黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的影響及其作用機(jī)制

張超賢，韓 宇，郭李柯

(1. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：1. 消化內(nèi)科；2. 口腔科，河南衛(wèi)輝 453100)

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◇中醫(yī)藥研究◇

黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的影響及其作用機(jī)制

張超賢1，韓 宇1，郭李柯2

(1. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：1. 消化內(nèi)科；2. 口腔科，河南衛(wèi)輝 453100)

目的 觀(guān)察黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的影響及其作用機(jī)制。方法 以人胃癌SGC7901細(xì)胞為研究對(duì)象，分別加入20 mL的培養(yǎng)液(對(duì)照組)或20 mL(50、100、150 mol/L)黃芩素溶液處理細(xì)胞48 h，細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)不同劑量黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移的影響，Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)黃芩素對(duì)細(xì)胞侵襲能力的改變；比色法檢測(cè)細(xì)胞胰蛋白酶活性，用Western blot方法檢測(cè)活化的蛋白酶激活受體-2(protease-activated receptor-2, PAR-2)蛋白表達(dá)水平，RT-PCR法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2, MMP-2)mRNA及基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9, MMP-9)mRNA水平。結(jié)果 與對(duì)照組比較，各治療組人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的能力、胰蛋白酶活性、活化的PAR-2、MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)水平均顯著下降(P<0.05)，呈劑量依賴(lài)性?；罨腜AR-2與MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.564，P<0.05；r=0.581，P<0.05)。結(jié)論 PAR-2活性、MMP-2及MMP-9 mRNA表達(dá)與胃癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，活化的PAR-2可通過(guò)上調(diào)MMP-2及MMP-9 mRNA的表達(dá)而參與癌細(xì)胞遷移及侵襲，黃芩素能顯著抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞的PAR-2活性和MMP-2及MMP-9 mRNA表達(dá)，從而降低癌細(xì)胞遷移及侵襲能力，這與其抑制胰蛋白酶活性有密切關(guān)系。

黃芩素；人胃癌SGC7901細(xì)胞；遷移及侵襲；胰蛋白酶活性；蛋白酶激活受體-2；基質(zhì)金屬蛋白酶-2；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

蛋白酶激活受體-2(protease-activated receptor-2, PAR-2)是一種細(xì)胞膜表面胰酶受體，廣泛分布于體內(nèi)多種器官和組織，可被體內(nèi)胰蛋白酶、類(lèi)胰蛋白酶、膜型絲氨酸蛋白酶-1和組織因子/活化凝血Ⅶ因子復(fù)合物(tissue factor/activated coagulation factor Ⅶ complex, TF/FⅦa)等內(nèi)源性激活劑激活，PAR-2被激活后可調(diào)控多種細(xì)胞因子、機(jī)體酶生長(zhǎng)因子的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，參與調(diào)控機(jī)體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡及腫瘤形成等多種生理和病理過(guò)程，與腫瘤關(guān)系密切[1-2]。國(guó)內(nèi)外研究表明，PAR-2在惡性腫瘤中呈現(xiàn)過(guò)度激活狀態(tài)，導(dǎo)致并調(diào)控惡性腫瘤患者基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2, MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9, MMP-9)等細(xì)胞因子過(guò)度和持續(xù)表達(dá)，從而參與了腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[3-4]。黃芩素(baicalein)是從唇形科植物黃芩的干燥根中提取的重要單體，是黃芩的主要有效成分之一，有較強(qiáng)的抗胰蛋白酶作用。國(guó)內(nèi)外研究顯示黃芩素可顯著抑制惡性腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移[5-6]，但這種作用是否與抑制胰蛋白酶和PAR-2活性及下游炎癥因子的表達(dá)有關(guān)尚不清楚。本研究以人胃癌SGC7901細(xì)胞為研究對(duì)象，體外研究黃芩素對(duì)細(xì)胞遷移及侵襲能力、胰蛋白酶活性、活化的PAR-2、MMP-2和MMP-9表達(dá)，初步探討黃芩素抗胃癌轉(zhuǎn)移的作用及其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 人胃癌SGC7901細(xì)胞系購(gòu)自中國(guó)生命科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)。細(xì)胞胰蛋白酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(上海銘博生物科技有限公司)；Transwell小室購(gòu)自BD公司，Trizol試劑(美國(guó)Invitrogen公司)；MMP-2、MMP-9及β-actin基因引物(上海生工生物工程公司)；RT-PCR(一步法)試劑盒(寶生物工程有限公司)；用于Western blot的PAR-2抗體(上海安妍生物有限公司)。7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(美國(guó)Life Technologies公司)，2720型PCR擴(kuò)增儀(美國(guó)Applied Biosystems公司)，5417R型冷凍離心機(jī)(法國(guó)Eppendorf公司)，Power Poc 型Western blot電泳儀(美國(guó)Bio-Rad公司)，DMI3000B型熒光顯微鏡(德國(guó)萊卡公司)。黃芩素(純度980 g/L)由陜西慈緣生物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)前，用1 g/L二甲基亞砜將黃芩素溶解成50、100、150 mol/L溶液備用。

