板藍根芪藿口服液中黃芪多糖的提取工藝研究

王湘妍，王延珍，徐高杰

（1.河南應(yīng)用技術(shù)職業(yè)學(xué)院，河南鄭州 450000；2.河南省海天農(nóng)牧科技有限公司，河南鄭州 450000；3.河南藥品檢驗所，河南鄭州 450000）

板藍根芪藿口服液中黃芪多糖的提取工藝研究

王湘妍1，王延珍2，徐高杰3

（1.河南應(yīng)用技術(shù)職業(yè)學(xué)院，河南鄭州 450000；2.河南省海天農(nóng)牧科技有限公司，河南鄭州 450000；3.河南藥品檢驗所，河南鄭州 450000）

篩選和確立板藍根芪藿口服液中主要成分黃芪多糖的提取工藝與參數(shù)，提高藥劑黃芪多糖的含量。分別從黃芪的粉碎參數(shù)、提取工藝、除雜工藝等方面確定合適的方法與參數(shù)，并進行重現(xiàn)性驗證，以確定合適的黃芪提取工藝方法。結(jié)果證明：本方法合理可行，產(chǎn)品收率穩(wěn)定，重現(xiàn)性和可操作性好，適用于板藍根芪藿口服液黃芪多糖的提取工藝方法。

板藍根芪藿口服液；黃芪多糖；提取工藝

板藍根芪藿口服液是用于禽類動物提高免疫增強用的新型制劑。其中的中藥多糖在提升免疫力方面有獨特優(yōu)勢，安全綠色，科學(xué)研究結(jié)果表明，板藍根多糖、黃芪多糖、黃芪甲苷、淫羊藿苷具有增強動物機體免疫力、抗感染、抗腫瘤、抗氧化等多種生物學(xué)功能。板藍根芪藿口服液的處方黃芪補中益氣，其主要成分為多糖類和皂苷類成分。黃芪水提醇沉多糖類成分損失大，黃芪有效成分為水溶性皂苷類和多糖類，為充分提取其有效成分因此黃芪單獨提取法[1]。

1 黃芪的破碎研究

板藍根芪藿口服液的處方中黃芪為根莖類藥材，粉碎為粗粉有效成分易于提??；淫羊藿為葉類藥材質(zhì)地柔軟，易于提取，不需要粉碎。

稱取黃芪藥材，采用9F50-40型粉碎機，將藥材粉碎為粗粉。從表1得出，黃芪纖維性較強，藥材粉碎的平均收率為98.3%。

表1 黃芪粉碎試驗結(jié)果

2 黃芪的提取方法研究

多糖是黃芪的主要成分之一，其可顯著提高機體的免疫力，增強細(xì)胞的生理代謝作用，能顯著促進骨髓造血細(xì)胞DNA合成，加快有核細(xì)胞分裂過程，對體內(nèi)血糖水平有雙向調(diào)節(jié)作用。以黃芪多糖含量為評價指標(biāo)權(quán)重占80%，出膏率為評價指標(biāo)占20%。

2.1 提取方法

方法一：黃芪藥材粗粉500g，加水煎煮兩次，第一次加水12倍量煎煮1.5h，第二次加水10倍量煎煮1h，濾過，合并濾液，濾液濃縮至1 000mL，靜置24h，上清液高速離心過濾，濾液濃縮至500mL。

方法二：黃芪藥材粗粉500g，加水煎煮兩次，第一次加水12倍量煎煮1.5h，第二次加水10倍量煎煮1h，濾過，合并濾液，濾液濃縮至1 000mL，靜置24h，上清液高速離心過濾，濾液，加乙醇使?jié)舛冗_到60%，靜置24h后，取上清液濾過，濾液加乙醇使?jié)舛冗_到70%，靜置24h后，取上清液濾過，濾液回收乙醇，揮至無醇味，加純化水定容到500mL。

2.2 黃芪多糖測定方法[2]

比色法原理是根據(jù)多糖在硫酸的作用下水解成單糖分子，并迅速脫水生成糖醛衍生物，再將其與苯酚縮合成有色化合物，在適當(dāng)波長下和一定濃度范圍內(nèi)，吸收值與糖濃度呈線性關(guān)系，從而可比色測定其含量。

2.2.1 對照品溶液的制備

取在105℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品0.1g，精密稱定，置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備

精密量取本品1mL〔如有沉淀。需先加熱使溶解，放冷〕，置100mL量瓶中，加30%硫酸鋅溶液5mL，在水浴中加熱5min后，在振搖下立即加亞鐵氰化鉀試液5mL，冷卻后加水至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液5mL，置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。

2.2.3 測定法

精密量取對照品溶液與供試品溶液各2mL，分別置10mL量瓶中，各加2%苯酚溶液0.5mL，硫酸5mL，搖勻，置水浴中加熱15min，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄25頁），在490nm波長處分別測定吸收度，計算，實驗結(jié)果見表2。

表2 黃芪提取方法結(jié)果

3 黃芪提取液的除雜工藝研究

中藥材加水煎煮，既提取出有效成分，同時也提出一些水溶性雜質(zhì)，為了保證產(chǎn)品質(zhì)量和療效，生產(chǎn)中除雜可以采用醇沉法，但醇沉法多糖類成分損失很大。故本研究采用高速離心法，以減少了黃芪多糖的損失和破壞，節(jié)省了大量物料，降低了藥品成本。根據(jù)本研究需考察項目，確定三個因素，每個因素取3個水平，試驗見表3。

