4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物的合成與生物活性研究

汪秋安, 喬艷欣, 毛 炎, 劉 多

(湖南大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院, 湖南 長(zhǎng)沙 410082)

4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物的合成與生物活性研究

汪秋安*, 喬艷欣, 毛 炎, 劉 多

(湖南大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院, 湖南 長(zhǎng)沙 410082)

4-甲基傘形內(nèi)酯(4-甲基-7-羥基香豆素, 1)是一種具有重要生物活性的香豆素類天然產(chǎn)物. 本文以間苯二酚和乙酰乙酸乙酯為原料, 經(jīng)Pechmann反應(yīng)合成4-甲基傘形內(nèi)酯(1). 然后以4-甲基傘形內(nèi)酯(1)為底物, 分別經(jīng)Mannich反應(yīng)、乙?；?、Fries重排、O-甲基化、Baeyer-Villiger氧化、O-異戊烯基化和Claisen重排等反應(yīng)步驟, 合成了一系列4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物2～10.并對(duì)所合成的化合物進(jìn)行了人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制活性測(cè)試, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)新化合物4-甲基5-異戊烯基-8-羥基-7-甲氧基香豆素(10)對(duì)Hela細(xì)胞的抑制活性(IC50= 28.58 μmol/L), 高于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑(IC50= 41.25 μmol/L), 具有進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)的價(jià)值.

4-甲基傘形內(nèi)酯； 香豆素衍生物； 合成； 生物活性

香豆素是一類具有抗腫瘤、抗病毒、抗菌和抗凝血作用等重要生物活性的天然產(chǎn)物. 例如,Kashman等從馬來(lái)西亞熱帶雨林樹木藤黃科胡桐樹(Calophyllumlanigerum)中分離出來(lái)的Calandide具有很強(qiáng)的抗艾滋病毒活性[1]. 2003年Lee等從緬甸的KayeaOssamica樹皮中分離得到的新香豆素TheraphinsA, B和C顯示出很好的抗Co12, KB和LNCaP人腫瘤細(xì)胞活性[2]. 張慶林等從蛇床子(Cnidiummonnier)中分離出的3種香豆素對(duì)耐藥的腫瘤細(xì)胞KBV200具有明顯的逆轉(zhuǎn)作用[3]. Itoigawa等從C.inophllum中分離出的10種4-苯基香豆素對(duì)腫瘤細(xì)胞Epstein-Barr Virus(EBV)具有顯著抑制活性[4].

4-甲基傘形內(nèi)酯(1)是一種簡(jiǎn)單的天然香豆素, 它對(duì)各種腫瘤細(xì)胞具有抑制活性, 同時(shí)也是一種新型利膽藥物[5-6]. 由于它的分子量小、合成簡(jiǎn)便且生物利用度高, 由4-甲基傘形內(nèi)酯所衍生出來(lái)的香豆素衍生物顯示出良好的生物活性和藥理作用, 已引起人們的廣泛關(guān)注[7-10]. 現(xiàn)有的研究表明, 異戊烯基、甲氧基和含氮堿基對(duì)香豆素類化合物的生物活性具有增強(qiáng)效果, 例如, 蛇床子素(osthol, 7-甲氧基-8-異戊烯基香豆素)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種很有潛力的高效抗腫瘤的異戊烯基香豆素[11]. 為了進(jìn)一步研究4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物的生物活性及適應(yīng)新藥開(kāi)發(fā)的需要, 我們首先以間苯二酚和乙酰乙酸乙酯為原料, 經(jīng)Pechmann反應(yīng)合成了4-甲基傘形內(nèi)酯(1), 然后對(duì)4-甲基傘形內(nèi)酯進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾, 分別經(jīng)Mannich 反應(yīng)、乙?；?、Fries重排、O-甲基化、Baeyer-Villiger氧化、O-異戊烯基化和Claisen重排等反應(yīng), 合成了一系列4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物2～10.并對(duì)所合成的4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物進(jìn)行了人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制活性測(cè)試. 4-甲基傘形內(nèi)酯(1)及其衍生物2～10的合成路線如圖1所示.

