從農(nóng)藝性狀及化學(xué)成分測定分析遠(yuǎn)志藥材商品品規(guī)和良種選育的合理性

王丹丹+白璐+許曉雙+張福生+邢婕+賈金萍+田洪嶺+秦雪梅

[摘要]通過對(duì)18份具有不同農(nóng)藝性狀特征的遠(yuǎn)志樣品進(jìn)行農(nóng)藝性狀（株高、根直徑、根長、第一側(cè)根分叉高度、側(cè)根數(shù)、根重）分析，并采用HPLC對(duì)18份遠(yuǎn)志樣品的3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分（細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、遠(yuǎn)志酮Ⅲ、3，6′-二芥子?；崽牵┻M(jìn)行含量測定，最后通過散點(diǎn)圖分析6個(gè)農(nóng)藝性狀與3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)18份遠(yuǎn)志樣品中的3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量與遠(yuǎn)志根直徑均無明顯相關(guān)性，且細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量與其余5個(gè)農(nóng)藝性狀也無明顯相關(guān)性；遠(yuǎn)志酮Ⅲ在主根長較短、第一側(cè)根分叉高度較短，側(cè)根數(shù)較多的遠(yuǎn)志樣品中含量較高；3，6′-二芥子酰基蔗糖在主根長較長的遠(yuǎn)志樣品中含量較高。可見現(xiàn)行遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)及等級(jí)劃分與良種選育方法，并不符合優(yōu)等藥材其體內(nèi)指標(biāo)性化學(xué)成分含量較高的藥典標(biāo)準(zhǔn)，所以急需制訂出具有科學(xué)數(shù)據(jù)支撐的遠(yuǎn)志商品規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及良種選育方法。

[關(guān)鍵詞]遠(yuǎn)志； 農(nóng)藝性狀； HPLC； 商品品規(guī)； 良種選育

[Abstract]The agronomic traits （plant height， root diameter， root length， first lateral root height， lateral root amount， root weight） of 18 Polygala tenuifolia samples with different agronomic traits were analyzed， respectively. HPLC was used to analyze three main characteristic components including tenuifolin， polygalaxanthone Ⅲ， and 3，6′-disinapoyl sucrose. At last， the correlation between six agronomic traits and three main characteristic components were analyzed by scatter plot. We found no significant correlation between root diameter and three main characteristic components. There were no obvious correlations between tenuifolin and the remaining five agronomic traits. Short root length and first lateral root height as well as high lateral root amount resulted in high levels of polygalaxanthone Ⅲ in P. tenuifolia samples. High levels of 3，6′-disinapoyl sucrose were observed in P. tenuifolia samples with longer root. So， the current commodity criteria and traditional breeding of P. tenuifolia did not conform to pharmacopoeia standards， which excellent medicinal materials should have high contents of the main characteristic components. It was urgent to revise the current commodity criteria and breeding methods.

[Key words]Polygala tenuifolia； agronomic traits； HPLC； commodity criteria； breeding

doi：10.4268/cjcmm20162006

遠(yuǎn)志是我國常用的傳統(tǒng)大宗中藥材之一，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品^[1]。2015年版《中國藥典》中收載的遠(yuǎn)志，為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志Polygala tenuifolia Willd.或卵葉遠(yuǎn)志P. sibirica L.的干燥根，具有安神益智、交通心腎、祛痰、消腫等功效^[2]；其主要有效成分為皂苷類、酮類和糖酯類等化合物^[3]。關(guān)于商品遠(yuǎn)志的品質(zhì)，傳統(tǒng)“商品遠(yuǎn)志以筒粗、肉厚、去凈木心之遠(yuǎn)志筒為佳”^[4]。現(xiàn)行的遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格依然遵循1984年國家頒布的《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》^[5]，將遠(yuǎn)志藥材劃分為志筒、志肉2種規(guī)格，其中志筒依據(jù)長度和中部直徑的大小，劃分為一等、二等2種等級(jí)，志肉只有統(tǒng)貨1種等級(jí)。而2015年版《中國藥典》則以細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷（≥2.0%）、遠(yuǎn)志酮Ⅲ（≥0.15%）、3，6′-二芥子酰基蔗糖（≥0.50%）含量的高低，作為評(píng)價(jià)商品遠(yuǎn)志質(zhì)量優(yōu)劣的標(biāo)準(zhǔn)^[2]。因此，遠(yuǎn)志藥材的傳統(tǒng)商品規(guī)格及等級(jí)是否與上述3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分的含量有必然的相關(guān)性，這一問題值得商榷。

