低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能、脛骨發(fā)育、免疫性能及抗氧化能力的影響

鄭惠文 王寶維 葛文華 張名愛(ài) 岳 斌 張澤南 張洋洋 任 民

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營(yíng)養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109)

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低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能、脛骨發(fā)育、免疫性能及抗氧化能力的影響

鄭惠文 王寶維*葛文華 張名愛(ài) 岳 斌 張澤南 張洋洋 任 民

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營(yíng)養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109)

本試驗(yàn)旨在研究低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能、脛骨發(fā)育、免疫性能及抗氧化能力的影響，探索飼糧添加植酸酶能否提高鋅生物學(xué)效價(jià)和有效降低鋅的添加水平。選用1日齡五龍鵝360只，隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只鵝(公母各占1/2)。Ⅰ組為正對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，添加80 mg/kg硫酸鋅，未添加植酸酶；Ⅱ組為負(fù)對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，添加1 200 U/kg植酸酶，未添加鋅；Ⅲ～Ⅵ組在負(fù)對(duì)照組的基礎(chǔ)上分別添加16、32、48、64 mg/kg硫酸鋅。試驗(yàn)期28 d。結(jié)果表明：1)通過(guò)二次曲線擬合分析，在飼糧添加1 200 U/kg植酸酶的條件下，飼糧鋅添加水平為34.00～44.70 mg/kg時(shí)可獲得最佳平均日增重與料重比。2)Ⅳ、Ⅴ組的骨密度(BMD)顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ、Ⅴ組的骨礦含量(BMC)和血清堿性磷酸酶(AKP)活性顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)。通過(guò)二次曲線擬合分析，飼糧鋅添加水平為51.38 mg/kg時(shí)，血清AKP活性最大。3)Ⅳ組的血清和肝臟總抗氧化能力(T-AOC)顯著高于Ⅱ組(P<0.05)，與Ⅰ組差異不顯著(P>0.05)。通過(guò)二次曲線擬合分析，飼糧鋅添加水平分別為50.24和47.49 mg/kg時(shí)，血清和肝臟的T-AOC最大。4)Ⅲ～Ⅵ組的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)均顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)；Ⅳ～Ⅵ組免疫前后的血清新城疫抗體水平均顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)。由此可見(jiàn)，飼糧中添加植酸酶可以提高1～4周齡五龍鵝的生長(zhǎng)性能，促進(jìn)脛骨發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力和免疫性能，有效提高鋅利用率，降低飼糧中鋅添加水平，增加鋅的生物學(xué)效價(jià)。在飼糧添加1 200 U/kg植酸酶的條件下，鋅適宜添加水平為44.70～51.38 mg/kg。

鋅；植酸酶；鵝；生長(zhǎng)發(fā)育；脛骨發(fā)育；抗氧化能力；免疫

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇1日齡體況相近的五龍鵝360只，隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只鵝，公母各占1/2。Ⅰ組為正對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，添加80 mg/kg硫酸鋅，未添加植酸酶；Ⅱ組為負(fù)對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，添加1 200 U/kg植酸酶，未添加鋅；Ⅲ～Ⅵ組在負(fù)對(duì)照組的基礎(chǔ)上分別添加16、32、48、64 mg/kg硫酸鋅。本試驗(yàn)鋅源購(gòu)自浙江新維普添加劑有限公司，植酸酶購(gòu)自江蘇遠(yuǎn)方中匯生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)用飼糧以玉米和豆粕為主要原料，參照NRC(1994)家禽營(yíng)養(yǎng)需要量中推薦的鵝飼糧營(yíng)養(yǎng)水平設(shè)計(jì)配方。試驗(yàn)期28 d。基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1?；A(chǔ)飼糧中鋅含量采用等離子體發(fā)射光譜儀測(cè)得。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)鵝舍及器具進(jìn)行沖洗和高錳酸鉀噴霧消毒，然后用福爾馬林和高錳酸鉀熏蒸，密閉門窗24 h。1周后開(kāi)始試驗(yàn)。試驗(yàn)采用網(wǎng)上散養(yǎng)方式，全期自由采食，自由飲水，試驗(yàn)期內(nèi)定期消毒，嚴(yán)格控制溫濕度和光照，1～3日齡皮下注射小鵝瘟、鵝副黏病毒二聯(lián)滅活疫苗；10日齡皮下注射新城疫H5N1疫苗；20日胸部肌肉注射新城疫油苗。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)多維和微量元素為每千克飼糧提供 The multi-vitamin and trace elements provided the following per kg of the diet:VD3200 IU，VA 1 500 mg，VE 12.5 mg，VK 31.5 mg，VB12.2 mg，VB25.0 mg，煙酸 nicotinic acid 65 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，VB62 mg，生物素 biotin 0.2 mg，葉酸 folic acid 0.5 mg，膽堿 choline 1 000 mg，F(xiàn)e 85 mg，Mn 80 mg，Cu 20 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg。

