雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定復(fù)方磺胺甲噁唑片中兩組分的含量*

王樂(lè)婷 郭秀琴 李 珂

(泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 泰安 271016)

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雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定復(fù)方磺胺甲噁唑片中兩組分的含量*

王樂(lè)婷 郭秀琴 李 珂

(泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 泰安 271016)

目的 建立復(fù)方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑和甲氧芐啶含量測(cè)定的雙波長(zhǎng)分光光度法。方法 采用雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定?；前芳讎f唑的測(cè)定波長(zhǎng)為257 nm，參比波長(zhǎng)為305 nm，以0.4%氫氧化鈉溶液作為SMZ的空白溶劑；甲氧芐啶的測(cè)定波長(zhǎng)為239 nm，參比波長(zhǎng)為293 nm，以鹽酸—氯化鉀溶液作為T(mén)MP的空白溶劑。結(jié)果 磺胺甲噁唑濃度在2～10 μg·ml-1之間，甲氧芐啶濃度在0.2～1.0 μg·ml-1之間，符合比爾定律，濃度與吸收度差值呈良好的線性關(guān)系。兩被測(cè)成分的平均回收率和RSD分別為磺胺甲噁唑97.84%和0.25%，甲氧芐啶為：97.91%和0.2%。 結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為該片劑質(zhì)量控制的方法之一。

雙波長(zhǎng)分光光度法；磺胺甲噁唑；復(fù)方磺胺甲噁唑片；甲氧芐啶

復(fù)方磺胺甲噁唑?yàn)榛前奉?lèi)抗菌藥，是磺胺甲噁唑(SMZ)與甲氧芐啶(TMP)的復(fù)方制劑，本品對(duì)非產(chǎn)酶金黃色葡萄球菌、克雷伯菌屬等腸桿菌科細(xì)菌、流感嗜血桿菌等均具有良好的抗菌作用。該品作用機(jī)制為：SMZ干擾合成葉酸第一步，TMP作用于葉酸合成代謝的第二步，選擇性抑制還原酶的作用，使細(xì)菌的葉酸代謝受到雙重阻斷。該品的協(xié)同抗菌作用較單藥增強(qiáng)，對(duì)其呈現(xiàn)耐藥菌株減少。了解藥品中磺胺甲噁唑和甲氧芐啶含量，能使我們安全合理地用藥以及為生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制提供依據(jù)。依據(jù)藥品中兩組分的測(cè)定波長(zhǎng)不同，本研究采用雙波長(zhǎng)分光光度法[1-2]測(cè)定復(fù)方磺胺甲噁唑片中兩組分的含量，具有操作簡(jiǎn)便、儀器設(shè)備簡(jiǎn)便、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

島津UV-2550型紫外可見(jiàn)分光光度儀(日本島津公司)；電子分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司)；KQ-500E型醫(yī)用超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)。

1.2 藥品與試劑

復(fù)方磺胺甲噁唑片(山東省新華制藥廠，批號(hào)1303042，1305118，1401065)；磺胺甲噁唑?qū)φ掌罚患籽跗S啶對(duì)照品；無(wú)水乙醇(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)；0.4%氫氧化鈉溶液(天津市大陸化學(xué)試劑廠)；0.1 mol/L鹽酸溶液(淄博化學(xué)試劑廠)；氯化鉀；淀粉；硬脂酸鎂。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的確定

2.1.1 磺胺甲噁唑 取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于磺胺甲噁唑50 mg與甲氧芐啶10 mg)，置于100 ml容量瓶中，加乙醇適量，振搖15 min使磺胺甲噁唑與甲氧芐啶溶解，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑?qū)φ掌?0 mg與甲氧芐啶對(duì)照品10 mg，分別置于100 ml容量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別作為對(duì)照品溶液(1)與(2)。精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液(1)(2)各兩組各2 ml,分別置于100 ml容量瓶中，分別加0.4%氫氧化鈉溶液和乙醇稀釋至刻度,搖勻。在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，得紫外光譜圖1和圖2。

結(jié)果顯示：以氫氧化鈉溶液為溶劑時(shí)，SMZ在257 nm處有最大吸收，TMP在此波長(zhǎng)吸收最小并在305 nm[3]波長(zhǎng)附近有一個(gè)等吸收點(diǎn)，故選定257 nm為SMZ的測(cè)定波長(zhǎng)，305 nm為參比波長(zhǎng)；以乙醇為溶劑時(shí)，SMZ在259 nm處有最大吸收，TMP在此波長(zhǎng)吸收最小并在295nm波長(zhǎng)附近有一個(gè)等吸收點(diǎn)，故選259 nm為SMZ的測(cè)定波長(zhǎng)，295 nm為參比波長(zhǎng)。

