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    血清抗體與快速尿素酶檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌感染的靈敏度及特異性分析

    2016-12-06 07:20:11周小微李安全
    現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生 2016年22期
    關(guān)鍵詞:螺桿菌幽門(mén)靈敏度

    周小微,李安全

    (福建醫(yī)科大學(xué)附屬南平市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建南平353000)

    血清抗體與快速尿素酶檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌感染的靈敏度及特異性分析

    周小微,李安全

    (福建醫(yī)科大學(xué)附屬南平市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建南平353000)

    目的 比較血清抗體和快速尿素酶檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染的靈敏度及特異性。方法 選取2014年5月至2015年12月該院門(mén)診及住院患者100例,行胃鏡檢查時(shí)在內(nèi)鏡指導(dǎo)下活檢胃竇黏膜組織1塊立即進(jìn)行快速尿素酶檢查,隨后進(jìn)行血清抗體檢測(cè)。以病理組織學(xué)檢查結(jié)果陽(yáng)性作為對(duì)照,比較2種方法檢測(cè)Hp感染的靈敏度、特異性。結(jié)果 血清抗體檢查Hp陽(yáng)性率明顯高于快速尿素酶,血清抗體檢測(cè)Hp感染的靈敏度明顯高于快速尿素酶,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清抗體檢測(cè)Hp感染的特異性與快速尿素酶相當(dāng)。結(jié)論 血清抗體檢測(cè)Hp感染的靈敏度較高,特異性與快速尿素酶相當(dāng),是一種普查Hp感染的較理想的檢測(cè)方法,但快速尿素酶檢測(cè)費(fèi)用低、費(fèi)時(shí)少,適合經(jīng)濟(jì)水平低及門(mén)診患者的檢測(cè)。

    螺桿菌,幽門(mén); 抗體; 尿素酶; 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法

    幽門(mén)螺桿菌(helicobacter pylori,Hp)不僅是消化道潰瘍、慢性胃炎、胃癌、功能性腹痛等疾病的主要病因,還是胰腺癌、肝硬化,甚至肝癌等疾病的病因[1-2]。目前,診斷Hp感染的方法分為侵入性和非侵入性兩大類(lèi)。侵入性診斷方法主要是依賴(lài)胃鏡活組織檢查包括快速尿素酶試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)、組織學(xué)檢查、Hp基因檢測(cè)(如寡核苷酸探針雜交、聚合酶鏈反應(yīng))等。非侵入性檢測(cè)方法主要指不需要內(nèi)鏡檢查的方法包括13碳或14碳尿素呼氣試驗(yàn)、Hp抗體檢測(cè)、糞便Hp抗原檢測(cè)、尿液Hp抗體試驗(yàn)等。因此,如何簡(jiǎn)便、快速地檢出Hp感染非常重要。本研究將2種檢測(cè)Hp感染的方法進(jìn)行比較,旨在尋找一種操作簡(jiǎn)便、敏感的檢測(cè)Hp方法,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 資料

    1.1.1 一般資料 選取2014年5月至2015年12月本院門(mén)診及住院患者100例,其中男58例,女42例;年齡20~70歲,平均(54.2±14.2)歲。100例患者均于胃鏡檢查時(shí)鏡下活檢胃竇組織后進(jìn)行快速尿素酶檢測(cè),隨后進(jìn)行血清抗體檢測(cè)。

    1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) 有上腹痛、飽脹、反酸、噯氣、食欲減退等不同癥狀就診而行胃鏡檢查并經(jīng)病理檢查證實(shí)者。

    1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 1個(gè)月內(nèi)曾應(yīng)用質(zhì)子泵抑制劑、抗生素、鉍劑等治療者。

    1.2 方法

    1.2.1 快速尿素酶檢測(cè) 采用胃Hp檢測(cè)試劑盒(產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):YZB/閩0692-2011,生產(chǎn)企業(yè)許可證編號(hào):第20110191號(hào),醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào):準(zhǔn)字2011第2400096號(hào)),主要組成為底物微孔藥條、反應(yīng)液。主要成分為尿素、酚紅、純化水,規(guī)格為12孔/條,4條。取樣時(shí)盡可能避免酸堿類(lèi)物質(zhì)、重金屬鹽類(lèi)污染。操作方法:(1)取出底物微孔藥條,每孔加100 μL反應(yīng)液,充分溶解備用;(2)胃鏡檢查時(shí)活檢胃竇黏膜組織,立即放入尿素酶試劑中,10~30℃條件下反應(yīng)1.5 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判定:采用目測(cè)法。陽(yáng)性為黏膜樣品孔顏色呈紅色至紫紅色;陰性為黏膜樣品孔無(wú)色。

    1.2.2 血清抗體檢測(cè) 采用Hp免疫球蛋白G抗體試劑盒(產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):YZB國(guó)4915-2012,醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào):準(zhǔn)字2012第3401447號(hào))。主要成分為Hp抗體檢測(cè)試劑40人份、一次性塑料吸管。采集患者早晨空腹靜脈血2 mL,分離血清,盡量使用新鮮標(biāo)本,如未及時(shí)檢測(cè)置于2~8℃保存3 d。操作方法:(1)從原裝鋁箱中取出試劑;(2)將試劑置于干凈平臺(tái)上用塑料吸管吸取樣板,垂直滴注3滴(約100 μL)無(wú)空氣氣泡的血清于試劑的加樣孔內(nèi);(3)等待紅色條帶的出現(xiàn)。結(jié)果應(yīng)在10~20 min內(nèi)判讀。結(jié)果判定:陽(yáng)性為2條紅色條帶出現(xiàn);陰性為僅質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)1條紅色條帶。