2)粗纖維、鋅為實(shí)測(cè)值，其余營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。CF and Zn were tested values, while the others were calculated values.

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

在1日齡時(shí)對(duì)試驗(yàn)鵝苗進(jìn)行稱重，第4周齡末，以重復(fù)為單位分別進(jìn)行空腹稱重，計(jì)算1～4周齡的平均日增重(ADG)；統(tǒng)計(jì)每日耗料量，計(jì)算平均日采食量(ADFI)。每天記錄各組死淘情況，計(jì)算料重比(F/G)和死淘率[11]。

1.4.2 脛骨發(fā)育

在第4周齡末屠宰后，取鵝右側(cè)脛骨(每重復(fù)1只，共36只)，采用數(shù)字閃爍式錐形掃描骨密度儀(osteocoer 3)測(cè)定骨密度(bone mineral density，BMD)，計(jì)算骨礦含量(bone mineral content，BMC)，然后105 ℃烘干后稱重脛骨重量，再依據(jù)GB/T 6438—1992、原子分光光度分和鉬黃比色法分別測(cè)定脛骨中骨灰分及鈣(Ca)、磷(P)含量。AKP活性由相應(yīng)試劑盒測(cè)得，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.4.3 抗氧化指標(biāo)

第4周齡末屠宰時(shí)，采集鵝的血清和肝臟(每重復(fù)2只，共72只)?？偪寡趸芰?T-AOC)采用比色法測(cè)定，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性采用比色法測(cè)定，銅鋅超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)活性采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定，丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)定，上述指標(biāo)均用試劑盒測(cè)定，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 免疫性能

免疫器官指數(shù)的測(cè)定：在第4周齡末進(jìn)行屠宰試驗(yàn)時(shí)，摘取鵝的免疫器官(胸腺、脾臟、法氏囊)，并剔除附著的組織，用濾紙吸干多余水分后準(zhǔn)確稱其重量。

免疫器官指數(shù)(mg/g)=免疫器官

鮮重(mg)/活體重(g)。

新城疫抗體效價(jià)的測(cè)定：鵝苗于注射新城疫疫苗前，分別從每組中抽取6只體重相近的鵝，進(jìn)行靜脈采血，并作標(biāo)記；注射新城疫疫苗后，分別于注射后第7、14天再次對(duì)標(biāo)記鵝進(jìn)行靜脈采血，血樣作不抗凝處理，3 000 r/min離心10 min后吸取血清，用于測(cè)定新城疫抗體效價(jià)?？贵w效價(jià)的測(cè)定根據(jù)病毒的血凝和血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行。血清效價(jià)為以100%抑制凝集的血清最大稀釋度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 19.0軟件中單因素方差分析(one-way ANOVA)中的LSD法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P<0.05和P<0.01分別為差異顯著和極顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，Ⅳ、Ⅴ組的體重和平均日增重均極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.01)，Ⅳ組的平均日采食量極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.01)，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組的料重比極顯著低于Ⅰ組(P<0.05)，各組死淘率差異不顯著(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，飼糧添加植酸酶可顯著提高1～4周齡鵝的生長(zhǎng)性能，且在加酶條件下平均日增重和料重比與飼糧鋅添加水平有相關(guān)性。對(duì)Ⅱ～Ⅵ組平均日增重(Y1)和料重比(Y2)分別與飼糧鋅添加水平(X)進(jìn)行二次曲線擬合，建立回歸方程如下：

