丹參飲片產(chǎn)地加工工藝與質(zhì)量研究

謝 平， 俞磊明， 朱光明， 談景福， 張 朋， 李 琦

(上海市藥材有限公司，上海 200002)

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丹參飲片產(chǎn)地加工工藝與質(zhì)量研究

謝 平， 俞磊明， 朱光明， 談景福， 張 朋， 李 琦*

(上海市藥材有限公司，上海 200002)

[目的] 研究不同加工方法對(duì)丹參飲片質(zhì)量的影響，為改良丹參飲片產(chǎn)地加工工藝提供參考。[方法] 采用干切、浸潤(rùn)、水蒸氣悶潤(rùn)3種方法加工丹參飲片，通過(guò)飲片品相認(rèn)定并結(jié)合有效成分含量測(cè)定綜合評(píng)價(jià)丹參飲片質(zhì)量。[結(jié)果] 丹參干切片切制困難，表面色澤差，呈磚紅色，常出現(xiàn)開(kāi)裂、翹邊，片形不一致且成片率低；浸潤(rùn)所得丹參飲片表面顏色加深，切面平整、無(wú)裂縫、呈暗紅色，芯部呈紫黑色，片形不美觀，丹酚酸B、丹參酮 ⅡA含量均顯著降低；水蒸氣悶潤(rùn)所得丹參飲片表面顏色鮮亮、呈紫紅色，切面平整、光滑、無(wú)裂痕、呈淡黃色，質(zhì)硬，參味濃，片形美觀，成片率高，加工省時(shí)省力，且丹酚酸B與丹參酮 ⅡA含量無(wú)顯著變化。[結(jié)論] 從飲片品相、各活性成分含量、生產(chǎn)成本等方面綜合考慮，丹參飲片的產(chǎn)地加工方法應(yīng)以水蒸氣悶潤(rùn)軟化藥材為宜。

丹參飲片；產(chǎn)地加工；品相；丹參酮 ⅡA；丹酚酸B

丹參來(lái)源為唇形科植物丹參(SalviamiltorrhizaBge．)的干燥根及根莖，味苦，性微寒，歸心、肝經(jīng)，具有活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛、涼血消癰、除煩安神之功效[1]。近年來(lái)研究表明，丹參具有較強(qiáng)的抗氧化作用，是目前治療心血管疾病不可缺少的天然藥物[2]。丹參有效成分主要有兩大類(lèi)，一是丹參酮 Ⅰ、丹參酮 ⅡA、丹參酮 ⅡB、隱丹參酮等脂溶性的菲醌類(lèi)化合物；二是丹參素、原兒茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C等水溶性成分[3]。已有研究成果顯示，丹參所含的兩大類(lèi)活性物質(zhì)對(duì)加工條件的響應(yīng)有所不同。以丹酚酸B為代表的丹酚酸類(lèi)成分具有鄰苯二酚及Ar-CH=CH-COOR結(jié)構(gòu)，其酚羥基在高溫下極易氧化，溫度是影響該類(lèi)化合物的主要因素[4]；而以丹參酮 ⅡA為代表的丹參酮類(lèi)成分對(duì)光照條件比較敏感[5]，光照是影響該類(lèi)化合物的主要因素，長(zhǎng)時(shí)間在陽(yáng)光下暴曬，該類(lèi)成分極易損失，且飲片外觀顏色變暗。

山東臨沂地區(qū)自1971年引種丹參，現(xiàn)已發(fā)展成為山東丹參的重要產(chǎn)地和種苗輸出地，具備在產(chǎn)地加工成丹參飲片的客觀條件。丹參產(chǎn)地加工成飲片有減少藥效損失、節(jié)省能源、加快飲片上市時(shí)間等優(yōu)勢(shì)。但受傳統(tǒng)習(xí)慣的影響，現(xiàn)在丹參仍在秋冬季產(chǎn)地采收后曬干，后期再通過(guò)浸潤(rùn)軟化、切制、晾曬得丹參飲片。該生產(chǎn)工序下丹參水溶性成分流失嚴(yán)重，且飲片表面顏色發(fā)暗，品相差，商品價(jià)值不高。筆者對(duì)山東臨沂產(chǎn)丹參進(jìn)行產(chǎn)地調(diào)查，對(duì)產(chǎn)地加工飲片方法進(jìn)行試驗(yàn)，對(duì)飲片質(zhì)量進(jìn)行分析，并與按藥典法加工的飲片進(jìn)行比較，以期為丹參的加工炮制一體化研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試藥材。丹參藥材樣品產(chǎn)自上海華宇藥業(yè)有限公司山東臨沂藥源基地，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)王文全教授鑒定為唇形科鼠尾草屬植物丹參(S.miltiorrhiza)的根及根莖。