表3 黃芪提取液除雜考察

沉淀效果；沉淀好+++沉淀一般++沉淀差+

從表3得出，黃芪提取液過濾濃縮至考察的體積比后，靜置觀察沉淀效果，綜合除雜效果和效率，選擇液料比1mL∶0.5g，靜置的時間24h，上清液高速離心過濾，濾液濃縮至1mL∶1g。

4 黃芪提取工藝驗證試驗

將處方中黃芪的粉碎提取、除雜、濃縮等工藝條件篩選出來之后，還需考查工藝條件的重現(xiàn)性、可操作性以及連貫性。

按條件重復(fù)3次試驗，投料量均為處方量，結(jié)果如表4所示：

表4 黃芪工藝驗證試驗

從驗證結(jié)果來看，本研究篩選確立的黃芪提取工藝條件可靠。

5 結(jié)論

最佳的黃芪提取工藝為：藥材粗粉，加水煎煮兩次，第一次加水10倍量，煎煮1.5h，第二次加水8倍量，煎煮1h，濾過，合并濾液，濾液濃縮至50℃時相對密度1.03（1mL含藥材0.5g），靜置24h，上清液高速離心過濾，濾液濃縮至1mL含藥材1g備用。該工藝合理可行，產(chǎn)品收率穩(wěn)定，具有重現(xiàn)性和可操作性。

[1] 中國藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].第1版北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011：955.

[2] 獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2003年版[M].第1版北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2003：174.

[3] 孟祥敏，王輝.猴頭多糖口服液的制備工藝研究[J].食品工業(yè)，2013，（3）：65.

[4] 顧進華.獸藥科技創(chuàng)新發(fā)展趨勢和對策研究[J].中國獸藥雜志，2016，50（8）：57-61.

表1 一等品原料逐步被重殘液置換后產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)

通過表1我們發(fā)現(xiàn)，變化最大的是堿度與色度這兩個指標(biāo)。在高堿度及色度的己內(nèi)酰胺進入反應(yīng)器后，所得到的切片濕粘度大幅降低。通過對反應(yīng)溫度、壓力、原料配比進行調(diào)整，對提高濕切片粘度的影響比較?。ㄒ姳?）。

表2 通過對反應(yīng)溫度、壓力、原料配比進行調(diào)整濕切片粘度指標(biāo)

通過表1與表2所得參數(shù)進行比對發(fā)現(xiàn)隨著原料中堿度及色度的提高粘度逐步下降，當(dāng)己內(nèi)酰胺堿度大于30mmol/kg時，粘度下降幅度開始加大，并且干切片粘度也開始大幅降低，這還是在大幅提高干燥氮氣溫度的情況下獲得的一組參數(shù)，由此可見重殘液堿度對聚合反應(yīng)非常敏感，高堿度物料在聚合過程中粘度比較低且比較穩(wěn)定通過高溫干燥增粘效果不好。在原料這一塊也曾經(jīng)試圖通過加大醋酸量對原料中的游離堿進行中和但效果都不理想。

通過生產(chǎn)實踐觀察并采取一定工藝措施，是切片產(chǎn)品質(zhì)量得到控制。

1）對上游的控制，在精制單元平穩(wěn)的狀態(tài)下將重殘液的堿度控制在30mmol/kg以下，通過和重排分廠溝通是可以實現(xiàn)的。

2）通過自身的配置系統(tǒng)將重排來的高堿度重殘液進行配置降低其堿度。

3）在堿度控制在一定范圍以后，可通過干燥系統(tǒng)提高熱氮氣溫度對切片粘度進行微調(diào)。

4）可根據(jù)堿度的范圍選擇醋酸的加入量。

4 結(jié)論

通過以上分析可知，重殘液中堿度對切片粘度影響比較大，聚合反應(yīng)對原料堿度反應(yīng)敏感，但通過生產(chǎn)實踐觀察并采取一定工藝措施結(jié)合生產(chǎn)數(shù)據(jù)分析，將堿度控制在一定的范圍內(nèi)，對產(chǎn)品質(zhì)量還是可控的。

參考文獻

[1] 黃桂根，黃開華.20kt/a PA6前聚合工藝的優(yōu)化[J]合成纖維工業(yè)，2009，（3）：53-55.

Analysis and Research on the Extraction Process of Astragalus Polysaccharide of Radix Isatidis Qiho oral Liquid

Wang Xiang-yan1，Wang Yan-zhen2，Xu Gao-jie3

the selection and establishment of main components of Radix Astragalus qiho oral liquid in the extraction process of polysaccharide and chemical parameters，improve the content of Astragalus polysaccharides.The suitable methods and parameters were determined from the grinding parameters，extraction process and impurity removal process，and the reproducibility of the method was verified.Results：this method is reasonable and feasible，stable product yield，good reproducibility and operability，a method of extraction for qiho radix astragalus polysaccharide oral liquid.

Radix qiho oral liquid；astragalus polysaccharide；extraction technology

TQ461

B

1003–6490（2016）09–0056–02

2016–09–10

河南省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)重點研究項目 項目標(biāo)號17A360008。

王湘妍（1982-），女，河南開封人，講師，主要研究方向為中藥新制劑研發(fā)。