Y1=-0.003X2+0.204X+40.538

(R2=0.915，PQ=0.000)；

Y2=2.410-0.007X+(7.813E-5)X2

(R2=0.817，PQ=0.000)。

由上述回歸方程得出，飼糧中鋅添加水平為34.00 mg/kg時(shí)平均日增重最大，飼糧中鋅添加水平為44.70 mg/kg時(shí)料重比最低。從綜合效益角度分析，1～4周齡鵝飼糧中植酸酶添加水平為1 200 U/kg條件下，獲得最佳生長(zhǎng)性能的飼糧鋅添加水平為34.00～44.70 mg/kg。

2.2 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝脛骨發(fā)育的影響

由表3可以看出，Ⅳ、Ⅴ組的骨密度顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ、Ⅴ組的骨礦含量顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)；Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組的AKP活性顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)；各組骨灰分含量差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ、Ⅵ組Ca含量顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組P含量顯著高于Ⅱ組(P<0.05)。

對(duì)Ⅱ～Ⅵ組的骨密度和血清AKP活性分別進(jìn)行二次曲線擬合，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，骨密度與飼糧鋅添加水平的曲線關(guān)系不顯著(R2<0.700)，血清AKP活性(Y3)與飼糧鋅添加水平(X)的回歸方程如下：

Y3=-0.004X2+0.411X+90.545

(R2=0.911，PQ=0.000)。

由上述回歸方程得出，當(dāng)飼糧鋅添加水平為51.38 mg/kg時(shí)，血清AKP活性最大，即成骨細(xì)胞的活動(dòng)越強(qiáng)。

表2 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同小寫(xiě)字母或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)，相鄰小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，相間小寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。表3、表5、表6、表7同。

In the same column, values with the same small or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as Table 3, Table 5, Table 6 and Table 7.

表3 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝脛骨發(fā)育的影響

由表4可以看出，骨密度、鈣含量與血清AKP活性呈極顯著正相關(guān)(P<0.01)，血清磷含量與血清AKP活性呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。

以上結(jié)果表明，飼糧添加植酸酶與鋅協(xié)同，能通過(guò)提高血清AKP的活性，增加骨密度，促進(jìn)骨中鈣、磷鈣的沉積，從而促進(jìn)脛骨的發(fā)育。

2.3 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝抗氧化能力的影響

由表5可以看出，血清中，Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ組的T-AOC顯著高于Ⅱ組(P<0.05)，與Ⅰ組差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ、Ⅳ組Cu-Zn SOD活性顯著高于Ⅱ組(P<0.05)，Ⅴ、Ⅵ組極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)；各組MDA含量差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ～Ⅵ組GSH-Px活性極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.01)。

肝臟中，Ⅴ、Ⅵ組的T-AOC顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)；Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組的Cu-Zn SOD、GSH-Px活性及MDA含量均顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)。

Ⅱ～Ⅵ組的血清和肝臟抗氧化指標(biāo)均隨著飼糧鋅添加水平的升高有提高趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)Ⅱ～Ⅵ組的曲線擬合分析可得，血清T-AOC(Y4)和肝臟T-AOC(Y5)與飼糧鋅添加水平(X)呈二次曲線關(guān)系，建立回歸方程如下：

Y4=12.179+0.042X-(4.18E-4)X2

(R2=0.702，PQ=0.001)；

Y5=0.853+0.017X-(1.79E-4)X2

(R2=0.748，PQ=0.000)。

由上述回歸方程得出，當(dāng)飼糧鋅添加水平為50.24 mg/kg時(shí)，血清T-AOC最高；當(dāng)飼糧鋅添加水平為47.49 mg/kg時(shí)，肝臟T-AOC最高。以上結(jié)果表明，低鋅飼糧添加植酸酶能夠提高鵝血清和肝臟的抗氧化能力。

表4 血清堿性磷酸酶活性與脛骨指標(biāo)的相關(guān)性分析

*表示顯著相關(guān)(P<0.05)，**表示極顯著相關(guān)(P<0.01)。

* mean significant correlation (P<0.05)， ** mean extremely significant correlation (P<0.05).

