卵黃抗體在水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治及水產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用研究進(jìn)展

靖凱霖，徐永平,2，李 媛，姚 營(yíng)，王麗麗,2，張美霞，尹婷慧，李曉宇,2

( 1.大連理工大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，遼寧 大連 116024；2.動(dòng)物性食品安全保障技術(shù)教育部工程研究中心，遼寧 大連 116020 )

卵黃抗體在水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治及水產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用研究進(jìn)展

靖凱霖1，徐永平1,2，李 媛1，姚 營(yíng)1，王麗麗1,2，張美霞1，尹婷慧1，李曉宇1,2

( 1.大連理工大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，遼寧 大連 116024；2.動(dòng)物性食品安全保障技術(shù)教育部工程研究中心，遼寧 大連 116020 )

卵黃抗體；水產(chǎn)養(yǎng)殖；病害防治；水產(chǎn)品保鮮；疾病診斷

2012年，水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量占世界水產(chǎn)品總產(chǎn)量(養(yǎng)殖和捕撈)的比例，由2000年的25.7%升至42.2%，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)完全可以與捕撈業(yè)相媲美[1]。自改革開(kāi)放以來(lái)，我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)高速發(fā)展舉世矚目，是世界唯一漁業(yè)養(yǎng)殖產(chǎn)量超過(guò)捕撈產(chǎn)量的國(guó)家，也是世界第一水產(chǎn)養(yǎng)殖大國(guó)[2]。2012年我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量占全球總產(chǎn)量的47.4%[3]，是食物供給功能獲得極大成功的國(guó)家[4]。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化、規(guī)?；陌l(fā)展，水產(chǎn)動(dòng)物病害頻發(fā)，病原菌產(chǎn)生耐藥性[5-6]，水體嚴(yán)重污染[7]，水環(huán)境生態(tài)失衡[8]，影響食品質(zhì)量安全[9]，間接危害人體健康[10]。因此，研究抗生素或化學(xué)藥物替代品已成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)[11]。卵黃抗體亦稱卵黃免疫球蛋白，是在特異性抗原刺激下由禽類B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生并轉(zhuǎn)移到卵黃中的多克隆抗體[12]。卵黃抗體可從雞蛋中獲取，無(wú)需宰殺動(dòng)物，符合動(dòng)物權(quán)益保護(hù)，且具有特異性高、無(wú)毒無(wú)副作用、對(duì)環(huán)境友好等特點(diǎn)，而廣泛用于診斷和防治動(dòng)物感染性疾病[13]。

1 卵黃抗體在細(xì)菌性水產(chǎn)疾病中的應(yīng)用

監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，在126種病害中，細(xì)菌性疾病有61種，約占48%[14]。水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性疾病主要有弧菌病、愛(ài)德華氏菌病、出血病、爛鰓病、赤皮病、腐皮病、腹水病、細(xì)菌性敗血癥和細(xì)菌性腎病等[15-16]，引起這些疾病的病原主要有：鰻弧菌(Vibrioanguillarum)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、燦爛弧菌(V.splendidus)、遲緩愛(ài)德華氏菌(Edwardsiellatarda)、嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)、鰻敗血假單胞菌(Pseudomonasanguilliseptica)和鮭魚(yú)腎桿菌(Renibacteriumsalmoninarum)等[17-19]。目前，使用卵黃抗體技術(shù)防治水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病，已有諸多研究報(bào)道，且防治效果良好(表1)。

用卵黃抗體控制水產(chǎn)動(dòng)物疾病的方式主要有注射、口服和浸浴。理論上認(rèn)為，注射方式效果最為直接，血清中的抗體水平更高。用腹腔注射、口服和加入飼料中等方式研究抗鰻弧菌特異性卵黃抗體對(duì)虹鱒(Oncorhynchusmykiss)的被動(dòng)免疫保護(hù)作用發(fā)現(xiàn)，這3種方式均能明顯提高虹鱒的抗病能力[23]，其中注射效果最好，死亡率明顯低于口服組和飼喂組，且注射組血清中卵黃抗體水平最高為1×104ng/mL，而口服組和飼喂組分別為3×102ng/mL和1×102ng/mL。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，口服前的饑餓時(shí)間和飼料中添加的吸收助劑都影響血清中卵黃抗體的水平。卵黃抗體的使用方式不同，保護(hù)效果也不同，飼喂方式延長(zhǎng)了卵黃抗體在胃酸和消化酶環(huán)境中的時(shí)間，使卵黃抗體極容易被破壞，影響了其免疫保護(hù)效果。