目前，根類中藥材新品種的傳統(tǒng)選育方法主要參考根及根莖類農(nóng)作物，以藥材畝產(chǎn)量及根的農(nóng)藝性狀等作為主要選育指標(biāo)。由于無商品化的種子來源，遠(yuǎn)志藥材的生產(chǎn)種植目前仍處于一個(gè)粗放式、自采自種的原始階段^[6]。長此以往，勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致遠(yuǎn)志品種的退化。因此，有必要且急需對(duì)遠(yuǎn)志藥材進(jìn)行良種選育。又因中藥材的質(zhì)量優(yōu)劣與其藥效的強(qiáng)弱密切相關(guān)，其藥效的強(qiáng)弱又與其體內(nèi)有效化學(xué)成分含量的高低密切相關(guān)^[7]。而作為遠(yuǎn)志藥材傳統(tǒng)良種選育的主要指標(biāo)，根的農(nóng)藝性狀是否與上述3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量有必然的相關(guān)性，這一問題同樣值得進(jìn)一步商榷。

本文分別對(duì)18份具有不同農(nóng)藝性狀特征的遠(yuǎn)志樣品進(jìn)行農(nóng)藝性狀（株高、根直徑、根長、第一側(cè)根分叉高度、側(cè)根數(shù)、根重）分析，并采用HPLC對(duì)遠(yuǎn)志的細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、遠(yuǎn)志酮Ⅲ、3，6′-二芥子?；崽沁M(jìn)行含量測定，最后通過散點(diǎn)圖分析6個(gè)不同農(nóng)藝性狀與3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分間的相關(guān)性，進(jìn)而探討遠(yuǎn)志藥材傳統(tǒng)商品規(guī)格等級(jí)劃分及良種選育方法的合理性。

1 材料

1.1 植物

本實(shí)驗(yàn)依托于山西省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所（以下簡稱經(jīng)作所）。經(jīng)作所先后從山西省內(nèi)、外征集17份遠(yuǎn)志資源，并分別種植于經(jīng)作所試驗(yàn)田。之后將征集到的所有遠(yuǎn)志種質(zhì)資源利用系統(tǒng)選育法，從中選育出18個(gè)具有不同農(nóng)藝性狀的優(yōu)良株系，并編號(hào)便于管理。本文所用18份遠(yuǎn)志樣品均于2010年7月在遠(yuǎn)志新品種選育資源保存圃播種，依據(jù)大田管理細(xì)則進(jìn)行統(tǒng)一管理，并于2013年11月采挖全植株（包括地上部分和地下部分），放置于陰涼通風(fēng)處干燥。樣品經(jīng)秦雪梅教授鑒定為遠(yuǎn)志P. tenuifolia，憑證標(biāo)本均保存于山西大學(xué)中醫(yī)藥現(xiàn)代研究中心。具體樣品信息見表1。

1.2 儀器及試劑

Waters 高效液相色譜儀：高壓泵（Waters 1525，美國）；紫外檢測器（Waters 2487，美國）；Breeze 色譜工作站；色譜柱：agela-Venusil XBP C₁₈（4.6 mm×250 mm，5 μm，中國）；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。

