• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    利用四唑染色圖像測(cè)定玉米種子活力*

    2021-06-11 04:19:56黃正仙何麗萍
    關(guān)鍵詞:玉米種四唑種子活力

    常 飄,黃正仙,何麗萍**,孫 雁

    (1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院,云南 昆明 650201;2.云南省種子管理站,云南 昆明 650031)

    玉米是世界上總產(chǎn)量最高的糧食和飼料作物[1],在中國玉米的種植面積和產(chǎn)量均占主要糧食作物的30%以上[2]。種子的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的成效,種子活力(seed vigor)是種子最重要的質(zhì)量指標(biāo)之一,高活力的種子具有明顯的生長優(yōu)勢(shì)和生產(chǎn)潛力,能確保田間快速整齊一致的出苗,能影響作物在田間整齊一致的生長發(fā)育,影響最終收獲的產(chǎn)量和質(zhì)量[3],尤其是在機(jī)械單粒播種越來越普及的區(qū)域,種子活力已成為最重要的種子質(zhì)量指標(biāo)[4]。篩選出高質(zhì)量、高活力的種子滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的需要,對(duì)企業(yè)或農(nóng)民都具有非常重要的意義。玉米種子活力測(cè)定大多采用種子發(fā)芽試驗(yàn)中的一些參數(shù)和指標(biāo),采用低溫發(fā)芽試驗(yàn)和加速老化試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的方法,這些檢測(cè)和評(píng)價(jià)的方法多與種子生理發(fā)芽指標(biāo)和潛在的生理指標(biāo)有關(guān),測(cè)定程序較為復(fù)雜且時(shí)間較長,至少需要7~10 d[5-6]。近年來,隨著光學(xué)技術(shù)的發(fā)展,高光譜成像作為一種無損、快速的種子質(zhì)量和安全性評(píng)估方法,廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蘿卜[7]、青椒[8]、西瓜[9]和玉米[10]種子的活力水平,但目前尚無成熟可商用的種子活力光學(xué)檢測(cè)裝備,且光學(xué)檢測(cè)的技術(shù)成本較高。

    種子生活力(seed viability)是指種胚潛在的發(fā)芽能力和種胚所具有的生命力,四唑染色法是其快速測(cè)定方法之一。四唑(2,3,5-三苯基氯化四氮唑,TTC 或TZ)可被種子中活細(xì)胞的脫氫酶還原生成穩(wěn)定的、不溶于水、不揮發(fā)的紅色甲臜類物質(zhì),使活組織和細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,而種子中的死細(xì)胞由于缺乏脫氫酶則不會(huì)被染色,而呈現(xiàn)白色,同時(shí)根據(jù)染成紅色的深淺程度表明種子生活力的高低。四唑法測(cè)定種子生活力由國際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)(ISTA) 于1953 年列入國際種子檢驗(yàn)規(guī)程,是世界公認(rèn)的最有效的種子生活力的測(cè)定方法[11],被廣泛應(yīng)用于各種農(nóng)作物、園藝和其他種子的生活力測(cè)定[12-15]。FRAN?A-NETO 等[15]提出種子四唑染色后,依據(jù)染成紅色的深淺程度以及種胚或組織染色結(jié)構(gòu)來區(qū)分種子活力水平,把種子分為A (活力高)、B (有活力但活力低)、C (無活力水平) 三級(jí),并把大豆種子分為1~5 級(jí)有活力和6~8 級(jí)無活力。徐本美等[16]利用TTC 定量法測(cè)定不同作物種子的活力,并提取生成的紅色甲臜類物質(zhì),利用分光光度計(jì)比色確定種子的活力,結(jié)果表明:在一般情況下TTC 染色法測(cè)定種子活力是準(zhǔn)確和可靠的;趙新子等[17]采用計(jì)算機(jī)圖像處理與識(shí)別測(cè)定種子活力,計(jì)算機(jī)檢測(cè)結(jié)果對(duì)四唑染色法人工測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度達(dá)93.7%以上。PEREIRA 等[18]將光學(xué)和TTC 染色法結(jié)合,通過計(jì)算機(jī)采集TTC 染色后大豆種子的圖像特征,并建立了一套有效的大豆種子活力分類等級(jí)。本試驗(yàn)嘗試研究利用TTC 染色圖像測(cè)定和評(píng)價(jià)玉米種子活力水平的可能性,試圖找到一種準(zhǔn)確可靠、快速簡便、重復(fù)性高、成本低廉以及與田間出苗率相關(guān)的玉米種子活力測(cè)定方法,以供種業(yè)公司、種子質(zhì)量檢驗(yàn)站和其他人員在快速測(cè)定玉米種子活力時(shí)使用。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    玉米種子為正大619 雜交種子,由云南正大種子有限公司2013、2014 和2015 年生產(chǎn),2016年夏季收到種子后于4 ℃冰箱貯藏,試驗(yàn)時(shí)間為2018 年3—9 月。

