解脲支原體感染對不育男性精液質(zhì)量及生育能力的影響

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(1.南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿男科，湖南 衡陽 42100；2.湖南環(huán)境生物職業(yè)技術(shù)學(xué)院)

·臨床醫(yī)學(xué)·

解脲支原體感染對不育男性精液質(zhì)量及生育能力的影響

劉伯龍1*，王娟花2，唐正1，張益康1，秦松林1

(1.南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿男科，湖南 衡陽 42100；2.湖南環(huán)境生物職業(yè)技術(shù)學(xué)院)

目的探討解脲支原體(UU)感染對不育男性精液質(zhì)量及生育能力的影響。方法回顧性分析本院生殖中心就診的男性不育患者298例，根據(jù)患者精液是否存在解脲支原體感染分為病例組(n=109)和對照組(n=189)，并對兩組患者的精液質(zhì)量進(jìn)行分析。同時，對UU感染患者予以阿奇霉素治療，隨訪1年觀察治療后病例組患者生育情況。結(jié)果與對照組相比，病例組患者精子總活力、前向運(yùn)動率(PR)、精子存活率顯著降低，精子正常形態(tài)率顯著降低，精子頭部畸形率顯著增高(P均<0.05)，而兩組患者的精子畸形指數(shù)、畸形精子指數(shù)、體部畸形率和尾部畸形率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與對照組相比，病例組精子頂體酶活性顯著降低，而頂體酶異常率、精漿彈性蛋白酶顯著高；精漿彈性蛋白酶診斷解脲支原體感染的敏感性為67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，特異性為66.7% (95%CI:43.5%～86.8%)，ROC曲線下面積為0.71(95%CI:0.57～0.86)；病例組78例接受了阿奇霉素治療2周，1年內(nèi)妻子受孕率明顯高于對照組 (HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)。結(jié)論解脲支原體感染可影響男性精液質(zhì)量，是導(dǎo)致不育的重要原因之一，抗解脲支原體治療可提高患者生育機(jī)會。

解脲支原體； 不育； 精液質(zhì)量； 生育能力

生殖健康相關(guān)流行病學(xué)資料顯示[1]，近年來我國男性生殖水平明顯降低，男性不育患者數(shù)量呈現(xiàn)出逐年增加趨勢。生活壓力增大、生育年齡延后及不良的生活飲食習(xí)慣是我國男性生殖能力降低的重要原因。同時，有研究報道[2]，我國不育男性精液中解脲支原體感染率較高，提示解脲支原體感染可能與我國男性不育有關(guān)。但國外亦有研究報道，不育男性患者中解脲支原體感染率與正常生育能力男性人群并無明顯差異[3]。因此，解脲支原體感染是導(dǎo)致男性不育的原因仍存在爭議。本研究對我院近年來門診接診的男性不育患者精子檢查結(jié)果進(jìn)行分析，探討解脲支原體感染對不育男性精液質(zhì)量及生育能力的影響。

1 資料與方法

1.1臨床資料

1.1.1 患者來源 回顧性分析2012年1月至2014年1月本院生殖中心就診的男性不育患者298例，收集其精液進(jìn)行檢測分析，并根據(jù)是否存在解脲支原體(ureaplasma urealyticum，UU)感染分為病例組(n=109)和對照組(n=189)，并對兩組患者的精液質(zhì)量進(jìn)行分析，探討解脲支原體感染對不育男性精液質(zhì)量的影響。病例組平均年齡30.6±5.5歲，平均不育史16.8±6.6月，對照組31.1±4.8歲，平均不育史15.6±5.9月。兩組患者性生活正常無明顯睪丸、附睪、輸精管等異常，無性傳播疾病病史。

1.1.2 精液采集 囑患者禁欲2～7 天后進(jìn)行精液檢測，患者于取精室安靜狀態(tài)下進(jìn)行取精，首先用溫水清洗手部及陰莖、龜頭等部位，然后通過手淫的方法進(jìn)行取精，應(yīng)將精液全部射入無菌無毒精杯。取精成功后將無菌精杯迅速放入37℃培養(yǎng)箱中，待精液完全液化后進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測。

1.2方法

1.2.1 解脲支原體感染檢測 本研究中支原體檢測試劑盒由珠海麗珠生物科技有限公司提供,按照說明操作，結(jié)果判斷：UU培養(yǎng)基由黃變紅，且清澈透明，判斷為有解脲支原體生長，判斷為陽性。

1.2.2 精子活力分析 采用計算機(jī)精液輔助分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測，(檢測設(shè)備為CASA系統(tǒng)，購自：北京中科科技有限公司)。精子活力分為前向運(yùn)動、非前向運(yùn)動和不動3級。

1.2.3 精子形態(tài)分析 采用拉薄技術(shù)制作適當(dāng)厚度精子涂片，采用Diff-Quick染色試劑盒進(jìn)行染色(試劑盒購自珠海麗珠生物科技有限公司)。計數(shù)200條精子的形態(tài)，統(tǒng)計正常形態(tài)精子數(shù)目及比例，精子頭部畸形、中段畸形及尾部畸形精子數(shù)目及比例，并計算精子畸形指數(shù)與畸形精子指數(shù)。

