對生理學實驗“尿生成的調節(jié)”的幾點看法

楊青

[摘要]尿生成實驗是生理學動物實驗中結果較難控制的實驗，由于家兔和操作者的原因，往往造成實驗失敗。在總結了以往失敗經驗基礎上，通過對實驗觀察項目及操作細節(jié)做了調整后，實驗的成功率顯著提高了，使尿生成實驗能順利開展，同時也增強了學生的自信心。

[關鍵詞]生理學；尿生成；實驗

影響尿生成的因素是生理學中一個重要的實驗，其目的是通過實驗了解影響尿生成的各種因素，加深學生對尿生成調節(jié)機制的理解。但是，尿生成實驗對操作者的熟練程度及家兔本身的適應能力有較高的要求，根據實驗中出現的問題總結的失敗原因主要有這些：家兔個體差異大，家兔常出現少尿、無尿，用計數尿滴數的方法記錄尿量多少不切實際；實驗中反復多次注射耳緣靜脈，學生操作不熟練，家兔耳緣靜脈容易被破壞實驗項目多、耗時長、2個學時的時間往往做不完；針對上述情況，實驗室經過長期教學的實踐，將實驗做了相應調整以提高實驗的成功率。

1 幾種常用家兔尿液收集方法比較

目前收集尿液的方法主要有膀胱插管法、輸尿管插管法、尿道插管法等。輸尿管插管法，因為常導創(chuàng)傷性無尿，現在已經很少使用。尿道插管法對于學生來說，首次操作很難成功，而多次插入會引起尿道血腫而影響尿液的排放。雖然對家兔手術損傷較小，但實際成功率并不是很高，而且該方法要求性別是雄兔，在實際使用時有一定的限制性。本實驗室在多次實驗教學中發(fā)現，膀胱插管手術成功率更高一些，不管學生是否熟練都能操作成功，學生也可以直接看到膀胱和輸尿管的解剖結構，而且做膀胱插管的手術創(chuàng)傷一般情況下家兔都能承受，極少因為膀胱插管而導致創(chuàng)傷性無尿。具體操作方法是：從恥骨聯合向上沿中線作長約4厘米的切口，沿腹白線打開腹腔，將膀胱輕拉到腹壁外，先辨認清楚膀胱和輸尿管的解剖部位，用線結扎膀胱頸部以阻斷它同尿道的通路。用止血鉗提起膀胱前壁（靠近頂端部分），選擇血管較少處，切一縱行小口，插入插管后膀胱即隨著尿液的流出而縮小。如膀胱壁較松馳而膀胱容積仍較大時，可用粗線將膀胱扎掉一部分，使膀胱內的貯尿量減至最少。使插管尿液流出口處低于膀胱水平，用小燒杯盛接由插管流出的尿液，手術完畢后，用溫熱的生理鹽水紗布覆蓋腹部創(chuàng)口。

2 如何減少對家兔耳緣靜脈的損傷

家兔耳緣靜脈的特點是：靜脈沿耳背后緣走行，覆蓋在靜脈皮膚上的毛必須先拔去或剪去，用手指輕彈血管，使兔耳血流增加，并在耳根將耳緣靜脈壓迫，以使其血管怒張。但往往由于學生操作不熟練，出現注射阻力較大或局部腫脹，導致藥物漏出或滲入組織內，使藥物不能充分吸收，達不到用藥的目的。而且，實驗內容要求多次注射，不可避免對血管造成破壞，常常耳緣靜脈堵塞嚴重，使實驗無法進行下去。為了解決這個問題，用下面這個方法就能解決，耳緣靜脈注射采用一次性靜脈輸液器，準備好輸液架，250ml生理鹽水，由于耳朵上有毛不能用膠布固定，可用1-2個動脈夾固定效果較好。給藥時，輸液器本身可以控制開關，而且前端針頭處可斷開給藥，時間長了可以少量注射肝素，防止針頭被血堵住。但要注意的是操作中防止大量空氣進入。

3 尿量的觀察方法

由于手術操作刺激或家兔本身的原因，家兔經常出現少尿或無尿，為了增加家兔的基礎尿量，使實驗效果明顯，可以調整一下實驗項目的順序。

（1）給家兔輸液，增加家兔的基礎尿量，在實驗過程中要嚴格控制輸液滴數，約2滴/10秒，這樣輸入的生理鹽水量不會影響到動脈血壓。注射約15分鐘左右就可見尿液排出，觀察尿液的滴速。

（2）靜脈給藥去甲腎上腺素，如果見尿液滴速慢下來了，說明去甲腎上腺素起作用了。

（3）注射20%葡萄糖溶液5ml，待尿滴速加快時，立即進行尿糖定性實驗或用尿糖試紙檢測，陽性說明有尿糖。

（4）靜脈注射速尿，由于速尿藥效較大，雖然注射葡萄糖時尿滴速有所增加，但速尿的效果更加明顯，尿滴速更快，可以很明顯的觀察到效果。

（5）在時間允許的情況下，讓學生分離頸總動脈，進行動脈插管，根據家兔體重放血20-30ml來降低血壓，觀察尿滴速，分析血壓降低對尿量的影響。

按照上述順序，理論上尿量先增加再減少，實驗中則表現為尿滴速先快后慢，方便學生肉眼觀察。但此方法受家兔個體差異的影響，實驗項目之間等待的時間無法確定，根據多年的經驗大概在15分鐘之內看到變化。

“尿生成的影響因素”是機能學實驗經典實驗項目之一，讓學生掌握家兔的基本手術操作，同時觀察多種因素對家兔尿量的影響并分析機制。在進行了一系列嘗試改革，比如利用靜脈輸液的方法可以減少家兔耳緣靜脈注射的次數，選擇更適宜的手術方式、調整實驗項目順序及對家兔尿滴速比較觀察，極大的提高了手術成功率，增強了學生的自信心，達到一定的教學目的。實驗方法改進以前，六個實驗組2學時最多成功完成一至兩個組，差一點的班級六個組都實驗失敗，改進以后，多數班級六個組均能成功完成，效果明顯。但是，此實驗還存在一些無法解決的問題，如家兔個體差異及健康狀態(tài)也常常會影響實驗的效果，特別對于一些中?；驅？茖W校來說，要獲得標準的試驗用家兔，需要學校經費的支持。其實，在現實實驗教學中，實驗室用家兔都是從市場購買的，個體差異較大。