細胞信號轉(zhuǎn)導通路MEK在宮頸癌前病變和宮頸癌的表達及意義

符敏，瞿全新

細胞信號轉(zhuǎn)導通路MEK在宮頸癌前病變和宮頸癌的表達及意義

符敏，瞿全新

目的：探討宮頸癌前病變及宮頸癌組織中絲裂原激活細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK）細胞信號轉(zhuǎn)導通路表達的意義。方法：選擇并收集2013年1月—2014年4月在天津市第一中心醫(yī)院婦科診治、臨床病理資料完整的宮頸病變患者共92例，根據(jù)宮頸病變程度將患者分為正常組（30例）、高級別宮頸上皮內(nèi)瘤樣變（CIN）組（30例）和宮頸癌組（32例）。用免疫組織化學SP法檢測MEK在不同組織中的表達。結(jié)果：MEK在正常組、高級別CIN組和宮頸癌組中陽性表達率分別為20.0%、56.7%和68.8%，其中宮頸癌組MEK陽性表達率最高，分別高于高級別CIN組及正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。高級別CIN組MEK的陽性表達率高于正常組（P=0.003）。MEK陽性表達率與患者年齡、宮頸癌病理類型、腫瘤組織分化程度、腫瘤大小及宮頸癌臨床分期等因素無關(guān)（P＞0.05）。結(jié)論：MEK轉(zhuǎn)導通路可能在宮頸癌及癌前病變的發(fā)生發(fā)展中有一定的作用。

宮頸腫瘤；癌前狀態(tài)；絲裂原激活蛋白激酶激酶類；信號傳導

（J Int Obstet Gynecol，2016，43:340-342）

宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，全世界范圍內(nèi)大約每年有新發(fā)宮頸癌病例50萬例，中國每年約新增病例13.15萬例［1-2］，且發(fā)病年齡有年輕化趨勢［3］。因此，尋找宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)因素并對其進行干預、控制，對于宮頸癌的治療和預防有著重要意義。眾所周知，宮頸癌的病因是人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染，從HPV感染到發(fā)展為宮頸癌是一個漫長的過程，這為研究者提供了有利的阻斷時機［4］。已有研究證明，MEK在乳腺癌、結(jié)腸癌等中有促進腫瘤細胞增殖的作用［5-6］。然而，關(guān)于MEK在宮頸癌及癌前病變組織中的表達及其臨床意義研究很少，本研究采用免疫組化SP法，分別對正常宮頸、高級別宮頸病變（包括原位癌）及宮頸癌組織中MEK的表達量進行檢測，探討MEK在宮頸癌前病變及宮頸癌中的表達及其臨床意義，為宮頸癌的治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2013年1月—2014年4月在天津市第一中心醫(yī)院婦科診治、臨床病理資料完整的宮頸病變患者共92例，根據(jù)宮頸病變程度，將患者分為正常組（A組，30例）、高級別宮頸上皮內(nèi)瘤樣變（CIN）組（B組，30例）和宮頸癌組（C組，32例）3組。A組中有CINⅠ8例，同時收集因良性病變行子宮切除的正常宮頸組織22例。B組中有CINⅡ～Ⅲ24例、原位癌6例。C組中，宮頸癌32例，包括鱗癌27例，腺癌5例。所有患者在采集標本前未行放、化療。3組患者年齡分別為（45.73±7.56）歲、（43.97±11.56）歲和（48.56±11.98）歲，差異無統(tǒng)計學意義（F=1.491，P=0.231）。

1.2 方法采用免疫組化SP法，將因良性病變行子宮切除術(shù)的正常宮頸組織標本作為陰性對照，3，3-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色后蘇木素復染，中性樹膠封片。用磷酸鹽緩沖溶液（PBS）代替一抗（兔抗人MEK多克隆抗體：北京中杉金橋公司，工作液濃度1∶100）作陰性對照，用已知陽性組織切片作陽性對照［7］。

1.3 觀察指標在100倍光學顯微鏡下隨機抽取8個視野，每個視野觀察100個細胞，計數(shù)陽性細胞，取平均值。將陽性細胞按其染色數(shù)量比例和顯色強度分為4級：陽性細胞數(shù)為0計0分；1%～25%計1分；26%～50%計2分；51%～75%計3分；76%以上計4分；染色強度按無著色計0分、淺黃色計1分、棕黃色計2分、棕褐色計3分；兩項計分相加，計為總分，0～3分為陰性，4～7分為陽性。所有標本由經(jīng)驗豐富的高年資病理醫(yī)師診斷證實。