1.1.2 主要試劑。甲醇、磷酸均為色譜純，美國(guó)Fisher公司；水為娃哈哈純凈水；乙醇及其他試劑均為分析純，北京化工廠。丹參酮 ⅡA對(duì)照品與丹酚酸B對(duì)照品均購(gòu)自上海融禾醫(yī)藥科技有限公司，純度大于98%。

1.1.3 主要儀器。LC-2010AHT型高效液相色譜儀，日本島津公司；KQ500DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；FW100型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)，北京中興偉業(yè)儀器有限公司；BP211D型電子分析天平，德國(guó)Sartorius公司。

1.2 方法

1.2.1 樣品加工處理。樣品來(lái)源為同批次丹參藥材，選擇根條粗細(xì)一致的藥材作為供試材料。試驗(yàn)共設(shè)干切片、浸潤(rùn)、水蒸氣悶潤(rùn)3個(gè)處理(具體處理方法見(jiàn)表1)，每個(gè)加工處理重復(fù)3次。

1.2.2 對(duì)照品溶液的制備。分別精密稱(chēng)取丹酚酸B和丹參酮 ⅡA2種對(duì)照品，加甲醇配制成每1.0 mL含0.258 mg丹酚酸B、0.009 6 mg丹參酮 ⅡA的儲(chǔ)備液。精密吸取丹參酮 ⅡA儲(chǔ)備液2.5 mL至10 mL容量瓶中，加甲醇定容，配制成2.4×10-2mg/mL的丹參酮 ⅡA對(duì)照品溶液；丹酚酸B儲(chǔ)備液不予稀釋?zhuān)苯幼鳛閷?duì)照品溶液。將上述對(duì)照品溶液存放于4 ℃冰箱中備用。

表1 試驗(yàn)處理組及操作方法

1.2.3 供試品溶液的制備。精密稱(chēng)取丹參飲片粉末(過(guò)40目篩)約0.5 g，以75%乙醇為溶劑，固液比1∶200 g/mL的條件下，超聲提取10 min，制備供試品溶液。所制備的供試品溶液存放于4 ℃冰箱中備用。

1.2.4 含量測(cè)定。方法參考王文全教授課題組建立的高效液相色譜法(HPLC)同時(shí)測(cè)定丹參中丹酚酸B和丹參酮 ⅡA2種活性成分含量的方法[6]。具體色譜條件如下：Wondasil C18色譜柱(4.6 mm × 250 mm，5 μm)；流動(dòng)相:甲醇(A)- 0.01%磷酸水(B)；梯度洗脫(0～3 min，30%A；3～5 min，30%～40%A；5～13 min，40%A；13～20 min，40%～58%A；20～22 min，58%～75%A；22～24 min，75%A；24～50 min，75%～85%A)；流速1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)286 nm(丹酚酸B)和268 nm(丹參酮 ⅡA)；柱溫30 ℃；進(jìn)樣體積10 μL。

1.2.5 方法學(xué)考察。進(jìn)行精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性考察，并進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同加工方法對(duì)丹參飲片品相的影響 由表2可見(jiàn)，干切丹參飲片，切制困難，在切制過(guò)程中有大量白色碎渣掉落，表面色澤差，呈磚紅色，皮部組織大量剝離、脫落，切面呈白色，紋理較模糊，常有裂縫、翹邊，質(zhì)堅(jiān)實(shí)，片形不一致，成片率低，僅為80.90%。浸潤(rùn)后藥材易切片，成片率達(dá)到93.00%，但是飲片表面顏色加深，切面平整、無(wú)裂縫、呈暗紅色，芯部呈紫黑色，質(zhì)硬，片形不美觀。水蒸氣悶潤(rùn)后藥材易切片，飲片表面顏色鮮亮，呈紫紅色，切面平整、光滑、無(wú)裂痕、呈淡黃色，質(zhì)硬，參味濃，片形美觀，成片率最高，可達(dá)94.40%，且加工時(shí)間短。

表2 不同加工方法對(duì)丹參飲片品相的影響

注：同列不同小寫(xiě)字母表示處理間在0.05水平差異顯著。

Note： Different lowercases in the same column stand for significant difference at 0.05 level.