表1 卵黃抗體在水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病中的應(yīng)用(部分)

Lee 等[22]給虹鱒口服抗魯氏耶爾森氏菌(Yersiniaruckeri)卵黃抗體后，最初的2 h內(nèi)胃中的抗體活性快速下降，5 h后完全喪失，但在攻毒試驗(yàn)中，口服卵黃抗體仍對(duì)虹鱒保護(hù)作用較好。注射對(duì)魚(yú)體刺激較大，腹腔注射卵黃抗體很容易引起魚(yú)體的免疫應(yīng)答，使其產(chǎn)生相應(yīng)抗體與之結(jié)合，調(diào)動(dòng)其他免疫機(jī)制清除進(jìn)入魚(yú)體的卵黃抗體。用口服和腹腔注射方式給大菱鲆(Scophthalmusmaximus)進(jìn)行抗遲緩愛(ài)德華氏菌卵黃抗體免疫后，分別用注射和劃傷浸泡兩種方式攻毒[24]。結(jié)果表明，口服特異性卵黃抗體后兩種攻毒方式對(duì)大菱鲆的免疫保護(hù)率分別為83.3%和100%，注射免疫沒(méi)有保護(hù)作用。

筆者推測(cè)，卵黃抗體使用方式不同，保護(hù)效果不同，其原因可能是不同病原菌對(duì)魚(yú)的感染方式不同，魯氏耶爾森氏菌和遲緩愛(ài)德華氏菌通過(guò)魚(yú)腸黏膜感染致病[37-38]，因此，口服特異性卵黃抗體，能夠直接有效地抑制腸道病原菌的黏附、聚集和增殖，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡；而鰻弧菌的感染會(huì)引起全身性的組織病變，雖然不同的魚(yú)感染鰻弧菌后，表現(xiàn)的癥狀不同，但最主要癥狀是體表出血[39]。因此，通過(guò)腹腔注射卵黃抗體可以提高血清中卵黃抗體水平，使卵黃抗體隨血液循環(huán)到達(dá)全身各組織病灶處，發(fā)揮保護(hù)作用。與非特異性卵黃抗體試驗(yàn)組相比，抗鰻弧菌特異性卵黃抗體對(duì)香魚(yú)(Plecoglossusaltivelis)的被動(dòng)免疫作用，除了可以降低血液、肝臟、脾臟和頭腎的病原菌數(shù)目外，還表現(xiàn)在頭腎、脾臟和肝臟中，明顯地降低腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β和白細(xì)胞源趨化因子2的轉(zhuǎn)錄水平[33]。該研究還報(bào)道，卵黃抗體能增強(qiáng)香魚(yú)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，這一結(jié)果與之前的研究相一致[40-41]。

該研究深入探討了卵黃抗體對(duì)魚(yú)黏膜免疫系統(tǒng)的被動(dòng)免疫調(diào)節(jié)作用，也是對(duì)特異性卵黃抗體防治細(xì)菌感染性疾病作用機(jī)理的重要補(bǔ)充。

2 卵黃抗體在病毒性水產(chǎn)疾病中的應(yīng)用

白斑綜合癥病毒是一種傳播速度快，傳染范圍廣的強(qiáng)感染力病毒，使對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)受損嚴(yán)重。本試驗(yàn)組前期研究表明，甲殼類動(dòng)物缺少特異性免疫系統(tǒng)，用針對(duì)病原體的特異性卵黃抗體，為其提供被動(dòng)免疫保護(hù)，恰好使其具有“主動(dòng)防御”的能力，Lu等[42]用基因重組技術(shù)將白斑綜合癥病毒的主要致病蛋白基因VP28、VP19和VP15串聯(lián)表達(dá)制成DNA疫苗。以白斑綜合癥病毒滅活疫苗為參照，免疫蛋雞獲取特異性卵黃抗體。通過(guò)注射、口服和浸泡等方式考察抗白斑綜合癥病毒特異性卵黃抗體的被動(dòng)免疫保護(hù)效果，結(jié)果顯示，注射滅活疫苗卵黃抗體組，對(duì)蝦9 d內(nèi)累計(jì)死亡率為46.7%，注射DNA疫苗卵黃抗體組累計(jì)死亡率100%；口服試驗(yàn)中，投喂含有1%的滅活疫苗卵黃抗體組，9 d內(nèi)累計(jì)死亡率為53.3%，而DNA疫苗組與陰性對(duì)照組無(wú)顯著性差異；浸泡試驗(yàn)中，滅活疫苗卵黃抗體組的累計(jì)死亡率降低至33.3%，DNA疫苗卵黃抗體組死亡率80%。