Reagents and conditions: a. H2SO4, r.t.; b. 37% HCHO(aq), amine, C2H5OH, H+, microwave(600 W, 80 ℃); c. Ac2O, DMAP; d. AlCl3, Δ; e. (CH3)2SO4, acetone, K2CO3; f. H2O2; g. prenyl bromine, acetone, K2CO3; h. microwave (600 W, 200 ℃), DEA.

圖1 4-甲基傘形內(nèi)酯(1)及其衍生物2～10的合成路線

Fig.1 Synthetic routes of 4-methylumbelliferone (1) and its derivatives 2～10

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

熔點(diǎn)在 XRC-1 型顯微熔點(diǎn)儀上測(cè)定(溫度計(jì)未校正)；NMR 用 Bruker Am-400 型核磁共振儀測(cè)定(溶劑 CDCl3或 DMSO-d6, TMS 為內(nèi)標(biāo))；MS 用 Agilent 1100 液-質(zhì)聯(lián)用儀或 ZAB-HS 型儀測(cè)定記錄(EI模式)；IR用 FD-5DX 儀 (KBr 壓片法)測(cè)定；微波加熱用XH-MC-1實(shí)驗(yàn)室微波合成儀(北京祥鵠科技發(fā)展有限公司)；薄層和柱層析用硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品；所用試劑和溶劑為化學(xué)純和分析純, 要求無(wú)水的溶劑都經(jīng)過(guò)干燥劑或分子篩除水和重蒸處理.

4-甲基-7-羥基香豆素(1)按文獻(xiàn)以間苯二酚和乙酰乙酸乙酯為原料合成[12].

1.2 4-甲基-7-羥基-8-亞甲基(1-二正丙胺)香豆素(2)合成

首先將0.8 mL甲醛、0.8 mL二正丙胺、5滴濃鹽酸溶于5 mL乙醇中, 室溫下攪拌10 min, 再稱取化合物1 (200 mg, 1.14 mmol) 于100 mL加有磁子的圓底燒瓶中, 將20 mL無(wú)水乙醇加入其中, 微波條件(600 W, 80 ℃)下溶解原料, 回流30 min左右, 反應(yīng)完畢, 旋干反應(yīng)液, 加水, 用乙酸乙酯萃取3次, 無(wú)水硫酸鈉干燥, 過(guò)濾, 旋蒸除溶劑,用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶, 得到黃色固體165 mg, 產(chǎn)率50%, m.p. 125～127 ℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.24 (d,J= 8.5 Hz, 1H, 5-H), 6.57 (d,J= 8.5 Hz, 1H, 6-H), 5.88 (s, 1H, 3-H), 3.91 (s, 2H, NCH2), 2.41 (t,J= 6.9 Hz, 4H, NCH2), 2.25 (s, 3H, 4-CH3), 1.46～1.49 (m, 4H, CH2), 0.78 (t,J= 6.7 Hz, 6H, CH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ163.09, 160.84, 153.22, 152.20, 124.28, 113.16, 111.59, 109.98, 108.08, 55.47, 50.79, 19.18, 18.55, 11.55. MS (EI),m/z: 289 [M]+. Anal. calcd for C17H23O3N: C 70.56, H 8.01, N 4.84；found C 70.48, H 7.98, N 4.81.

1.3 4-甲基-7-羥基-8-亞甲基(1-吡咯烷)香豆素(3)的合成

合成方法同(2)得到黃色固體201 mg, 產(chǎn)率68%, m.p. 223～225℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ13.08 (s, 1H, OH), 7.32 (d,J= 8.7 Hz, 1H, 5-H), 6.67 (d,J= 8.7 Hz, 1H, 6-H), 5.97 (s, 1H, 3-H), 4.10 (s, 2H, NCH2), 2.65 (s, 4H, NCH2), 2.30 (s, 3H, 4-CH3), 1.81 (s, 4H, CH2).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ163.13, 161.37, 153.46, 152.02, 124.49, 113.37, 111.91, 110.34, 108.60, 77.46, 77.14, 76.82, 53.60, 51.43, 23.70, 18.83. MS (EI),m/z: 259 [M]+. Anal. calcd for C15H17O3N: C 69.48, H 9.51, N 7.77；found C 69.57, H 9.38, N 7.83.

