性病門診235例患者生殖支原體感染分析

曾成龍，王勝春，趙小東，馬翠玲

性病門診235例患者生殖支原體感染分析

曾成龍，王勝春，趙小東，馬翠玲

曾成龍

目的研究分析我院皮膚性病門診患者生殖支原體（Mg）的感染情況。方法收集2015年2—10月就診于皮膚性病門診疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染的患者235例（男165例，女70例），采集男性尿道或女性宮頸分泌物分別進行超顯微鏡檢、淋球菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)、生殖道沙眼衣原體聚合酶鏈反應（PCR）檢測和生殖支原體實時熒光核酸恒溫擴增檢測技術（SAT）檢測。結果235例患者中各種微生物檢出情況分別為Mg 17例（7.23%），解脲脲原體（Uu）72例(30.64%)，人型支原體（Mh）22例（9.36%），生殖道沙眼衣原體（Ct）10例（4.26%），淋球菌6例（2.55%），上述檢測項目全部陰性122例（51.91%）。Mg陽性的17例患者中單一感染7例（41.18%），混合感染10例（58.82%），其中Mg+Uu感染6例，Mg+Uu+Mh感染4例。結論Mg可單一感染，也可混合感染，臨床上應加強對性病門診患者Mg的篩查。Mg生長條件要求高，培養(yǎng)成功率低，SAT檢測是目前可以選擇用來檢測Mg的方法之一。

生殖支原體，感染；性病門診；SAT檢測

1962年人類利用人工培養(yǎng)基分離支原體獲得成功后，從人體分離的支原體現(xiàn)已有20多種，主要有解脲脲原體（Uu）、人型支原體（Mh）、生殖支原體（Mycoplasma genitalium，Mg）、發(fā)酵支原體（Mf）、穿透支原體（Mpe）、梨支原體（Mpi）、肺炎支原體等[1]。Uu、Mh和Mg及肺炎支原體為臨床常見的人體致病支原體[2]。Mg是由Tully等于1981年從2例患有非淋菌性尿道炎(NGU)男性患者的泌尿生殖道中分離出、并命名，目前認為與NGU、前列腺炎、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎及不孕不育等疾病密切相關[3]，是性傳播疾病的病原體之一。

為研究皮膚性病門診患者Mg的感染情況，進一步提高臨床醫(yī)生對Mg的認識與重視，對2015年2—10月就診于我院皮膚性病門診疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染的235例患者，進行泌尿生殖道的微生物檢測，現(xiàn)報告如下。

1　資料與方法

1.1資料

1.1.1研究對象 本科2015年2—10月期間性病門診疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染患者共235例，其中男165例（70.21%），女70例（29.79%），年齡18～78歲，平均（35.02±10.79）歲。

1.1.2標本采集將無菌棉拭子放入男性尿道約2～4 cm，女性宮頸管內(nèi)1～2 cm進行取材。第1個棉拭子接種涂片，用于淋球菌檢測和顯微鏡鏡檢；第2個棉拭子立即接種，用于支原體培養(yǎng)；第3個棉拭子置于裝有1 ml生理鹽水的EP管洗脫，用于衣原體檢測；第4個棉拭子置于裝有樣本保存管洗脫，用于Mg檢測，標本處理后將EP管和樣本保存管置于-20℃冰箱保存。

1.2方法

淋球菌檢測（采用淋球菌培養(yǎng)法，24～48 h后形成小、凸起、光滑、圓形和無色的菌落，顯微鏡下見淋球菌呈革蘭陰性、成雙和腎形排列）；衣原體檢測[采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）檢測法，試劑盒由泰普生物工程有限公司提供]；支原體培養(yǎng)（采用支原體液體培養(yǎng)方法，法國Biomerieux'sa）；Mg檢測[采用實時熒光核酸恒溫擴增檢測技術（SAT）檢測，上海仁度生物科技有限公司]。嚴格按試劑盒說明書進行各項操作。

1.3統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行卡方檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

235例患者中Uu感染72例（30.64%），Mh感染22例(9.36%)，Mg17例（7.23%），Ct感染10例（4.26%），NG感染6例（2.55%），陰性122例（51.91%）。Mg不僅可單一感染，還可與其他病原體混合感染。Mg陽性的17例患者中單一感染7例（41.18%），混合感染10例（58.82%），其中Mg+Uu感染6例，Mg+Uu+Mh感染4例。

