血清抗核抗體譜在梅毒診斷中的臨床研究

楊永軍周建偉孔　翠蔡淑靜

血清抗核抗體譜在梅毒診斷中的臨床研究

楊永軍1周建偉2孔翠2蔡淑靜2

目的： 評價血清抗核抗體譜（ANAs）在梅毒診斷中的臨床意義。方法： 對220例梅毒明膠顆粒凝集試驗（TPPA）陽性者和220例TPPA陰性的健康體檢者采用免疫印跡法檢測ANAs。結(jié)果：

梅毒抗體； 抗核抗體譜； 明膠顆粒凝集試驗； 甲苯胺紅不加熱血清試驗

梅毒是由梅毒螺旋體（TP）感染所致的一種慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病，可通過血液、胎盤及性傳播。TP可侵犯皮膚黏膜、眼、骨骼、神經(jīng)等全身多個器官，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，嚴(yán)重威脅人們的健康。目前，TP的致病機(jī)制尚不完全清楚。近年來，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)TP的致病可能與誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生自身抗體有關(guān)［1，2］。本研究通過檢測梅毒患者的抗核抗體譜（ANAs）水平，初步探討對該人群進(jìn)行自身抗體檢測的臨床意義。

1　對象與方法

1.1對象 選擇2014年1月至2015年12月在本院就診或住院的220例明膠顆粒凝集試驗（TPPA）檢測梅毒抗體陽性者為研究對象，其中男164例，女56例，年齡26～72歲，平均（44±12）歲。另從本院體檢中心選擇220例健康體檢者作為對照，其中男160例，女60例，年齡23～68歲，平均（50±9）歲。TPPA法檢測梅毒抗體為陰性。所有參與者均排除乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病病毒等病原體感染，無腫瘤性疾病及6個月內(nèi)未服用免疫抑制或增強(qiáng)藥物。

1.2儀器與試劑 TPPA試劑盒購自MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司；甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）試劑盒購自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；ANAs試劑盒購于蘇州浩歐博生物醫(yī)藥有限公司；Blotrary-866自動蛋白印跡儀購自深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司。

1.3方法 抽取研究組和對照組靜脈血2 mL分離血清后，吸取15 μL以Blotrary-866自動蛋白印跡儀檢測ANAs。同時，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行TRUST試驗。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件，采用χ2檢驗對計數(shù)資料進(jìn)行統(tǒng)計分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

220例TPPA陽性患者中，24例呈SSA陽性，陽性率10.9%；37例Ro-52陽性（16.8%），8例DsDNA陽性（4.0%），16例PCNA陽性（7.2%），7例Po陽性（3.2%），17例 SSB陽性（7.7%）。健康體檢者中，SSA、Ro-52、DsDNA、PCNA、Po、SSB的陽性率分別為2.3%、4.1%、0.9%、2.7%、0%和0.9%（表1）。6組數(shù)據(jù)相比，TPPA陽性患者的陽性率顯著高于健康體檢者（P＜0.01）。

表1　梅毒感染者與健康體檢者ANAs檢測結(jié)果比較

在研究組，TRUST試驗陽性者為32例。TRUST陽性患者ANAs結(jié)果與陰性患者相比，各抗核抗體陽性率無顯著差異（P＞0.05）（圖1）。女性SSA、Ro-52和SSB的陽性率明顯高于男（P＜0.05）（圖2）。45歲以下者ANAs陽性率較低，46～55歲、56～65歲和66～75歲年齡段陽性率有逐漸增高的趨勢（圖3）。

3　討論

體液免疫和細(xì)胞免疫兩方面的研究顯示，TP感染后對機(jī)體帶來免疫損傷［3，4］。目前這種免疫損傷機(jī)制尚不明確。有報道認(rèn)為，TP可以誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生自身免疫應(yīng)答，從而造成免疫損傷。這種自身免疫應(yīng)答的機(jī)制可能是機(jī)體在TP刺激下器官組織損傷，釋放自身免疫原性成分，從而產(chǎn)生自身抗體［5，6］。本研究通過檢測TPPA陽性者血清中的ANAs，探討TP感染后自身免疫發(fā)生的機(jī)制。結(jié)果顯示，研究組血清中SSA、Ro-52、DsDNA、PCNA、Po、SSB等多種抗核抗體陽性率明顯高于健康對照。這與文獻(xiàn)報道的梅毒感染者抗核抗體（ANA）陽性率高于正常人的報道基本一致［1，2］。這些研究結(jié)果均表明梅毒感染者產(chǎn)生自身抗體的概率顯著高于健康對照，從而提示梅毒感染后可能更容易罹患自身免疫相關(guān)疾?。?］。