1.4 4-甲基-7-羥基-8-亞甲基(4-羥基哌啶)香豆素(4)的合成

合成方法同(2)得到黃色固體214 mg,產(chǎn)率65%, m.p. 150～152 ℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.39 (d,J= 8.7 Hz, 1H, 5-H), 6.75 (d,J= 8.7 Hz, 1H, 6-H), 6.05 (s, 1H, 3-H), 4.04 (s, 2H, NCH2), 3.84 (s, 1H, CH(OH)), 2.92 (s, 2H, NCH2), 2.37 (s, 5H, NCH2and 4-CH3), 1.95 (s, 2H, CH2), 1.68 (s, 2H, CH2).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ162.71, 161.36, 153.48, 152.40, 124.60, 113.44, 112.16, 110.49, 107.72, 53.81, 33.84, 29.92, 18.79. MS (EI),m/z: 289 [M]+. Anal. calcd for C16H19O4N: C 66.42, H 6.62, N 4.84；found C 66.36, H 6.70, N 4.75.

1.5 4-甲基-7-乙酰氧基香豆素(5)的合成

稱取化合物1 (500 mg, 2.85 mmol), 催化量的4-二甲氨基吡啶于100 mL圓底燒瓶中, 加入15 mL乙酸酐,50 ℃反應(yīng)2 h, 原料點(diǎn)幾乎消失, 停止反應(yīng),旋干反應(yīng)液, 用乙酸乙酯萃取3次, 飽和食鹽水洗滌, 干燥, 旋干溶劑, 最后用二氯甲烷-石油醚重結(jié)晶, 得到白色固體497 mg, 產(chǎn)率80%, m.p.142～144℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.54 (d,J= 8.4 Hz, 1H, 5-H), 7.07～6.98 (m, 2H, 6-H and 8-H), 6.20 (s, 1H, 3-H), 2.36 (s, 3H, 4-CH3), 2.28 (s, 3H,COCH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ167.80, 159.51, 153.09, 151.97, 150.96, 124.40, 117.10, 116.82, 113.47, 109.44, 20.12, 17.74. MS (EI),m/z: 218 [M]+. Anal. calcd for C12H10O4: C 66.05, H 4.62；found C 65.96, H 4.63.

1.6 4-甲基-8-乙?；?7-羥基香豆素(6)的合成

稱取化合物5 (500 mg, 2.29 mmol), AlCl3(1 g, 7.49 mmol), 適量NaCl于100 mL圓底燒瓶中, 在140 ℃下反應(yīng)24 h, 冷卻, 滴加 10% 稀鹽酸至酸性, 抽濾, 干燥, 用CH2Cl2溶解, 過(guò)濾, 最后重結(jié)晶, 得到黃色固體324 mg, 產(chǎn)率65%, m.p. 166～168℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ13.45 (s, 1H, OH), 7.57 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 5-H), 6.79 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 6-H), 6.05 (s, 1H, 3-H), 2.82 (s, 3H, 4-CH3), 2.33 (s, 3H,COCH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ204.32, 166.56, 159.31, 155.06, 153.07, 131.28, 115.06, 111.82, 110.98, 109.18, 33.91, 19.19. MS (EI),m/z: 218 [M]+. Anal. calcd for C12H10O4: C 66.05, H 4.62；found C 66.10, H 4.57.

1.7 4-甲基-8-乙?；?7-甲氧基香豆素(7)的合成

將化合物6(500 mg,2.29 mmol), 碳酸鉀(1.90 g, 13.74 mmol)放于圓底燒瓶中, 加入20 mL丙酮,40℃下加熱使原料溶解, 滴加2 mL硫酸二甲酯, 5 h后, 原料點(diǎn)幾乎沒(méi)有, 停止反應(yīng), 旋干濾液, 重結(jié)晶, 得白色固體425 mg, 產(chǎn)率80%, m.p. 95～97℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.57 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 5-H), 6.89 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 6-H), 6.11 (s, 1H, 3-H), 3.89 (s, 3H, OCH3), 2.57 (s, 3H, 4-CH3), 2.38 (s, 3H, COCH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ199.47, 159.95, 158.37, 152.24, 150.51, 126.50, 119.19, 113.87, 112.41, 107.47, 56.28, 32.42, 18.73. MS(EI),m/z: 232 [M]+. Anal. calcd for C13H12O4: C 67.23, H 5.21；found C 67.16, H 5.25.

