兒童患者血培養(yǎng)分離菌的分布與耐藥性

呂春蘭， 劉開琴， 陳瑩瑩， 蘇大林

·論著·

兒童患者血培養(yǎng)分離菌的分布與耐藥性

呂春蘭， 劉開琴， 陳瑩瑩， 蘇大林

目的 了解湖北省襄陽市中醫(yī)醫(yī)院兒童患者血培養(yǎng)分離菌的臨床分布和耐藥狀況，為兒科醫(yī)師診治提供依據(jù)。方法 收集2014年度門診及住院兒科患者血培養(yǎng)的分離菌及藥敏試驗進行回顧性分析。結(jié)果 兒童患者血培養(yǎng)共分離細菌257株，其中以凝固酶陰性葡萄球菌為主，占31.5 %；其次是大腸埃希菌（占18.3 %），肺炎克雷伯菌（占15.2 %），金黃色葡萄球菌（金葡菌，占11.3 %），腸球菌（占9.7 %）等。金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、苯唑西林、頭孢菌素、紅霉素、克林霉素耐藥率相對較高，對利福平、阿米卡星的耐藥率相對較低；腸球菌屬對紅霉素和環(huán)丙沙星耐藥率較高，對青霉素和氨芐西林耐藥率較低。尚未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、替考拉寧或利奈唑胺的革蘭陽性球菌。MRSA的檢出率為27.6 %，MRCNS檢出率為53.1 %。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林、頭孢唑林耐藥率較高，對頭孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦耐藥率較低，ESBL陽性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為31.9 %和23.1 %。結(jié)論 凝固酶陰性葡萄球菌為醫(yī)院兒童患者血培養(yǎng)主要分離菌。應(yīng)加強對兒童患者血培養(yǎng)中的分離菌進行耐藥性監(jiān)測，掌握其耐藥特點以便有效地控制和防止多重耐藥現(xiàn)象的發(fā)生。

血培養(yǎng)； 兒童； 分離菌； 耐藥性

血流感染是嚴重的感染性疾病，致死率達35.1 %［1-2］，由于兒童患者免疫力低下更易造成血流感染。為了解兒童患者血培養(yǎng)陽性分離菌的臨床分布和耐藥狀況，我們對湖北省襄陽市中醫(yī)醫(yī)院2014年1－12月兒童患者血培養(yǎng)陽性的257株分離菌進行回顧性分析?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 來自湖北省襄陽市中醫(yī)醫(yī)院2014年1－12月門診及住院部兒科送檢的血培養(yǎng)2 805份標本中分離出細菌257株（除去復數(shù)株以及皮膚寄殖菌）。血培養(yǎng)陽性率為9.2 %。其中0～3歲218株，4～6歲18株，7～9歲12株，10～12歲9株。

1.1.2 抗菌藥物紙片和培養(yǎng)基 抗菌藥物紙片、哥倫比亞瓊脂及MH瓊脂均購自英國OXOID公司。

1.2 方法

1.2.1 細菌鑒定及藥敏試驗 細菌鑒定嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》常規(guī)方法進行。藥敏試驗采用紙片擴散法，按CLSI 2014年版制定的標準判斷結(jié)果。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、ATCC 35218，金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923，糞腸球菌ATCC 29212，銅綠假單胞菌ATCC 27853，肺炎克雷伯菌ATCC 700603均購自湖北省臨床檢驗中心。

1.2.2 甲氧西林耐藥葡萄球菌檢測 采用CLSI 2014年推薦的頭孢西丁法檢測。

1.2.3 ESBL檢測 采用CLSI推薦的表型確證試驗，即用頭孢噻肟-克拉維酸和頭孢他啶-克拉維酸兩組紙片同時進行檢測并用大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603作質(zhì)控。

1.2.4 統(tǒng)計學處理 實驗數(shù)據(jù)采用WHONET 5.6版本進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 分離菌構(gòu)成

兒童患者血培養(yǎng)以凝固酶陰性葡萄球菌為主，占31.5 %；其次是大腸埃希菌占18.3 %，肺炎克雷伯菌占15.2 %，金葡菌占11.3 %，腸球菌占9.7 %等。結(jié)果見表1。