韋嵩等[43]進(jìn)一步用含有抗白斑綜合癥病毒的特異性卵黃抗體試驗(yàn)飼料投喂對(duì)蝦，以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照，考察了酚氧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶及超氧化物歧化酶等非特異性免疫相關(guān)因子酶活力。結(jié)果顯示，試驗(yàn)組中氧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶和超氧化物歧化酶活力均顯著高于對(duì)照組，表明卵黃抗體能有效地提高對(duì)蝦免疫功能。

上述結(jié)果表明，滅活疫苗卵黃抗體組的保護(hù)效果優(yōu)于DNA疫苗卵黃抗體組。究其原因，一是全滅活疫苗比DNA疫苗的免疫原性更強(qiáng)[44]，即免疫刺激使蛋雞產(chǎn)生特異性抗體的能力更強(qiáng)；二是卵黃抗體與白斑綜合癥病毒中和遵循“多擊理論”，即1個(gè)卵黃抗體分子尚不能中和單個(gè)白斑綜合癥病毒分子，而需多個(gè)卵黃抗體協(xié)同作用才能起效[45]，因此全滅活疫苗卵黃抗體能與白斑綜合癥病毒表面多個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，誘導(dǎo)病毒表面蛋白的空間構(gòu)型重排，阻止大多數(shù)囊膜蛋白與細(xì)胞表面受體結(jié)合，滅活疫苗卵黃抗體效果更好。而DNA疫苗卵黃抗體專一性更強(qiáng)，只能影響病毒某一主要黏附位點(diǎn)，限制了多個(gè)卵黃抗體分子協(xié)同發(fā)揮阻遏作用。筆者認(rèn)為注射效果最好，但實(shí)際應(yīng)用上不易實(shí)施；浸泡和口服在實(shí)際應(yīng)用中更具可行性。

3 卵黃抗體在水產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用

水產(chǎn)品的冷藏保鮮對(duì)水產(chǎn)品加工、運(yùn)輸、貯藏和消費(fèi)等環(huán)節(jié)至關(guān)重要，生物保鮮劑來(lái)源于生物體自身組成或代謝成分，對(duì)人體無(wú)害、安全、高效而受到高度重視[46]。Xu等[47]制備冷藏牙鲆(Paralichthysolivaceus)特定腐敗菌——腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)和熒光假單胞菌(P.fluorescens)的特異性卵黃抗體。在4 ℃條件下，將試驗(yàn)組魚(yú)片浸于100 mg/mL的特異性卵黃抗體溶液中10 min后無(wú)菌包裝, 4 ℃冷藏，每3 d取樣進(jìn)行微生物分析、化學(xué)分析和感官評(píng)定。結(jié)果表明，特異性卵黃抗體處理后，試驗(yàn)組魚(yú)片的細(xì)菌總數(shù)明顯降低，貨架期從8～9 d延長(zhǎng)至12～15 d；化學(xué)分析結(jié)果證明，揮發(fā)性鹽基氮值和硫代巴比妥酸值均明顯低于對(duì)照組；感官評(píng)定中，評(píng)分低于4分(判定為不新鮮)的時(shí)間，也延長(zhǎng)了3～6 d。微生物、化學(xué)及感官指標(biāo)保持很好的一致性。Zhang等[48]進(jìn)一步考察了腐敗希瓦氏菌特異性卵黃抗體活性片段Fab′對(duì)冷藏大菱鲆的保存效果。微生物分析結(jié)果顯示，卵黃抗體活性片段Fab′與完整卵黃抗體相比具有更高效和持久的抑菌效果；化學(xué)分析中，揮發(fā)性鹽基氮值顯著低于完整卵黃抗體組；而感官評(píng)定中，卵黃抗體活性片段Fab′組初始得分低于其他組，原因可能由于活性片段制備過(guò)程中使用胃蛋白酶酶解，有些許胃蛋白酶味道殘留，后期純化過(guò)程未完全除去，導(dǎo)致感官評(píng)分低于其他組，但試驗(yàn)進(jìn)行到15 d時(shí)，卵黃抗體活性片段Fab′組感官評(píng)分明顯高于其他各組，表現(xiàn)出良好的保藏效果。