表5 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝抗氧化能力的影響

2.4 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝免疫性能的影響

由表6可以看出，Ⅲ～Ⅵ組的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)均顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)；各組脾臟指數(shù)差異不顯著(P>0.05)。

由表7可以看出，免疫前后，Ⅳ～Ⅵ組的血清新城疫抗體水平均顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)，且Ⅱ～Ⅴ組隨著飼糧鋅添加水平的增加，血清抗體水平呈上升趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)Ⅱ～Ⅵ抗體水平的二次曲線擬合分析，免疫第14天后的血清抗體水平(Y6)與飼糧鋅添加水平(X)呈二次線性關(guān)系，建立回歸方程如下：

Y6=6.365+0.045X-(4.53E-4)X2

(R2=0.882，PQ=0.000)。

由上述回歸方程得出，當(dāng)飼糧鋅添加水平為49.67 mg/kg時(shí)，血清抗體水平最高。以上結(jié)果表明，飼糧添加植酸酶與鋅協(xié)同能夠提高鵝免疫性能，且當(dāng)飼糧鋅添加水平為49.67 mg/kg時(shí)，免疫第14天后能獲得最佳血清抗體水平。

表6 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝免疫器官指數(shù)的影響

表7 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝血清抗體水平的影響

3 討 論

3.1 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能的影響

動(dòng)物的生長(zhǎng)性能是反映動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的指標(biāo)，幼齡動(dòng)物是生長(zhǎng)力最旺盛的時(shí)期，其生長(zhǎng)性能高低將直接影響其進(jìn)入育成期的生長(zhǎng)發(fā)育好壞。鋅和植酸酶均能對(duì)育雛期動(dòng)物的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生有利的影響。蘇麗娜等[12]研究了鋅對(duì)蛋雛鴨生長(zhǎng)性能的影響，發(fā)現(xiàn)飼糧鋅添加水平的提高能促進(jìn)蛋雛鴨生長(zhǎng)性能，并確定蛋雛鴨飼糧適宜鋅添加水平為51.8 mg/kg；Attia等[13]發(fā)現(xiàn)，在雛雞飼糧中添加500 U/kg微生物來(lái)源植酸酶極顯著提高了雛雞的生長(zhǎng)性能；Józefiak等[14]研究了復(fù)合糖酶與植酸酶對(duì)育雛雞生長(zhǎng)性能的影響，發(fā)現(xiàn)加酶組料重比由1.90降至1.84。本試驗(yàn)的研究結(jié)果表明，加酶的Ⅲ～Ⅵ組料重比低于不加酶的Ⅰ組，平均日增重高于Ⅰ組；Ⅱ組的生長(zhǎng)性能顯著低于其他各組，是由于Ⅱ組飼糧中的鋅水平不能滿足鵝需要量，鵝群普遍出現(xiàn)缺鋅癥狀。為了探討添加植酸酶時(shí)鋅適宜添加水平，對(duì)料重比和平均日增重分別進(jìn)行二次曲線擬合，結(jié)果顯示鋅的添加水平應(yīng)控制在34.00～44.70 mg/kg。由此證明飼糧添加植酸酶能有效降低鋅的添加水平。

