呂玉霞 王萍 趙麗麗
【摘要】目的:研究蟲草素對果蠅壽命的影響,評價其抗衰老作用;方法:將300只剛羽化黑腹果蠅隨機分為五組,分別在添加了濃度為0、0.1、0.4、0.7、1.0 mg/kg蟲草素的基本培養(yǎng)基中培養(yǎng),每小時進行觀察統(tǒng)計,計算每組果蠅的半數死亡天數、平均壽命和平均最高壽命;結果:實驗三組(培養(yǎng)基中添加0.7mg/kg蟲草素)與對照組相比,蟲草素對雄性果蠅壽命延長作用非常顯著(P<0.01),對雌性果蠅壽命延長作用亦顯著(P<0.05);結論:說明蟲草素具有一定的延緩衰老的作用,是冬蟲夏草抗衰老的主要成分之一。
【關鍵詞】蟲草素;果蠅;壽命
【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2016)05-01290132-02
蟲草素是冬蟲夏草中的活性成分,大量文獻研究顯示它具有免疫調節(jié)、抗腫瘤、抗菌和抗病毒、抗白血病等作用,但對其抗衰老作用方面的研究較少[1]。
因此,本課題對蟲草素對黑腹果蠅(文中均簡稱果蠅)壽命的影響進行了研究,以期能夠在宏觀角度上證明蟲草素具有抗衰老作用,為進一步明確冬蟲夏草抗衰老作用的機制并更好地開發(fā)利用冬蟲夏草提供理論依據。
1 資料與方法
1.1 一般資料
1.1.1 儀器設備及物料
鑷子、剪刀等實驗耗材;175mL果蠅培養(yǎng)瓶;容量瓶;分析天平;玉米粉、紅糖、瓊脂、丙酸、酵母粉等果蠅基礎培養(yǎng)基成分。
1.1.2 研究對象
(1)果蠅 選取羽化時間在1h內的果蠅300只,其中雌雄各150只。
(2)蟲草素 純度≥95%的蟲草素。
1.2 方法
1.2.1 培養(yǎng)基的制備
按照水1000mL、玉米粉105g、紅糖75g、瓊脂7.5g、丙酸6.25ml、酵母粉20g的比例,并加入相應濃度的蟲草素,按照常規(guī)方法制備果蠅標準培養(yǎng)基。
1.2.2 果蠅的培養(yǎng)
將300只果蠅隨機分為五組,每組3瓶,每瓶雌雄各10只;五個組分別標記為對照組、實驗一組、實驗二組、實驗三組、實驗四組,并分別給予添加了濃度為0、0.1、0.4、0.7、1.0 mg/kg蟲草素的果蠅培養(yǎng)基,每瓶厚2.5cm;每2天更換1次培養(yǎng)基,且每次更換的培養(yǎng)基保證為同一批次配制。每小時定時觀察統(tǒng)計果蠅死亡數目,直至全部死亡。
統(tǒng)計每組果蠅的半數死亡天數、平均壽命和平均最高壽命三個指標,每組果蠅死亡天數的算術平均值為該組的平均壽命;每組果蠅中每瓶最高壽命的平均數為平均最高壽命。
1.3 統(tǒng)計學分析
數據用x±s表示,采用SPSS19.0軟件進行分析,組間對比用卡方檢驗,P<0.05表示有統(tǒng)計學顯著差異。
2 實驗結果
對照組雌雄果蠅的平均體重分別為831μg,632μg;半數死亡時間分別為496h,319h;平均壽命分別為514.72±8.97h,348.07±7.47h;平均最高壽命分別為556.84±7.65h,451.44±3.17h;而實驗一組的上述指標分別為820μg ,624μg ;400h,336 h; 494.88±9.54 h,351.84±8.85 h;568.96±3.57 h,464.32±3.54 h;實驗二組分別為816 μg,658 μg;416h,384h;545.52±8.12h,358.88±7.39h;565.32±4.66h,458.56±1.65h;實驗三組分別為837μg,639μg;512h,392h;617.84±10.01h *,366.56±6.82h **;563.76±1.68 h,463.84±5.61h;而實驗四組分別為829μg,625μg ;520h,384h;596.88±9.43h,352.72±7.04h;564.40±3.83h,450.64±6.44h。
其中,**表示雄性果蠅實驗三組與對照組相比壽命明顯延長,統(tǒng)計學差異顯著(P<0.01);*表示雄性果蠅實驗三組與對照組相比壽命延長,統(tǒng)計學檢驗差異顯著(P<0.05)。
由以上數據結果可知,實驗三組(培養(yǎng)基中添加0.7mg/kg蟲草素)與對照組相比,蟲草素對雄性果蠅壽命延長作用非常顯著(P<0.01),對雌性果蠅壽命延長作用亦顯著(P<0.05);因此,蟲草素具有延長果蠅壽命的作用,并且對雄果蠅的作用強于雌果蠅。
另外,從“平均壽命”這項指標來看,培養(yǎng)基中添加蟲草素的四組均比空白對照組高,也可以從側面說明蟲草素能夠延長果蠅的生存期。
3 結論
本實驗研究的結果表明,蟲草素能夠延長果蠅的壽命,且對雄果蠅的作用強于雌果蠅,一定程度上說明,蟲草素具有抗衰老作用。
4 討論
進行動物生存期實驗是判斷某種物質是否具有抗衰老作用的最簡單有效的方法,而果蠅是生物學等學科研究中的模式生物,生命周期短,且長期的研究已證實超過60%的人類疾病基因在果蠅的基因組中有直系同源物[2,3]。因此,以果蠅為樣本,能夠回答生命科學研究中最基本的生物學問題,本課題以果蠅為模式生物佐證蟲草素對人體抗衰老作用的影響,有一定的科學性,可作為對蟲草素進一步研究的理論及實驗基礎。
但本研究僅從“生存期”這一項宏觀指標進行了研究,為了取得更加充分的證據,本課題將進一步從分子生物學的角度進行研究,例如對比添加蟲草素培養(yǎng)的果蠅與空白組果蠅體內的超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量。從而進一步確證蟲草素的抗衰老作用,為研究冬蟲夏草提供理論依據。
參考文獻:
[1]李盡哲,黃雅琴,等.蟲草素對果蠅生長發(fā)育和壽命的影響[J].食用菌學報,2016, 23 (1): 10-11.
[2]劉帥,楊小蘭,張曉云.長山藥粗多糖對果蠅抗衰老作用的研究[J].食品工業(yè)科技,2013, 34(14):339-341.