卵黃抗體綠色、安全，能夠抑制主要腐敗微生物，不破壞食品原有品質(zhì)，而成為一種食品保鮮領(lǐng)域極具前景的生物保鮮劑[49-50]。

4 卵黃抗體在水產(chǎn)寄生蟲(chóng)及毒素診斷中的應(yīng)用

源于岡比亞盤藻(Gambierdiscustoxicus)的雪卡毒素毒性比河豚毒素強(qiáng)100倍，是一種危害較嚴(yán)重的生物毒素[51-52]。雪卡毒素通過(guò)食物鏈在魚(yú)體內(nèi)富集，但被污染的魚(yú)肉無(wú)法憑感官鑒定且缺少靈敏可靠的檢測(cè)方法，因此全世界每年約 50 000人因誤食受污染的魚(yú)而中毒[53]。Empey 等[54]利用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)魚(yú)肉組織中的雪卡毒素，該方法使用的雙抗體為：與雪卡毒素的ABCD域特異性結(jié)合的卵黃抗體；與雪卡毒素的JKLM域特異性結(jié)合且偶聯(lián)辣根過(guò)氧化物酶的小鼠免疫球蛋白G。試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精度和重現(xiàn)性良好，且與軟海綿酸和軟骨藻酸無(wú)交叉反應(yīng)性，表明卵黃抗體技術(shù)提供了一種靈敏、準(zhǔn)確、快速的檢測(cè)雪卡毒素方法。

Young等[55]制備了抗太平洋鮭魚(yú)(Oncorhynchustshawytscha)微孢子蟲(chóng)的特異性卵黃抗體。間接免疫熒光抗體試驗(yàn)結(jié)果顯示，檢測(cè)固定化的Lomasalmonae孢子，有特異性熒光反應(yīng)。免疫組化試驗(yàn)結(jié)果顯示，L.salmonae孢子在鮭魚(yú)各組織中染色程度強(qiáng)，最早可在接觸感染4周后，在鰓和心臟感染組織切片中，檢測(cè)出生長(zhǎng)階段的寄生蟲(chóng)寄主復(fù)合體。交叉反應(yīng)試驗(yàn)中，卵黃抗體與其他微孢子蟲(chóng)如Pseudolomaneurophilia和Glugeaanomala無(wú)交叉反應(yīng)，表明其具有良好的特異性，適于其他水產(chǎn)動(dòng)物的病原診斷。而快速、準(zhǔn)確地診斷也是有效防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物病害的基礎(chǔ)和先決條件。

卵黃抗體可有效地避免傳統(tǒng)的病原診斷中耗時(shí)費(fèi)力，延誤最佳治療時(shí)機(jī)的缺點(diǎn)，還可以避免常規(guī)診斷中用哺乳類動(dòng)物源抗體造成的非特異性交叉反應(yīng)。因此，卵黃抗體或成為一種快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的診斷優(yōu)勢(shì)技術(shù)[56]。

5 展 望

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖的種類和規(guī)模不斷擴(kuò)大，各類細(xì)菌、病毒病害頻發(fā)。卵黃抗體高效、低成本，收集抗體無(wú)需采血符合動(dòng)物權(quán)益，且對(duì)環(huán)境友好，無(wú)毒副作用、無(wú)殘留[57]，作為抗生素類藥物和化學(xué)保鮮劑的替代品，在水產(chǎn)疾病防治、水產(chǎn)保鮮及病害診斷中，具有巨大學(xué)術(shù)意義和應(yīng)用價(jià)值。

但是，卵黃抗體防控技術(shù)及產(chǎn)品應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)程尚未建立，國(guó)家目前也尚未制定針對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中動(dòng)物用生物制劑產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)程和法規(guī)，使卵黃抗體作為海水養(yǎng)殖動(dòng)物病害防治產(chǎn)品而產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)具有一定的困難。相信隨著研究的不斷深入，卵黃抗體在防治水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病、水產(chǎn)品的保鮮及病害診斷中，一定會(huì)有更好的應(yīng)用前景。

[1] 李明爽.2012年全球水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量和產(chǎn)值統(tǒng)計(jì)[J].中國(guó)水產(chǎn),2014(8):36-39.