3.2 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝脛骨發(fā)育的影響

鋅和植酸酶對(duì)動(dòng)物骨骼的發(fā)育均有影響，其作用機(jī)制主要與影響AKP的活性以及影響鈣、磷代謝有關(guān)。AKP是一種催化磷酸單酯水解釋放無(wú)機(jī)磷的酶類，是反映骨骼代謝和成骨細(xì)胞活動(dòng)的重要指標(biāo)，缺鋅可引起胃和血清AKP活性降低，導(dǎo)致骨代謝異常，改變骨的鈣化作用，使骨骼生長(zhǎng)板上的軟骨細(xì)胞增生，骨密度下降。何霆等[15]發(fā)現(xiàn)，肉仔雞血清AKP活性隨飼糧鋅添加水平的提高而提高，當(dāng)飼糧鋅添加水平為70 mg/kg時(shí)達(dá)到最高。而植酸酶可使飼糧有效磷水平增加，促進(jìn)血液和骨骼中的鈣、磷代謝，增加骨中鈣和磷的沉積，從而促進(jìn)脛骨的發(fā)育。Manobhavan等[16]研究了高劑量植酸酶對(duì)雛雞骨骼礦物元素含量的影響，發(fā)現(xiàn)飼糧添加2 500～5 000 U/kg植酸酶能顯著增加骨骼中鈣、磷等礦物元素的含量；雷喬波等[17]研究表明，飼糧添加300 U/kg植酸酶能顯著提高脛骨灰分和灰分中磷的含量；趙春等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞飼糧添加植酸酶能顯著促進(jìn)鈣、磷的利用率。本試驗(yàn)的研究首先證明了添加植酸酶的Ⅲ～Ⅵ組的血清AKP活性比Ⅰ組顯著增加，且與飼糧鋅添加水平之間存在二次曲線關(guān)系，對(duì)其進(jìn)行擬合分析后得知，當(dāng)飼糧鋅添加水平為51.38 mg/kg時(shí)血清AKP活性最高，且血清AKP活性與骨密度和鈣、磷含量之間存在顯著或極顯著線性關(guān)系；其次證明了添加植酸酶后，Ⅳ～Ⅵ組的骨磷含量顯著高于Ⅰ、Ⅱ組。由此表明飼糧添加植酸酶后，能提高鋅對(duì)脛骨發(fā)育的生物學(xué)效價(jià)，有效降低飼糧鋅的添加水平。

3.3 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝抗氧化能力的影響

動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力決定了動(dòng)物機(jī)體防御體系的強(qiáng)弱。T-AOC是體內(nèi)酶促抗氧化體系的重要組成部分，能清除機(jī)體不斷產(chǎn)生的氧自由基。GSH-Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的含鋅酶，它主要參與還原型谷胱甘肽對(duì)過(guò)氧化氫(H2O2)的還原反應(yīng)，能夠防止脂質(zhì)過(guò)氧化，提高機(jī)體的抗氧化能力。CuZn-SOD是一種鋅依賴酶，主要功能是使超氧自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，消除其毒性，防止機(jī)體過(guò)氧化。MDA含量是間接反映生物體內(nèi)氧自由基的代謝狀況以及脂質(zhì)過(guò)氧化程度的指標(biāo)。王寶維等[19]的研究表明，增加飼糧鋅水平能顯著通過(guò)血清和肝臟T-AOC及GSH-Px、CuZn-SOD活性，顯著降低血清和肝臟MDA含量；鐘映梅等[20]的研究表明，提高飼糧鋅水平能降低鵝血清和肝臟的MDA含量。Tang等[21]研究了補(bǔ)鋅對(duì)胰腺炎大鼠的抗氧化調(diào)節(jié)，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)鋅組的超氧化物歧化酶(SOD)和還原型谷胱甘肽(GSH)活性顯著提高。Liu等[22]研究證明，植酸酶能提高血清T-AOC和SOD活性9%～16%；Gowanlock等[23]在仔豬飼糧中加入植酸酶，發(fā)現(xiàn)鋅與植酸酶協(xié)同能夠提高肝臟CuZn-SOD的活性。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，缺鋅的Ⅱ組血清和肝臟抗氧化指標(biāo)均顯著低于其他各組；添加植酸酶后，Ⅳ～Ⅵ組的血清和肝臟的T-AOC和GSH-Px活性比Ⅰ組顯著升高；血清的MDA含量差異不大，肝臟的MDA含量，Ⅳ～Ⅵ組比Ⅰ組極顯著降低。結(jié)果表明添加植酸酶提高了鋅促進(jìn)機(jī)體抗氧化能力的生物學(xué)效應(yīng)，兩者協(xié)同能有效降低飼糧鋅的添加水平，但缺鋅狀態(tài)會(huì)嚴(yán)重降低機(jī)體抗氧化能力。經(jīng)過(guò)對(duì)血清和肝臟T-AOC的分析，飼糧鋅添加水平在47.49～50.24 mg/kg時(shí)機(jī)體的抗氧化能力最佳。