    1.2 方法

    1.2.1 玉米種子四唑染色

    玉米種子室溫下預(yù)先浸濕16 h,沿胚縱切,留取其中一半,另一半舍去,保證留下的一半種子中包含種胚的各部分,且完整暴露出來。切好的種子置于小燒杯中,加入0.1% 的TTC 溶液(上海馨晟試化工科技有限公司生產(chǎn))浸沒,35 ℃避光染色6 h。染色結(jié)束后濾去溶液,清水清洗2 次備用。每處理100 粒種子,4 次重復(fù)。

    1.2.2 數(shù)碼顯微鏡對(duì)四唑染色玉米種胚主要結(jié)構(gòu)圖像采集

    開啟數(shù)碼顯微鏡Smart Zoom 5 (德國卡爾·蔡司股份有限公司),將染色后的玉米種子放置到數(shù)碼顯微鏡的載物臺(tái)上,固定種子種胚使其切面朝上,將顯微鏡放大34 倍并拍下種胚的圖像,觀察鑒定種胚中各主要結(jié)構(gòu)的染色深淺,以RGB顏色模式為標(biāo)準(zhǔn),劃分為染色深、染色淺和未染色3 個(gè)等級(jí):當(dāng)種胚顏色為珊瑚色(R:255;G:127;B:80) 或深于珊瑚色時(shí),判定種子染色深;當(dāng)種胚顏色淺于珊瑚色時(shí),判定種子染色淺。

    1.2.3 種胚結(jié)構(gòu)染色面積測(cè)定和染色面積劃分

    利用Smart Zoom 5 的面積測(cè)量工具,分別測(cè)量種胚各結(jié)構(gòu)[胚芽、胚軸、胚根和盾片(子葉)]未染色的面積以及種胚的總面積,計(jì)算種胚染色面積的百分率。

    依據(jù)玉米種胚染色區(qū)域的面積大小劃分為5 個(gè)區(qū)間,分別為 [0,25%)、[25%,50%)、[50%,75%)、[75%,100%)和100%。

    1.2.4 玉米田間出苗率試驗(yàn)

    每個(gè)年份設(shè)置4 個(gè)小區(qū)(重復(fù)),每個(gè)小區(qū)播種100 粒種子,3 個(gè)年份共計(jì)12 個(gè)小區(qū)。播種深度為3~4 cm,定期澆水和除草田間管理,第20 天記錄玉米出苗數(shù),計(jì)算田間出苗率。

    1.2.5 相關(guān)性分析

    利用Microsoft Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,用IBM SPSS Statistics 25.0 進(jìn)行分析比較,用Graphpad Prism 8 進(jìn)行作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 玉米種子種胚結(jié)構(gòu)四唑染色圖像

    染色后的玉米種胚各主要結(jié)構(gòu)(胚芽、胚軸、胚根和盾片)均呈紅色(圖1);根據(jù)染色顏色的深淺標(biāo)準(zhǔn)(圖2)分為染色顏色深、染色顏色淺和未染色3 類,并將試驗(yàn)中所獲得的玉米種子種胚染色顏色進(jìn)行區(qū)分和計(jì)數(shù)。其中,種胚部分未染色又包括盾片上部未染色、盾片中部未染色、盾片下部未染色、胚根未染色和胚軸未染色5 類(圖3)。

