高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕對斷奶仔豬生長性能、抗氧化能力、肝功能指標的影響

■周玲玲 徐建雄

（上海交通大學，上海 201101）

保育仔豬又稱為斷奶仔豬，現(xiàn)在生產(chǎn)中多采用 21日齡仔豬早期斷奶方法，然而此階段的仔豬由于其消化道發(fā)育不成熟，消化酶系統(tǒng)的發(fā)育尚未完全，難以完全吸收利用飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)[1]。保育仔豬對植物性蛋白質(zhì)的消化能力弱且對抗營養(yǎng)因子較為敏感，普通豆粕因含有大量植酸、皂苷、胰蛋白酶抑制因子、單寧等抗營養(yǎng)因子[2]，難以適應(yīng)保育斷奶仔豬營養(yǎng)需要。而不含或少含抗營養(yǎng)因子的新型蛋白質(zhì)飼料原料——高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕，因其富含多種小肽，大豆異黃酮的轉(zhuǎn)化率高，具有顯著的抗氧化作用，近年來被應(yīng)用到了仔豬的生產(chǎn)中，收到了較好的效果。

肝臟是動物重要的代謝器官，也起到分泌膽汁的作用。肝臟的功能直接反映著機體的新陳代謝情況及健康狀況。仔豬在斷奶過程中，往往伴隨著炎癥產(chǎn)生[3]和自由基代謝失衡[4]，自由基代謝失衡會導致機體內(nèi)細胞受損[5]，肝臟作為機體新陳代謝的樞紐性器官，更容易受到氧化應(yīng)激的影響。

本試驗采用不同含量的高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕飼喂斷乳仔豬,研究其對斷奶仔豬生長性能、抗氧化機能、肝功能指標的影響，以期為新型發(fā)酵豆粕的推廣應(yīng)用提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗動物和分組

選擇體重相近、日齡相近且健康狀況良好的280頭(21±2)日齡斷奶仔豬(杜洛克×長白×大白)，按體重一致性隨機分為4組，每組7個重復，每個重復10頭。分兩個階段(斷奶后0～14 d，斷奶后15～40 d)，分別飼喂4組處理日糧。對照組(A組)飼喂基礎(chǔ)日糧。試驗組分別在在基礎(chǔ)日糧中以4%(B組)、8%(C組)和12%(D組)高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕等蛋白替代基礎(chǔ)日糧中的豆粕(日糧組成及營養(yǎng)水平見表1)。試驗從仔豬斷奶開始飼喂至61日齡共40 d。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平

高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕(以下簡稱發(fā)酵豆粕)由上海源耀生物科技有限公司采用微生物固態(tài)發(fā)酵工藝生產(chǎn)而成，具有香味濃郁、色澤金黃、質(zhì)地松軟等特點，體外試驗表明，高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕中苷元型ISF轉(zhuǎn)化率達到異黃酮總量的85.62%，抗氧化力顯著高于普通豆粕。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗在上海新農(nóng)飼料股份有限公司亭林豬場進行。飼養(yǎng)管理、防病、免疫接種和飼料營養(yǎng)按常規(guī)進行；試驗仔豬自由飲水，每日飼喂5次，從06：30至20：00，每3 h飼喂1次。

1.3 測定指標及方法

平均日采食量：按重復記錄試驗開始至結(jié)束的采食量，計算平均日采食量。體重：試驗開始、試驗14 d和結(jié)束時早上空腹地磅秤稱重，計算平均體重和平均日增重。血樣采集、制備和測定：試驗結(jié)束時每重復選擇平均體重仔豬6頭，采用前腔靜脈采血，血液靜置后3 000×g離心10 min，分離血清，-20℃保存待用。

測定血清中抗氧化能力指標[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、抑制羥自由基能力、皮質(zhì)醇]和肝功能指標（谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性及總膽固醇含量），測定用試劑盒均購自南京建成生物有限公司，測定步驟按照說明書進行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理

所有數(shù)據(jù)用SPSS 20.0軟件進行分析，采用鄧肯氏新復極差法進行多重比較。結(jié)果以“平均數(shù)±標準誤（Mean±S.E.）表示。

2 結(jié)果

2.1 斷奶仔豬生長性能（見表2）

在試驗前2周（0～14 d），含8%高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕組仔豬平均日采食量和平均日增重較其他各組顯著增加（P＜0.05），其0～40 d的平均日采食量和平均日增重較對照組分別提高6%和5.8%，有提高的趨勢。其他組和試驗時間段仔豬的平均日采食量、平均日增重、料重比和成活率無顯著影響（P＞0.05）。

表2 斷奶仔豬生長性能

2.2 斷奶仔豬血清抗氧化性能（見表3）

如表3所示，以4%、8%和12%高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕替代普通豆粕后，保育仔豬血清中抑制羥自由基的能力顯著提升(P＜0.05)，各試驗組之間無顯著差異(P＞0.05)。發(fā)酵豆粕替代對斷奶仔豬血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和皮質(zhì)醇的含量影響不顯著(P＞0.05)。但以4%和8%發(fā)酵豆粕替代后，仔豬血清丙二醛(MDA)含量較對照組有降低趨勢(分別降低35.98%和31.11%)。