圖1　研究組TRUST試驗陽性與陰性者ANAs陽性率比較

圖2　研究組不同性別ANAs陽性率比較

圖3　研究組不同年齡段四種抗核抗體陽性率比較

TRUST是一個檢測梅毒感染的非特異性指標(biāo)，主要用于病毒感染分期和療效觀察。本實驗中，將TRUST陽性患者ANAs結(jié)果與陰性患者比較，發(fā)現(xiàn)各抗核抗體陽性率無顯著差異。這表明TRUST結(jié)果與自身抗體的產(chǎn)生沒有相關(guān)性。分析原因可能在于梅毒患者自身免疫免疫應(yīng)答是一個慢性過程，是在梅毒持續(xù)刺激作用下發(fā)生的，而TRUST主要用于檢測早期和二期梅毒，故其陽性結(jié)果與自身抗體的產(chǎn)生并未有直接的相關(guān)關(guān)系。這提示ANAs的檢測可能對診斷梅毒的意義不大。但在封建凱等［8］的研究中，TRUST陽性的梅毒患者抗核抗體的陽性率顯著高于陰性感染者。這種差異可能是ANA與ANAs檢測的原理與方法學(xué)不同造成的［9］。據(jù)此，我們建議ANA和ANAs的聯(lián)合檢測可能對梅毒的診斷作用評價更客觀。

從性別的角度進(jìn)行分析，感染梅毒后女性SSA、Ro-52和SSB的陽性率明顯高于男性患者。這說明在TP的作用下，女性可能更易于發(fā)生自身免疫病。另外，本研究還從年齡的角度進(jìn)行分析，觀察年齡因素可能在梅毒感染者自身抗體產(chǎn)生中的影響。發(fā)現(xiàn)45歲以下的梅毒感染者ANAs陽性率較低，隨著年齡的增長陽性率有逐漸增高的趨勢。這與前期研究的老年梅毒感染者ANA的陽性率較高相一致［10］。進(jìn)一步提示隨著年齡的增長，機(jī)體越發(fā)存在免疫功能紊亂，在TP的作用下，機(jī)體更易產(chǎn)生一些治療性抗體、嗜異性抗體、甲胎蛋白等非特異成分，加重自身免疫反應(yīng)［11，12］。

總之，梅毒感染者血清ANAs陽性率明顯高于健康人群。該陽性率可能與性別和年齡相關(guān)，女性和老年梅毒患者更可能并發(fā)自身免疫病。檢測ANAs有利于評估和防治梅毒感染患者免疫損傷，減少自身免疫病的發(fā)生，但對梅毒的臨床診斷參考意義不大。

［1］伍尚華，周華強(qiáng)，邱小軍，等.抗心磷脂抗體與自身抗體在梅毒人群的表現(xiàn)［J］.中國醫(yī)療前沿，2013，8（4）:82-83.

［2］朱浩穩(wěn)，周衛(wèi)民，郭琪，等.500例梅毒患者血清抗核抗體和抗心磷脂抗體檢測結(jié)果分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（8）:2410-2411.

［3］劉雙全，汪世平，吳移謀，等.梅毒螺旋體Tp0751重組蛋白有道人單核細(xì)胞表達(dá)前驗證細(xì)胞因子的研究［J］.中國科學(xué):生命科學(xué)，2010，40:48-54.

［4］Brinkman MB，Mc Gill MA，Pttersson J，et al.A novel Treponeuma palllidum antigen，TP0316，is an outer membrane protein that binds human fibronectin［J］.Infect Immun，2008，76（5）:1848-1857.