1.8 4-甲基-8-羥基-7-甲氧基香豆素(8)的合成

稱量化合物7 (200 mg, 0.86 mmol) 于100 mL圓底燒瓶中, 加入15 mL二氧六環(huán), 12 mL 4%氫氧化鈉溶液, 40 ℃加熱, 使原料溶解, 冰浴條件下將10 mL 30% 的雙氧水溶液滴入其中, 反應(yīng)3 h左右, 用冰的稀鹽酸進(jìn)行酸化使pH=1, 原料點(diǎn)幾乎沒(méi)有, 停止反應(yīng), 加水, 用二氯甲烷萃取3～4次, 萃取后, 飽和食鹽水洗滌有機(jī)層, 干燥, 旋除溶劑, 最后重結(jié)晶, 得黃色固體89 mg, 產(chǎn)率50%， m.p. 80～82 ℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.12 (d,J= 8.8 Hz, 1H, 5-H), 6.87 (d,J= 8.8 Hz, 1H, 6-H), 6.14 (d,J= 0.9 Hz, 1H, 3-H), 3.98 (s, 3H, OCH3), 2.39 (d,J= 1.1 Hz, 3H, 4-CH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ160.17, 152.85, 149.30, 141.61, 132.75, 115.24, 114.38, 112.18, 107.30, 56.40, 18.61. MS(EI),m/z: 206 [M]+. Anal. calcd for C11H10O4: C 64.07, H 4.89；found C 64.11, H 4.78.

1.9 4-甲基-7-甲氧基-8-異戊烯氧基香豆素(9)的 合成 稱量化合物8 (200 mg, 0.97 mmol), 無(wú)水碳酸鉀(800 mg, 5.80 mmol)于100 mL圓底燒瓶中, 加入15 mL丙酮,40 ℃加熱, 使原料溶解, 滴加0.2 mL異戊烯基溴, 反應(yīng)4 h左右, 停止反應(yīng), 過(guò)濾, 旋轉(zhuǎn)蒸除溶劑, 用二氯甲烷-石油醚重結(jié)晶, 得到黃色固體226 mg, 產(chǎn)率85%， m.p. 66～68 ℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.29 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 5-H), 6.87 (d,J= 8.9 Hz, 1H, 6-H), 6.13 (s, 1H, 3-H), 5.59 (td,J= 7.3, 1.3 Hz, 1H, CH), 4.64 (d,J= 7.3 Hz, 2H, OCH2), 3.94 (s, 3H, OCH3), 2.38 (s, 3H, 4-OCH3), 1.73 (s, 3H, CH3), 1.69 (s, 3H, CH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ159.68, 154.80, 151.55, 147.13, 138.23, 133.96, 119.02, 118.43, 113.70, 111.32, 106.94, 69.00, 55.30, 24.80, 17.75, 16.97. MS(EI),m/z: 274 [M]+. Anal. calcd for C16H18O4: C 70.06, H 6.61；found C 70.11, H 6.55.

