熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關(guān)性

趙秋霞　周松偉　王莉

熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關(guān)性

趙秋霞周松偉王莉

目的 探討熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關(guān)性。方法 以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者為研究對象，全部患者均以熒光定量PCR法和ELISA法分別對HBV-DNA和前s1抗原等乙肝免疫學指標進行檢測。結(jié)果 （1）模式1（大三陽患者）HBV陽性符合率93.70%、前s1抗原陽性率81.66%；模式2（小三陽患者）HBV陽性符合率61.76%、前s1抗原陽性率64.71%，兩項指標均占多數(shù)；（2）HBsAg濃度與前s1抗原陽性率呈正相關(guān)。結(jié)論 乙肝免疫學指標與HBV-DNA存在相關(guān)性，兩者聯(lián)合應(yīng)用能提高臨床診斷準確性，乙肝前s1抗原能夠反映HBV復制狀態(tài)與傳染性，可作為HBeAg和HBV-DNA檢測的補充和對照。

乙型肝炎；HBV-DNA；免疫標志物；相關(guān)性

乙型病毒性肝炎是臨床常見肝臟炎性病變[1］。乙肝免疫學指標檢測（乙肝兩對半）是現(xiàn)階段臨床篩查、診療乙肝最常用方法，它能夠反映出機體對乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)，但無法直接表達HBV復制。HBV-DNA監(jiān)測是能夠反映HBV復制活躍度及傳染性的重要方法。有報道指出[2］，HBV-DNA與乙肝免疫學指標間的相關(guān)性對臨床治療乙肝和判斷預后具有重要指導意義，鑒于此，文章現(xiàn)以110例患者為研究對象進行分析和探討，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者為研究對象，全部患者入院時不同程度的伴有惡心、上腹不適等消化道表現(xiàn)及乏力、疲勞、輕度發(fā)熱等全身表現(xiàn)，部分患者黃疸或肝區(qū)疼痛等。經(jīng)診斷，患者病癥均符合文獻標準[3］，臨床判定為乙型病毒性肝炎。其中，男60例，女50例；患者年齡18～72歲，平均年齡（46.3±9.1）歲；急性乙肝53例，慢性乙肝57例；患者病程1～14周，平均病程（6.3±2.7）周。

1.2方法

全部患者均以熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR法）和酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA法）分別對HBV-DNA和乙肝免疫學指標進行檢測，對比分析檢測結(jié)果。乙肝免疫學指標檢測項目：（1）乙肝表面抗原（HBsAg）；（2）乙肝表面抗體（抗-HBs）；（3）乙肝e抗原（HBeAg）；（4）乙肝e抗體（抗-HBe）；（5）乙肝核心抗體（抗-HBc）；（6）乙肝前s1抗原。

表1　110例患者乙肝免疫學指標表現(xiàn)模式

2　結(jié)果

檢查結(jié)果顯示，110例患者分別處于不同乙肝發(fā)病階段，詳見表1。通過PCR檢測HBV-DNA和前s1抗原測定，結(jié)果顯示，模式1（大三陽患者）HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率最高，模式2（小三陽患者）HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率次之，模式6（乙肝恢復期患者）HBV陽性符合率最低，模式5、模式6 前s1抗原陽性率均為0%，詳見表2。