    圖1 玉米種胚主要結(jié)構(gòu)四唑染色圖Fig.1 Tetrazolium staining imagination of maize seed embryo structure

    圖2 玉米種胚四唑染色圖像分級(jí)Fig.2 Classification of tetrazolium staining imagination of maize seed embryo structure

    圖3 玉米種胚結(jié)構(gòu)未染色圖示Fig.3 Unstaining imagination of maize seed embryo structures

    2.2 不同年份玉米種子種胚四唑染色結(jié)果

    2.2.1 玉米種胚主要結(jié)構(gòu)染色及顏色分級(jí)

    由表1 可知:從玉米種子種胚染色情況來看,2015、2014 和2013 年的種胚中,盾片整體染色深的數(shù)量均低于胚芽、胚軸和胚根;盾片上部與下部染色淺的數(shù)量高于種胚其他結(jié)構(gòu)。2015和2013 年的玉米種胚各結(jié)構(gòu)的染色深淺均存在顯著性差異(P<0.05),說明隨著貯藏時(shí)間的延長,玉米種子的生活力逐漸降低。2015 與2014年的種胚中,胚芽、胚軸和盾片上部未染色均存在顯著性差異,其他種胚結(jié)構(gòu)和染色深淺間不存在顯著性差異,這說明在一定的貯藏時(shí)間內(nèi),玉米種子的生活力差異不顯著。

    表1 不同年份玉米種子種胚結(jié)構(gòu)染色深淺的比較Tab.1 Comparison of staining in embryo structure of different year maize seeds

    2.2.2 不同年份玉米種胚染色面積比較

    經(jīng)四唑染色后未染色和染色淺的種子是死種子或生活力低的種子,表明其已經(jīng)發(fā)生衰老劣變和死亡。由圖4 可知:在2015 與2014 年間,種胚染色面積為[50%,75%) 和100% 的玉米種子占比存在顯著性差異,而其他染色面積的種子占比無顯著性差異;2015 和2014 年種胚各染色面積的玉米種子占比均與2013 年存在顯著性差異;3 個(gè)年份中,染色面積達(dá)100% 的種子最多,分別為94.5%、88.5%和64%,且存在顯著性差異,表明隨著種子貯藏時(shí)間的延長,玉米種子活力逐漸降低。

    圖4 不同年份的玉米種胚染色面積Fig.4 Stained area of maize embryo in different years

    2.2.3 不同年份玉米種子染色深淺比較

    由圖5 可知:2015 和2014 年的玉米種子種胚染色變化均無顯著性差異,其中種胚全部染色深的種子占比顯著高于 2013 年,種胚部分染色深、種胚染色淺和種胚未染色的種子占比顯著低于2013 年,表明隨著貯藏時(shí)間的延長,種子衰老增加,種子活力水平逐漸下降。

    圖5 不同年份玉米種子種胚染色變化Fig.5 Staining variation of maize seeds embryo in different years

    2.3 玉米種胚四唑染色與田間出苗率

    2.3.1 玉米種胚染色面積與田間出苗率的相關(guān)性

    當(dāng)玉米種子種胚部分染色,染色面積在[0,25%)、[25%,50%)、[50%,75%) 和[75%,100%)區(qū)間,即染色面積低于100%時(shí),與玉米種子田間出苗率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)(R)分別為-0.959、-1.000 (P<0.05)、-0.875 和-0.998 (P<0.05),玉米種子田間均不能出苗,為無活力的種子;而當(dāng)玉米種胚全部染色,且染色面積為100%時(shí),與田間出苗率呈正相關(guān)關(guān)系(R=0.986),表明此時(shí)玉米種子能夠出苗,為具有活力的種子。

    2.3.2 玉米種子染色分級(jí)與田間出苗率的相關(guān)性

    玉米種子種胚全部染色而且顏色深時(shí),與田間出苗率呈顯著正相關(guān)(R=1.000,P<0.05);玉米種子部分種胚染色深時(shí),種子與田間出苗率呈顯著負(fù)相關(guān)(R=-1.000,P<0.05);全部種胚染色淺和全部未染色時(shí),與田間出苗率均呈負(fù)相關(guān)(R=-0.921 和-0.905)。說明只有當(dāng)玉米全部種胚染色深時(shí),玉米種子在田間才具備出苗能力,為有活力的種子;其他染色情況下,種子則不出苗,為無活力的玉米種子。

