC、CEA、AFP值。

1.4 HPV檢測(cè)及宮頸涂片檢測(cè)

1.4.1 HPV檢測(cè) 以專用取材器材置于宮頸口處逆時(shí)針轉(zhuǎn) 3圈, 停留 10 s左右,將棉簽置于專用培養(yǎng)試管中送 HPV檢測(cè)。

1.4.2 宮頸涂片檢測(cè) 用 1次性木制宮頸刮板刮取宮頸鱗柱上皮交界處細(xì)胞, 均勻涂抹于刮片上, 送細(xì)胞室做巴氏分級(jí)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0和STATA統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。所有連續(xù)型變量采用中位數(shù)(四分位數(shù))表示，計(jì)量資料兩組比較采用t檢驗(yàn)，組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Kolmogorow-Smirnov)；各組率的比較采用2檢驗(yàn)；回歸分析G-CSF、SCC、CEA、AFP因子在輔助診斷宮頸良惡性病變中的意義；SROC曲線分析G-CSF和SCC診斷宮頸癌的準(zhǔn)確性；回歸方法篩選與宮頸癌相關(guān)的血清腫瘤標(biāo)志物。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α設(shè)定為0.05。

2 結(jié)果

2.1 血清腫瘤標(biāo)志物

結(jié)果顯示：宮頸癌組血清G-CSF、SCC、CEA、AFP水平較宮頸良性病變組和健康對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；宮頸癌組G-CSF、SCC、CEA、AFP值升高率大于宮頸良性病變組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；宮頸癌組較子宮良性病變組及健康對(duì)照組HPV感染率高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1、表2)。

表1 3組腫瘤標(biāo)志物水平比較

注:G-CSF:顆粒細(xì)胞集落刺激因子；AFP：甲胎蛋白；CEA：癌胚抗原； SCC：鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原

表2 不同腫瘤標(biāo)志物升高百分比及HPV感染率[n(%)]

注:G-CSF:顆粒細(xì)胞集落刺激因子；AFP：甲胎蛋白；CEA：癌胚抗原； SCC：鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原；HPV：人乳頭狀瘤病毒

2.2 血G-CSF和SCC表達(dá)與宮頸病變惡性程度的關(guān)系

卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示：隨著腫瘤分化程度降低，患者血G-CSF陽(yáng)性率增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。當(dāng)伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)會(huì)增加G-CSF表達(dá)的陽(yáng)性率，角化鱗癌與非角化鱗癌G-CSF表達(dá)的陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；檢驗(yàn)結(jié)果顯示：SCC表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤分化程度有關(guān)，中分化時(shí)陽(yáng)性率最高，高分化時(shí)最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者SCC表達(dá)高于未轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；角化與非角化鱗癌二者比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表3)。

表3 G-CSF與SCC在不同惡性程度宮頸癌中的表達(dá)情況[n(%)]

注:G-CSF:顆粒細(xì)胞集落刺激因子；SCC：鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原；高：高分化；中：中分化；低：低分化

2.3 回歸分析結(jié)果

回歸分析顯示：血清G-CSF值與宮頸癌發(fā)生存在相關(guān)性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；血清SCC值與宮頸癌發(fā)生存在相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；腫瘤標(biāo)志物CEA、AFP值顯示相關(guān)性不顯著，不建議作為宮頸癌的輔助診斷指標(biāo)(表4)。2.4 SROC曲線評(píng)價(jià)G-CSF及SCC診斷準(zhǔn)確性結(jié)果

G-CSF診斷宮頸癌SROC曲線下面積AUC=0.994(95%CI,0.000～1.000)，具有較高診斷準(zhǔn)確性；SCC診斷宮頸癌SROC曲線下面積AUC=0.745(95%CI,0.670～0.821)，具有一定診斷準(zhǔn)確性(圖1)。

表4 血清腫瘤標(biāo)志物回歸分析結(jié)果

模型：yi=β0+β1x1+β2x2+β3x3+β4x4+εi，其中εi表示隨機(jī)誤差項(xiàng)。

注:Coef:常數(shù)項(xiàng)，控制變量系數(shù)；Std.Err:標(biāo)準(zhǔn)誤；G-CSF:顆粒細(xì)胞集落刺激因子；AFP：甲胎蛋白；CEA：癌胚抗原； SCC：鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原