1.2 細(xì)胞與培養(yǎng) 從液氮中取出人胃癌SGC7901細(xì)胞復(fù)蘇(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室提供)，用含100 mL/L FBS的DMEM培養(yǎng)基在37 ℃含50 mL/L CO2的孵箱中培養(yǎng)，隔天傳代1次，待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后用于實(shí)驗(yàn)。

1.3 細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力 以每孔5×105個(gè)細(xì)胞的密度接種于6孔培養(yǎng)板，待細(xì)胞貼壁后加入mytomycin C(S期細(xì)胞周期阻滯劑)預(yù)處理1 h，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。用10 μL移液槍頭在每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)劃一直線(xiàn)，PBS洗去劃下的細(xì)胞后分別加入20 mL DMEM培養(yǎng)液(對(duì)照組)和同體積(50、100、150 mol/L黃芩素溶液繼續(xù)培養(yǎng)。顯微鏡下對(duì)比0、24、48 h各組細(xì)胞劃痕的愈合情況，用Image-Pro PLus 6.0軟件計(jì)算分析。

1.4 Transwell侵襲試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力 將人胃癌SGC7901細(xì)胞均勻接種于鋪有基質(zhì)膠的24孔Transwell小室(上室)中，分別加入20 mL DMEM培養(yǎng)液(對(duì)照組)和同體積(50、100及150 mol/L黃芩素溶液培養(yǎng)，下室加入含200 g/L FBS的完全培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)24、48 h，用棉簽拭去小室內(nèi)底部細(xì)胞，40 g/L甲醛固定液固定小室外底部的細(xì)胞，結(jié)晶紫染色，顯微鏡下觀(guān)察各組細(xì)胞穿過(guò)小室基質(zhì)膠的情況，統(tǒng)計(jì)穿過(guò)的細(xì)胞數(shù)目，對(duì)比不同組間處理對(duì)SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響。

1.5 癌細(xì)胞胰蛋白酶活性的測(cè)定 細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)人胃癌SGC7901細(xì)胞密度1×105/mL，加入compound48/80至終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，37 ℃培養(yǎng)1 h，離心，取上清液備用，比色法測(cè)定胰蛋白酶活性。

1.6 Western blot法檢測(cè)活化PAR2蛋白表達(dá)水平 不同濃度黃芩素溶液或DMEM培養(yǎng)液作用48 h后去培養(yǎng)基，用冰PBS洗兩遍，加入細(xì)胞裂解液(50 mmol/L Tris-HCl pH 7.4，150 mmol/L NaCl，1 mmol/L PMSF，1 mmol/L EDTA，10 g/L Tritonn X-100，5 g/L deoxycholate，1 μg/mL leupeptin，2 mg/L aprotinin，1 mmol/L Na3VO4和1 g/L SDS)冰上30 min，抽提細(xì)胞總蛋白，取100 μg胞漿蛋白樣品于100 g/L SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，然后轉(zhuǎn)印至PVDF膜，用封閉液(50 g/L脫脂奶粉、0.5 g/L Tween-20TBS)封閉后，一抗1∶1 000，4 ℃過(guò)夜。二抗1∶2 000，室溫4 h，采用GAPDH作內(nèi)參，化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象于X光片。凝膠成像系統(tǒng)分析吸光度(A)比值。