    3 討論

    3.1 評(píng)價(jià)種子活力與田間出苗狀況之間的關(guān)系

    種子活力測(cè)定的目的是為種子提供準(zhǔn)確的潛在生理能力差異的信息,尤其是發(fā)芽率相似,但經(jīng)過貯藏?zé)o法斷定田間播種后是否具備較好出苗狀況的種子。而測(cè)定田間出苗狀況并非易事,種子活力代表的是種子較多綜合特性的總和。單一的活力指標(biāo)是否能準(zhǔn)確描述和表達(dá)真實(shí)的種子活力水平,一直是學(xué)者長期以來研究和追尋的目標(biāo)[19]。100 多年來,種子學(xué)家們提出的描述種子的活力和活力測(cè)定評(píng)價(jià)方法,可以說得上是一個(gè)世紀(jì)的編年史,直到20 世紀(jì)80 年代初,McDonald 提出種子活力的概念得到了國際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)(ISTA)和美國官方種子分析家協(xié)會(huì)(AOSA)的認(rèn)可[20],即指在廣泛的田間條件下,決定種子迅速整齊出苗和長成正常幼苗潛在能力的總稱[21],也即表明有活力的種子在廣泛的田間條件能快速整齊出苗,而無活力的種子在田間條件下不能夠出苗。因此,在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定種子活力水平的方法,應(yīng)最終與田間出苗率也即田間表現(xiàn)相關(guān)。

    3.2 四唑染色法測(cè)定玉米種子活力的優(yōu)勢(shì)

    種子活力測(cè)定的方法可以分為基于發(fā)芽試驗(yàn)方法的生理測(cè)定和生化測(cè)定,而理想的種子活力測(cè)定方法,需要滿足結(jié)果準(zhǔn)確、簡單易行、快速省時(shí)、重復(fù)性好、成本低廉和與田間出苗率相關(guān)的要求[22]。周雷[23]曾做過探索測(cè)定玉米種子活力的最佳方法的研究,將常用的種子活力測(cè)定方法如標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)、低溫測(cè)定、鹽度測(cè)定、四唑染色和電導(dǎo)率測(cè)定等方法測(cè)出的結(jié)果與田間出苗率進(jìn)行相關(guān)分析,其中低溫測(cè)定法與田間出苗率的相關(guān)系數(shù)最高(0.979),即該方法為最佳測(cè)定方法;張守潤[24]曾做過玉米種子活力測(cè)定及其與田間出苗率的關(guān)系指出:對(duì)于鑒別早播條件下種子批的田間出苗能力,遇冷試驗(yàn)及活力指數(shù)均為有效的方法,與田間出苗率的相關(guān)系數(shù)分別為0.71 和0.77,而電導(dǎo)率測(cè)定結(jié)果與田間出苗率的相關(guān)系數(shù)最高,達(dá)到了0.85,為最佳測(cè)定方法。本試驗(yàn)采用四唑染色測(cè)定玉米種子活力,種胚全部染色且染色深時(shí)與田間出苗率的相關(guān)系數(shù)達(dá)到了1.000,即在測(cè)定時(shí)只需觀察玉米種胚是否全部100%染色以及是否染色顏色深就可以確定種子是否具備出苗能力,全部染色且顏色深的種子是有活力的種子,其他情況下種子都不具有活力,測(cè)定的方法更為簡便和準(zhǔn)確。本試驗(yàn)從預(yù)先濕潤玉米種子開始到試驗(yàn)結(jié)束只需1 d (24 h),而低溫測(cè)定最少需要7 d,因此,四唑染色圖像法大大縮短了檢測(cè)時(shí)間。