2.3.2 不同加工方法對(duì)丹參飲片有效成分含量的影響 由表3可見(jiàn)，不同加工方法對(duì)丹參飲片中2種活性成分的含量均有一定影響。浸潤(rùn)切制所得丹參飲片的丹酚酸B及丹參酮ⅡA含量均顯著低于干切片和水蒸氣悶潤(rùn)所得飲片，僅為6.40%和0.38%，干切片有效成分含量最高，分別為8.37%和0.48%，但是與水蒸氣悶潤(rùn)法所得飲片差異不顯著。

表3 不同加工方法對(duì)丹參飲片有效成分含量的影響(x±s，n=3)

Table 3 Effect of different processing methods on active ingredient content ofS.miltorrhizapieces

%

注：同列不同小寫(xiě)字母表示處理間在0.05水平差異顯著。

Note： Different lowercases in the same column stand for significant difference at 0.05 level.

2.3 方法學(xué)考察結(jié)果 精密度考察結(jié)果顯示，丹酚酸B、丹參酮 ⅡA含量的RSD分別為0.75%、2.10%，表明方法精密度良好。穩(wěn)定性考察結(jié)果表明，供試品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，丹酚酸B、丹參酮 ⅡA含量的RSD分別為0.45%、1.60%。重復(fù)性考察結(jié)果顯示，丹酚酸B、丹參酮 ⅡA含量的RSD分別為1.30%、2.40%。加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)得出，丹酚酸B回收率為97.89%，丹參酮 ⅡA回收率為102.06%，RSD分別為2.30%、3.10%。各項(xiàng)方法學(xué)考察結(jié)果證明，此方法準(zhǔn)確可靠，可以用于丹參中丹酚酸B、丹參酮 ⅡA這2種活性成分的檢測(cè)。

3 結(jié)論與討論

產(chǎn)地加工是藥材生產(chǎn)與品質(zhì)形成的重要環(huán)節(jié)，隨著丹參加工炮制一體化研究的推進(jìn)，產(chǎn)地加工過(guò)程顯得尤為關(guān)鍵。干切片可除去丹參藥材表面附著的一些雜質(zhì)，如泥土和大量的須根等，同時(shí)丹參藥材表皮粗糙多鱗片，易剝落[7]，造成干切片皮部組織大量剝離、脫落，而丹參酮 ⅡA主要分布于丹參皮部[7-9]，因此，干切片造成丹參酮 ⅡA部分流失。盡管有效成分檢測(cè)結(jié)果顯示，干切片的丹酚酸B及丹參酮 ⅡA含量仍高于其他2種加工方式，但是丹參干燥后質(zhì)地堅(jiān)硬，切制十分困難，所得片形大小、厚薄不一，切片凹凸不平、紋理模糊，成片率低，造成商品價(jià)值大幅下降，因此在生產(chǎn)中較少使用。