[2] 王熙濤,盧燕丹,王麗麗,等.新型抗生素替代品防治水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病的研究進(jìn)展[J].飼料與畜牧,2015(4):18-22.

[3] 農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局.中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2013.

[4] 唐啟升,丁曉明,劉世祿,等.我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)綠色、可持續(xù)發(fā)展保障措施與政策建議[J].中國(guó)漁業(yè)經(jīng)濟(jì), 2014,32(2):5-11.

[5] Adesiji Y O, Deekshit V K, Karunasagar I. Antimicrobial-resistant genes associated withSalmonellaspp. isolated from human, poultry, and seafood sources[J].Food Science & Nutrition,2014,2(4):436-442.

[6] 王瑞旋,馮娟,耿玉靜,等.水產(chǎn)細(xì)菌耐藥性的最新研究概況[J]. 海洋環(huán)境科學(xué),2010，30(5):770-776.

[7] Zou S, Xu W, Zhang R, et al. Occurrence and distribution of antibiotics in coastal water of the Bohai Bay, China:impacts of river discharge and aquaculture activities[J].Environmental Pollution,2011,159(10):2913-2920.

[8] Kümmerer K. Antibiotics in the aquatic environment——a review——Part Ⅰ[J].Chemosphere,2009,75(4):417-434.

[9] Verraes C, Van Boxstael S, Van Meervenne E, et al. Antimicrobial resistance in the food chain:a review [J]. International Journal of Environmental Research and Public Health,2013,10(7):2643-2669.

[10] Marshall B M, Levy S B. Food animals and antimicrobials:impacts on human health [J]. Clinical Microbiology Reviews,2011,24(4):718-733.

[11] Berghman L R, Abi-Ghanem D, Waghela S D, et al.Antibodies:an alternative for antibiotics[J]. Poultry Science,2005,84(4):660-666.

[12] Kim M, Higashiguchi S, Iwamoto Y, et al. Egg yolk antibody and its application[J].Biotechnology and Bioprocess Engineering,2000,5(2):79-83.

[13] Zhen Y, Jin L, Guo J, et al. Characterization of specific egg yolk immunoglobulin (IgY) against mastitis-causingEscherichiacoli[J].Veterinary Microbiology,2008,130(1/2):126-133.

[14] 農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局養(yǎng)殖課題組.我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治問(wèn)題研究[J].中國(guó)水產(chǎn),2006(4):12-13.

[15] Toranzo A E, Magarios B, Romalde J L. A review of the main bacterial fish diseases in mariculture systems[J].Aquaculture,2005,246(1/4):37-61.

[16] Newaj Fyzul A, Austin B. Probiotics, immunostimulants, plant products and oral vaccines, and their role as feed supplements in the control of bacterial fish diseases[J].Journal of Fish Diseases,2015,38(11):937-955.

[17] Toranzo A E, Romalde J L, Magarios B, et al. Present and future of aquaculture vaccines against fish bacterial diseases[J]. Options Méditerranéennes Série A Séminaires Méditerranéens,2009(86):155-176.

[18] 秦玉廣,陳秀麗,朱永安,等.細(xì)菌性魚(yú)病研究現(xiàn)狀與展望[J].井岡山大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2010,31(3):49-57.

[19] 肖婧凡,王玥,張?jiān)d,等.海水養(yǎng)殖細(xì)菌性病害檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)工程科學(xué),2014,16(9):10-15.

[20] Wu C J, Wang H, Chan Y L, et al. Passive immune-protection of small abalone againstVibrioalginolyticusinfection by anti-VibrioIgY-encapsulated feed[J].Fish & Shellfish Immunology,2011,3(4/5):1042-1048.

[21] 朱香萍, 張?jiān)偕? 劉宗柱. 對(duì)蝦鰻弧菌卵黃抗體(IgY)的制備及其對(duì)人工感染的保護(hù)研究[J].海洋科學(xué),2008,32(2):25-28.

[22] Lee S B, Mine Y, Stevenson R M W. Effects of hen egg yolk immunoglobulin in passive protection of rainbow trout againstYersiniaruckeri[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2000,48(1):110-115.