細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào) MUST-140428801，純度≥98%）；遠(yuǎn)志酮Ⅲ對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào) MUST-14100905，純度≥98%）；3，6′-二芥子?；崽菍?duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào) 111848-201303，純度以96%計(jì)）。

2 方法

2.1 農(nóng)藝性狀的測定

按順序從18個(gè)保存圃中隨機(jī)選取6～10株遠(yuǎn)志樣品進(jìn)行采挖，采挖植株的同時(shí)，測量并記錄以下4個(gè)農(nóng)藝性狀：株高（cm）、根長（cm）、第一側(cè)根分叉高度（cm，蘆頭到第1個(gè)側(cè)根的長度）、側(cè)根數(shù)（個(gè)）；待根干燥后，測量并記錄以下2個(gè)農(nóng)藝性狀：根直徑（cm，由于遠(yuǎn)志藥材的根長在20 cm左右，且根頂部的直徑與底部的直徑?jīng)]有太大的差異，所以將蘆頭下3 cm處主根的直徑認(rèn)為是根的直徑）及根重（g）。

2.2 指標(biāo)性化學(xué)成分的含量測定

細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、遠(yuǎn)志酮Ⅲ和3，6′-二芥子?；崽堑暮繙y定方法均參照2015年版《中國藥典》一部中遠(yuǎn)志的含量測定項(xiàng)下的高效液相色譜法進(jìn)行測定^[2]。

2.2.1 細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量測定 對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備方法參照2015年版《中國藥典》。

色譜條件：以甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30）為流動(dòng)相；檢測波長 210 nm；流速1.0 mL·min^-1；運(yùn)行時(shí)間30 min。每個(gè)測試樣品均平行備樣2份，并且每份樣品平行進(jìn)樣2針，每次進(jìn)樣10 μL。

2.2.2 遠(yuǎn)志酮Ⅲ和3，6′-二芥子?；崽堑暮繙y定 對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備方法參照2015年版《中國藥典》。

色譜條件：以乙腈-0.05%磷酸溶液（18∶82）為流動(dòng)相；檢測波長為320 nm；流速1.0 mL·min^-1，運(yùn)行時(shí)間40 min。每個(gè)測試樣品均平行備樣2份，并且每份樣品平行進(jìn)樣2針，每次進(jìn)樣10 μL。

2.3 數(shù)據(jù)處理

各項(xiàng)農(nóng)藝性狀均以±s表示，3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量以表示，并基于SPSS 16.0（IBM SPSS，USA）軟件，分別依據(jù)18份遠(yuǎn)志樣品的農(nóng)藝性狀和3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量進(jìn)行聚類分析，并分別對(duì)農(nóng)藝性狀和3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量進(jìn)行相關(guān)性分析。最后，采用OriginPro 8軟件（originlab，USA）對(duì)6個(gè)農(nóng)藝性狀與3個(gè)指標(biāo)性成分的含量做散點(diǎn)圖^[8]，分析農(nóng)藝性狀和指標(biāo)性成分之間的相關(guān)性。

3 結(jié)果與分析

3.1 遠(yuǎn)志農(nóng)藝性狀分析

3.1.1 6個(gè)農(nóng)藝性狀的測定結(jié)果與分析 18份遠(yuǎn)志樣品的農(nóng)藝性狀均存在顯著性差異，見表2。結(jié)果表明：①株高的變化范圍為18.23～31.71 cm，平均22.96 cm；其中4號(hào)樣品的平均株高最高，為31.71 cm；15號(hào)樣品的平均株高最低，為18.23 cm。②根直徑的變化范圍為0.29～0.50 cm，平均0.42 cm；其中13號(hào)樣品的平均直徑最大，為0.50 cm；1號(hào)樣品的平均直徑最小，為0.29 cm。③根長的變化范圍為15.93～21.65 cm，平均19.06 cm；其中6號(hào)樣品的平均根長最長，為21.65 cm；8號(hào)樣品的平均根長最短，為15.93 cm。④第一側(cè)根分叉高度的變化范圍為3.92～10.19 cm，平均6.33 cm；其中5號(hào)樣品的平均根分叉高度最長，為10.19 cm；18號(hào)樣品的平均根分叉高度最短，為3.92 cm。⑤側(cè)根數(shù)的變化范圍為2.09～7.82個(gè)，平均4.25個(gè)；其中14號(hào)樣品的平均側(cè)根數(shù)最多，為7.82個(gè)；1號(hào)樣品的平均側(cè)根數(shù)最少，為2.09個(gè)。⑥根重的變化范圍為1.20～4.58 g，平均2.82 g；其中13號(hào)樣品的平均單株根重最大，為4.58 g；1號(hào)樣品的平均單株根重，為1.20 g。

