葫蘆蘚的采集、觀察和保存

張濤

文件編號： 1003 - 7586（2016）11 - 0047 - 02

葫蘆蘚是苔蘚植物真蘚目葫蘆蘚屬中最常見的一種蘚類，其拉丁學名為Funaria hygrometrica Hedw.。植物體小而矮，只有1～3 cm，綠色，無光澤，稀疏或密集群生。它適宜生活在土質(zhì)肥沃或含氮元素較多背陰潮濕的地方，一般生長在庭院、田園、路旁，遍布于全國。植物體結構獨特，雌雄同體異枝，孢子體著生在配子體上，組織分化很不完善。葫蘆蘚是由水生向陸生過渡的代表植物之一，具有明顯的世代交替現(xiàn)象和特殊的繁殖方式，并在植物界的進化中占有重要地位，因而對葫蘆蘚的學習顯得尤為重要。以下是關于葫蘆蘚的采集、觀察和保存的簡要介紹。

1 采集

因葫蘆蘚生活史具有世代交替現(xiàn)象以及特殊的繁殖方式，所以在采集葫蘆蘚時一定要嚴格把握采集時期。

1.1 原絲體的采集

采集原絲體時，應在初春（我國北方3月中旬）時進行，留心察看庭院陰濕墻角、田圃背陰處等。待到中春（我國北方4月上旬）以后逐漸看到土表層發(fā)綠，就是原絲體。這時就可用采集鏟帶泥土鏟起一薄層，放入培養(yǎng)皿中。

1.2 配子體的采集

中春以后，隨著天氣逐漸變暖，原絲體生長很快，到4月中、下旬時原來發(fā)綠的土表層，綠色變得越來越厚，顏色更深一些，俯下身仔細察看就可發(fā)現(xiàn)植物體出現(xiàn)分枝，即是配子體植株。這時便可及時采集。

1.3 孢子體的采集

1.3.1 未成熟孢子體的采集

此類孢子體的采集一般在春末夏初時節(jié)進行為好，此時孢子體各部位已生長發(fā)育成形，完整孢蒴呈綠色，孢蒴里的孢子還未成熟。一般可以進行采集。

1.3.2 成熟孢子體的采集

采集成熟孢子體時，一般在夏末秋初季節(jié)，這時葫蘆蘚的孢子體大量成熟。完整葫蘆形的孢蒴飽滿，里面充滿了成熟的孢子，是采集成熟孢子體的最佳時期。此時，抓住有利時機便可采集。

以上采集葫蘆蘚時，無論哪個階段的類型一定要選取一些形態(tài)特征完整、生長健壯、個體大、姿態(tài)良好且各部位特征明顯的典型株體。此外，還要掌握好采集時機，過早采集的葫蘆蘚體形小或孢蒴形態(tài)不典型，過晚有些類型數(shù)量變少或蒴帽脫落，標本不完整，影響教學效果。而且采集時一定要把葫蘆蘚成片地帶泥掘起。

2 觀察

2.1 葫蘆蘚植物體（指配子體）外形的觀察

取采集好的葫蘆蘚配子體一小塊放入盛有清水的培養(yǎng)皿中，用軟毛刷子輕輕將它們所粘附的泥土在水中刷洗干凈，然后進行觀察。

2.1.1 根

無色透明，短而細，長約1 cm。在顯微鏡下可以看到只有單列細胞構成，因此它只有固著作用，無吸收水分和無機鹽的功能，是假根。

2.1.2 莖

莖細弱，其上生有葉，高約2 cm，單一或稀疏分支。莖分為雌雄枝，其頂端形成莖卵器和精子器。顯微鏡下觀察其構造分為三層組織，自外向內(nèi)依次是表皮、皮層和中軸。表皮、皮層基本是由薄壁細胞組成，中軸部分的細胞縱向延長，但沒有形成真正維管輸導組織。

2.1.3 葉

葉小而薄，多集生于莖的中上部而呈蓮座狀，長舌形，全緣，有時內(nèi)曲。無真正葉脈，葉片中間只有一條相當于葉脈的中肋，不到葉尖便消失。在顯微鏡下觀察整個葉片除中肋外只有一層薄壁細胞構成，細胞內(nèi)含有葉綠體。因此它能夠進行光合作用，又能吸收水分和溶解在水中的無機鹽。