2.1.2 甲氧芐啶

精密量取上述供試品溶液與對(duì)照品溶液(1)各兩組各3 ml，對(duì)照品溶液(2)兩組各4 ml，分別置于100 ml容量瓶中，一組加鹽酸—氯化鉀溶液(取0.1 mol/L鹽酸溶液75 ml與氯化鉀6.9 g，加水至1000 ml，搖勻)稀釋至刻度，另一組加乙醇稀釋至刻度，搖勻。在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，得紫外光譜圖3和圖4。

圖1 SMZ在氫氧化鈉溶液中的紫外吸收光譜圖

圖2 SMZ在乙醇中的紫外吸收光譜圖

圖3 TMP在鹽酸—氯化鉀溶液中的紫外吸收光譜圖

圖4 TMP在乙醇溶液中紫外吸收光譜圖

結(jié)果顯示：以鹽酸-氯化鉀溶液為溶劑時(shí)，TMP在239 nm波長(zhǎng)處有較大吸收，此波長(zhǎng)又是SMZ的最小吸收峰，并在293 nm[4]波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn)，且輔料無(wú)干擾，故選定239 nm為T(mén)MP的測(cè)定波長(zhǎng)，293 nm為參比波長(zhǎng)；以乙醇為溶劑時(shí)，TMP在240 nm波長(zhǎng)處有較大吸收，此波長(zhǎng)又是SMZ的最小吸收峰，并在294 nm波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn),故選240 nm為T(mén)MP的測(cè)定波長(zhǎng)，294 nm為參比波長(zhǎng)。

2.2 線性關(guān)系考察

2.2.1 磺胺甲噁唑 精密稱取SMZ對(duì)照品20 mg，加乙醇溶解并稀釋至100 ml，作為對(duì)照品溶液，分別吸取1，2，3，4，5 ml分別加0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至100 ml，搖勻，以0.4%氫氧化鈉溶液為空白，于波長(zhǎng)257，305 nm處測(cè)定吸光度。令△A1=△A257-△A305(△A1=△A259-△A295)，以濃度(C)為橫坐標(biāo)，△A為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程為A=0.049C+0.0805(μg/ml)，結(jié)果顯示SMZ在2～10 μg/ml濃度范圍內(nèi)吸光度有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)[6]r=0.9992。

同法，再取一組對(duì)照品溶液1 ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml分別加乙醇稀釋至100 ml，搖勻，以乙醇為空白，于波長(zhǎng)259 nm、295 nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算回歸方程為A=0.036C+0.0615(μg/ml)，結(jié)果顯示SMZ在2～10 μg/ml濃度范圍內(nèi)吸光度有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.9951。

2.2.2 甲氧芐啶 精密稱取TMP對(duì)照品2 mg，加乙醇溶解并稀釋至100 ml，作為對(duì)照品溶液，分別吸取1 ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml加鹽酸—氯化鉀溶液稀釋至100 ml，搖勻，以鹽酸—氯化鉀溶液為空白，于波長(zhǎng)237 nm、293 nm處測(cè)定吸光度。令△A2=△A237-△A293(△A2=△A240-△A294)，以濃度為橫坐標(biāo)，△A為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程為A=0.4875C+0.0251(μg/ml)，結(jié)果顯示SMZ在0.2～1.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)吸光度有良好的線性關(guān)系，r=0.9964。

同法，再取一組對(duì)照品溶液1 ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml分別加乙醇稀釋至100 ml，搖勻，以乙醇為空白，于波長(zhǎng)240 nm、294 nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算回歸方程為A=0.246C+0.0752(μg/ml)，結(jié)果顯示SMZ在0.2～1.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)吸光度有良好的線性關(guān)系，r=0.9974。

2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取對(duì)照品溶液(1)2 ml，用0.4%氫氧化鈉溶液稀釋100 ml，搖勻，以0.4%氫氧化鈉溶液為空白，于257 nm、305 nm處測(cè)定吸光度，重復(fù)測(cè)定6次[8]，取對(duì)照品溶液(2)4 ml，用鹽酸—氯化鉀溶液稀釋至100 ml，搖勻，以鹽酸—氯化鉀溶液為空白，于237 nm、293 nm處測(cè)定吸光度，重復(fù)測(cè)定6次[9]，計(jì)算出樣品中藥品含量，結(jié)果表明此實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液(1)、(2),分別加0.4%氫氧化鈉溶液、鹽酸—氯化鉀溶液稀釋至測(cè)定濃度,室溫放置0 h、2 h、4 h、8 h、12 h，測(cè)定吸光度[10]。經(jīng)試驗(yàn)，SMZ、TMP兩種成分的吸光度至少在12 h內(nèi)幾乎穩(wěn)定不變。

2.5 回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取105 ℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑、甲氧芐啶對(duì)照品適量,按處方量加入附加劑,模擬制成供試品。精密量取模擬品適量,加入80%、100%、120%量的對(duì)照品，分別用0.4%氫氧化鈉溶液、鹽酸—氯化鉀溶液配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定吸光度A，計(jì)算差值△A，分別代入回歸方程，計(jì)算得[9]表1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.6 樣品含量測(cè)定