    1.2.3 靈敏度、特異性判定標(biāo)準(zhǔn) 以病理組織學(xué)檢查結(jié)果陽(yáng)性作為對(duì)照,判定2種方法檢測(cè)Hp感染的靈敏度、特異性。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 2種方法檢測(cè)Hp陽(yáng)性率比較 血清抗體檢測(cè)Hp陽(yáng)性率[74.00%(74/100)]明顯高于快速尿素酶[42.00%(42/100)],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=26.69,P<0.05),見(jiàn)表1。

    表1 2種方法檢測(cè)Hp陽(yáng)性率比較

    2.2 2種方法檢測(cè)Hp感染的靈敏度及特異性比較血清抗體檢測(cè)Hp感染的靈敏度明顯高于快速尿素酶,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),特異性與快速尿素酶相當(dāng),

    見(jiàn)表2。

    表2 2種方法檢測(cè)Hp感染的靈敏度及特異性比較(n=100)

    3 討 論

    Hp是一種彎曲、螺旋形或S形革蘭陰性微需氧桿菌。Hp首先通過(guò)細(xì)菌膜表面尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨云在Hp周?chē)a(chǎn)生過(guò)氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶避免受中性粒細(xì)胞殺傷,這是Hp定植于胃、十二指腸的主要原因。Hp能產(chǎn)生炎性反應(yīng)繼而導(dǎo)致消化道腫瘤的發(fā)生。

    快速尿素酶檢測(cè)因試劑廉價(jià)、反應(yīng)迅速對(duì)胃鏡檢查常為首選方法。該法檢測(cè)影響因素較多:(1)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性強(qiáng)度與標(biāo)本中細(xì)菌密度呈正相關(guān),同時(shí)受Hp在胃“灶性分布”的影響[3-5],使其靈敏度低。(2)胃內(nèi)pH值及影響胃內(nèi)pH值的藥物可影響檢測(cè)結(jié)果。pH值為2.5~6.5時(shí)尿素酶主要維持Hp的代謝活動(dòng),在胃pH低的環(huán)境中尿素酶是維持Hp胞質(zhì)周?chē)鷓H穩(wěn)定的關(guān)鍵因子。pH值上升至4.0~5.5時(shí)尿素酶活力逐漸降低[6]。因此,質(zhì)子泵抑制藥物、胃酸缺乏、膽汁反流、嚴(yán)重萎縮性胃炎等疾病均可導(dǎo)致胃內(nèi)pH明顯上升,則均可出現(xiàn)假陽(yáng)性。(3)具有活性的尿素酶僅存在于黏液層,因此,黏液層厚度可影響檢查結(jié)果。尿素酶為蛋白質(zhì)分子,少量尿素酶一定時(shí)間內(nèi)可能不能產(chǎn)生肉眼能見(jiàn)的反應(yīng)。因此,也不可避免地出現(xiàn)假陰性。同時(shí)可產(chǎn)生尿素酶的常見(jiàn)細(xì)菌至少有20種以上[7],因此,也可能存在假陽(yáng)性。本研究結(jié)果顯示,快速尿素酶檢測(cè)Hp感染的靈敏度較低,與血清抗體比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但最近一種單克隆抗體的尿素酶試驗(yàn)?zāi)芘c特異性抗體識(shí)別并結(jié)合尿素酶,靈敏度得到了提高。

    Hp菌體表面存在的鞭毛及分泌的多種抗原組分均可激發(fā)宿主免疫應(yīng)答誘導(dǎo)抗體的產(chǎn)生,檢測(cè)血清中特異性抗體同樣可反映病原體感染情況。通過(guò)不同種類(lèi)的抗體能判定細(xì)菌類(lèi)型,進(jìn)而預(yù)測(cè)胃病嚴(yán)重程度,能更好地指導(dǎo)臨床治療。Hp感染數(shù)周后才產(chǎn)生特異抗體,同時(shí)細(xì)菌根除后抗體可維持半年以上[8]。因此,Hp抗體陽(yáng)性不能肯定患者有活動(dòng)性感染,陰性也不能排除初期感染。

    綜上所述,血清抗體檢測(cè)Hp感染的靈敏度高于快速尿素酶,但因存在假陽(yáng)性及假陰性,不適于臨床診斷,該項(xiàng)檢查只能用于流行病學(xué)篩檢??焖倌蛩孛笝z測(cè)Hp感染的靈敏度較低,可結(jié)合其他檢測(cè)方法,如13碳或14碳尿素呼氣試驗(yàn)檢測(cè)Hp感染。

    [1] 竇逾常,王江濱.胰腺癌患者幽門(mén)螺桿菌感染的檢測(cè)及臨床意義[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2008,34(2):317-319.

    [2] 徐美華,瞿秋,張桂英.初探幽門(mén)螺桿菌與肝硬化及肝硬化并肝癌的關(guān)系[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2007,32(5):917-920.

    [3] 蔡政杰.幽門(mén)螺旋桿菌感染與胃癌發(fā)病的相關(guān)性研究[J].吉林醫(yī)學(xué),2009,30(1):88-89.

    [4] 方瑞芳,林慶順,鄭楚濤.三種幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)方法比較[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2007,18(2):52.

    [5] 劉寅,孔憲忠,王振宇,等.兩種幽門(mén)螺桿菌尿素酶依賴(lài)性檢測(cè)方法比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2005,9(1):90-91.

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    10.3969/j.issn.1009-5519.2016.22.032

    B

    1009-5519(2016)22-3502-02

    2016-07-09)

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