17例Mg陽性患者中有16例出現(xiàn)不同程度的臨床不適感，尿道口流分泌物4例（23.53%），尿道刺癢3例（17.65%），外陰瘙癢1例（5.88%），白帶增多4例（23.53%），且顯微鏡鏡檢中白細胞計數(shù)＞10個/HP。男性患者165例中陽性12例（7.27%），女性患者70例中陽性5例（7.14%），兩者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

3　討論

Mg作為醫(yī)學界分離到的第12種支原體，是一種介于細菌和病毒之間的微生物，在分類學上屬于柔膜綱支原體目。其主要特點是缺乏細胞壁，能獨立復制，它寄生于人和其他靈長類動物的泌尿生殖道、呼吸道和關節(jié)腔滑液中。大多數(shù)研究結果支持Mg是一種病原體而非共生菌，它不但可以引起非淋菌性尿道炎，在男性還可導致前列腺炎，進而影響性功能和生育；在女性可以引起宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎和盆腔炎，甚至導致不孕等[4]，其致病性可能與Mg黏附于上皮細胞有關。

Mg生長條件要求高且生長緩慢, 一般不采用經(jīng)典的培養(yǎng)法。1995年Mg基因序列測定完成，使得在分子水平研究致病性成為可能，核酸檢測被認為是檢測Mg的有效診斷方法[5]。SAT是將核酸恒溫擴增技術和實時熒光檢測技術相結合的一種新型核酸檢測技術，其原理是在同一溫度下，首先將提取的靶標核酸(RNA)通過M-MLV反轉錄酶產(chǎn)生一個雙鏈DNA拷貝，然后利用T7RNA多聚酶從該DNA拷貝上產(chǎn)生多個(100～1 000個)RNA拷貝，每一個RNA拷貝再從反轉錄開始進入下一個擴增循環(huán)；同時，帶有熒光標記的探針和這些RNA拷貝特異結合，產(chǎn)生熒光，該熒光信號可由熒光檢測儀實時捕獲，實時反映擴增循環(huán)情況[6]。該技術具有敏感性、特異性較高和反應穩(wěn)定等優(yōu)點[7]，是目前可以選擇用來檢測Mg的方法之一。

Mg明確為泌尿生殖系統(tǒng)感染的一種病原微生物，有研究者認為Mg感染和其他性傳播疾病一樣普遍，甚至比淋病更為常見[8]，但并不是臨床常規(guī)篩查檢測項目。本研究中，性病門診Mg感染率為7.23%，感染率和文獻[9,10]相近，低于Uu和Mh，卻高于Ct和NG。與這些常規(guī)性傳播疾病比較，可以看出Mg的感染臨床上同樣不容忽視，應該受到廣泛關注和重視。Mg感染患者可無癥狀[11]，本研究17例Mg感染患者中1例無癥狀，有16例出現(xiàn)不同程度的泌尿生殖道感染癥狀，男性多表現(xiàn)為NGU癥狀，女性多為宮頸炎。有文獻報道與Mg關系最為密切的疾病是男性的NGU和女性宮頸炎及盆腔炎[12]。17例Mg感染患者中有5例患者臨床癥狀反復出現(xiàn)，有文獻報道Mg與泌尿生殖道感染的出現(xiàn)、持續(xù)存在和復發(fā)密切相關[13]。Mg不僅可以單一感染，還可以與其他病原體混合感染。有文獻報道可并發(fā)感染淋菌性尿道炎、生殖道沙眼衣原體和陰道毛滴蟲感染等[14]。本組研究僅發(fā)現(xiàn)并發(fā)Uu和Mh的感染，有文獻報道Mg在高和低風險人群非常普遍[15]，提示在臨床工作中應重視Mg的全面檢查和診治，尤其在不安全性接觸的高危人群和其他泌尿生殖道病原體檢測結果為陰性的臨床不適患者，應加大其常規(guī)篩查力度[16]。

[1] 王明麗, 徐笑紅. 我國女性泌尿生殖道支原體感染現(xiàn)狀研究 [J]. 中國微生態(tài)學雜志, 2010, 22(11):1056.

[2] 黃英, 井曉瑩. 680例女性泌尿生殖支原體培養(yǎng)與藥敏結果分析 [J].檢驗醫(yī)學與臨床, 2013, 10(增刊):155-156.

[3] 蔣法興, 其木格, 蘇曉紅. 生殖支原體感染的研究進展 [J]. 中國皮膚性病學雜志, 2010, 24(9).859-861.

[4] 廖陽英, 居永芳, 吳偉, 等. 生殖支原體的研究進展 [J]. 中國麻風皮膚病雜志, 2006, 22(8):670-673.