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于磺胺甲噁唑50 mg與甲氧芐啶10 mg)，置于100 ml容量瓶中，加乙醇適量，振搖15 min使磺胺甲噁唑與甲氧芐啶溶解，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。SMZ的測(cè)定：取供試液1.5 ml加0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至100 ml，搖勻，在257 nm、305 nm處測(cè)定吸光度，代入回歸方程，計(jì)算即得。TMP的測(cè)定：取供試液2 ml，加鹽酸—氯化鉀溶液稀釋至100 ml，搖勻，在237 nm、293 nm處測(cè)定吸光度，代入回歸方程，計(jì)算即得[11]，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討 論

3.1 最佳溶劑的選擇

磺胺甲噁唑和甲氧芐啶難溶于水，能溶于乙醇、堿性水溶液或酸性水溶液，所以由紫外吸收?qǐng)D譜和工作曲線綜合比較得出：SMZ在0.4%氫氧化鈉溶液中波形變化更明顯，△A值更大，SMZ在此溶液中更敏感；TMP在鹽酸—氯化鉀溶液中的波形變化更明顯，△A值更大，TMP在此溶液中更敏感。因此，選0.4%氫氧化鈉溶液作為SMZ的最佳溶劑，鹽酸—氯化鉀溶液作為T(mén)MP的最佳溶劑。

3.2 紫外吸收波長(zhǎng)的選擇

根據(jù)實(shí)驗(yàn)中掃描紫外吸收光譜圖可知，在磺胺甲噁唑波長(zhǎng)的選擇中，以氫氧化鈉溶液為溶劑時(shí)，SMZ在257 nm處有最大吸收，TMP在此波長(zhǎng)吸收最小并在305 nm[4]波長(zhǎng)附近有一個(gè)等吸收點(diǎn)，且無(wú)輔料干擾，故選定257 nm為SMZ的測(cè)定波長(zhǎng)，305 nm為參比波長(zhǎng)；以乙醇為溶劑時(shí)，SMZ在259 nm處有最大吸收，TMP在此波長(zhǎng)吸收最小并在295 nm波長(zhǎng)附近有一個(gè)等吸收點(diǎn)，故選259 nm為SMZ的測(cè)定波長(zhǎng)，295 nm為參比波長(zhǎng)；在甲氧芐啶的波長(zhǎng)選擇中，以鹽酸—氯化鉀溶液為溶劑時(shí)，TMP在239 nm波長(zhǎng)處有較大吸收，此波長(zhǎng)又是SMZ的最小吸收峰，并在293 nm[5]波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn)，且輔料無(wú)干擾，故選定239 nm為T(mén)MP的測(cè)定波長(zhǎng)，293 nm為參比波長(zhǎng)；以乙醇為溶劑時(shí)，TMP在240 nm波長(zhǎng)處有較大吸收，此波長(zhǎng)又是SMZ的最小吸收峰，并在294nm波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn),故選240 nm為T(mén)MP的測(cè)定波長(zhǎng)，294 nm為參比波長(zhǎng)。

[1] 中國(guó)藥典(2000版)二部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:518.

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Determination of the two groups in Compound Sulfamethoxazole Tablets content by dual wavelength spectrophotometric method

WANG Le-ting GUO Xiu-qin LI Ke

(Taishan Medical College, Taian 271016, China)

Objective: A dual wavelength determination of sulfamethoxazole and trimethoprim in compound sulfamethoxazole tablets by spectrophotometry. Methods: Determined by dual wavelength spectrophotometry. Wavelength determination of sulfamethoxazole was 257nm,the reference wavelength was 305nm. Taking 0.4% sodium hydroxide solution as SMZ blank solvent. Wavelength determination of trimethoprim was 239nm,the reference wavelength was 293 nm. Hydrochloric acid potassium chloride solution as the TMP blank solvent. Results: The results showed that both the standard curve of sulfamethoxazole concentration ranging from 2 to 10 μg·ml-1and trimethoprim concentration ranging from 0.2 to 1.0 μg·ml-1was in correspondence with Beer's law.The absorptivity difference and the concentration showed a good linear relationship.The average recoveries and RSD were 97.84%、0.25%for sul-famethoxazole,and were 97.91%、0.2%for trimethoprim. Conclusion: The method is simple and accurate,which can be used as one of methods for quanlity control of the tables.

dual wavelength spectrophotometry；sulfamethoxazole tables；sulfamethoxazole compound；trimethoprim

王樂(lè)婷(1995—)，女，山東青島人，泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院2013級(jí)本科學(xué)生。

李珂(1978—)，女，副教授，主要從事藥物分析的教學(xué)及科研工作。

R917

A

1004-7115(2016)12-1336-04

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.12.007

2016-09-17)