腸桿菌科細(xì)菌ESBLs和Am pC酶檢測(cè)及耐藥性分析

張丹丹　陸陽(yáng)　馬良

腸桿菌科細(xì)菌ESBLs和Am pC酶檢測(cè)及耐藥性分析

張丹丹陸陽(yáng)馬良

目的 探討腸桿菌科細(xì)菌ESBLs和AmpC酶檢測(cè)及耐藥性。方法 選取300株腸桿菌，AmpC酶、ESBLs表型通過(guò)雙紙片確診試驗(yàn)、雙紙片氯唑西林增效試驗(yàn)予以測(cè)定，觀察300株菌種對(duì)10種抗菌藥物的耐藥性。結(jié)果 300株腸桿菌中檢測(cè)到ESBLs菌158株，AmpC酶菌130株；單產(chǎn)AmpC酶菌對(duì)頭孢曲松、氨曲南、哌拉西林、頭孢噻肟產(chǎn)生的耐藥性明顯低于非產(chǎn)酶菌，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 ESBLs和AmpC酶是造成腸桿菌細(xì)菌產(chǎn)生耐藥的重要原因，可依照實(shí)際藥敏結(jié)果采取合理治療。

腸桿菌；ESBLs；AmpC酶；耐藥性

近些年來(lái)，臨床中越來(lái)越廣泛的使用抗菌藥物對(duì)患者進(jìn)行治療，但是伴隨抗菌藥物的使用率越來(lái)越高，導(dǎo)致其細(xì)菌耐藥性也越來(lái)越強(qiáng)，使得臨床治療及醫(yī)院感染的控制均受到一定的威脅[1］。在臨床中，腸桿菌是比較常見的一種耐藥菌，是進(jìn)行抗感染治療的一個(gè)重點(diǎn)項(xiàng)目。本文選取300株菌株對(duì)腸桿菌科細(xì)菌ESBLs、AmpC酶測(cè)定結(jié)果及其耐藥性予以研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我院2015年3月～2016年3月的患者標(biāo)本培養(yǎng)的300株腸桿菌。

1.2方法

細(xì)菌均通過(guò)VITEK60微生物鑒定儀及配套GNB鑒定卡完全確認(rèn)。ESBLs檢測(cè)采用為雙紙片確診試驗(yàn)（紙片擴(kuò)散法）篩選表型，通過(guò)確證試驗(yàn)后對(duì)其予以測(cè)定，菌株極有可能產(chǎn)生ESBLs：孢噻肟抑菌環(huán)直徑≥27 mm，頭孢他啶抑菌環(huán)直徑≥22 mm，完成確證試驗(yàn)之后，對(duì)比增加克拉維酸藥物、增加克拉維酸抑菌環(huán)，當(dāng)數(shù)值提高＞5 mm表明其產(chǎn)生ESBLs。AmpC酶檢測(cè)的表型篩選方法為雙紙片氯唑西林增效試驗(yàn)（紙片擴(kuò)散法），實(shí)施確證的方法是改良后的Hodge試驗(yàn)。產(chǎn)生AmpC酶：頭孢西丁抑菌圈直徑＜18 mm，通過(guò)確證試驗(yàn)顯示，頭孢西丁抑菌圈數(shù)值＞2 mm表明其產(chǎn)生AmpC酶。統(tǒng)計(jì)兩種檢測(cè)方法所得到的測(cè)定結(jié)果，然后對(duì)其實(shí)施藥檢試驗(yàn)，對(duì)產(chǎn)酶菌與產(chǎn)酶菌的測(cè)定結(jié)果予以對(duì)比研究。通過(guò)紙片擴(kuò)散法對(duì)其實(shí)施藥敏試驗(yàn)，檢測(cè)抗生素藥物的耐藥性，銅綠假單胞菌ATCC27853及大腸埃希菌ATCC25922為質(zhì)控菌。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析，計(jì)數(shù)資料經(jīng)χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料經(jīng)t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1腸桿菌的菌種分布