表1 兒童患者血培養(yǎng)常見分離菌構(gòu)成Table1 Distribution of the bacterial strains isolated from blood in children by species

2.2 MRSA、 MRCNS檢出率

MRSA和MRCNS檢出率分別為27.6 %（8/29）和53.1 %（43/81）。

2.3 ESBL檢出率

ESBL陽性大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別為31.9 %（15/47）和23.1 %（9/39） 。

2.4 革蘭陽性球菌對抗菌藥物耐藥率

兒童患者血培養(yǎng)金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、苯唑西林、頭孢菌素、紅霉素、克林霉素耐藥率相對較高，對利福平、阿米卡星耐藥率相對較低，腸球菌屬對紅霉素、環(huán)丙沙星耐藥率較高，對青霉素、氨芐西林耐藥率較低，尚未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的革蘭陽性球菌。結(jié)果見表2。

2.5 革蘭陰性菌對抗菌藥物耐藥率

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林、頭孢唑林耐藥率較高，對頭孢哌酮-舒巴坦，哌拉西林-他唑巴坦耐藥率較低，結(jié)果見表3。

3 討論

本院兒童患者血培養(yǎng)分離菌以革蘭陽性球菌為主，占54.9 %，革蘭陰性桿菌占45.1 %。主要分離菌的分布依次為凝固酶陰性葡萄球菌，占31.5 %；大腸埃希菌占18.3 %；肺炎克雷伯菌占15.2 %；金葡菌占11.3 %；腸球菌占9.7 %等。未檢出真菌。與成人患者血培養(yǎng)相比［3］少見銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌。

表2 兒童患者血培養(yǎng)革蘭陽性球菌對常用抗菌藥物的敏感率和耐藥率Table2 Susceptibility of the gram-positive cocci isolated from blood in children to commonly used antimicrobial agents

表3 兒童患者血培養(yǎng)革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的敏感率和耐藥率Table3 Susceptibility of the gram-negative bacteria isolated from blood in children to commonly used antimicrobial agents

本次統(tǒng)計中，兒童患者血培養(yǎng)中MRCNS的檢出率（53.1 %）低于劉建華等［4］報道。MRSA的檢出率相對較低，為27.6 %，與文獻報道較為一致［4］。有文獻報道MRCNS最容易通過醫(yī)務(wù)人員的手進行廣泛傳播，因此我們在診療操作過程中，必須嚴格無菌操作，杜絕院內(nèi)交叉感染機會。同時應(yīng)避免濫用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑，加強病房內(nèi)消毒制度，加強醫(yī)護人員手衛(wèi)生規(guī)范，加強醫(yī)務(wù)人員責任意識，督促其定期評估醫(yī)院感染危險態(tài)勢，防止醫(yī)院感染的暴發(fā)和流行［5］

近年來由于抗菌藥物的不合理使用導致細菌耐藥愈來愈嚴重，從本次統(tǒng)計資料來看，兒童患者血培養(yǎng)葡萄球菌對青霉素、紅霉素、克林霉素的耐藥率均較高，說明這些傳統(tǒng)的經(jīng)驗用藥已不再適合治療兒童葡萄球菌血流感染。與成人血培養(yǎng)菌株相比兒童患者中分離菌對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、慶大霉素耐藥率相對較低，這可能與這些藥物對兒童有一定的不良反應(yīng)，在兒童患者中使用較少有關(guān)。目前國內(nèi)在治療葡萄球菌引起的血流感染時首選萬古霉素，而國外已有多例耐萬古霉素金葡菌的報道［6］，因此要嚴格控制臨床萬古霉素的使用，避免抗菌藥物濫用，延緩耐藥性的發(fā)生。兒童患者血培養(yǎng)中屎腸球菌多于糞腸球菌，尚未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和替考拉寧的腸球菌。但國內(nèi)外都已存在兒童患者血培養(yǎng)病例中分離到耐萬古霉素腸球菌的報道，需引起重視［7］。