    目前,中國玉米種子活力測(cè)定的方法并未列入農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程,玉米種子活力測(cè)定在企業(yè)中并不普及,主要是因?yàn)榇蟛糠制髽I(yè)沒有掌握種子活力測(cè)定的技術(shù)方法。本試驗(yàn)根據(jù)四唑染色法染色后的種胚是否完全染色而且染色顏色深,利用肉眼或者放大鏡就能判定種子是否具有種子活力和田間出苗能力。該技術(shù)方法簡化了玉米種子活力測(cè)定方法,在當(dāng)前單粒機(jī)械播種區(qū)域越來越廣、對(duì)整齊一致的出苗率要求越來越高的情況下,對(duì)保障高效和簡化的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和用種安全具有非常重要的意義。

    4 結(jié)論

    玉米種子經(jīng)四唑染色后,只有種胚結(jié)構(gòu)全部染色且染色深的種子才能夠在田間出苗,可判定為有活力的種子;而種胚部分結(jié)構(gòu)染色或者全部染色但染色淺的種子在田間不能出苗,即為無活力的種子。這一結(jié)論可為快速測(cè)定玉米種子活力提供新的技術(shù)方法和指標(biāo),為玉米種子質(zhì)量檢驗(yàn)提供一種準(zhǔn)確、實(shí)用、方便和廉價(jià)的測(cè)定方法,可供種子檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)和種業(yè)公司采用。