圖1 G-CSF與SCC診斷準(zhǔn)確性的SROC曲線

注:G-CSF:顆粒細(xì)胞集落刺激因子; SCC：鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原

3 討論

宮頸癌發(fā)病率在女性易發(fā)惡性腫瘤中排第2位，僅次于乳腺癌。宮頸癌目前的治療方式主要包括手術(shù)及放化療，早期多以手術(shù)根治切除為主，中晚期則行同步放化療。近年來，流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示宮頸癌的發(fā)病呈年輕化上升趨勢(shì)，如何在徹底清除病灶前提下保留陰道和卵巢功能的矛盾日益突出。因此，如何選擇合適的方法對(duì)宮頸癌進(jìn)行早期篩查和診斷至關(guān)重要[8]。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是惡性腫瘤篩查與輔助診斷的重要工具之一。目前常用的血清腫瘤標(biāo)志物主要包括CEA、CA125、CA199、AFP及SCC。報(bào)道[4,9]顯示，僅SCC水平與宮頸鱗癌的侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)?；A(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，G-CSF在乳腺癌、宮頸癌等惡性腫瘤中的水平異常升高，提示血清中的G-CSF值可能成為這些腫瘤的分子標(biāo)記物。本研究通過收集檢測(cè)宮頸癌患者、宮頸良性病變患者及健康體檢者血清SCC、G-CSF值，分析其與宮頸癌的關(guān)系，且預(yù)測(cè)作為宮頸癌輔助診斷指標(biāo)的意義。

本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組血清SCC值高于子宮良性病變組及健康對(duì)照組，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且血清SCC升高比例大于宮頸良性病變組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。回歸分析結(jié)果顯示，SCC值與宮頸癌發(fā)生有關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。宮頸癌病變多發(fā)生于宮頸鱗狀上皮與柱狀上皮交接移行處，SCC易在宮頸鱗癌類患者的血清和組織提取物中升高，其陽(yáng)性率與宮頸癌分期相關(guān)，中晚期患者SCC水平較高。Arbyn等[10]研究認(rèn)為Ⅰ期陽(yáng)性率約為29%，Ⅳ期約為89%。張彥娜等[11]回歸分析認(rèn)為SCC對(duì)于宮頸癌患者具有較好的診斷價(jià)值，可作為宮頸癌輔助診斷的首選指標(biāo)，此結(jié)果與本研究回歸分析結(jié)果一致。研究認(rèn)為血清中SCC水平與腫瘤體積也存在相關(guān)性，腫瘤體積越大其產(chǎn)生并釋放到血液中癌抗原的概率也隨之增加。Brioschi等[12]研究指出腫瘤體積>10 mL者約有92.6%的宮頸癌患者其SCC-Ag水平>2 ng/mL。本研究回顧性分析了血清G-CSF、SCC表達(dá)與宮頸癌惡性程度的關(guān)系，研究認(rèn)為惡性程度越高上述兩種指標(biāo)陽(yáng)性率越高，由此可見宮頸癌惡性程度與上述兩種指標(biāo)存在正相關(guān)趨勢(shì)的聯(lián)系。惡性程度越高的癌細(xì)胞，其增殖遷移性更強(qiáng)，局部異型鱗狀上皮導(dǎo)致了SCC升高；而更強(qiáng)的遷移性癌細(xì)胞引起了G-CSF高表達(dá)。SROC曲線分析了G-CSF診斷宮頸癌的準(zhǔn)確性，結(jié)果認(rèn)為以病理結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，AUC=0.994(95%CI,0.000～1.000)，具有較高診斷準(zhǔn)確性；SCC診斷宮頸癌SROC曲線下面積AUC=0.745(95%CI,0.670～0.821)，具有一定診斷準(zhǔn)確性。此結(jié)果認(rèn)為G-CSF與SCC對(duì)于診斷宮頸良惡性病變具有較高準(zhǔn)確性。