[23] Arasteh N, Aminirissehei A H, Yousif A N, et al. Passive immunization of rainbow trout (Oncorhynchusmykiss) with chicken egg yolk immunoglobulins (IgY)[J].Aquaculture,2004,231(1/4):23-36.

[24] 王斌,劉永波,劉雙鳳,等.雞抗遲緩愛(ài)德華氏菌卵黃抗體的應(yīng)用研究[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,21(3):203-206.

[25] Gutierrez M A, Miyazaki T, Hatta H, et al. Protective properties of egg yolk IgY containing anti-Edwardsiellatardaantibody against paracolo disease in the Japanese eel,AnguillajaponicaTemminck & Schlegel[J].Journal of Fish Diseases,2006,16(2):113-122.

[26] 莊政.嗜水氣單胞菌亞單位成分卵黃抗體在鰻鱺養(yǎng)殖中應(yīng)用[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué),2008.

[27] Li X, Shuai J, Fang W. Protection ofCarassiusauratusGibelio against infection byAeromonashydrophilausing specific immunoglobulins from hen egg yolk[J]. Journal of Zhejiang University Science B, 2006,7(11):922-928.

[28] 鄒棟良.致魚(yú)細(xì)菌性敗血癥嗜水氣單胞菌特異性卵黃抗體的制備及性能研究[D].大連：大連理工大學(xué),2010.

[29] 于生蘭,王帥兵,朱善元,等.嗜水氣單胞菌卵黃抗體的制備[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2011(12):119-122.

[30] Jin L, Li X, Zou D, et al. Protection of crucian carp (CarassiusauratusGibelio) against septicaemia caused byAeromonashydrophilausing specific egg yolk immunoglobulins[J]. Aquaculture Research, 2013,44(6):928-936.

[31] Gan H, He H, Sato A, et al. Ulcer disease prophylaxis in koi carp by bath immersion with chicken egg yolk containing anti-AeromonassalmonicidaIgY[J]. Research in Veterinary Science, 2015(99):82-86.

[32] 程娜.抗鰻利斯頓氏菌雞卵黃抗體對(duì)致病香魚(yú)保護(hù)作用的研究[D].寧波：寧波大學(xué),2014.

[33] Li C, Lu X, Li D, et al. Passive protective effect of chicken egg yolk immunoglobulins against experimentalVibrioanguillaruminfection in ayu (Plecoglossusaltivelis)[J].Fish & Shellfish Immunology,2014,37(1):108-114.

[34] 陳強(qiáng),周建武,饒平凡,等.卵黃抗體在防治中華鱉氣單胞菌病中的應(yīng)用[J].福州大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2001,29(5):115-118，126.

[35] 李肖梁,馬有智,方維煥.特異性卵黃抗體添加劑對(duì)中華鱉攝食和生長(zhǎng)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2006,30(3):425-428.

[36] 馬有智,盧媛媛,何琳,等.棘胸蛙嗜水氣單胞菌卵黃抗體的制備及其保護(hù)作用研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2013(9):142-143.

[37] 張曉君.魯氏耶爾森氏菌及魚(yú)類相應(yīng)感染癥(綜述)[J].河北科技師范學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2004,3(3):77-80.

[38] 王波,莫照蘭.遲緩愛(ài)德華氏菌及其致病機(jī)理[J].海洋科學(xué)集刊,2007(48):133-139.

[39] 張新中,張世秀,李海平,等.海水養(yǎng)殖動(dòng)物致病性(Pathogenicity)鰻弧菌(Vibroanguillarum)的研究綜述[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息,2007(1):16-19.

[40] Barnes A C, Guyot C, Hansen B G, et al. Antibody increases phagocytosis and killing ofLactococcusgarvieaeby rainbow trout (Oncorhynchusmykiss, L.) macrophages[J].Fish & Shellfish Immunology,2002,12(2):181-186.

[41] Zhen Y H, Jin L J, Guo J, et al. Characterization of specific egg yolk immunoglobulin (IgY) against mastitis[J].

Journal of Applied Microbiology,2008,105(5):1529-1535.

[42] Lu Y, Liu J, Jin L, et al. Passive protection of shrimp against white spot syndrome virus (WSSV) using specific antibody from egg yolk of chickens immunized with inactivated virus or a WSSV-DNA vaccine[J]. Fish & Shellfish Immunology,2008,25(5):604-610.

