昆明香菇反季節(jié)栽培的主要病原真菌及其發(fā)生特點*

汪威，田云霞，武紹啟，許慶坤

（1.昆明市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院食用菌中心，云南昆明650034；2.云南萬盛食用菌種植有限公司，云南昆明655200）

〈產(chǎn)業(yè)論壇〉

昆明香菇反季節(jié)栽培的主要病原真菌及其發(fā)生特點*

汪威1，田云霞1，武紹啟1，許慶坤2

（1.昆明市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院食用菌中心，云南昆明650034；2.云南萬盛食用菌種植有限公司，云南昆明655200）

通過對昆明地區(qū)幾個香菇反季節(jié)栽培種植區(qū)采集病原真菌樣本，分離、純化鑒定出木霉屬（Trichoderma）、青霉屬（Penicillium）、擬青霉屬（Paecilomyces）、鐮孢屬（Fusarium）、輪枝霉屬（Verticillium）、毛霉屬（Mucor）共6個屬，其中木霉屬分離頻次最高（61.90%）；香菇反季節(jié)栽培出菇期病原真菌的種類最多，而培菌后期最少。木霉屬是主要病原真菌，培菌前期、培菌后期和出菇期發(fā)生率分別為0.33%、2.20%和14.36%，擬青霉屬真菌污染僅在培菌前期發(fā)現(xiàn)，發(fā)生率為0.25%。

香菇；反季節(jié)；病原真菌

香菇（Lentinus edodes）的春栽夏菇模式即反季節(jié)栽培模式，實現(xiàn)了香菇的周年化生產(chǎn)［1］。每年全國夏季高溫導(dǎo)致優(yōu)質(zhì)鮮香菇貨源緊缺，市場需求大。而昆明夏無酷暑，氣候潮濕。這種氣候優(yōu)勢有利于香菇栽培，但同時也易導(dǎo)致病原真菌大量發(fā)生，造成香菇生產(chǎn)減產(chǎn)甚至絕收。因此，分離、純化和鑒定香菇栽培的主要病原真菌，研究其發(fā)生特點，可為香菇反季節(jié)栽培中主要真菌性病害綜合防治提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1樣本采集

2015年1月～2015年8月，在昆明市農(nóng)業(yè)科技示范園（團結(jié)）和云南萬盛食用菌種植公司香菇種植示范區(qū)采集樣本，按培菌前期（從接完種到菌絲長滿）、培菌后期（從菌絲長滿到菌棒轉(zhuǎn)色完成）和出菇期3個階段分別統(tǒng)計，共采集樣本212份，用無菌塑料袋裝好，帶回實驗室進行下一步分離和鑒定。

1.2病原真菌的分離純化

將所采集的被真菌污染的培養(yǎng)料樣品，在無菌條件下取一小塊置于PDA平板上，在25℃下培養(yǎng)至長出菌落，然后挑取菌落邊緣的菌絲進行純化，或在產(chǎn)孢后挑取孢子進行單孢分離，將純化好的菌株接種在PDA斜面上培養(yǎng)1周，然后置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?］。

1.3病原真菌的鑒定

用插片培養(yǎng)法觀察真菌形態(tài)。將純化好的真菌接種在PDA平板中間，邊緣以45°角插上3片蓋玻片，25℃下培養(yǎng)至菌絲長滿蓋玻片且剛開始產(chǎn)孢，擦去背對中心的那面的菌絲后，置于滴有無菌水載玻片上，再加蓋玻片鏡檢。參考有關(guān)文獻［3-5］將各真菌鑒定到屬。

2　結(jié)果與分析

香菇反季節(jié)栽培中污染真菌的種類及分離頻率見表1。

表1　香菇反季節(jié)栽培中污染真菌種類及分離頻率Tab.1The species and isolated frequency of pathogenic fungi during Lentinus edodes anti-season cultivation

表1結(jié)果表明，共獲得木霉屬（Trichoderma）、青霉屬（Penicillium）、擬青霉屬（Paecilomyces）、鐮孢屬（Fusarium）、輪枝霉屬（Verticillium）、毛霉屬（Mucor）共6個屬的香菇病原真菌，顯微結(jié)構(gòu)見圖1，此外有少量未鑒定的真菌屬。木霉屬真菌是香菇反季節(jié)栽培的主要病原真菌，分離頻次達到61.90%；其次是青霉屬和鐮刀菌屬真菌，分別是12.09%和8.42%。

圖1中1～6依次為木霉屬（Trichoderma）、青霉屬（Penicillium）、擬青霉屬（Paecilomyces）、鐮孢屬（Fusarium）、輪枝霉屬（Verticillium）、毛霉屬（Mucor）真菌放大400倍顯微結(jié)構(gòu)。