兒童患者血培養(yǎng)中革蘭陰性桿菌感染主要為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。二者對氨芐西林、頭孢唑林耐藥率較高，對頭孢哌酮-舒巴坦，哌拉西林-他唑巴坦的耐藥率較低。ESBL陽性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為31.9 %和23.1 %.低于陳翠芳［8］等的報道。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)ESBL陽性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌多表現(xiàn)為多重耐藥，因此臨床要加強消毒隔離制度，防止耐藥菌的播散。

本研究中血培養(yǎng)陽性率為9.2 %，較文獻報道血培養(yǎng)陽性率在10 %～15 %［9］為低。要注意把握采血量、采血份數(shù)以及采血時機。對于每一次采樣，建議至少同時做一個需氧瓶與一個厭氧瓶，并在不同時間、不同部位做3次采樣［10］。樣本注入培養(yǎng)瓶后盡快送至實驗室上機培養(yǎng)，樹脂兒童瓶室溫保存的應(yīng)在24 h內(nèi)上機。對營養(yǎng)要求苛刻的微生物可適當延長培養(yǎng)周期，再轉(zhuǎn)種特殊培養(yǎng)基。對血培養(yǎng)陽性但涂片革蘭染色陰性的樣本改用鹽酸乙醇溶液脫色、亞甲蘭溶液復染，可能發(fā)現(xiàn)不常見菌［11］。

總之，兒童患者血培養(yǎng)與成人患者血培養(yǎng)分離菌分布及耐藥性存在一定的差異，加強兒童患者血培養(yǎng)耐藥性監(jiān)測，掌握分離菌分布及耐藥特點，嚴格掌握抗菌藥物的用藥適應(yīng)證，為臨床醫(yī)師合理用藥提供依據(jù)是非常必要的。

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Distribution and antibiotic resistance profile of the bacterial strains isolated from blood of children in a Traditional Chinese Medicine Hospital

Lü Chunlan， LIU Kaiqin， CHEN Yingying， SU Dalin.
（Department of Laboratory Medicine， the Affiliated Hospital of Hubei Traditional Chinese Medicine University， Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital，Xiangyang Hubei 441000， China）

Objective The distribution and antibiotic resistance profle of the strains from blood samples were investigated in the children treated in a Traditional Chinese Medicine Hospital. The fndings was useful for better clinical treatment. Methods The data of blood culture and antimicrobial susceptibility testing in 2014 were collected for pediatric outpatients and inpatients. A retrospective analysis was conducted with the data available. Results A total of 257 strains of bacteria were isolated from children's blood，of which coagulase negative Staphylococcus accounted for 31.5 %， followed by Escherichia coli 18.3 %， Klebsiella pneumoniae 15.2 %， Staphylococcus aureus 11.3 %， and Enterococcus 9.7 %. No fungal isolate was found. The S. aureus and coagulase negative Staphylococcus isolates showed relatively higher resistance rates to penicillin， oxacillin， cephalosporin， erythromycin， and clindamycin， but lower resistance to rifampin and amikacin. The Enterococcus strains were highly resistant to erythromycin and ciprofoxacin， but lower resistance to penicillin and ampicillin. No gram-positive bacterial strains were found resistant to vancomycin，teicoplanin or linezolid. The prevalence of MRSA was 27.6 % in the S. aureus isolates， and 53.1 % of the CNS strains were resistant to methicillin. E. coli and K. pneumoniae strains showed higher resistance rate to ampicillin and cefazolin， but relatively lower resistance to cefoperazone-sulbactam and piperacillin-tazobactam. The prevalence of ESBLs-positive strains was 31.9 % in E. coliand 23.1 % in K. pneumoniae. Conclusions Coagulase negative Staphylococcus is the main bacterial isolates in blood culture in children. We should strengthen the monitoring of antimicrobial resistance of the isolates from blood samples in order to take effective measures to control and prevent theemergence of multidrug resistance.

blood culture； children； bacterial isolate； antimicrobial resistance

R378.11

A

1009-7708 （ 2016） 05-0644-04

10.16718/j.1009-7708.2016.05.021

2015-10-13

2016-03-23

湖北中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院襄陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科； 湖北襄陽 441000。

呂春蘭（1973 —），女，學士，副主任技師，主要從事臨床微生物研究。

劉開琴，E-mail：liukaiqin73@126.com。