2.3 斷奶仔豬肝功能指標（見表4）

如表4所示，以8%和12%高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕替代普通豆粕后，保育仔豬血清中AST、ALT含量顯著降低(P＜0.05)，8%和12%發(fā)酵豆粕替代組之間無顯著差異(P＞0.05)。發(fā)酵豆粕替代對仔豬血清總蛋白影響不顯著，但8%和12%發(fā)酵豆粕替代組血清總蛋白有提高趨勢(P＞0.05)，且8%發(fā)酵豆粕替代組優(yōu)于12%發(fā)酵豆粕替代組。

表3 斷奶仔豬血清抗氧化指標

表4 斷奶仔豬肝功能指標

3 討論

自然飼養(yǎng)狀態(tài)下，仔豬哺乳時間長，斷奶晚，母豬年平均產(chǎn)仔不足兩窩[6]，造成母豬利用率低、棚舍周轉(zhuǎn)慢，導致生產(chǎn)成本高，無法適應(yīng)現(xiàn)代化生豬生產(chǎn)的需求。因此，現(xiàn)代大型集約化豬場為了提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，采用早期斷奶的方式。但是早期斷奶伴隨著仔豬嚴重的斷奶應(yīng)激，包括腸道絨毛斷裂損傷[7]、腸道緊密連接破壞[8]、腹瀉等病癥。

仔豬斷奶的過程中腸道經(jīng)歷了一個二次發(fā)育的過程，在此階段，仔豬消化功能和免疫功能均不成熟，因此對于飼料中的抗營養(yǎng)因子十分敏感。在斷奶發(fā)生后的1～2周內(nèi)，保育仔豬厭食、體重下降尤為明顯。發(fā)酵豆粕利用微生物發(fā)酵技術(shù)，能夠有效的除去豆粕中的抗營養(yǎng)因子。本研究表明，添加8%發(fā)酵豆粕能使21日齡斷奶的保育豬在斷奶14日內(nèi)平均日采食量、平均日增重顯著增高，這在一定程度上能夠緩解仔豬斷奶造成的仔豬掉膘、進食不足的問題。而在斷奶后15～40日內(nèi)，不同劑量發(fā)酵豆粕添加對保育仔豬平均日采食量、平均日增重無顯著影響可能是由于仔豬的斷奶應(yīng)激時期已度過，平均日采食量和平均日增重恢復了正常水平。

斷奶仔豬的抗氧化能力主要通過血清中抗氧化指標反映。眾所周知，過氧化氫作為一種自由基可以對細胞結(jié)構(gòu)產(chǎn)生很強的危害。本研究表明，飼喂發(fā)酵豆粕的斷奶仔豬血清中抑制羥自由基的能力有了極顯著的提升。MDA是細胞代謝的產(chǎn)物，機體在不良環(huán)境下活性氧自由基大量積累，導致機體產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)[9]。本研究表明，發(fā)酵豆粕替代對仔豬血清丙二醛(MDA)影響不顯著，但4%和8%發(fā)酵豆粕替代組丙二醛(MDA)有降低趨勢。超氧化物歧化酶(SOD)為體內(nèi)酶類自由基清除劑，皮質(zhì)醇能較好的反映動物體應(yīng)激水平[10]。

谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是肝臟中重要的轉(zhuǎn)氨酶，正常情況下存在于肝臟細胞內(nèi)，當肝臟受損時，細胞壞死，轉(zhuǎn)氨酶進入血液，使得血液中AST及ALT含量升高。本團隊通過對發(fā)酵豆粕的異黃酮含量檢測[11]和體外抗氧化試驗研究[12]發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕具有比普通豆粕更高的異黃酮含量，且體外抗氧化能力優(yōu)于普通豆粕。本研究表明，采用發(fā)酵豆粕部分替代傳統(tǒng)豆粕能夠顯著降低仔豬血清中AST和ALT活性，提示在仔豬斷奶后飼喂發(fā)酵豆粕能夠提高仔豬肝臟功能，減輕肝臟損傷程度，其機理可能與發(fā)酵豆粕有較高的抗氧化作用有關(guān)。

血清總蛋白（TP）也是重要的肝功能指標，生物體內(nèi)許多酶類都是蛋白質(zhì)，在肝臟中合成，TP下降表明機體新陳代謝能力可能受損。本研究表明，采用發(fā)酵豆粕部分替代8%傳統(tǒng)豆粕能夠一定程度上提高仔豬血清蛋白含量，但與普通豆粕相比，不具有顯著差異(P＞0.05)。

4 結(jié)論

采用一定比例的高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕替代普通豆粕飼喂斷奶仔豬能夠提高仔豬平均日采食量、平均日增重，提高抑制羥自由基的能力和降低丙二醛(MDA)含量的趨勢。采用8%和12%高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕替代普通豆粕飼喂斷奶仔豬能降低血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性，有提高血清總蛋白的趨勢。試驗結(jié)果提示，可以采用8%的高活性大豆異黃酮發(fā)酵豆粕替代普通豆粕作為保育斷奶仔豬日糧，并且在斷奶后兩周內(nèi)尤為必要。