3.4 低鋅飼糧添加植酸酶對(duì)1～4周齡鵝免疫性能的影響

對(duì)免疫性能的影響主要包括對(duì)免疫器官指數(shù)和血清抗體水平的影響。家禽主要的免疫器官包括胸腺、脾臟和法氏囊。其中胸腺發(fā)揮生理作用需要鋅的參與；脾臟主要與產(chǎn)生抗原和免疫應(yīng)答有關(guān)；法氏囊對(duì)幼齡動(dòng)物的體液免疫有重要影響。三者的發(fā)育情況由相應(yīng)的器官指數(shù)衡量。蘇莉娜等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧鋅添加水平為55.7 mg/kg時(shí)，胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)顯著升高；Cui等[25]研究缺鋅對(duì)鴨免疫器官發(fā)育的影響，發(fā)現(xiàn)缺鋅嚴(yán)重抑制了鴨法氏囊的發(fā)育；徐曉娜等[26]的研究發(fā)現(xiàn)添加900 U/kg植酸酶，五龍鵝的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著提高；Zya等[27]在肉雞飼糧添加植酸酶復(fù)合酶制劑，發(fā)現(xiàn)植酸酶能增加法氏囊的重量。本試驗(yàn)在低鋅水平飼糧添加植酸酶后，Ⅲ～Ⅵ組的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著增加，甚至超過(guò)了Ⅰ、Ⅱ組的水平，但2個(gè)對(duì)照組間差異不大，分析原因可能由于Ⅰ組未添加植酸酶，幼齡鵝飼糧秸稈含量高，其中的植酸抑制了鋅的吸收利用，而缺鋅的Ⅱ組由于添加了植酸酶，對(duì)免疫器官的發(fā)育有一定的促進(jìn)作用，彌補(bǔ)了鋅的不足。結(jié)果表明，植酸酶與鋅協(xié)同有效促進(jìn)了免疫器官的發(fā)育，且能有效降低飼糧鋅的添加。

免疫抗體效價(jià)直接反映了動(dòng)物體液免疫的水平，對(duì)預(yù)防家禽傳染病的發(fā)生具有重要的意義。王明發(fā)等[28]研究表明，添加氨基酸絡(luò)合鋅極顯著提高了肉雞新城疫抗體水平；Chand等[29]探討了鋅對(duì)肉雞血清抗體的影響，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)鋅組的傳支和傳法的抗體滴度顯著增加；Shaw等[30]在接種了球蟲(chóng)病的肉仔雞飼喂植酸酶，發(fā)現(xiàn)飼喂植酸酶后白介素基因的表達(dá)量顯著提高；Liu等[31]研究發(fā)現(xiàn)，添加高植酸酶飼糧的肉仔雞新城疫抗體水平顯著提高。本試驗(yàn)的研究表明，添加植酸酶的Ⅲ～Ⅵ組，免疫前后血清新城疫抗體水平較Ⅰ組均有顯著提高，Ⅱ組的抗體水平較低，說(shuō)明缺鋅對(duì)血清抗體的產(chǎn)生有不良影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，添加植酸酶能提高低飼糧鋅水平下鵝的血清抗體水平，也說(shuō)明添加植酸酶可以降低飼糧鋅的添加水平。

綜上研究結(jié)果表明，植物性飼糧中植酸水平均較高，尤其是秸稈中含量更多，家禽等單胃動(dòng)物自身不能分泌植酸酶，添加微生物植酸酶可將飼糧中的植酸鹽水解為肌醇和磷酸單酯酶，使植酸對(duì)鋅等微量元素的絡(luò)合作用降低，使其以無(wú)機(jī)離子態(tài)的形式游離出來(lái)，被單胃動(dòng)物所吸收利用，從而提高了鋅的營(yíng)養(yǎng)利用率，使低鋅飼糧也可以取得理想的生產(chǎn)效果，此結(jié)果對(duì)指導(dǎo)鵝生態(tài)養(yǎng)殖具有重要意義。