300株菌種共檢測(cè)到ESBLs菌158株（52.7%），檢測(cè)到AmpC酶菌130株（43.3%）。其中單產(chǎn)ESBLs菌130株（43.3%）、AmpC酶菌104株（34.7%）、不產(chǎn)AmpC酶20株（6.7%）、不產(chǎn)ESBLs菌30株（10%）、產(chǎn)AmpC酶、ESBLs菌16株（5.3%）。

2.2菌種的耐藥性分析

單產(chǎn)AmpC酶菌對(duì)于頭孢曲松、氨曲南、哌拉西林、頭孢噻肟具有較高的耐藥性，與非產(chǎn)酶菌的耐藥性對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高產(chǎn)AmpC酶菌與非產(chǎn)酶菌在4重耐藥率、8重耐藥方面，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），如表1所示。

3　討論

CTX腸桿菌科在我國(guó)臨床中是比較常見的一種病原菌，在使用環(huán)丙沙星、丁胺卡那等藥物進(jìn)行治療時(shí)，往往顯示出中性耐藥性，所以對(duì)其進(jìn)行臨床治療時(shí)，應(yīng)注意保持謹(jǐn)慎狀態(tài)[2-5］；腸桿菌對(duì)于亞胺硫霉素、頭孢吡肟均存在較為顯著的敏感性，所以可進(jìn)行臨床上的推廣應(yīng)用。通過(guò)本文研究可知，300株腸桿菌共檢測(cè)到ESBLs菌158株，AmpC酶菌130株，其中大腸埃希菌、克雷伯菌屬細(xì)菌具有較高的檢測(cè)率。通過(guò)藥敏實(shí)驗(yàn)可知，受檢菌均對(duì)于1～3代頭孢菌素具有較為顯著的耐藥性，其中產(chǎn)AmpC酶和ESBLs菌耐藥性與非產(chǎn)酶要顯著增強(qiáng)，所以在觀察受檢菌產(chǎn)生耐藥性的相關(guān)因素中，產(chǎn)AmpC酶和ESBLs菌具有較為重要的臨床意義。通過(guò)本文的研究可知，對(duì)AmpC酶實(shí)施治療時(shí)可通過(guò)亞胺培南等碳青霉烯類抗菌藥物予以對(duì)應(yīng)治療，或通過(guò)頭孢吡肟等四代頭孢對(duì)單產(chǎn)AmpC酶菌感染予以相應(yīng)的治療，可根據(jù)患者實(shí)際藥敏情況合理選用哌拉西林、頭孢哌酮等抗菌藥物[6-8］。

表1　300株菌種的抗菌藥物耐藥性（%）

總而言之，在臨床中對(duì)患者進(jìn)行抗感染治療時(shí)，需對(duì)AmpC酶、ESBLs等耐藥酶進(jìn)行有效檢測(cè)，使得抗菌藥物的使用更具有合理性，有效預(yù)防耐藥性的產(chǎn)生。

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Detection and Drug Resistance Analysis of ESBLs and Am pC in Intestinal Bacteria

ZHANG Dandan LU Yang MA Liang Department of Clinical Laboratory，The Hospital of Traditional Chinese Medicine of Luohe City， Luohe He'nan 462000， China

Objective To study the enterobacteriaceae bacteria ESBLs and AmpC enzyme detection and drug resistance. Methods Chose 300 strains of intestinal bacilli， AmpC enzyme， ESBLs phenotype by double disc conf rmatory test， observation of 300 strains bacteria resistance of 10 kinds of antim icrobial agents. Results 300 strains of intestinal bacilli detected in ESBLs 158 strains bacteria， AmpC enzyme 130 strains bacteria； The yield of AmpC enzyme bacteria resistance to ceftriaxone， aztreonam， cefotaxime and cefotaxime have signif cantly lower than that of enzyme producing bacteria， the difference was statistically signifcant （P＜0.05）. Conclusion ESBLs and AmpC enzyme is the important cause of bacteria resistance， can be in accordance with the actual drug susceptibility results take reasonable treatment.

Bacteria， ESBLs， AmpC enzyme， Drug resistance

R 446.5

A

1674-9308（2016）25-0175-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.25.108

河南省漯河市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 漯河 462000