各項(xiàng)農(nóng)藝性狀指標(biāo)的變異系數(shù)（coefficient of variance，CV，變異系數(shù)=均方差/平均值）^[9]從大到小，依次為側(cè)根數(shù)>根重>第一側(cè)根分叉高度>株高>根直徑>根長。樣品性狀的變異系數(shù)越大，則遺傳多樣性越大，良種選育時(shí)選擇潛力越大^[10]。其中，側(cè)根數(shù)的變異系數(shù)（0.384）最大，可選擇的范圍也最寬，選擇效果最好^[11]；而根長的變異系數(shù)（0.078）最小，可選擇的范圍最窄。第一側(cè)根分叉高度與遠(yuǎn)志抽心的難易程度密切相關(guān)，其變異系數(shù)為0.254，說明可選擇的空間較大；而根重與遠(yuǎn)志的產(chǎn)量密切相關(guān)，其變異系數(shù)為0.299，可見也有一定的選擇空間。綜上可知，18份遠(yuǎn)志樣品的6個(gè)不同農(nóng)藝性狀均存在著不同的變異幅度。

3.1.2 18份遠(yuǎn)志藥材樣品的農(nóng)藝性狀特征聚類分析 在目前的實(shí)際應(yīng)用中，系統(tǒng)聚類法（hierarchical clustering methods，也稱層次聚類法）和K均值聚類法（K-means）是聚類分析中最常用的2種方法。系統(tǒng)聚類法由于類與類之間的距離計(jì)算方法靈活多樣，使其可以適應(yīng)不同的要求，該方法是目前實(shí)踐中使用最多的，其中離差平方和法（Ward′s method）分類效果較好，應(yīng)用比較廣泛。需要注意的是，采用離差平方和法，樣本間的距離必須采用歐氏距離（Euclidean distance）^[12]。

因此本文采用SPSS 16.0軟件中的離差平方和法對(duì)18份遠(yuǎn)志樣品的農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，見圖1。18份樣品明顯分為3組，其中第一組包括6個(gè)遠(yuǎn)志樣品（3，12，8，6，17，13），它們的株高中等，根直徑和根重最高；側(cè)根數(shù)較多，第一側(cè)根分叉高度較短，屬于產(chǎn)量較高，但比較難抽心的類型。第二組也包括6個(gè)遠(yuǎn)志樣品（10，15，7，16，1，5），它們的株高，根直徑和根重最低；側(cè)根數(shù)較少，第一側(cè)根分叉高度較長，屬于產(chǎn)量較低，但比較容易抽心的類型。第三組也包括6個(gè)遠(yuǎn)志樣品（2，11，9，14，16，4），它們的株高最高，根直徑和根重中等；側(cè)根數(shù)和第一側(cè)根分叉高度也處于中等水平，屬于產(chǎn)量中等，抽心難易程度也處于中等水平的類型。每組中根長比較穩(wěn)定，所以可推測18份遠(yuǎn)志樣品并不是依據(jù)根長來進(jìn)行分組的。

3.1.3 不同農(nóng)藝性狀特征間的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析目前應(yīng)用最廣的為Pearson相關(guān)和Spearman秩相關(guān)，其中Pearson相關(guān)要求原數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布，而Spearman秩相關(guān)屬于非參數(shù)檢驗(yàn)，并不知道物種服從何種分布，用起來更為靈活方便^[13]。