1.4 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計分析。定性資料用率表示，采用χ2檢驗或Fisher精確概率法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.13 組患者MEK的表達A、B、C組MEK表達陽性率分別為20.0%（6/30）、56.7%（17/30）和68.8% （22/32），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=8.058，P=0.017），其中C組MEK陽性表達率最高，高于B組和A組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2分別為4.444和15.017，P＜0.05），B組MEK陽性表達率高于A組（χ2=8.531，P=0.003）。MEK在宮頸組織細胞質(zhì)中表達，見圖1。

2.2 MEK與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系在32例宮頸癌患者中，MEK陽性表達率與患者年齡、病理類型、腫瘤組織分化程度、腫瘤大小及臨床分期無關(guān)（均P＞0.05），見表1。

表1 宮頸癌患者臨床特征與MEK表達的關(guān)系

3 討論

MEK是絲裂原活化蛋白激酶家族的重要一員，可被多種炎性因子、生長因子和環(huán)境應激反應等激活，導致細胞的增殖［8-9］。MEK分為分子質(zhì)量44 ku和45 ku的MEK1和MEK2兩種類型，在腫瘤細胞生物學中，MEK是絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路中特性了解最為透徹的激酶之一［10］。本研究發(fā)現(xiàn)由正常宮頸組織到宮頸癌組織的變化過程中，MEK表達呈遞增趨勢，宮頸癌組中表達率最高，這說明MEK參與了宮頸腫瘤的發(fā)展。原因可能是宮頸癌的發(fā)生多數(shù)伴有Ras基因突變，然后通過Ras-Raf-MEK-細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）信號轉(zhuǎn)導通路激活MEK，MEK使其下游底物ERK磷酸化而具有活性，將信號傳導至細胞核內(nèi)使細胞的增殖增強，從而促使宮頸細胞進一步向?qū)m頸癌細胞發(fā)展。

有研究表明，在年齡≥50歲、臨床分期較早、病理分級高分化和腫瘤直徑＜5 cm的肝癌患者中MEK-1的表達強于年齡＜50歲、分期較晚、低分化、腫瘤直徑≥5 cm者［11］。但本研究對宮頸癌患者的結(jié)果表明，MEK陽性表達與患者年齡、宮頸癌病理類型、腫瘤組織分化程度、原發(fā)腫瘤大小及宮頸癌臨床分期等因素無關(guān)，這一結(jié)果可能與本研究病例數(shù)較少有關(guān)，需增加樣本量進一步研究。

圖1 MEK在不同宮頸組織中表達（SP法×100）

綜上，MEK可能參與了宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展，通過抑制MEK的活性使Ras-Raf-MEK-ERK信號轉(zhuǎn)導通路受到阻斷，抑制MEK的磷酸化［12-13］，從而可以抑制腫瘤細胞的發(fā)展。目前已有多種MEK抑制劑投入臨床試驗，如有突破將為宮頸癌的治療提供新的思路，為宮頸癌患者帶來希望。

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The Expression and Its Significance of Cell Signal Transduction Pathways MEK in Cervical Precancerous Lesions and Cervical Cancer

FU Min，QU Quan-xin.Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin Occupational Diseases Precaution and Therapeutic Hospital，Tianjin 300011，China（FU Min）；Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin First Center Hospital，Tianjin 300192，China（QU Quan-xin）

FU Min，E-mail:yzxfck@163.com

Objective:To explore the expressssion of mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase（MEK）signaling pathways in cervical precancerous lesions and cervical cancer.Methods:A total of 92 patients with cervical lesions were collected between January 2013 and April 2014 in the department of gynecology of Tianjin First Central Hospital. According to the degree of cervical lesions，the patients were divided into three groups:normal group（30 cases），high level cervical intraepithelial neoplasia（CIN）group（30 cases），cervical cancer group（32 cases）.Using immunohistochemical SP method to detect the MEK expression in different tissues.Results:In normal group，high level CIN group and cervical cancer group，the positive rates of MEK were 20.0%，56.7%，68.8%respectively.MEK positive expression rate is highest in the cervical cancer group，higher than that of the high level CIN group and normal group（P＜0.05）.The difference between the normal group and the high level CIN group was the statistical significant（P=0.003）.MEK positive expression rate had no correlated with patients′age，cervical cancer pathological type，degree of tumor differentiation，tumor size and clinical stage（P＞0.05）. Conclusions:MEK pathway may play a certain role in cervical cancer and precancerous lesion development.

Uterine cervical neoplasms；Precancerous conditions；Mitogen-activated protein kinases；Signal transduction

2015-12-23）

［本文編輯 秦娟］

300011天津市職業(yè)病防治院婦產(chǎn)科（符敏）；天津市第一中心醫(yī)院婦產(chǎn)科（瞿全新）

符敏，E-mail：yzxfck@163.com