本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組血清G-CSF值高于子宮良性病變組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且血清G-CSF升高比例大于宮頸良性病變組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；回歸分析結(jié)果顯示，SCC值與宮頸癌發(fā)生有關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。近年來，研究發(fā)現(xiàn)部分類型的腫瘤細(xì)胞也可分泌G-CSF， Ichiishi等[13]發(fā)現(xiàn)肺鱗癌可分泌表達(dá)G-CSF，此后相繼有研究對(duì)伴外周血粒細(xì)胞計(jì)數(shù)增高的宮頸癌患者進(jìn)行G-CSF血清學(xué)檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清中G-CSF水平升高，并與粒細(xì)胞計(jì)數(shù)成線性相關(guān)。血清中G-CSF表達(dá)水平與癌組織中粒細(xì)胞浸潤(rùn)相關(guān)。Strachan等[14]研究結(jié)果顯示，宮頸癌組織可檢測(cè)出G-CSF，表明宮頸癌細(xì)胞可產(chǎn)生G-CSF，并對(duì)粒細(xì)胞有趨化作用。由此說明宮頸癌組血清G-CSF增高的原因是因?yàn)榘┘?xì)胞分泌產(chǎn)生了更多的G-CSF，而宮頸良性病變及健康宮頸細(xì)胞產(chǎn)生G-CSF量較小，與本次臨床分析結(jié)果相符。研究[15]表明，G-CSF還可影響腫瘤血管生成，G-CSF的表達(dá)可作用于單核細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄水平升高血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF) mRNA，增加VEGF蛋白表達(dá)量，促使腫瘤新生血管形成[16]。因此，G-CSF高表達(dá)還會(huì)影響腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，而腫瘤細(xì)胞又會(huì)進(jìn)一步分泌G-CSF，故G-CSF水平與宮頸癌相關(guān)，可作為宮頸癌患者的篩查和輔助診斷指標(biāo)。

綜上所述，血清腫瘤標(biāo)志物中G-CSF、SCC值可一定程度反應(yīng)宮頸病變的良惡性，可作為宮頸癌的篩查和輔助診斷指標(biāo)。由于本研究未對(duì)宮頸癌組病例進(jìn)行臨床分期討論，病例間未能避免異質(zhì)性，存在一定的局限性，部分病例未能同時(shí)檢測(cè)G-CSF與SCC、未能分析聯(lián)合檢測(cè)兩種指標(biāo)對(duì)宮頸癌的陽(yáng)性率，還需要進(jìn)一步的研究和探討。

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Clinical Significance of Granulocyte Serum Colony Stimulating Factor and Squamous Cell Carcinoma Antigen in the Diagnosis, Treatment and Prognosis of Cervical Cancer

ShuLihong1,2，DingXianping1△.

1.SchoolofLifeScience,SichuanUniversity,Chengdu610041,China; 2.ChengduSeventhPeople′sHospitalTheSeventhPeople′sHospitalofChengducity,Chengdu610041,China

Objective To explore the clinical significance of serum granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) and squamous cell carcinoma antigen (SCC-Ag) in the diagnosis, treatment and prognosis of cervical cancer. Methods The clinical data of the serum G-CSF, SCC-Ag, carcinoembryonic antigen (CEA), and alpha-fetoprotein (AFP) were collected from 1250 cases who were tested between April of 2011 and February of 2016 in Chengdu Seventh People′s Hospital. Among those cases, 358 cases were diagnosed with cervical cancer, 425 cases were with cervical benign neoplasm, and 467 cases were healthy. The statistical variance analysis was used to analyze the differences in the data of the serum G-CSF, SCC-Ag, CEA and AFP, the regression analysis was adopted to explore the expression significance of the detection values in the malignant tumor, and the SROC curve analysis was used to evaluate the accuracy of SCC and G-CSF in the diagnosis of cervical cancer. Results The results of the statistical variance analysis showed that the levels of detection values and the percentage rises of those values in patients with cervical cancer were significantly higher than those in patients with cervical benign neoplasm and the healthy cases (P<0.05). The area under the curve (AUC) in the G-CSF diagnosis was 0.994 with high accuracy of diagnosing cervical cancer, and the AUC in the SCC diagnosis was 0.745 with moderate accuracy. The results of the regression analysis showed that the levels of G-CSF and SCC were significantly correlated with both benign and malignant cervical cancer and the other tumor markers were not significantly correlated with cervical cancer. Conclusion The levels of G-CSF and SCC in patients with cervical cancer are higher than those in patients with cervical benign neoplasm and healthy women, so they can be applied as auxiliary diagnosis indexes in the diagnosis, follow-up evaluation, treatment and prognosis of cervical cancer.

G-CSF; SCC; Cervical cancer; Auxiliary diagnosis

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20161202.1622.002.html

10.3969/j.issn.1674-2257.2016.06.010

R737.33

A

△通信作者：丁顯平，E-mail ：2438075801@qq.com