4 結(jié) 論

① 低鋅飼糧中添加植酸酶能夠提高1～4周齡鵝生長(zhǎng)性能、免疫性能和機(jī)體抗氧化能力，促進(jìn)脛骨發(fā)育，降低飼糧中鋅的添加水平。

② 飼糧添加1 200 U/kg植酸酶的條件下，1～4周齡鵝飼糧鋅的適宜添加水平為44.70～51.38 mg/kg。

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*Corresponding author, professor, E-mail: wangbw@qau.edu.cn

(責(zé)任編輯 武海龍)

Effects of Phytase Supplementation in a Low Zinc Diet on Growth Performance, Tibial Development, Immune Performance and Antioxidant Capacity of Geese Aged from 1 to 4 Weeks

ZHENG Huiwen WANG Baowei*GE Wenhua ZHANG Ming’ai YUE Bin ZHANG Zenan ZHANG Yangyang REN Min

(Nutrition and Feed Laboratory of China Agriculture Research System, Institute of High Quality Waterfowl, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China)

This experiment was conducted to study the effect of phytase supplementation in a low zinc diet on growth performance, tibial development, immune performance and antioxidant capacity of geese aged from 1 to 4 weeks, and to explore whether phytase could effectively reduce the zinc supplemental level and increase the biological availability of zinc. A total of 360Wulonggeese were randomly divided into six groups with six replicates per group and ten geese per replicate (half male and half female). Geese in the group Ⅰ (positive control group) were fed the basal diet supplemented with 80 mg/kg zinc sulfate, and without phytase; geese in the group Ⅱ (negative control group) were fed a basal diet supplemented with 1 200 U/kg phytase, and without zinc sulfate; and the others in the groups Ⅲ to Ⅵ were fed the diets supplemented with 16, 32, 48 and 64 mg/kg zinc sulfate based on negative control group, respectively. The experiment lasted for 28 days. The results showed as follows: 1) by quadratic curve fitting analysis, in the condition of dietary supplemented with 1 200 U/kg phytase, when dietary zinc supplemental level was 34.00 to 44.7 mg/kg, the average daily gain and feed to gain reached the best. 2) The bone mineral density (BMD) of groups Ⅳ and Ⅵ was significantly higher than that of group Ⅱ (P<0.05); the bone mineral content (BMC) and serum alkaline phosphatase (AKP) activity of groups Ⅳ and Ⅵ were significantly higher than those of groups Ⅰ and Ⅱ (P<0.05 orP<0.01). By quadratic curve fitting analysis, when the dietary zinc supplemental level was 51.38 mg/kg, the serum AKP activity reached the strongest. 3) The total antioxidant capacity (T-AOC) in serum and liver of group Ⅳ was significantly higher than that of group Ⅱ (P<0.05), and were no significant difference compared with group Ⅰ (P>0.05). By quadratic curve fitting analysis, when the zinc supplemental level was 50.24 and 47.49 mg/kg, respectively, the T-AOC in serum and liver was the highest. 4) The thymus index and bursa of Fabricius index of groups Ⅲ to Ⅵ were significantly higher than those of groups Ⅰ and Ⅱ (P<0.05 orP<0.01), while the level of serum antibody against avian influenza of groups Ⅳ to Ⅵ was significantly higher than that of groups Ⅰ and Ⅱ before or after immunization (P<0.05 orP<0.01). In conclusion, diet adding phytase can enhance the growth performance of Wulong geese aged from 1 to 4 weeks, promote development of tibia, enhance the antioxidant capacity and immune performance, improve the utilization rate of zinc, reduce the dietary zinc supplemental level, and increase the biological availability of zinc. It is suggested that the optimal zinc supplemental level is 44.70 to 51.38 mg/kg when the diet adding 1 200 U/kg phytase.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(11)：3557-3566]

zinc; phytase; geese; growth performance; tibial development; antioxidant capacity; immune

2016-04-25

國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)基金(CARS-43-11)；山東省良種工程(12-1-3-17-nsh)

鄭惠文(1991—)，女，山東濰坊人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail: 1258992674@qq.com

*通信作者：王寶維，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: wangbw@qau.edu.cn

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.11.024

S835

A

1006-267X(2016)11-3557-10