1.2.4 頂體酶活性檢 應(yīng)用精子頂體酶活性檢測試劑盒(購自：深圳博銳德生物科技有限公司)檢測患者精子頂體酶活性，并根據(jù)試劑盒說明計算精子頂體酶活性。

1.2.5 精漿彈性蛋白酶水平 用精漿彈性蛋白酶定量測試劑盒 (購自：北京百奧萊博科技有限公司)測定患者精漿彈性蛋白酶水平，濃度測定大于1 000 ng/mL提示泌尿生殖道存在感染。

1.2.6 隨訪 對患者進(jìn)行電話或門診隨訪，記錄患者妻子是否懷孕及懷孕時間。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1解脲支原體感染與精子活力病例組患者精子總活力、前向運(yùn)動率、精子存活率顯著低于對照組，而精子濃度兩組比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，詳見表1。

表1兩組患者精子活力比較

組別n總活力(%)前向運(yùn)動率(%)存活率(%)精子濃度(106/mL)病例組10943．2±13．6a31．3±15．1a53．3±17．2a43．8±6．6對照組18949．4±15．135．1±14．357．9±16．644．2±7．4

與對照組比較，a∶P<0.05

2.2解脲支原體感染與精子形態(tài)病例組患者精子正常形態(tài)率為(2.61±1.45)% 顯著低于對照組(4.55±1.88)，且差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；病例組精子頭部畸形率顯著高于對照組(82.6±4.1 vs 70.3±5.4)%，且差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而兩組患者的精子畸形指數(shù)、畸形精子指數(shù)、中段畸形率和尾部畸形率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(圖1)。

圖1 兩組患者解脲支原體感染與精子形態(tài)關(guān)系 與對照組比較，*：P<0.05

2.3解脲支原體感染與精子頂體酶活性如表2所示，病例組與對照組精子頂體酶活性分別為(58.6±26.8) μIU/106和(95.1±24.7) μIU/106，且病例組顯著低于對照組(P<0.05)，其頂體酶異常率顯著高于對照組(P<0.05)。

表2兩組患者精子頂體酶活性及異常率比較

組別n頂體酶活性(μIU/106)異常率[n，(%)]病例組2858．6±26．89(32．1)對照組5195．1±24．77(13．7)t/χ22．493．80P0．010．04

2.4解脲支原體感染對精漿彈性蛋白酶的影響如圖2所示，病例組21例患者與對照組28例患者進(jìn)行了精漿彈性蛋白酶水平分析，病例和對照組中精漿彈性蛋白酶分別為(318.56±233.7) ng/ 1 mL和(268.8±186.6) ng/mL，病例組顯著高于對照組(P<0.05)；以精漿彈性蛋白酶為判斷泌尿生殖道解脲支原體感染的標(biāo)準(zhǔn)，其診斷敏感性為67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，特異性為66.7% (95%CI:43.5%～86.8%)，ROC曲線下面積為0.71(95%CI:0.57～0.86。

圖2 精漿彈性蛋白酶判斷解脲支原體感染的ROC曲線

2.5抗解脲支原體治療對生育率影響病例組78例接受了阿奇霉素治療(阿奇霉素0.5 g/日，口服，連續(xù)2周)，1月后復(fù)查，66例患者UU感染轉(zhuǎn)為陰性，并對患者進(jìn)行1年的隨訪。對兩組患者1年內(nèi)妻子受孕率進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，試驗組妻子懷孕幾率明顯高于對照組，且差別有統(tǒng)計學(xué)意義(HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)，圖3。