[5] Plecko V, Zele Starcevic L, Tripkovic V, et al. Mycoplasma genitalium: Clinical Significance and Diagnosis [J]. Acta Dermatovenerol Croat, 2013, 21(4):236-240.

[6] 王永忠, 張宏宇, 劉小琴. 痰液標本結核分支桿菌RNA恒溫擴增檢測及臨床應用 [J]. 山東醫(yī)藥, 2011, 51(41):83-84.

[7] 張睿, 葉阿里, 孔令君, 等. 臨床患者三種性傳播疾病分子生物學檢測分析 [J]. 現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志, 2015, 30(3):107-108.

[8] Yu JT, Tang WY, Lau KH, et al. Asymptomatic urethral infection in male sexually transmitted disease clinic attendees [J]. Int J STD AIDS, 2008, 19(3):155-158.

[9] Jensen JS, Hansen HT, Lind K. Isolation of Mycoplasma genitalium strains from the male urethra [J]. J Clin Microbiol, 1996, 34(2):286-291.

[10] Wroblewski JK, Manhart LE, Dickey KA, et al. Comparison of transcription-mediated amplification and PCR assay results for various genital specimen types for detection of Mycoplasma genitalium [J]. J Clin Microbiol, 2006, 44(9):3306-3312.

[11] Takahashi S, Takeyama K, Miyamoto S, et al. Detection of Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, and Ureaplasma parvum DNAs in urine from asymptomatic healthy young Japanese men [J]. J Infect Chemother, 2006, 12(5):269-271.

[12] Taylor-Robinson D, Jensen JS. Mycoplasma genitalium: from Chrysalis to multicolored butterfly [J]. Clin Microbiol Rev, 2011, 24(3):498-514.

[13] 路麒, 趙玉敏, 楊安波, 等. 生殖支原體與復發(fā)性泌尿道及生殖道感染的調(diào)查 [J]. 中華醫(yī)院感染學雜志, 2011, 21(8):1708-1709.

[14] Sethi S, Singh G, Samanta P, et al. Mycoplasma genitalium: An emerging sexually transmitted pathogen[J]. Indian J Med Res, 2012, 136(6):942-955.

[15] McGowin CL, Anderson-Smits C. Mycoplasma genitalium: an emerging cause of sexually transmitted disease in women [J]. PLoS Pathog, 2011,7(5):e1001324.

[16] Daley G, Russell D, Tabrizi S, et al. Mycoplasma genitalium:a review [J]. Int J STD AIDS, 2014, 25(7):475-487.

（本文編輯耿建麗）

Mycoplasma genitalium infection analysis of 235 outpatients with STD

ZENG Cheng-long，WANG Sheng-chun，ZHAO Xiao-dong，et al
Department of Dermatology at Xijing Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China

ObjectiveTo analyze Mycoplasma genitalium(Mg) infection among patients

by the STD outpatient clinic of the authors’ department. MethodsTotal 235 patients (165 males and 70 females) with suspected genitourinary system infections visiting our STD clinic during February to October, 2015 were recruited in the study. Urethral discharge from the male and cervical secretion from the female were collected for microscopy, gonococci and mycoplasma culture, polymerase chain reaction (PCR) detection of Chlamydia and simultaneous amplification and testing (SAT) for Mg. ResultsAmong the 235 patients, infections had been detected included 17(7.23%) by Mg, 33(30.64%) by Ureaplasma urealyticum (Uu), 22(9.36%) by Mycoplasma hominis (Mh), 10(4.26%) by Chlamydial trachomatis (Ct) and 6(2.55%) by Neisseria gonorrhoeae (Ng), and 122(51.91%) were negative for all the above organisms. Among the 17 patients with Mg (+), 7(41.18%) were of simple infection, and other 10(58.82%) were coinfected with other organisms, of which 6 with Uu and 4 with Mh. ConclusionOur findings suggested that Mg infection can occur alone or in combination with other pathogens. Awareness of Mg screening among outpatients with STD should be enhanced. Mg is difficult to cultivate due to its demanding condition of growth, therefore, currently, SAT test serves as an effective and available test method for Mg.

Mycoplasma genitalium，Infection；STD outpatient；SAT test [J Pract Dermatol, 2016, 9(2):107-108]

R318.08

A

1674-1293(2016)02-0107-02

10.11786/sypfbxzz.1674-1293.20160208

710032 西安，第四軍醫(yī)大學西京皮膚醫(yī)院（曾成龍，王勝春，趙小東，馬翠玲）

曾成龍，在職研究生，主管技師

E-mail: zengchenglong_45@163.com

馬翠玲，E-mail: macuiling@fmmu.edu.cn

（2015-11-09

2015-12-28）