銀丹心腦通軟膠囊中大蒜成分的鑒別方法

汪凱莎　李媛媛

(1.安順學院農(nóng)學院，貴州　安順 561000)(2.安順市食品藥品檢驗所，貴州　安順 561000)

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銀丹心腦通軟膠囊中大蒜成分的鑒別方法

汪凱莎1李媛媛2

(1.安順學院農(nóng)學院，貴州安順 561000)(2.安順市食品藥品檢驗所，貴州安順 561000)

銀丹心腦通軟膠囊作為在治療冠心病、腦梗死后遺癥、心絞痛等方面得到廣泛應(yīng)用的一種藥物，其所含大蒜成分的鑒別方法鮮有報道。論文運用氣相色譜法和薄層色譜法分別對銀丹心腦通軟膠囊中大蒜成分進行了分析比較，結(jié)果表明：氣相色譜法分離效果好，靈敏度高，但檢測成本昂貴；薄層色譜法斑點清晰，無干擾，且檢測成本低廉。薄層色譜法簡單可行，檢測效果好，可作為銀丹心腦通軟膠囊中大蒜成分的有效鑒別方法供選擇。

銀丹心腦通軟膠囊；大蒜；氣象色譜；薄層色譜；定性鑒別

銀丹心腦通軟膠囊由銀杏葉、丹參、大蒜、三七等八味藥制成，近年來其在心肌缺血再灌注損傷的保護，在治療冠心病、腦梗死后遺癥、心絞痛等治療方面得到廣泛運用。其制備工藝中大蒜成分的制備是將大蒜提取大蒜油后，與其它原材料混合均勻，壓制，即得[1]。

大蒜成分的制備因方法不相同而使得所得組分有差異，但大蒜素均為其主要成分。大蒜素并非單一物質(zhì)，其由二十多種有機化合物組成，主要有大蒜新素、大蒜辣素等[2]。本文分別采用氣相色譜法和薄層色譜法分別對銀丹心腦通軟膠囊中大蒜成分進行了分析比較并得出了相應(yīng)結(jié)論。

1儀器與試藥

1.1儀器

(1)島津2010-PLUS氣相色譜儀，AOC-5000自動進樣裝置；FID檢測器；GC-solution色譜工作站；

(2)TCQ-250超聲波清洗器(北京醫(yī)療設(shè)備二廠)；

(3)電子分析天平 (FA-2004，上海上平儀器公司)；

(4)超聲波振蕩儀(SK-7200H，上?？茖С晝x器有限公司)；

(5)預(yù)制硅膠G板(青島海洋化工廠分廠)

1.2試藥與樣品

乙酸乙酯(分析純)；正己烷(分析純)； 乙醚(分析純)；

石油醚(60～90℃)(分析純)；大孔樹脂D101(上海希格瑪技術(shù)有限公司)；大蒜油對照品(由貴州百靈制藥有限公司提供，供鑒別使用)，水楊酸甲酯內(nèi)標物(天津市光明精細化工研究所，批號為：20111122)。樣品和陰性樣品均由貴州百靈制藥有限公司提供。

2氣象色譜方法與結(jié)果

對銀丹心腦通軟膠囊中的大蒜成分進行氣相色譜鑒別方法研究?！吨袊幍洹?015年版一部收載了大蒜成分的鑒別方法，筆者參考《中國藥典》2015年版一部大蒜的鑒別及相關(guān)文獻資料，對本品中的大蒜成分進行了鑒別，并對鑒別的方法進行了研究。

2.1色譜條件 色譜柱：島津Rtx-Wax(30meter ，0.32mmID, 0.25um df);柱溫：140℃；進樣口溫度：160℃；檢測器溫度：180℃；分流比：50:1；理論板數(shù)按大蒜成分峰計算應(yīng)不低于4000.1

2.2系統(tǒng)適用性試驗 取大蒜對照品、水楊酸甲酯內(nèi)標物、供試品和缺大蒜油的陰性樣品，用乙酸乙酯配制成相應(yīng)的溶液進行試驗。記錄色譜圖，從圖中可見大蒜成分，水楊酸甲酯的保留時間分別為6.084min，7.608min。陰性空白無干擾，大蒜成分和水楊酸甲酯與相鄰峰分離完全(分離度大于1.5)，即本試驗條件下大蒜成分、水楊酸甲酯與其他組分分離完全。對照品色譜中大蒜成分、水楊酸甲酯峰的理論板數(shù)分別為22545和28453，供試品色譜中大蒜成分、水楊酸甲酯峰的理論板數(shù)分別為19213和24622，故暫定理論板數(shù)以大蒜成分峰計算為不低于4000。

2.3標準溶液的制備精密稱取水楊酸甲酯內(nèi)標物0.7113g，置500ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，制得內(nèi)標物溶液(1.4226mg/ml)。

再準確稱取大蒜油對照品0.05123g(貴州百靈制藥有限公司提供)于25ml量瓶中，加內(nèi)標溶液溶解并稀釋至刻度，制得大蒜油對照品貯備液(1.7469mg/ml)。

2.4樣品溶液的制備：取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，混勻，取約1.0g，準確稱量后置于具塞錐形瓶中，再加入乙酸乙酯內(nèi)標液20ml，密塞，稱重，超聲20分鐘，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補重，搖勻，過濾，取續(xù)濾液用于大蒜成分的鑒別。