圖1　病原真菌顯微結(jié)構(gòu)Fig.1Microscopic structure of pathogenic fungi

香菇反季節(jié)栽培培菌前期、培菌后期和出菇期病原真菌的種類和發(fā)生率各不相同，見圖2。

由圖2可見，出菇期發(fā)生病原真菌的種類最多，而發(fā)菌后期病原真菌種類最少；木霉屬真菌是最主要的污染真菌，在培菌前期、培菌后期和出菇期發(fā)生率大幅增加，分別為0.33%、2.20%和14.36%；青霉屬真菌發(fā)生率在發(fā)菌前期和后期差別不大，分別為0.12%和0.11%，而在出菇期發(fā)生率達到3.10%；擬青霉屬真菌污染僅在培菌前期發(fā)現(xiàn)，發(fā)生率為0.25%。

3　討論

昆明夏天正是真菌最適宜生長時期，香菇反季節(jié)栽培種分離得到的病原真菌種類與徐耀波、盧東升等人報道［2，6］的基本一致，但擬青霉屬真菌未見報道，可能是栽培基質(zhì)污染。

邊銀丙等［7］認為食用菌菌絲病害分為菌絲體侵染性病害與競爭性病害。侵染性病害是由于菌絲體受到病原物侵染；競爭性病害是由于培養(yǎng)基質(zhì)存在其它微生物污染，與食用菌菌絲體拮抗反應(yīng)，從而阻礙菌絲體正常生長。因此，培菌前期菌絲體未長滿菌棒，主要發(fā)生菌絲體競爭性病害，其它2個時期菌絲已長滿，主要發(fā)生菌絲體侵染性病害。培菌前期、培菌后期和出菇期病木霉菌發(fā)生率大幅增加，可能是香菇菌絲體生長環(huán)境逐步開放，降低了木霉菌侵入難度；另外持續(xù)高溫條件下香菇菌棒生理活性下降，對木霉菌失去抗性［8］所致。

圖2　香菇反季節(jié)栽培不同時期各病原真菌的發(fā)生率比較Fig.2Comparison of pathogenic fungi incidence during Lentinus edodes anti-season cultivation

［1］張金霞，黃晨陽.無公害食用菌安全生產(chǎn)手冊［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008.

［2］徐耀波，文成敬.平菇和香菇袋料栽培中污染真菌的研究［J］.中國食用菌，2004，23（2）：45-47.

［3］Paul M Kirk，Paul F Cannon.Dictionary of the fungi（10th edition）［M］.CABI Publishing：2008.

［4］魏景超.真菌鑒定手冊［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1979.

［5］董偉.蔬菜病蟲害診斷與防治彩色圖譜［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2012.

［6］盧東升，王金平.食用菌污染真菌的調(diào)查研究［J］.信陽師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2007，20（4）：447-451.

［7］邊銀丙.食用菌菌絲體侵染性病害與競爭性病害研究進展［J］.食用菌學(xué)報，2013，20（2）：1-7.

［8］曹現(xiàn)濤.香菇菌棒腐爛病相關(guān)木霉鑒定與發(fā)生規(guī)律初步研究［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

Pathogenic Fungi and Main Features of Occurrence During Lentinus edodes anti-season Cultivation in Kunming

WANG Wei1，TIAN Yun-xia1，WU Shao-qi1，XU Qing-kun2
（1.Kunming Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650034，China；2.Yunnan Wansheng Mushroom Cultivation Ltd.，Kunming 655200，China）

Absract：The pathogenic fungi samples from several growing farm of anti-season Lentinus edodes were collected isolated and purified，and a total of 6 genus were identified，such as Trichoderma，Penicillium，Paecilomyces，F(xiàn)usarium，Verticillium，Mucor. The isolated frequency of Trichoderma was highest（61.90%）.The most pathogenic fungi species appeared in fruiting season cultivation，and it occur rarely in late cultivation season.Trichoderma is a major pathogenic fungi，and the occurrence rate in pre cultivation season，late cultivation season and fruiting were 0.33%，2.20%and 14.36%respectively.Paecilomyces fungus contamination was found only in the pre cultivation season，and the occurrence rate was 0.25%.

Lentinus edodes；anti-season；pathogenic fungi

S646.1

A

1003-8310（2016）03-0068-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2016.03.015

昆明特色經(jīng)濟作物新品種選育及栽培技術(shù)推廣應(yīng)用（2130106）；昆明科技局重大項目（2015-2-N-01573）。

汪威（1980-），男，碩士，農(nóng)藝師，主要從事食用菌產(chǎn)業(yè)化開發(fā)與技術(shù)推廣研究。E-mail：10524354@qq.com

2016-03-03