1.7 RT-PCR檢測(cè)PAR2、MMP-2及MMP-9 mRNA表達(dá)水平 不同濃度組黃芩素溶液或DMEM培養(yǎng)液作用48 h后去培養(yǎng)基，加入1 mL/孔Trizol，室溫裂解10 min，加入0.2 mL三氯甲烷，劇烈顛倒混勻15 s。靜置10 min后4 ℃ 12 000 r/min，離心15 min，吸取上層水樣層加入0.5 mL異丙醇，顛倒混勻后，25 ℃放置10 min，4 ℃ 12 000 r/min/離心15 min，移去上清。750 mL/L乙醇1 mL沉淀RNA，4 ℃ 7 500 r/min離心5 min，在防止丟失RNA沉淀的前提下吸盡上清，靜置以揮發(fā)乙醇。DEPC水30 μL溶解RNA，用Trizol(Invitrogen公司)抽提RNA，RT-PCR半定量法檢測(cè)mRNA表達(dá)量：①PAR2 mRNA檢測(cè)。PAR2 mRNA上游引物序列：5′-CCCTTTGTATGTCGTGAAGCAGAC-3′；TNF-α下游引物序列：5′-TTCCTGGAGTGTTTCTTTGAGGTG-3′，產(chǎn)物長(zhǎng)度385 bp；設(shè)β-actin為內(nèi)參照，其上流引物序列：5′-TTGTAACCAACTGGGACGATATGG-3′，下游引物序列：5′-GATCTTGATCTTCATGGTGCTAGG-3′，產(chǎn)物長(zhǎng)度275 bp。反應(yīng)條件：50 ℃ 1 h，90 ℃ 5 min；94 ℃ 30 min，65 ℃ 30 min，68 ℃ 1 min 30個(gè)循環(huán)；65 ℃延伸2 min，4 ℃保存。20 g/L的瓊脂糖凝膠電泳，在凝膠成像系統(tǒng)中計(jì)算PAR2 mRNA與β-肌動(dòng)蛋白的電泳條帶的光密度比值。②MMP-2 mRNA檢測(cè)。MMP-2引物序列：上游5′-GTGCCCAAAGAAAGGTGCTG-3′，下游5′-AGGAGGGGAGCCATCCATAG-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度454 bp。內(nèi)參β-肌動(dòng)蛋白序列：上游5′-GTAAAGACCTCTATGCCATCA-3′，下游5′-GGACTCATGCTACTCCTGCT-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度227 bp。PCR條件：各擴(kuò)增管先置于55 ℃水浴逆轉(zhuǎn)錄40 min，然后直接置PCR擴(kuò)增儀94 ℃變性45 s，54 ℃退火45 s，72 ℃延伸60 s，共40個(gè)循環(huán)，再72 ℃延伸5 min，PCR產(chǎn)物在15 g/L瓊脂糖凝膠上電泳，在凝膠成像系統(tǒng)中計(jì)算MMP-2 mRNA與β-肌動(dòng)蛋白的吸光度比值。③MMP-9 mRNA檢測(cè)。MMP-9引物序列：上游5′-AACCAATCTCACCGACAG-3′，下游5′-AAAGGCGTCGTCAATCAC-3′。擴(kuò)增產(chǎn)物全長(zhǎng)316 bp，β-actin序列：上游5′-CAGCCTGTGCTGCTCACCGAGGCC-3′。下游5′-CCACACAGATGACTTGCGCTCAGG-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物全長(zhǎng)690 bp，擴(kuò)增條件為：預(yù)變性94 ℃ 4 min，循環(huán)，94 ℃變性60 s，58 ℃ 45 s，72 ℃ 45 s，共38個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸10 min，取10 μL PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，以DL2000作為分子量標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行12 g/L的瓊脂糖凝膠電泳(含0.5 mg/L EB)。電泳后進(jìn)行凝膠電泳圖像掃描分析。電泳結(jié)果以MMP-9 mRNA的表達(dá)相對(duì)量來(lái)表示，即MMP-9 mRNA/β-actin的比值來(lái)表示。

2 結(jié) 果

2.1 黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的影響 細(xì)胞劃痕試驗(yàn)結(jié)果顯示，與0 h對(duì)比，對(duì)照組細(xì)胞24 h遷移率為67.48%，50 mol/L黃芩素組為54.91%，100 mol/L黃芩素組為42.02%，150 mol/L黃芩素組為26.65%。處理48 h后，溶劑對(duì)照組細(xì)胞遷移率為85.32%，50 mol/L黃芩素組為69.23%，100 mol/L黃芩素組為54.51%，150 mol/L黃芩素組為38.47%，提示黃芩素明顯抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞的遷移，呈劑量依賴(lài)性(圖1)。