2.5實驗結(jié)果供試品溶液主峰的分離度好，供試品溶液主峰的保留時間與大蒜油對照藥材溶液主峰的保留時間一致，陰性無干擾。結(jié)果見圖1至圖3。

圖1　 蒜油(乙酸乙酯)總離子流圖

圖2　大蒜油陰性總離子流圖(乙酸乙酯)

圖3　銀丹心腦通軟膠囊中大蒜總離子流圖

3薄層色譜方法與結(jié)果

3.1供試品溶液的制備：取銀丹心腦通軟膠囊內(nèi)容物1g，用石油醚(60～90℃) 20ml時時振搖提取20分鐘，過濾取濾液，加在已處理好的大孔吸附樹脂D101上，用10ml 石油醚(60～90℃)洗脫，收集相應(yīng)的石油醚洗脫液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯2ml溶解，作為供試品溶液。

3.2大蒜油對照品溶液的制備：另取大蒜油對照品0.1g，加乙酸乙酯100ml制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.3檢查法：照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，取上述兩種溶液3 ul，點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷為展開劑，展開，取出，晾干，并置碘缸中熏至斑點顯色，取出，在日光下檢視。供試品在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。

圖4　大孔吸附樹脂D101除雜比較① 性未除雜供試品溶液；②陽性未除雜供試品溶液；③除雜陰性供試品溶液；④ 除雜供試品溶液；⑤大蒜油對照品溶液；

3.4實驗結(jié)果：未經(jīng)D101大孔樹脂洗脫除雜的陰性供試品有干擾，故為確保檢驗結(jié)果準確，樣品需經(jīng)過大孔樹脂D101洗脫除雜。結(jié)果見圖4。

提取四個不同批號的銀丹腦心通軟膠囊供試品溶液，除雜后點樣，點樣量各3ul、大蒜油對照品溶液，點樣量2ul，點于同一硅膠G板上。對4批銀丹心腦通軟膠囊藥品進行薄層實驗，實驗結(jié)果表明：薄層鑒別方法重現(xiàn)性、穩(wěn)定性均較好,專屬性強,斑點清晰。結(jié)果見圖5。

圖5　不同批號藥品的薄層色譜① 藥品批號20120218；②藥品批號20120219；③藥品批號20120220；④ 藥品批號20120221；⑤大蒜油對照品溶液；

由于銀丹心腦通軟膠囊成分復雜，含有多個活性成分，含量測定與質(zhì)量控制較為困難。本研究參考中國藥典及其他相關(guān)論文，以大蒜油為對照品，對銀丹心腦通軟膠囊中所含的有效成分之一——大蒜成分進行定性分析，結(jié)果顯示，氣相色譜檢測法操作方便，靈敏度高，專屬性強，檢測結(jié)果直觀可見，但檢測設(shè)備需求及耗材費用較高；薄層色譜法各供試品斑點清晰，分離效果較好，重現(xiàn)性和適用性較好，檢測成本低，普通實驗室均可操作，但存在實驗過程復雜的不足。

對兩種方法進行比較，提示兩種方法對大蒜成分的檢測均有較好的專屬性，且無陰性干擾，檢測結(jié)果清晰，分離性及重復性均較好，可根據(jù)實際情況進行選擇。本實驗可對銀丹心腦通軟膠囊的大蒜成分鑒定與質(zhì)控等提供一定指導和參考。

[1]第五秉政,劉彥民,劉敬欣·銀丹心腦通軟膠囊的薄層色譜研究[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2012,5,28(3):77-79.

[2] 趙東升,李新霞,關(guān)明·大蒜藥材的薄層鑒別方法[J].西北藥學雜志，2011,12,26(6):391-394.

[3]中國藥典[S]2015年版，一部：23.

[4]蔣利，孫力，常軍民·大蒜有效部位的薄層鑒別[J].中國藥物與臨床,2012,12(6):768-769.

[5] 鄭屏,盛旋,張祥·天然大蒜油及合成大蒜素的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].分析化學研究簡報，2005,9(33)：1321-1323.

[6]魏寧漪,吳建敏,張啟明·GC-MS法測定大蒜有關(guān)物質(zhì)和穩(wěn)定性研究[J].藥物分析雜質(zhì),2011,31(9):1699-1702.

(責任編輯：王德紅)

Research on Identification Methods of the Garlic in Yindanxinnaotong Capsule

Wang Kaisha1Li Yuanyuan2

(1.Anshun University,Anshun 561000,Guizhou,China)(2.Anshun Institute for Food and Drug Control, Anshun 561000,Guizhou,China)

The identification of medicinal materials used in Yindanxinnaotong capsule in explicit reports to identify, the garlic, the quality control is more effective, the author used gas chromatography and thin layer chromatography method respectively to identify the garlic in Yindan Xinnaotong Capsule. The results show that: gas chromatography separation effect is good, high sensitivity, but the detection cost is expensive; TLC spots were clear, without interference from negative control, and detection cost is low. Conclusion: the established method is reproducible and feasible,and can be provided as effective identification method of garlic in the Yindan Xinnaotong Capsule for selection.

Yindanxinnaotong capsule，garlic，GC，TLC，identification

2016-07-10

1.汪凱莎(1982.10～)，女，貴州安順人，安順學院講師。研究方向：微生物與生化藥學。

H159

A

1673-9507(2016)05-0127-03

2.李媛媛(1990.08～)，女，貴州安順人，安順市食品藥品檢驗所檢驗員。研究方向：藥品檢驗。