《中華人民共和國(guó)藥典》(一部)規(guī)定飲片的加工方法為“除去雜質(zhì)及殘莖，洗凈，潤(rùn)透，切厚片，干燥”。傳統(tǒng)丹參切制“七分潤(rùn)工，三分切工”，充分說(shuō)明了飲片加工中藥材軟化和切制的關(guān)系。浸潤(rùn)為實(shí)際生產(chǎn)中的常用方法，可以軟化藥材，降低切制難度，但是其弊端也很突出，即有效成分含量的下降，導(dǎo)致產(chǎn)品檢測(cè)不合格。浸潤(rùn)過(guò)程中藥材長(zhǎng)時(shí)間浸泡于水中(一般10 h左右)，使其水溶性成分從藥材中浸出，水顯紅棕色，從而造成以丹酚酸B為代表的水溶性有效成分含量的降低。有文獻(xiàn)報(bào)道，丹參加工過(guò)程中長(zhǎng)時(shí)間水處理會(huì)造成水溶性成分的大量流失[10-11]，印證了該試驗(yàn)的結(jié)果。同時(shí)大量用水導(dǎo)致藥材含水量上升，切制后2次晾曬時(shí)間延長(zhǎng)，受光照以及高溫影響，對(duì)光照條件敏感的丹參酮 ⅡA以及對(duì)溫度敏感的丹酚酸B含量進(jìn)一步下降。該方法加工的丹參飲片有效成分大量流失，外觀質(zhì)量不穩(wěn)定，且易霉變，切制后損耗大，后續(xù)干燥能耗高，不符合中藥現(xiàn)代化發(fā)展的要求。

水蒸氣悶潤(rùn)技術(shù)可以快速軟化藥材，真正做到“藥透水盡”，且操作自動(dòng)化，生產(chǎn)效率高。藥材含水率低，水分易控制，有效避免了以丹酚酸B為代表的丹參水溶性有效成分的經(jīng)水流失。同時(shí)，由于含水量低，縮短飲片切制后晾曬時(shí)間，使光照對(duì)丹參酮 ⅡA的含量造成的損失大幅減少。與常規(guī)浸潤(rùn)的藥材相比，水蒸氣悶潤(rùn)軟化后的藥材切制飲片片形美觀、平整、光滑、無(wú)裂痕，有效成分損失少。因此，采用水蒸氣悶潤(rùn)軟化藥材，改善了飲片質(zhì)量，提高了飲片的有效成分含量；同時(shí)，縮短了丹參產(chǎn)地加工時(shí)間，降低了能耗，提高了生產(chǎn)效率，是一項(xiàng)值得推廣的中藥材產(chǎn)地加工技術(shù)。

以丹參酮 ⅡA、丹酚酸B的含量為成分指標(biāo)，以表皮顏色、切面平整度、片形美觀度、成片率等外觀特征為品相指標(biāo)，結(jié)合藥材產(chǎn)地加工一體化、藥效損失、節(jié)約生產(chǎn)成本及能耗、加快飲片上市時(shí)間等諸多因素考慮，丹參飲片水蒸氣悶潤(rùn)工藝具有良好的規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化前景。

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Research of the Technology and Quality in Original Processing ofSalviamiltorrhizaPieces

XIE Ping, YU Lei-ming, ZHU Guang-ming, LI Qi*et al

(Shanghai Traditional Chinese Medicine Co.Ltd., Shanghai 200002)

[Objective] Effects of different processing methods on the quality ofS.miltorrhizapieces were researched, in order to provide a reference for the improvement of technology in original processing ofS.miltorrhizapieces. [Method] By using methods of dry cutting, infiltrating to cut and steam moistening to cut,S.miltorrhizapieces were processed, through product phase identification and effective ingredients content determination, quality ofS.miltorrhizapieces were evaluated comprehensively. [Result] The dry sections were difficult to cut, the surface color was brick red, often cracking, piece shape inconsistent and low pieces rate. Infiltration resulting pieces surface color deepened, although smooth to cut, no crack, purplish-black core, slice-shaped unsightly, salvianolic acid B and tanshinone ⅡAreduced significantly. Pieces stuffy by steam surface moist bright color, purple, smooth to cut, no cracks, pale yellow, sheet-shaped appearance, into a high piece rate, and saving time and effort in processing, while salvianolic acid B and tanshinone ⅡAshowed no significant change. [Conclusion] Considering the product phase, the content of active ingredients and processing cost etc., stuffy by steam to soften herbs is the most suitable original processing method.

S.miltorrhizapieces; Original processing; Product phase; Tanshinone ⅡA; Salvianolic acid B

謝平(1989- )，男，浙江平湖人，碩士，從事丹參規(guī)范化種植及生產(chǎn)技術(shù)研究。*通訊作者，高級(jí)工程師，從事中藥生產(chǎn)及質(zhì)量控制研究。

2016-07-25

S 567.5+3

A

0517-6611(2016)29-0084-03