    猜你喜歡
    玉米種四唑種子活力
    牧神4YZS-8 自走式種穗收獲機(jī)的試驗(yàn)研究
    更 正
    我國破譯控制水稻種子活力的“遺傳密碼”
    特定基因調(diào)控水稻種子活力機(jī)理揭示
    華南農(nóng)業(yè)大學(xué)揭示特定基因調(diào)控水稻種子活力機(jī)理
    基于機(jī)器視覺的玉米種粒破損識(shí)別方法研究
    玉米種胚HSP20基因?qū)θ斯だ匣幚淼捻憫?yīng)
    通過氨基酸滲漏檢測(cè)小麥種子活力的研究
    四唑基聚合物的研究進(jìn)展
    中國塑料(2015年11期)2015-10-14 01:14:05
    雙[2-(5-硝基-2H-四唑基)-2,2-二硝乙基]硝胺的合成與量子化學(xué)計(jì)算
    久久99热这里只频精品6学生 | 精品午夜福利在线看| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 免费av不卡在线播放| 亚洲最大成人av| 国产精品精品国产色婷婷| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久人人爽人人片av| 久久综合国产亚洲精品| 一区二区三区四区激情视频| 色综合站精品国产| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久韩国三级中文字幕| 1024手机看黄色片| 国产美女午夜福利| av女优亚洲男人天堂| 久久草成人影院| 99热精品在线国产| 成年版毛片免费区| 久久热精品热| 精品久久久久久电影网 | 久久精品国产亚洲网站| 国产麻豆成人av免费视频| 51国产日韩欧美| 亚洲四区av| 男人和女人高潮做爰伦理| 一区二区三区四区激情视频| 热99在线观看视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产成人一区二区在线| 国产av一区在线观看免费| 天天躁日日操中文字幕| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 91狼人影院| 国产高清三级在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲国产精品国产精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 99热6这里只有精品| 日本一二三区视频观看| 欧美成人a在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 毛片一级片免费看久久久久| 国产亚洲av嫩草精品影院| 大香蕉97超碰在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 丰满人妻一区二区三区视频av| 女人久久www免费人成看片 | 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产成人精品一,二区| 99久久人妻综合| 秋霞在线观看毛片| 亚洲欧美日韩高清专用| 美女内射精品一级片tv| 美女内射精品一级片tv| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久99精品国语久久久| 一个人看的www免费观看视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 桃色一区二区三区在线观看| 免费在线观看成人毛片| 国产一区二区在线av高清观看| 综合色av麻豆| 日韩av不卡免费在线播放| 免费看光身美女| 久久久久免费精品人妻一区二区| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 三级国产精品欧美在线观看| 如何舔出高潮| 人妻系列 视频| 久久久国产成人精品二区| 亚洲精品色激情综合| 2021天堂中文幕一二区在线观| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲精品自拍成人| 2021天堂中文幕一二区在线观| 中文欧美无线码| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 欧美+日韩+精品| 欧美日本视频| 搞女人的毛片| 日韩视频在线欧美| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久精品夜色国产| 欧美成人a在线观看| 日韩av在线大香蕉| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费看美女性在线毛片视频| 毛片一级片免费看久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲精品国产成人久久av| 国产精品三级大全| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产不卡一卡二| 七月丁香在线播放| 激情 狠狠 欧美| 欧美性感艳星| 国产一区二区在线av高清观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 久久精品91蜜桃| 国产高清不卡午夜福利| 欧美+日韩+精品| 国产伦理片在线播放av一区| 91精品一卡2卡3卡4卡| a级一级毛片免费在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 午夜精品国产一区二区电影 | 亚洲人成网站在线观看播放| 成人欧美大片| 亚洲丝袜综合中文字幕| 成人美女网站在线观看视频| 日本三级黄在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 午夜久久久久精精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 99久久精品一区二区三区| 亚洲av二区三区四区| 插逼视频在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国产一区有黄有色的免费视频 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 成年版毛片免费区| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲成人av在线免费| 高清视频免费观看一区二区 | 天堂影院成人在线观看| 内地一区二区视频在线| 又爽又黄无遮挡网站| 韩国高清视频一区二区三区| 51国产日韩欧美| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜福利成人在线免费观看| 久久久久久久国产电影| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲av一区综合| 欧美性感艳星| 免费大片18禁| 久久99热这里只频精品6学生 | 偷拍熟女少妇极品色| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产精品女同一区二区软件| 麻豆国产97在线/欧美| 免费观看性生交大片5| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲最大成人av| 国产黄a三级三级三级人| 成年女人永久免费观看视频| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲高清免费不卡视频| 日本欧美国产在线视频| 在线免费十八禁| 免费在线观看成人毛片| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 国产精品国产三级专区第一集| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 亚洲,欧美,日韩| 国产成人一区二区在线| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产精品不卡视频一区二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 中文资源天堂在线| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲成av人片在线播放无| 国产综合懂色| 看黄色毛片网站| 亚洲av二区三区四区| 小说图片视频综合网站| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 又爽又黄a免费视频| 成人一区二区视频在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产午夜精品论理片| 