3 討 論

圖3 抗解脲支原體治療對生育率影響曲線圖

解脲支原體為體積介于細(xì)菌和病毒之間的一類病原體，直徑僅有15～25 μm，是引發(fā)泌尿生殖系統(tǒng)感染的重要病原體之一。研究報道[4-5]，解脲支原體感染患者精液量減少，精子活力減弱，可能是是引發(fā)男性不育的重要原因之一。既往有文獻(xiàn)報道[5]，男性不育患者中，解脲支原體感染的發(fā)生率明顯高于正常男性，提示解脲支原體感染與男性不育存在流行病學(xué)上的相關(guān)性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)解脲支原體感染后男性精液質(zhì)量變化，包括精液體積、精子濃度、活力、正常形態(tài)精子等降低[6]。同時，解脲支原體能夠與男性精子結(jié)合，進(jìn)而導(dǎo)致精子頭部及頸部發(fā)生形態(tài)學(xué)改變，而精子尾部發(fā)生卷曲，導(dǎo)致精子的活動能力降低，前向運(yùn)動能力降低，從而影響精子與卵子的正常結(jié)合，從而導(dǎo)致男性不育。周歡群，等[7]對廣東地區(qū)143例男性不育患者的精液質(zhì)量進(jìn)行了分析，143例不育患者中，解脲支原體感染者為46例，感染率為32.2%。解脲支原體感染者精子形態(tài)正常率顯著降低、頂體酶活性降低，頂體酶異常率升高(P<0.05); 而感染者精子前向運(yùn)動率及總活力與無感染組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。胡建新，等[8]對貴州地區(qū)男性不育患者精子質(zhì)量檢測發(fā)現(xiàn)，不育患者精液中解脲支原體感染率為47.2% 明顯高于周歡群等人報道到的32.2%，而我們發(fā)現(xiàn)男性不育患者解脲支原體感染率為36.6% 與周歡群等人的報道接近。胡建新，等[8]研究認(rèn)為男性生殖道解脲支原體感染與精液中抗精子抗體的產(chǎn)生有相關(guān)性，從而導(dǎo)致男性生育能力下降。在本研究中，精液解脲支原體感染感染能夠影響患者的精子總活力、前向運(yùn)動率、精子正常形態(tài)率。而對患者的精子畸形指數(shù)、畸形精子指數(shù)、中段畸形率和尾部畸形率無明顯影響，這與國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)報道基本一致[9-10]。同時本研究還發(fā)現(xiàn)感染組患者精子頂體酶活性顯著降低，這可能是解脲支原體感染導(dǎo)致不育的重要原因。因為，精子與卵子的正常結(jié)合是受孕的基本條件，這個結(jié)合過程最重要的步驟就是精子發(fā)生頂體反應(yīng)，精子頂體釋放頂體酶和透明質(zhì)酸酶，進(jìn)而溶解透明帶，能夠使得精子順利通過透明帶與卵子結(jié)合完成DNA融合的授精過程，在此過程中，頂體酶無疑發(fā)揮重要作用。解脲支原體感染感染后，頂體酶水平降低，頂體異常率顯著升高導(dǎo)致無法正常溶解透明帶，從而無法順利與卵子DNA融合完成授精過程。因此，理論上對解脲支原體感染患者進(jìn)行抗解脲支原體治療能夠提高患者生育水平。在本研究中，我們對解脲支原體感染患者進(jìn)行了阿奇霉素治療，并對治療后的患者進(jìn)行了1年的隨訪，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，78例患者接受阿奇霉素治療(阿奇霉素0.5 g/日，口服，連續(xù)2周)，1年內(nèi)妻子受孕率顯高于對照組 (HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)。但由于生育的因素可能與多種因素有關(guān)，如工作環(huán)境改變，性生活頻率，年齡因素，女方因素等。因此，并不能說明UU感染是導(dǎo)致男性不育的直接原因。通過本研究，我們認(rèn)為，解脲支原體感染可降低男性精液質(zhì)量，是可能與男性不育有關(guān)，通過抗解脲支原體治療有望提高患者生育機(jī)會。由于本研究為回顧性分析，容易受到信息偏倚的影響，且納入患者例數(shù)較少，統(tǒng)計效能較低，結(jié)論的穩(wěn)定性有待進(jìn)一步證實。

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EffectsofUreaplasmaUrealyticumInfectionontheQualityofSemeninPatientsofMaleSterility

LIU Bolong，WANG Juanhua,TANG Zheng，et al
(DepartmentofAndriatrics，TheFirstAffiliatedHospitalofUniversityofSouthChina，HunanHengyang421001，China)

ObjectiveTo evaluate the effects of ureaplasma urealyticum(UU) infection on the quality of semen in patients of male sterility.Methods298 cases of male sterility diagnosed in this study in our hospital were retrospectivel.The semen was diveided into case group(n=109) and control group (n=189) accoding to whether or not infected with UU.The semen quality of the two groups were tested，the patients of case group

Azithromycin treatment and follow up for one year.The fertility rate was analyzed in the cases grop.ResultsCompared with the control group，the total sperm activity，the forward movement rate and survival rate spermatozoa was significantly lower，while sperm concentration between the two groups had no significant difference; The morphology normal rate of sperm in the case group was significantly lower than that in the control group (P<0.05)，the abnormal rate of sperm head in the case group was significantly higher，But the sperm deformity index，abnormal sperm index，sperm head deformity rate，central deformity rate and tail deformity rate were not statistically significant between the two groups (P>0.05).Compared with the control group，sperm terminal enzyme activity of the case group was significantly lower (P<0.05)，but the abnormal rate of sperm terminal enzyme and the seminal plasma elastase was significantly higher (P<0.05).According to plasma elastase，the diagnosis of UU infection of urinary and reproductive tract was 67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，and 66.7%(95%CI:43.5%～86.8%)，for sensitivity and specificity with area under the ROC curve of 0.71 (95%CI:0.57～0.86).In the case group，78 cases were treated with azithromycin for 2 weeks and with 1 year follow up，the wife's pregnancy rate was significantly higher than that of the control group，and the difference was statistically significant (HR=2.76，95%CI:1.26 ～ 6.06，P<0.05).ConclusionUreaplasma urealyticum infection can affect the quality of semen in patients with sterility，which could be one of the reasons for sterility.Anti treatment of ureaplasma urealyticum can elevated the rate of fertility.

ureaplasma urealyticum; infertility; semen quality; fertility

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.04.015

2016-05-04；

2016-06-16

*通訊作者，E-mail:2674918171@qq.com.

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