[43] 韋嵩,宋曉玲,李海兵,等.白斑綜合征病毒卵黃抗體對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫相關(guān)酶活力和抗病毒能力的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2009,33(1):112-118.

[44] 擺茹,王希良,周亞.DNA疫苗免疫原性的研究策略[J].免疫學(xué)雜志,2005,21(3):34-37.

[45] Fu L, Wang Y, Li J, et al. Protection ofFenneropenaeuschinensis(Osbeck, 1765) against the white spot syndrome virus using specific chicken egg yolk immunoglobulins by oral delivery[J].Aquaculture Research,2010,41(12):1806-1816.

[46] 趙海鵬,謝晶.生物保鮮劑在水產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用[J].吉林農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,34(4):60-64.

[47] Xu Y, Lin H, Sui J, et al. Effects of specific egg yolk antibody (IgY) on the quality and shelf life of refrigeratedParalichthysolivaceus[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,2012,92(6):1267-1272.

[48] Zhang Q, Lin H, Sui J, et al. Effects of Fab′fragments of specific egg yolk antibody (IgY-Fab′) againstShewanellaputrefacienson the preservation of refrigerated turbot [J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,2015,95 (1):136-140.

[49] 胥亞夫,林洪,張茜,等.冷藏牙鲆中主要腐敗菌卵黃抗體的抑菌性能[J].食品科學(xué),2010,31(23):109-113.

[50] 張茜,林洪,黨昕,等.腐敗希瓦氏菌卵黃抗體活性片段的制備及抑菌效果的分析[J].食品工業(yè)科技,2013(13):75-78.

[51] Lewis R J, Holmes M J. Origin and transfer of toxins involved in ciguatera[J].Comp Biochem Physiol C,1993,106(3):615-628.

[52] Hamilton B, Whittle N, Shaw G, et al. Human fatality associated with Pacific ciguatoxin contaminated fish[J].Toxicon,2010,56(5):668-673.

[53] 張彩霞,閆鴻鵬,鄭杰,等.雪卡毒素單克隆抗體的制備及鑒定[J].免疫學(xué)雜志,2011,27(10):890-893.

[54] Empey C C, Hokama Y, Yabusaki K, et al. Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of ciguatoxin in fish tissue using chicken immunoglobulin Y [J]. Journal of Clinical Laboratory Analysis, 2008,22(4):239-245.

[55] Young C A, Silversides F G, Jones S R M. Chicken-derived IgY recognizes developing and mature stages ofLomasalmonae(Microsporidia) in Pacific salmon,Oncorhynchusspp.[J].Aquaculture,2007,273(4):398-404.

[56] Kovacs-Nolan J, Mine Y. Using egg IgY antibodies for health, diagnostic and other industrial applications[J].Improving the Safety & Quality of Eggs & Egg Products Egg Safety & Nutritional Quality,2011(2):346-373.

[57] Xu Y, Li X, Jin L, et al. Application of chicken egg yolk immunoglobulins in the control of terrestrial and aquatic animal diseases:a review [J]. Biotechnology Advances, 2011,29(6):860-868.

ResearchAdvancesonEggYolkAntibodiesinPassiveProtectionofDiseasesinAquacultureandPreservationofFisheryProducts

JING Kailin1，XU Yongping1,2，LI Yuan1，YAO Ying1，WANG Lili1,2，ZHANG Meixia1，YIN Tinghui1，LI Xiaoyu1,2

( 1.College of Life Science and Technology, Dalian University of Technology，Dalian 116024，China；2. Center for Food Safety of Animal Origin，Ministry of Education，Dalian 116020, China )

egg yolk antibody; aquaculture; disease control; fishery product preservation; disease diagnosis

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.02.016

S942.5

C

1003-1111(2016)02-0185-06

2015-06-24；

2015-08-07.

國(guó)家海洋公益項(xiàng)目(201405003-3)；遼寧省農(nóng)業(yè)領(lǐng)域青年科技創(chuàng)新人才培養(yǎng)資助計(jì)劃項(xiàng)目(2014007).

靖凱霖(1990-)，男，碩士研究生；研究方向：特異性卵黃抗體替代抗生素防控水產(chǎn)動(dòng)物疾病.E-mail：jingkailin@163.com.通訊作者：李曉宇(1980-)，女，講師；研究方向：動(dòng)物源性食品安全保障技術(shù).E-mail：xiaoyuli@dlut.edu.cn.