欧美日韩国产亚洲二区| 成人欧美大片| 黄色配什么色好看| 久久热精品热| 久久欧美精品欧美久久欧美| av在线观看视频网站免费| 99热网站在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 欧美zozozo另类| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品,欧美在线| АⅤ资源中文在线天堂| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 成人特级av手机在线观看| 欧美性感艳星| 国产成人a∨麻豆精品| 99久久精品国产国产毛片| 麻豆成人午夜福利视频| 日韩一区二区三区影片| 如何舔出高潮| 国产综合懂色| 国产午夜精品一二区理论片| 色尼玛亚洲综合影院| 免费看av在线观看网站| av在线老鸭窝| 岛国毛片在线播放| 久久久午夜欧美精品| 亚洲av日韩在线播放| 99视频精品全部免费 在线| 国产熟女欧美一区二区| 国产 一区精品| 最新中文字幕久久久久| 日韩制服骚丝袜av| 国产黄a三级三级三级人| 青青草视频在线视频观看| 好男人视频免费观看在线| 国产淫片久久久久久久久| 精品无人区乱码1区二区| 日本黄色片子视频| 99久久成人亚洲精品观看| 国产淫语在线视频| 国产伦理片在线播放av一区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 日韩一本色道免费dvd| av国产免费在线观看| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 深爱激情五月婷婷| 久久午夜福利片| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久久久久久久久久丰满| 秋霞伦理黄片| 欧美+日韩+精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产 一区精品| 青青草视频在线视频观看| 日本一二三区视频观看| 禁无遮挡网站| 国产视频内射| 久久这里有精品视频免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 少妇被粗大猛烈的视频| 综合色丁香网| 岛国在线免费视频观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲在线自拍视频| 尾随美女入室| 人体艺术视频欧美日本| av国产免费在线观看| 亚洲av一区综合| 色视频www国产| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美三级亚洲精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 亚洲在线观看片| 国产精品人妻久久久久久| 大话2 男鬼变身卡| 久久99热这里只有精品18| 日韩欧美精品免费久久| 99热这里只有是精品在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 国内精品美女久久久久久| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产精品日韩av在线免费观看| 99久久精品国产国产毛片| 欧美成人免费av一区二区三区| 精品久久久噜噜| 亚洲成色77777| 日韩中字成人| 国产黄色小视频在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| h日本视频在线播放| 免费av毛片视频| 午夜福利在线观看吧| 1024手机看黄色片| 18禁动态无遮挡网站| 欧美潮喷喷水| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲精品成人久久久久久| 97热精品久久久久久| 最近最新中文字幕大全电影3| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 偷拍熟女少妇极品色| 嘟嘟电影网在线观看| 99久久精品一区二区三区| 小说图片视频综合网站| 免费观看a级毛片全部| 国产一区二区在线av高清观看| 97热精品久久久久久| 特大巨黑吊av在线直播| 秋霞伦理黄片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 少妇丰满av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 青春草国产在线视频| 精品久久久噜噜| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久精品国产自在天天线| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲四区av| 又爽又黄a免费视频| 天天一区二区日本电影三级| 婷婷色麻豆天堂久久 | 国产在线一区二区三区精 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产黄a三级三级三级人| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美3d第一页| 看黄色毛片网站| 国产高潮美女av| 亚洲av免费在线观看| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 日韩一区二区视频免费看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 一区二区三区高清视频在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日本爱情动作片www.在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 丝袜喷水一区| 在线观看66精品国产| 26uuu在线亚洲综合色| 久久综合国产亚洲精品| 一级av片app| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日韩一本色道免费dvd| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 午夜福利在线观看吧| 国产精品久久电影中文字幕| 久久精品国产亚洲av涩爱| 午夜日本视频在线| 有码 亚洲区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久久久久久久久免费av| 久久国产乱子免费精品| 青春草亚洲视频在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久久久免费精品人妻一区二区| 日本wwww免费看| 日本一二三区视频观看| 日韩欧美国产在线观看| av福利片在线观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 韩国av在线不卡| 国产欧美日韩精品一区二区| 精品国产露脸久久av麻豆 | 国产精品1区2区在线观看.| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 国产亚洲91精品色在线| 亚洲国产色片| 国产色婷婷99| 国产免费福利视频在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 禁无遮挡网站| 99热这里只有是精品50| 两个人的视频大全免费| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 一本一本综合久久| 欧美97在线视频| 国内精品美女久久久久久| 久久人人爽人人爽人人片va| 麻豆成人午夜福利视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产高潮美女av| 男女边吃奶边做爰视频| 精品无人区乱码1区二区| 91精品一卡2卡3卡4卡| 欧美又色又爽又黄视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 久久99热6这里只有精品| 亚洲性久久影院| 少妇丰满av| 天天躁日日操中文字幕| 国产乱人偷精品视频| 插逼视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲四区av| 99久久精品一区二区三区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 最近中文字幕高清免费大全6| 久热久热在线精品观看| 伦精品一区二区三区| 九九在线视频观看精品| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 