1.10 4-甲基-5-異戊烯基-8-羥基-7-甲氧基香豆素 (10)的合成

稱量化合物 9 (200 mg, 0.73 mmol)于100 mL圓底燒瓶中, 加入15 mL無(wú)水N,N-二乙基苯胺, 微波條件(600 W, 200℃)下加熱, 反應(yīng)2 h左右, 原料點(diǎn)消失, 停止反應(yīng), 冷卻至室溫, 加入4%稀鹽酸, 用二氯甲烷萃取3次, 萃取后用飽和NaCl溶液洗滌有機(jī)層, 無(wú)水硫酸鈉干燥, 過(guò)濾, 旋蒸除溶劑, 硅膠柱層析 (V石油醚∶V乙酸乙酯=6∶1), 得到黃色固體70 mg, 產(chǎn)率35%,m.p. 123～125℃,1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ6.60 (s, 1H, 6-H), 6.04 (s, 1H, 7-H), 5.99 (s, 1H, CH), 5.06 (s, 1H, OH), 3.87 (s, 3H, OCH3), 3.56 (d,J= 5.5 Hz, 2H, CH2), 2.52 (s, 3H, 4-CH3), 1.62 (s, 3H, CH3),1.75(s,3H,CH3).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ158.79, 153.83, 147.35, 142.27, 132.34, 130.81, 130.41, 122.29, 112.66, 111.83, 109.85, 55.21, 33.57, 24.54, 23.50, 17.13. MS(EI),m/z: 274 [M]+. Anal. calcd for C16H18O4: C 70.06, H 6.61；found C 69.95, H 6.59.

1.11 生物活性測(cè)試

采用CCK-8法對(duì)合成化合物1～10進(jìn)行體外抗腫瘤細(xì)胞Hela(宮頸癌細(xì)胞)的活性篩選. 以順鉑 (cis-Platin )作為陽(yáng)性對(duì)照. 實(shí)驗(yàn)流程如下：將每5 000個(gè)腫瘤細(xì)胞接種到96孔板中(每一孔板接種5 000個(gè)細(xì)胞), 待細(xì)胞貼壁之后(一般過(guò)夜或12 h)給藥, 起始給藥濃度100 μmol/L, 3倍或4倍濃度進(jìn)行梯度稀釋, 一共稀釋8個(gè)濃度(如：稀釋4倍,分別是100 μmol/L, 25 μmol/L, 6.25 μmol/L, 1.56 μmol/L, 0.39 μmol/L, 0.097 6 μmol/L, 0.024 4 μmol/L, 0.006 1 μmol/L), 給藥后孵育培養(yǎng)48 h,棄去培養(yǎng)基, 加入含10% CCK-8(檢測(cè)線號(hào), 只與活細(xì)胞結(jié)合, 結(jié)合越多, 吸光度越大)的1640培養(yǎng)基(體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 主要有糖、氨基酸和維生素三大類)100 μL, 孵育1～2 h, 檢測(cè)波長(zhǎng)范圍450～490 nm, 酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(Bio-Rad 680)讀取各孔光吸收值, 記錄結(jié)果, 以濃度為橫坐標(biāo), 細(xì)胞存活率為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線, 應(yīng)用兩點(diǎn)法(Reed and Muench法)計(jì)算化合物的IC50值.

2 結(jié)果與討論

首先, 以間苯二酚和乙酰乙酸乙酯為原料, 經(jīng)香豆素合成的經(jīng)典反應(yīng)Pechmann反應(yīng)合成4-甲基傘形內(nèi)酯(1). 然后,4-甲基傘形內(nèi)酯(1)分別與二正丙胺、吡咯烷和4-羥基哌啶等3種二級(jí)胺和水合甲醛的酸性醇溶液, 在微波加熱(600 W, 80 ℃)下進(jìn)行Mannich反應(yīng), 因香豆素1環(huán)上8位上的電子云密度較大, 且處于酚羥基的鄰位, 易發(fā)生具有親電特征的Mannich反應(yīng), 生成8-位胺甲基取代的香豆素衍生物2～4, 這3種產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)通過(guò)1HNMR譜確證, 其中8位上的氫峰消失, 出現(xiàn)了δ2.41,4.10和4.04胺甲基氫的吸收峰. 微波促進(jìn)的Mannich反應(yīng)已見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道[13], 該法可大大縮短反應(yīng)時(shí)間, 且副產(chǎn)物少, 產(chǎn)率高.