經(jīng)過檢驗(yàn)，側(cè)根數(shù)和根重不符合正態(tài)分布，所以采用Spearman秩相關(guān)對(duì)各農(nóng)藝性狀進(jìn)行相關(guān)性分析，見表3。結(jié)果表明：①株高與根直徑、側(cè)根數(shù)、根重呈極顯著（P<0.001）正相關(guān)；②根直徑與側(cè)根數(shù)、根重呈極顯著正相關(guān)，與第一側(cè)根分叉高度呈極顯著負(fù)相關(guān)；③根長與根重呈極顯著正相關(guān)；④第一側(cè)根分叉高度與側(cè)根數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān)；⑤側(cè)根數(shù)與根重呈極顯著正相關(guān)。

可見遠(yuǎn)志藥材根直徑越粗、根長越長、根重越重，則遠(yuǎn)志藥材的產(chǎn)量越高，而遠(yuǎn)志藥材的側(cè)根數(shù)越多，第一側(cè)根分叉高度越短，則越不利于遠(yuǎn)志藥材的抽心處理。可根據(jù)各農(nóng)藝性狀間的相關(guān)性，對(duì)某一性狀進(jìn)行間接選擇，并且可取得良好的選擇效果^[10]。

3.2 遠(yuǎn)志指標(biāo)性化學(xué)成分分析

3.2.1 3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量測定結(jié)果與分析 在本實(shí)驗(yàn)的色譜條件下，遠(yuǎn)志樣品中的細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、遠(yuǎn)志酮Ⅲ和3，6′-二芥子?；崽欠宸蛛x度均大于1.5，可完全分離，峰型窄而且對(duì)稱。分別測定18份遠(yuǎn)志樣品的3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分的含量，結(jié)果見表4。

結(jié)果表明，所有18份遠(yuǎn)志樣品，①細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷平均含量為3.04%，其中含量最高的為15號(hào)樣品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.07%；含量最低的為12號(hào)樣品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.80%。除12號(hào)遠(yuǎn)志樣品外，均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)（≥2.0%）。②遠(yuǎn)志酮Ⅲ的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.20%，其中含量最高的為8號(hào)樣品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.46%；含量最低的為5號(hào)樣品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%。其中2，5，6，10，11，16，18號(hào)遠(yuǎn)志樣品的遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量均不符合藥典標(biāo)準(zhǔn)（≥0.15%）。③3，6′-二芥子?；崽堑钠骄|(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.72%，其中含量最高的為12號(hào)樣品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.17%；16號(hào)樣品含量最低，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.47%，次之為2號(hào)樣品，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.48%。除2號(hào)、16號(hào)遠(yuǎn)志樣品外，其余樣品均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)（≥0.50%）。由表4可見，同一成分在18份遠(yuǎn)志樣品中的含量明顯不同，且不同成分的波動(dòng)范圍也明顯不同。其中細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的變異系數(shù)最小，為0.155，說明細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量與樣品的直徑無關(guān)；3，6′-二芥子?；崽堑淖儺愊禂?shù)居中，為0.239；而遠(yuǎn)志酮Ⅲ的變異系數(shù)最大，為0.473，并且18份遠(yuǎn)志樣品中有7份樣品不符合藥典規(guī)定，說明遠(yuǎn)志藥材中遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量可能比細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量更容易隨外界因素發(fā)生變化。因此，推測藥典中規(guī)定的遠(yuǎn)志酮Ⅲ的質(zhì)控下限值可能有些偏高，可適當(dāng)降低含量標(biāo)準(zhǔn)，且以遠(yuǎn)志酮Ⅲ為指標(biāo)性成分用于遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格等級(jí)的劃分值得商榷。

