rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制研究

付宏亮

（山西省臨汾市醫(yī)院，山西 臨汾 041000）

rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制研究

付宏亮

（山西省臨汾市醫(yī)院，山西 臨汾 041000）

目的 分析rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制。方法 選取健康雌性SD大鼠12只，采用線拴法建立大鼠急性缺血性腦梗死模型（MCAO），分別納入研究組和對(duì)照組，研究組皮下注射rhG-CSF。TTC染色、流式細(xì)胞儀及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)梗死體積、凋亡細(xì)胞、CD34+細(xì)胞及神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白的表達(dá)。結(jié)果 研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對(duì)照組，且Garcia神經(jīng)功能評(píng)分更高，腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細(xì)胞及nestin陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)。結(jié)論 rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機(jī)理可能是rhG-CSF對(duì)缺血神經(jīng)元具有保護(hù)作用，減少細(xì)胞凋亡，并動(dòng)員骨髓干細(xì)胞，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生。

急性缺血性腦梗死；重組人粒細(xì)胞集落刺激因子；CD34+細(xì)胞；nestin陽(yáng)性細(xì)胞

在臨床上，急性缺血性腦梗死非常常見(jiàn)，具有比較高的致殘率和致死率，嚴(yán)重影響著人們的身體健康和生活質(zhì)量，甚至生命安全［1］。隨著急性缺血性腦梗死發(fā)病率的逐年升高，如何提高腦卒中患者的療效、改善其預(yù)后成為臨床不斷研究的重要問(wèn)題之一。近年來(lái)，不斷有研究認(rèn)為人重組粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-CSF）有被應(yīng)用在急性缺血性腦梗死治療中的可能性，且對(duì)于縮小急性缺血性腦梗死患者的梗死面積、恢復(fù)急患者的神經(jīng)功能等具有一定的作用。本研究通過(guò)進(jìn)行分組研究，rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制進(jìn)行研究，以期能夠提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選取健康雌性SD大鼠13只，參照Koizumi等建立的方法建立MCAO模型。將其分別納入研究組和對(duì)照組，各6只。按Garcia等的方法對(duì)大鼠術(shù)后進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，采用TTC染色、流式細(xì)胞儀及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)梗死體積、凋亡細(xì)胞、CD34+細(xì)胞及nestin的表達(dá)。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比（見(jiàn)表1）

表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比（±s）

表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比（±s）

注：#與24 h、48 h的Garcia神經(jīng)功能評(píng)分相比，P＜0.05；△與對(duì)照組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分相比，P＜0.05

組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組69.15±2.199.17±2.0212.66±0.85#△對(duì)照組69.10±2.219.20±2.1111.62±0.45#

2.2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比（見(jiàn)表2）

表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比（±s）

表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比（±s）

注：#與24 h、48 h的腦梗死體積相比，P＜0.05；△與對(duì)照組腦梗死體積相比，P＜0.05

組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組6270.48±27.44△270.65±36.87△98.45±22.45#△對(duì)照組6276.59±30.41274.14±41.25155.21±28.47#

2.3 兩組在急性缺血性腦梗死后神經(jīng)細(xì)胞、新生血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖上的對(duì)比

研究組大鼠的手術(shù)側(cè)腦組織在給藥后24 h有CD34+單個(gè)核細(xì)胞存在，且在給藥后48 h、1 w，所檢測(cè)到的CD34+單個(gè)核細(xì)胞出現(xiàn)浸潤(rùn)且數(shù)量增加趨勢(shì)明顯，而對(duì)照組大鼠未發(fā)生這種情況。

對(duì)照組nestin只在個(gè)別區(qū)域（如室管膜區(qū)、室管膜下區(qū)等）有所表達(dá)，且表達(dá)呈低水平狀態(tài)，呈稀疏排列。表達(dá)nestin的細(xì)胞在腦梗死后24 h稍微有所增加，在腦梗死后48 h持續(xù)增加，在腦梗死后1 w時(shí)達(dá)到最大數(shù)量。研究組nestin陽(yáng)性細(xì)胞1 w時(shí)，在梗死灶周?chē)–D34+細(xì)胞分布區(qū)）檢測(cè)到有一定數(shù)量的存在。所具有的規(guī)律為：表達(dá)nestin的細(xì)胞如果距離梗死灶比較近，則數(shù)量會(huì)比較多，反之，數(shù)量會(huì)比較少。