2.2 葫蘆蘚配子體雌雄生殖器官的觀察

葫蘆蘚是雌雄同株的植物，但雌雄生殖器官分別生長在不同枝上，即是雌雄同株異枝。

2.2.1 精子器的觀察

葫蘆蘚的雄性生殖器官叫精子器。其精子器生長在枝端，從外形看，頂端葉形較大而且外張，像一朵小花，叫雄器苞。若欲觀察其內(nèi)部情況，可取精子器裝片，在顯微鏡下觀察，可見在雄器苞內(nèi)有許多棒狀的精子器，內(nèi)生諸多精子。

2.2.2 頸卵器的觀察

葫蘆蘚的雌性生殖器官是頸卵器，產(chǎn)生頸卵器的枝端像一個頂芽，是雌器苞。取頸卵器裝片，在顯微鏡下觀察，可見在雌器苞內(nèi)有多個頸卵器，頸卵器為瓶狀，頸部細，腹部膨大。腹部內(nèi)有一個卵細胞。精子和卵細胞結合后發(fā)育成胚，胚在頸卵器中發(fā)育。胚進一步發(fā)育，長出一個長柄叫蒴柄。葫蘆蘚雄器苞內(nèi)精子器中的精子成熟散發(fā)后，較長雄枝變萎縮，這時雄枝下面較短雌枝即轉成主枝。因不同卵細胞受精時間早晚不一樣，所以孢子體有不同發(fā)育階段的各個形態(tài)，取頸卵器內(nèi)有胚的裝片進行觀察，然后尋找有胚的頸卵器。

2.3 對孢子體的觀察

葫蘆蘚的孢子體著生在配子體上，它是由雌枝頸卵器內(nèi)卵細胞受精后發(fā)育成的胚進一步發(fā)育而來。它主要由蒴柄、孢蒴、蒴蓋、蒴帽等組成。蒴柄細長約4～5 cm，先端呈弧形彎曲，干燥時扭轉。孢蒴為葫蘆形，不對稱，多垂傾。蒴柄、孢蒴未成熟時均為綠色，成熟時蒴柄變成紅褐色，孢蒴變得飽滿呈黃綠色。蒴蓋微凸，覆孢蒴之上，位于孢蒴和蒴帽結合處。蒴帽呈兜形，有長喙。

2.4 對原絲體的觀察

葫蘆蘚的原絲體是配子體的雛形，其形體較小，呈綠色，覆蓋在土層表面。用解剖針從采集的原絲體中分離出一些特征明顯且健壯個體，洗干凈，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中，用擴大10倍的放大鏡觀察，可看到它由許多分枝交錯組成。

3 保存

3.1 浸制

因葫蘆蘚株體較小，極易用小玻璃瓶或小標本瓶等制作成浸制標本長久保存。取一些采集好的葫蘆蘚，小心、仔細地將它們所粘附的泥土在清水中洗干凈，切不可弄斷葫蘆蘚的某個部分，以保證所制作標本的完整性。

3.1.1 一般浸制

將洗干凈的葫蘆蘚不同時期不同類型標本分別放入10 mL（高約5.5 cm）的醫(yī)用注射小瓶內(nèi)，加入體積分數(shù)為5%的福爾馬林溶液，蓋上皮塞，貼上標簽，并用石蠟封口保存，但時間久了標本會褪色。

3.1.2 保色浸制

為了使葫蘆蘚標本色澤自然，形態(tài)逼真，永久保持綠色?？梢园严锤蓛舻暮J蘚標本，用飽和的硫酸銅溶液浸泡一晝夜，取出后再用清水洗凈，放入盛有體積分數(shù)為5%的福爾馬林溶液醫(yī)用10 mL（高約5.5 cm）注射小瓶中，蓋上皮塞，貼上標簽，用石蠟封口保存。

3.2 干制

根據(jù)葫蘆蘚植株株體較小，葉薄、根單、莖細，易干燥，一般不宜發(fā)霉腐爛等特點，可制成干制標本保存。

3.2.1 自然干制

把野外采集的帶泥土的葫蘆蘚標本，在培養(yǎng)皿內(nèi)于陰涼處自然風干（主要指有孢子體的植株）。

3.2.2 清洗干制

將采集的帶泥土的葫蘆蘚標本，用清水洗干凈后，放入培養(yǎng)皿中，在陰涼處自然風干。待觀察時放入清水中，浸泡幾分鐘，因吸脹作用，可使株體吸水膨脹恢復原形，用于教學。