3.2.2 18份遠(yuǎn)志藥材樣品的指標(biāo)性成分聚類分析 本文采用SPSS 16.0軟件中的離差平方和法對(duì)18份遠(yuǎn)志樣品的農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，見圖2。18份樣品明顯分為2組，其中第一組包括15個(gè)遠(yuǎn)志樣品（6，10，11，9，18，5，1，13，14，2，16，4，7，8，15），它們的細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量較高，遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量較低，3，6′-二芥子?；崽呛枯^低。第二組包括3個(gè)遠(yuǎn)志樣品（3，17，12），它們的細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量較低，遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量較高，3，6′-二芥子?；崽呛枯^高。

3.2.3 不同指標(biāo)性成分含量間的相關(guān)性分析 經(jīng)過檢驗(yàn)，各指標(biāo)性成分含量符合正態(tài)分布，用Pearson相關(guān)對(duì)各指標(biāo)性成分含量間進(jìn)行相關(guān)性分析，見表5。結(jié)果表明：①細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量與遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)（P<0.05）；②3，6′-二芥子?；崽呛颗c細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量和遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量分別呈負(fù)相關(guān)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此推測：細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量越高，則遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量越低，這與遠(yuǎn)志藥材樣品的指標(biāo)性成分聚類結(jié)果一致。

3.3 3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量與不同農(nóng)藝性狀特征間的相關(guān)性分析

本研究對(duì)6個(gè)農(nóng)藝性狀與3個(gè)指標(biāo)性成分的含量分別做散點(diǎn)圖，見圖3。結(jié)果表明：①細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量在6個(gè)不同農(nóng)藝性狀中的含量變化范圍較大，無明顯的變化規(guī)律；②遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量與根長（圖3C）、第一側(cè)根分叉高度（圖3D）呈負(fù)相關(guān)（圖中代表遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量的點(diǎn)從左至右分布在一條斜率向下的直線上），與側(cè)根數(shù)（圖3E）呈正相關(guān)（圖中代表遠(yuǎn)志酮Ⅲ含量的點(diǎn)從左至右分布在一條斜率向上的直線上），與其他農(nóng)藝性狀無明顯的變化規(guī)律；③3，6′-二芥子酰基蔗糖的含量與根長（圖3C）呈正相關(guān)（直線斜率向上），與其他農(nóng)藝性狀無明顯的變化規(guī)律。

以上結(jié)果提示：細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷的含量高低與6個(gè)農(nóng)藝性狀無明顯相關(guān)性；遠(yuǎn)志酮Ⅲ在根較短，第一側(cè)根分叉高度較短，側(cè)根數(shù)較多的樣品中含量較高；3，6′-二芥子?；崽窃诟^長的樣品中含量較高。

18份樣品依據(jù)農(nóng)藝性狀得到的聚類分組（圖1）和依據(jù)指標(biāo)性化學(xué)成分含量得到的聚類分組（圖2）并不完全相同，這可能是由于同一物質(zhì)的不同屬性造成不同的分組結(jié)果。圖1中根直徑最高的一組（3，17，12，8，6，13），依據(jù)3個(gè)指標(biāo)性成分含量進(jìn)行分組，被分到了不同的2組中，說明3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分的含量與根直徑無關(guān)；并且3號(hào)、17號(hào)和12號(hào)在2個(gè)聚類圖中都被分到了同一組，這3份樣品具有側(cè)根數(shù)較多，第一側(cè)根分叉高度較短的農(nóng)藝性狀，且遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量較高，這與圖3得到的結(jié)果一致。由于3，6′-二芥子酰基蔗糖的含量與根長有關(guān)，但是農(nóng)藝性狀的聚類分組并不是依據(jù)根長進(jìn)行的，所以圖3的結(jié)果是對(duì)圖1和圖2結(jié)果的補(bǔ)充，得到3，6′-二芥子?；崽窃诟^長的樣品中含量較高的結(jié)論。