4-甲基傘形內(nèi)酯(1)與乙酸酐在催化量二甲基吡啶(DMAP)作用下,發(fā)生乙?；磻?yīng)得到化合物5.化合物5在Lewis酸無(wú)水AlCl3催化作用下, 發(fā)生Fries重排, 可得鄰位、對(duì)位羥基芳香酮類化合物, 本文的化合物5中因?qū)ξ槐徽紦?jù), 故得到鄰位重排產(chǎn)物6. 曾選用CS2或硝基苯作溶劑, 產(chǎn)率較低, 可能是溶劑中含有少量的水, 使部分無(wú)水AlCl3吸潮水解, 而使產(chǎn)率較低. 在無(wú)溶劑條件下, 于140 ℃反應(yīng)24 h產(chǎn)率最高. 化合物6的7-位經(jīng)O-甲基化作用得化合物7. 化合物7在雙氧水中經(jīng)Baeyer-Villiger氧化得8-位有酚羥基的化合物8. 化合物8與異戊烯基溴在無(wú)水K2CO3丙酮體系中, 經(jīng)親核取代反應(yīng)得O-異戊烯基化合物9. 化合物9溶于無(wú)水N,N-二乙基苯胺(DEA)溶劑中, 在微波加熱(600 W, 200 ℃)條件下, 發(fā)生Claisen重排得4-甲基-5-異戊烯基-7-甲氧基-8-羥基香豆素(10). 對(duì)所合成的4-甲基傘形內(nèi)酯及其衍生物進(jìn)行了體外抗人子宮頸癌細(xì)胞Hela細(xì)胞株的活性篩選,采用CCK-8法[14], 以順鉑(cis-Platin)為陽(yáng)性對(duì)照物, 其結(jié)果見(jiàn)表1.從表1的生物活性結(jié)果可以看出, 化合物1, 5, 6, 7和10對(duì)Hela細(xì)胞增殖具有抑制作用, 其中化合物10(IC50=28.58 μmol/L)的活性高于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑(IC50=41.25 μmol/L), 也高于其母體香豆素4-甲基傘形內(nèi)酯(IC50= 71.99 μmol/L).

表1 化合物1～10對(duì)Hela細(xì)胞株的半數(shù)抑制濃度[IC50]

aused for positive control.

3 結(jié) 論

天然香豆素4-甲基傘形內(nèi)酯經(jīng)Mannich 反應(yīng)、乙酰化、Fries重排、O-甲基化、Baeyer-Villiger氧化、O-異戊烯基化和Claisen重排等反應(yīng), 合成了一系列4-甲基傘形內(nèi)酯衍生物2～10. 所合成的目標(biāo)化合物經(jīng)測(cè)試對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞株的抑制活性, 發(fā)現(xiàn)異戊烯基香豆素10的活性(IC50=28.58 μmol/L)高于陽(yáng)性對(duì)照物順鉑(IC50=41.25 μmol/L), 具有進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)的價(jià)值.

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Synthesis and Biological Activity of 4-Methylumbelliferone Derivatives

WANG Qiu-an?,QIAO Yan-xin,MAO Yan,LIU Duo

(College of Chemistry and Chemical Engineering, Hunan Univ, Changsha, Hunan 410082, China)

4-Methylumbelliferone (4-methyl-7-hydroxycoumarin, 1) is a coumarins natural product with important biological activity. Firstly, 4-methylumbelliferone (1) was synthesized from resorcinol and ethyl acetoacetate by Pechmann reaction. Nine coumarin derivatives (2～10) were then synthesized through Mannich reaction, acetylation, Fries rearrangement, O-methylation, Baeyer-Villiger oxidation, O-prenylation and Claisen rearrangement from 4-methylumbelliferone (1). Their inhibitory activities on human cervical carcinoma Hela cells were evaluated in vitro. The biological testing results showed that 4-methyl-5-prenyl-8-hydroxy-7-methoxycoumarin (10, IC50 = 28.58 μmol/L) displayed stronger activity than the positive control drug cis-Platin (IC50 = 41.25 μmol/L), which is worthy of further study.

4-methylumbelliferone; coumarin derivatives; synthesis; biological activity

1674-2974(2016)12-0088-05

2016-05-13 基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(J1210040), National Natural Science Foundation of China (J1210040) 作者簡(jiǎn)介：汪秋安(1962-)，男,湖南常德人,湖南大學(xué)教授 ?通訊聯(lián)系人，E-mail:WangQA@hnu.edu.cn

O625.12

A