圖1 黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移的影響Fig.1 Effects of baicalein on migration of human gastric carcinoma SGC7901 cells

用Transwell侵襲試驗(yàn)檢測(cè)黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響，與對(duì)照組相比，黃芩素各組穿過(guò)小室的細(xì)胞數(shù)明顯減少(P<0.01)，提示黃芩素可降低人胃癌SGC7901細(xì)胞的侵襲能力，呈劑量依賴(lài)性(圖2)。

圖2 黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響Fig.2 Effects ofbaicalein on the invasion of human gastric carcinoma SGC7901 cells

2.2 黃芩素對(duì)人胃癌SGC7901胞胰蛋白酶活性、活化的PAR-2及PAR-2、MMP-2和MMP-9 mRNA的影響 與對(duì)照組比較，黃芩素各組胰蛋白酶活性、活化的PAR2、MMP-2 mRNA及MMP-7 mRNA表達(dá)水平均顯著下降(P<0.05)，呈劑量依賴(lài)性。胰蛋白酶活性與活化PAR2、PAR2與MMP-2 mRNA、PAR2與MMP-9 mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系(r1=0.564，P<0.05；r2=0.581，P<0.05；r2=0.601，P<0.05)。隨黃芩素濃度增大，組間PAR-2 mRNA有下降趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，表1、圖3～圖6)。

圖3 各組活化的PAR-2的表達(dá)Fig.3 Active PAR-2 expression in the 4 groups

圖4 各組PAR-2 mRNA的表達(dá)Fig.4 PAR-2 mRNA expression in the 4 groups

圖5 各組MMP-2 mRNA的表達(dá)Fig.5 MMP-2 mRNA expression in the 4 groups

圖6 各組MMP-9 mRNA的表達(dá)Fig.6 MMP-9 mRNA expression in the 4 groups

3 討 論

腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的腫瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞間相互作用的連續(xù)過(guò)程，涉及細(xì)胞間粘附、細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)降解、細(xì)胞遷移以及血管形成等步驟[7]。MMP-2和MMP-9是兩種重要的降解膠原纖維酶類(lèi)，他們通過(guò)對(duì)ECM的降解而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對(duì)周?chē)M織的浸潤(rùn)[8-10]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF是公認(rèn)的特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的強(qiáng)力促血管生成因子，其可以促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增生和分化成熟。因此，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要作用[11-13]。蛋白酶激活受體(protease-activated receptors, PARS)屬于G蛋白耦聯(lián)受體超家族成員之一，具有7個(gè)跨膜單位，目前已先后發(fā)現(xiàn)有PAR-1、PAR-2、PAR-3、PAR-4四種亞型，其中PAR-1、PAR-3和PAR-4都是凝血酶受體，PAR-2是胰酶受體。1994年首次在鼠DNA序列中發(fā)現(xiàn)了一種G蛋白耦聯(lián)受體的基因序列，命名為PAR-2。PAR-2由細(xì)胞外區(qū)(N末端和細(xì)胞外袢)、跨膜區(qū)(7個(gè)跨膜螺旋)及細(xì)胞內(nèi)區(qū)(細(xì)胞內(nèi)袢和C末端)組成。PAR-2廣泛分布于人體內(nèi)，可被體內(nèi)多種內(nèi)源性激活劑激活，如胰蛋白酶、類(lèi)胰蛋白酶、膜型絲氨酸蛋白酶-1、TF/FⅦa復(fù)合物等。PAR-2被激活后通過(guò)直接和間接方式產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)，包括炎癥反應(yīng)、擴(kuò)血管效應(yīng)、激發(fā)唾液分泌和胰腺分泌、特異性調(diào)節(jié)血管增生以及導(dǎo)致細(xì)胞的增殖和遷移等。在許多腫瘤中均可見(jiàn)到PAR-2的異常表達(dá)及活化并誘導(dǎo)MMP-2、MMP-9和VEGF等細(xì)胞因子大量表達(dá)，在惡性腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要的作用[14]。所以，在理論上通過(guò)抑制胰蛋白酶和PAR2活性、下調(diào)MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)是抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移一個(gè)重要途徑。

表1 各組胰蛋白酶活性、活化的PAR-2、MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)水平的比較Tab.1 Comparison oftypsin activity, active PAR-2, MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions among the 4 groups