表2　各模式下的PCR檢測結(jié)果 [n（%）］

3　討論

乙肝免疫學指標檢查主要是指對乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體和乙肝核心抗體的檢查，俗稱乙肝五項，主要用來判斷人體是否遭受乙肝病毒感染并粗略估計病毒復制水平，可用于乙肝疾病監(jiān)測和療效動態(tài)觀察[4-5］。本次臨床研究在這五項檢查項目基礎(chǔ)上加入了對乙肝前s1抗原的檢測。肝細胞膜是HBV的主要附著體，前s1蛋白的氨基酸21～47片段是肝細胞受體結(jié)合部位，提示前s1抗原具有高度敏感性和免疫原性，人體含有HBV就會有前s1抗原。有臨床研究證實，前s1抗原是HBV感染后最早出現(xiàn)的血清學標志物，這對于乙肝病毒的早期診斷具有重要參考意義[6］。HBV-DNA即乙肝病毒基因，是HBV感染最直接、特異性強和靈敏性高的指標，可用于鑒別HBV復制及是否具有傳染性。本次臨床研究以熒光定量PCR法對HBV-DNA進行定量檢查，這能夠直觀的幫助臨床掌握機體內(nèi)病毒含量，了解患者病情，指導意義顯著。此次研究結(jié)果顯示，大三陽、小三陽患者HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率均處于較高水平，發(fā)病之初或病情逐漸轉(zhuǎn)復以后，HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率較低，HBsAg濃度與前s1抗原陽性率呈正相關(guān)，與既往文獻研究結(jié)論基本一致[7-8］，提示前s1抗原可作為HBeAg和HBV-DNA檢測的補充和對照，乙肝免疫學指標與HBV-DNA存在相關(guān)性，兩者聯(lián)合應(yīng)用能提高臨床診斷準確性。

[1]黃存敏，李艷艷，梁海輝，等. ELISA法與熒光定量PCR法檢測乙肝病毒相關(guān)性分析[J］.國際病毒學雜志，2015，22（z1）：207-209.

[2]黃靜. 熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學檢測的探討[J］. 中國醫(yī)藥科學，2013，3（6）：110-111.

[3]周玉林，鄭金川，吳旭耀，等. 熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA與乙肝病毒標志物相關(guān)性[J］. 中國農(nóng)村衛(wèi)生事業(yè)管理，2013，33（10）：1191-1192.

[4]龔杰，劉柏林，方艷秋，等. 乙肝病毒外膜大蛋白、前S1抗原、HBV-DNA與血清標志物之間相關(guān)性分析[J］. 中國實驗診斷學，2013，17（9）：1634-1637.

[5]王碧玉，黃燕妮. 乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯(lián)合檢測的臨床意義[J］. 海南醫(yī)學，2016，27（7）：1182-1184.

[6]羅慧琴，王志剛，李玲，等. 乙肝患者血清標志物與前S1抗原及HBV-DNA相關(guān)性分析[J］. 國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，34（24）：3337-3338.

[7]曾繁鈺，蔣冰，譚璐，等. Pre S1抗原與HBV血清學標志物和HBV DNA的相關(guān)性及臨床意義[J］. 武漢大學學報（醫(yī)學版），2014，35（1）：85-88，105.

[8]張蕾，周玉妮，董景云，等. 血清HBV-DNA載量、乙肝免疫學標志物定量與老年慢性乙肝患者肝功能的關(guān)系[J］. 中國老年學雜志，2014，34（13）：3563-3564.

The Correlation Between HBV-DNA and EL ISA Method of Hepatitis B Imm une Index by Fluorescence Quan titative PCR Method

ZHAO Qiuxia ZHOU Songwei WANG Li Department of Clinica l Laboratory， The People's Hospital of Xinghua City， Xinghua Jiangsu 225700， China

Objective To study the correlation between the HBV-DNA and the ELISA method of hepatitis B immune index by fuorescence quantitative PCR method. Methods From January 2014 to December 2015， 110 cases of hepatitis B patients in our hospital were selected as the object of study. A ll the patients were by f uorescence quantitative PCR and ELISA respectively of HBV-DNA， Pre-s1 antigen and HBV immunological markers were detected. Resu lts Pattern 1 （ HBeAg positive patients ） in patients with HBV positive coincidence rate of 93.70%， Pre-s1 antigen positive rate of 81.66%； Pattern 2 （ HBV-DNA patients ） with HBV positive coincidence rate of 61.76% and Pre-s1 antigen positive rate was 64.71%， two indicators are in the majority； II HBsAg concentration is similar to that of Pre-s1 antigen positive rate was positively. Conclusion There was correlation betw een HBV Imm unological Markers and HBV-DNA and com bined application can increase the accuracy of clinical diagnosis and HBV Pre-s1 antigen can ref ect HBV replication and infectivity， as HBeAg and HBVDNA detection and control.

Hepatitis B， HBV-DNA， Immune markers， Correlation

R 446.6

A

1674-9308（2016）25-0045-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.25.026

江蘇省興化市人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 興化 225700