4 討論

本文研究結(jié)果表明，18份遠(yuǎn)志樣品中的3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分含量與遠(yuǎn)志根直徑均無明顯相關(guān)性，因此本文認(rèn)為，現(xiàn)行的依據(jù)是否抽心以及根的粗細(xì)等來劃分遠(yuǎn)志藥材的商品規(guī)格與等級(jí)，并依據(jù)遠(yuǎn)志藥材的畝產(chǎn)量及根的農(nóng)藝性狀等作為遠(yuǎn)志良種選育主要指標(biāo)，存在一定的片面性。

4.1 現(xiàn)有遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)與等級(jí)劃分的不足

自古以來，中藥材作為一種特殊的商品，已形成“看貨評(píng)級(jí)，分檔議價(jià)”的經(jīng)驗(yàn)判別方法^[14]，“辨狀論質(zhì)”在中藥材商品規(guī)格等級(jí)方面始終起著理論指導(dǎo)作用^[15]?，F(xiàn)行的遠(yuǎn)志商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)依然遵循《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格和等級(jí)的劃分標(biāo)準(zhǔn)^[5]。目前市場上出售的遠(yuǎn)志飲片大多是經(jīng)過抽心處理的志筒或志肉，但目前關(guān)于遠(yuǎn)志是否抽心仍尚無明確定論^[16-17]。并且市場上流通的遠(yuǎn)志藥材，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了志筒、志肉這2種規(guī)格，出現(xiàn)了志筒與遠(yuǎn)志根（或者志肉、蘆頭等）按不同比例摻雜的多種規(guī)格；不同規(guī)格又按抽心率的大小及遠(yuǎn)志筒（根）的粗細(xì)來劃分遠(yuǎn)志藥材的等級(jí)，且市場中沒有明確的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)^[18]，導(dǎo)致市場中商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)及等級(jí)劃分比較混亂。

化學(xué)成分作為中藥材發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，從理論上看，藥材的規(guī)格等級(jí)與化學(xué)成分含量之間似乎應(yīng)存在某種必然聯(lián)系，但事實(shí)并非如此，如川芎（不同規(guī)格川芎4種化學(xué)成分含量均無顯著性差異）^[19]、款冬花（優(yōu)級(jí)款冬花樣品中蘆丁平均含量略高于統(tǒng)貨樣品，但二者差別不大）^[20]、白芍（指標(biāo)性成分含有量最高的是傳統(tǒng)規(guī)格的三等白芍）^[21]等藥材的商品規(guī)格等級(jí)與化學(xué)成分含量之間沒有明顯的相關(guān)性。房敏峰等^[22]利用HPLC測定不同商品規(guī)格等級(jí)的遠(yuǎn)志樣品中遠(yuǎn)志皂苷元的含量，發(fā)現(xiàn)一級(jí)筒中皂苷元含量低于二、三級(jí)筒。本課題組曾對(duì)不同規(guī)格遠(yuǎn)志藥材中的3個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分的含量進(jìn)行測定^[23]，發(fā)現(xiàn)：①不同批次遠(yuǎn)志樣品間細(xì)葉皂苷的含量差異較大，無明顯規(guī)律，說明細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量與遠(yuǎn)志樣品直徑無關(guān)，與本文結(jié)論一致；②遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量在遠(yuǎn)志筒中含量變化范圍較窄，在根中比較離散，說明遠(yuǎn)志酮Ⅲ的含量與遠(yuǎn)志樣品直徑無關(guān)，與本文結(jié)論一致；③除1號(hào)野生品外，3，6′-二芥子?；崽堑暮?，在遠(yuǎn)志樣品中變化范圍較窄，說明3，6′-二芥子酰基蔗糖的含量與遠(yuǎn)志樣品直徑無關(guān)，與本文結(jié)論一致。上述結(jié)果與現(xiàn)行遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格^[5]相矛盾。由此可見，現(xiàn)有遠(yuǎn)志藥材的商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)及等級(jí)劃分，在市場定價(jià)及流通環(huán)節(jié)上無法起到應(yīng)有的指導(dǎo)作用，而上述現(xiàn)象在不同藥材品種中也有發(fā)生。有學(xué)者認(rèn)為應(yīng)將藥材的化學(xué)成分與外觀性狀結(jié)合起來評(píng)價(jià)商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)及等級(jí)劃分的科學(xué)性及合理性^[24]，以及用生物活性來反映商品規(guī)格及等級(jí)的內(nèi)涵^[25]。因此，本文建議先按照遠(yuǎn)志是否抽心將遠(yuǎn)志藥材劃分為遠(yuǎn)志筒與遠(yuǎn)志根2種規(guī)格，再分別按照形態(tài)、有效成分含量、生物活性等將不同規(guī)格的藥材劃分為不同的等級(jí)。