在线观看美女被高潮喷水网站| a级毛色黄片| 不卡视频在线观看欧美| 在线观看一区二区三区| 国模一区二区三区四区视频| 久久久a久久爽久久v久久| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国国产精品蜜臀av免费| 午夜激情福利司机影院| 欧美日韩国产亚洲二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 嫩草影院入口| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美三级亚洲精品| 欧美一区二区国产精品久久精品| 久久人人爽人人片av| 搞女人的毛片| 日韩精品有码人妻一区| 久久久久九九精品影院| 国产成人精品一,二区| 久久99精品国语久久久| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产免费又黄又爽又色| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 天美传媒精品一区二区| 亚洲av不卡在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 免费电影在线观看免费观看| 1024手机看黄色片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 精华霜和精华液先用哪个| 最后的刺客免费高清国语| 青春草视频在线免费观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 亚洲精品,欧美精品| 丰满少妇做爰视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本免费a在线| 国产av一区在线观看免费| 两个人的视频大全免费| 成人漫画全彩无遮挡| 国产精品久久电影中文字幕| 全区人妻精品视频| 久久久久久国产a免费观看| 成人二区视频| 精品国产露脸久久av麻豆 | 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美一区二区亚洲| 国产在线一区二区三区精 | 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品.久久久| 日韩三级伦理在线观看| 成人国产麻豆网| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 村上凉子中文字幕在线| 好男人在线观看高清免费视频| 国产黄片美女视频| 欧美一区二区亚洲| 久久精品国产亚洲av天美| 人体艺术视频欧美日本| 国产精品爽爽va在线观看网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日本黄大片高清| 日本爱情动作片www.在线观看| 午夜久久久久精精品| 久久久午夜欧美精品| 国产精品久久久久久av不卡| 免费一级毛片在线播放高清视频| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 97超碰精品成人国产| 欧美又色又爽又黄视频| 最后的刺客免费高清国语| kizo精华| 色综合亚洲欧美另类图片| 三级毛片av免费| 女人久久www免费人成看片 | 国产在视频线在精品| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 一区二区三区乱码不卡18| 中文资源天堂在线| 日日撸夜夜添| 国产69精品久久久久777片| 日本黄色视频三级网站网址| 激情 狠狠 欧美| videos熟女内射| 男人舔奶头视频| 99久久精品国产国产毛片| 天天一区二区日本电影三级| 一边亲一边摸免费视频| 国产av在哪里看| 能在线免费看毛片的网站| 久久亚洲国产成人精品v| 免费av毛片视频| 又爽又黄无遮挡网站| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲精品影视一区二区三区av| 波多野结衣巨乳人妻| 我的女老师完整版在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产av码专区亚洲av| 视频中文字幕在线观看| 国产色婷婷99| 久久99热这里只有精品18| 少妇熟女欧美另类| 国产极品精品免费视频能看的| 两个人视频免费观看高清| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 综合色av麻豆| 久久人妻av系列| 3wmmmm亚洲av在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 久久久欧美国产精品| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲在线观看片| 亚洲欧洲国产日韩| 久久99热6这里只有精品| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品人妻久久久影院| 中文字幕亚洲精品专区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久久久九九精品影院| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费黄色在线免费观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 久久精品综合一区二区三区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 亚洲性久久影院| 亚洲国产欧美人成| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲av.av天堂| 午夜福利成人在线免费观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲人与动物交配视频| 国内精品美女久久久久久| 天天躁日日操中文字幕| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久久久大精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 色尼玛亚洲综合影院| 日韩中字成人| 日本黄色片子视频| 日本五十路高清| 久久精品夜色国产| 成人毛片a级毛片在线播放| 男插女下体视频免费在线播放| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲av日韩在线播放| 美女cb高潮喷水在线观看| .国产精品久久| 99久久无色码亚洲精品果冻| 九草在线视频观看| 69av精品久久久久久| 九草在线视频观看| 视频中文字幕在线观看| 中文资源天堂在线| 国产精品日韩av在线免费观看| 免费观看精品视频网站| 亚洲精品色激情综合| 国产高清三级在线| 久久久久久久久大av| 亚洲国产精品久久男人天堂| eeuss影院久久| 亚洲av不卡在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 欧美高清性xxxxhd video| 色噜噜av男人的天堂激情| 老司机福利观看| www日本黄色视频网| 中文字幕制服av| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久99蜜桃精品久久| 成人鲁丝片一二三区免费| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 如何舔出高潮| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 99热精品在线国产| 国产三级中文精品| 久久久国产成人免费| 亚洲性久久影院| 久久久久久伊人网av| 熟女电影av网| 精品久久久久久久末码| 免费无遮挡裸体视频| 国产黄色小视频在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产在线男女| 日韩av在线大香蕉| 国产三级中文精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 国产亚洲一区二区精品| 亚洲综合色惰| 尾随美女入室| 禁无遮挡网站| 日韩中字成人| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 嫩草影院入口| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲内射少妇av| 99久久九九国产精品国产免费| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲,欧美,日韩| 国产淫片久久久久久久久|