本研究顯示，各組胰蛋白酶活性、PAR2活性與MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)呈同方向變化，且與癌細(xì)胞遷移及侵襲能力相平行，這驗(yàn)證了活化的PAR2可通過(guò)上調(diào)MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)來(lái)參與惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展。研究顯示人胃癌SGC7901細(xì)胞PAR2 mRNA在各組間表達(dá)差異不明顯，提示PAR2的活性并非完全由PAR2 mRNA表達(dá)所決定。PAR2 mRNA的表達(dá)從分子角度反映了基因的轉(zhuǎn)錄水平，轉(zhuǎn)錄水平越高，PAR2表達(dá)的數(shù)量越多，一定程度上就可提高PAR2的活性，但PAR2活性變化是受多因素影響的，在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，PAR2活性的增強(qiáng)主要是因?yàn)橐鹊鞍酌傅然罨蛩氐淖兓瘜?dǎo)致，而非PAR2 mRNA表達(dá)增多所致，所以抑制PAR2活性的有效手段是減少PAR2活化因素、阻斷PAR2活化途徑。黃芩素是黃芩的黃酮類(lèi)成分之一，具有較強(qiáng)的抗胰蛋白酶作用，而黃芩其他的6種黃酮類(lèi)成分抗胰蛋白酶作用弱，這可能與黃芩素結(jié)構(gòu)中黃酮骨架鄰接的羥基有關(guān)[15-16]。本研究顯示，各黃芩素組人胃癌SGC7901細(xì)胞遷移及侵襲的能力、PAR2、MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組顯著下降，且高濃度效果強(qiáng)于低濃度(P<0.05)，MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA表達(dá)與PAR2呈正相關(guān)(r均>0)，提示通過(guò)抑制胰蛋白酶活性來(lái)抑制PAR2活化，下調(diào)MMP-2 mRNA及MMP-9 mRNA等下游因子表達(dá)可能是黃芩素降低癌細(xì)胞遷移及侵襲能力的重要機(jī)制。

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(編輯 韓維棟)

Effects of baicalein on the migration and invasion of human gastric carcinoma SGC7901 cells and its mechanism

ZHANG Chao-xian1, HAN Yu1, GUO Li-ke2

(1. Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University, Weihui 453100; 2. Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University, Weihui 453100, China)

Objective To observe the effects of baicalein on the migration and invasion of human gastric carcinoma SGC7901 cells and its mechanism. Methods Human gastric carcinoma SGC7901 cells culturedinvitrowere respectively treated with 20 mL culture medium (control group), 50 mol/L baicalein, 100 mol/L baicalein, and 150 mol/L baicalein for 48 hours. Wound healing and Transwell assay were used to determine the inhibitory effects of baicalein on cell migration and invasion in human gastric carcinoma SGC7901 cells respectively. The typsin activity of cells was detected by photocolorimetric method, the protein expression of active protease-activated receptor-2 (PAR-2) was detemined by Western blotting; the matrix metalloproteinases-2 (MMP-2) mRNA, matrix metalloproteinases-9 (MMP-9) mRNA expressions were measured with RT-PCR. Results Compared with those in control group, the abilities of cells migration and invasion and the typsin activity, active PAR-2, MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions were dose-dependently decreased in three baicalein groups (P<0.01). There were obvious positive correlations among active PAR-2, MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions (r=0.564,P<0.05;r=0.681,P<0.05). Conclusion PAR-2 activity, MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions are closely correlated with the pathogenesis of gastric carcinoma. Active PAR-2 may play an important role in carcinoma cells migration and invasion via upregulating MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions. Baicalein can inhibit PAR-2 activity, MMP-2 mRNA and MMP-9 mRNA expressions obviously in human gastric carcinoma SGC7901 cells, thus decreasing the carcinoma cells migration and invasion, which is closely correlated to its inhibiting effects on typsin activity.

baicalein; human gastric carcinoma SGC7901 cell; migration and invasion; typsin activity; protease-activated receptor-2; matrix metalloproteinases-2; matrix metalloproteinases-9

2016-01-23

2016-06-29

河南省教育廳科研基金項(xiàng)目(No.20073200143)

Supported by the Scientific Research Foundation of Henan Provincial Education Department (No.20073200143)

張超賢. E-mail: nn21882001@aliyun.com

R735.2

A

10.7652/jdyxb201606024

優(yōu)先出版：http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1399.R.20161012.0952.006.html(2016-10-12)