4.2 遠(yuǎn)志藥材傳統(tǒng)良種選育方法的不足

遠(yuǎn)志的良種選育是建立規(guī)范化、規(guī)?；N質(zhì)的基礎(chǔ)，能從根本上解決目前遠(yuǎn)志生產(chǎn)上存在的品種混亂、種質(zhì)退化、產(chǎn)量下降、質(zhì)量參差不齊、生產(chǎn)潛力不足等問題，使遠(yuǎn)志藥材生產(chǎn)朝著優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定的方向發(fā)展，實(shí)現(xiàn)資源的可持續(xù)利用。目前遠(yuǎn)志的良種選育主要經(jīng)歷“引種—馴化—選種”等過程，且選育出一個(gè)新品種需要經(jīng)歷幾年甚至十幾年的時(shí)間。經(jīng)作所歷經(jīng)16年（1996—2012年），對(duì)遠(yuǎn)志各生育期觀察和通過抗性、產(chǎn)量性狀等比較，選育出我國第一個(gè)遠(yuǎn)志品種——晉遠(yuǎn)1號(hào)^[26]。相對(duì)于農(nóng)作物以產(chǎn)量優(yōu)先兼顧品質(zhì)，中藥材則首先應(yīng)以品質(zhì)（整齊度、質(zhì)量指標(biāo)）為先，其次再考慮其產(chǎn)量、抗性等^[27]。因此，現(xiàn)階段有必要制訂更加系統(tǒng)的良種選育方法，加快遠(yuǎn)志良種選育的進(jìn)程，如采用代謝組學(xué)技術(shù)、DNA分子標(biāo)記技術(shù)等對(duì)遠(yuǎn)志良種進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)和鑒定，同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)植物次生代謝產(chǎn)物生物合成的分子調(diào)控研究等^[28]。同時(shí)，本文研究結(jié)果表明，遠(yuǎn)志酮Ⅲ在主根長較短、第一側(cè)根分叉高度較短，側(cè)根數(shù)較多的遠(yuǎn)志樣品中含量較高；3，6′-二芥子?；崽窃谥鞲L較長的遠(yuǎn)志樣品中含量較高，這為今后遠(yuǎn)志的良種定向選育（以目標(biāo)活性物質(zhì)含量的高低為依據(jù)）提供了依據(jù)。

綜上所述，中藥材“辨狀論質(zhì)”是幾千年中醫(yī)藥傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，既有合理內(nèi)涵，也存在一定的局限性。因此在制訂遠(yuǎn)志藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)及等級(jí)劃分和篩選優(yōu)良種質(zhì)資源時(shí)，不僅要繼承傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)方法，還應(yīng)綜合考慮藥材中有效成分含量及生物活性等；此外，在進(jìn)行遠(yuǎn)志藥材的良種選育時(shí)，可根據(jù)選育用途來確定目標(biāo)性狀，在藥效優(yōu)先的情況下，兼顧產(chǎn)量，最終使研究成果能遵循科學(xué)、合理、實(shí)用性的原則。

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[責(zé)任編輯 呂冬梅]