3 討 論

急性缺血性腦梗死后，自身動(dòng)員和修復(fù)的效率很低，在局部無(wú)法產(chǎn)生顯著性的效果［2-3］。骨髓干細(xì)胞動(dòng)員可以使外周血干細(xì)胞的數(shù)量得以明顯的增加，繼而對(duì)腦組織的自然修復(fù)過(guò)程可以起到良好的促進(jìn)作用。通過(guò)進(jìn)行分組研究，筆者對(duì)rhG-CSF大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)機(jī)制有一定的推測(cè)，即：（1）當(dāng)局灶性腦梗死發(fā)生時(shí)，人重組粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-CSF）對(duì)受損細(xì)胞起到保護(hù)作用，使腦細(xì)胞壞死得以減少，對(duì)神經(jīng)修復(fù)速度起到良好的促進(jìn)作用。（2）作為骨髓干細(xì)胞的強(qiáng)有力動(dòng)員劑，人重組粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-CSF）可以對(duì)骨髓干細(xì)胞起到調(diào)動(dòng)作用，經(jīng)破壞的血腦屏障，到達(dá)腦梗死及其周?chē)@樣可以往神經(jīng)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞分化，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、血管的再生起到促進(jìn)作用，使腦梗死的體積得以縮小，對(duì)腦梗死后神經(jīng)功能的修復(fù)起到良好的促進(jìn)作用。

此外，還有研究認(rèn)為，骨髓干細(xì)胞接受動(dòng)員后，能夠同腦組織彼此發(fā)揮作用，進(jìn)而增加自分泌和旁分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，可以對(duì)受到損傷的神經(jīng)元的再生起到良好的促進(jìn)作用，可以使神經(jīng)元的病理狀態(tài)得以有效的改善，有助于保護(hù)缺血后神經(jīng)損傷，并對(duì)此加以有效的修復(fù)［4-5］。

本次研究中研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對(duì)照組，且Garcia神經(jīng)功能評(píng)分更高，腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細(xì)胞及nestin陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)。

綜上所述，rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機(jī)理可能是rhG-CSF對(duì)缺血神經(jīng)元具有保護(hù)作用，減少細(xì)胞凋亡，并動(dòng)員骨髓干細(xì)胞，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生。

［1］ 程元元，劉瑞珍，任建宏，等.rhG-CSF聯(lián)合胞磷膽堿處理對(duì)大鼠腦缺血再灌注后Bcl-2，Bax的影響［J］.中國(guó)醫(yī)療前沿，2012，（02）:16-17.

［2］ 方 立，王雪晶，荊 婧，等.rhG-CSF對(duì)大鼠缺血缺氧神經(jīng)元巨自噬水平的影響［J］.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2013，（11）:42-46.

［3］ 田 沈，林佳才，張朝東.RhG-CSF對(duì)糖尿病及非糖尿病大鼠缺血性腦卒中預(yù)后及神經(jīng)生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響［J］.華西藥學(xué)雜志，2012，（08）:61-63.

［4］ 鄧文靜，李東瑞，楚廣磊，滕軍放.重組人粒細(xì)胞集落刺激因子對(duì)腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)保護(hù)和血管再生作用［J］.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2015，（08）:15-17.

［5］ 辛國(guó)棟，鮑月寧.重組人粒細(xì)胞集落刺激因子佐治急性腦梗死40例療效觀察［J］.疑難病雜志，2011，（01）:62-64.

本文編輯：吳宏艷

R743.3

B

ISSN.2095-6681.2016.16.121.02

付宏亮（1980-），男，臨汾人，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：腦血管病