［5］張海萍，任榮鑫，賴迪輝，等.梅毒診斷中抗心磷脂抗體的分析和應(yīng)用［J］.中國皮膚性病學(xué)雜志，2013，27（5）:482-484.

［6］馬蔡昀，凌蕓，夏文穎，等.梅毒感染者血清抗心磷脂抗體分析［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（17）:2150-2151.

［7］徐龍珍，畢永春.不同梅毒血清學(xué)檢測方法的聯(lián)合應(yīng)用評價［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2009，24（3）:111-112.

［8］封建凱，馬端葉，姜正德，等.梅毒患者血清抗核抗體的檢測及意義［J］.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（33）:5-6.

［9］Lee SA，Kahng J，Kin Y，et al.Comparative study of immunofluorescent antinuclear antibody test and line immunoassay detecting 14 specific autoantibodies in patients with systemic rheumatic disease［J］.J Clin Lab Anal，2012，26（4）:307.

［10］蔡淑靜，周建偉，楊永軍，等.老年梅毒感染患者血清抗核抗體檢測的臨床意義［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2016，26（1）:64-65.

［11］Auqenbraun M，F(xiàn)rench A，Glesby M，et al.Hepatitis C virus infection and biological false positive syphilis tests［J］. Sex Transm Infect，2010，86（2）:97-98.

［12］門昆，魏殿軍，李立艷，等.天津地區(qū)286名健康老干部抗核抗體及ENA抗體檢測結(jié)果分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014，24（1）:114-116.

（收稿:2016-04-26 修回:2016-05-06）

Clinical research of serum antinuclear antibody spectrum in the diagnosis of syphilis

YANG Yongjun1，ZHOU Jianwei2，KONG Cui2，CAI Shujing2.
1.Jining City Hospital for Prevention and Treatment of Skin Disease，Shandong 272000，China；2.Affiliated Hospital of Jining Medical University，Shandong 272000，China Corresponding author:ZHOU Jianwei，E-mail:jyfyjyk@cntv.cn

Objective:To assess the clinical significance of antinuclear antibody spectrum（ANAs）in the diagnosis of syphilis.Methods:Serum ANAs were detected among 220 patients with positive treponema palladium particle assay（TPPA）and 200 healthy persons with negative TPPA.Results:Among the patients with positive TPPA SSA was positive in 24 patients（10.9%）；The positive rates of Ro-52，DsDNA，PCNA，Po and SSB were 16.8%，4.0%，7.2%，3.2%and 7.7%，respectively.All the antibodies of ANAs were significantly higher in the patients with positive TPPA than in the healthy controls（P＜0.01）.There was no significant difference（P＞0.05）in the positivity of ANAs among the patients with positive TRUST and among the patients with negative TRUST.The positive rates of SSA，Ro-52 and SSB were higher in females than in males.The positive rates among those younger than 45 years were relatively low，and increased with age among those older than 45 years.Conclusion:Syphilis infection may increase the risk of autoimmune diseases.ANAs detection may be useful to evaluate the risk of autoimmune disease among the patients with syphilis infection，although there is no diagnostic significance.

syphilis antibody；antinuclear antibody spectrum；treponema pallidium particle assay；toluidine red unheated serum test

山東省濟(jì)寧市科技局科技發(fā)展計劃項目（編號:2014jnjc12）濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院“苗圃”科研計劃項目（編號:JYFYMP-2013-09）

1濟(jì)寧市皮膚病防治院，山東濟(jì)寧，272000

2濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濟(jì)寧，272000

周建偉，E-mail:jyfyjyk@cntv.cn

220例TPPA陽性者中，SSA陽性24例（10.9%）；Ro-52陽性37例（16.8%）；DsDNA陽性8例（4.0%）；PCNA陽性16例（7.2%）；Po陽性7例（3.2%）；SSB陽性17例（7.7%）。所有ANAs陽性率顯著高于健康對照組（P＜0.01）。TRUST陽性與陰性患者相比，ANAs陽性率無顯著差異（P＞0.05）。女性的SSA、Ro-52和SSB的陽性率明顯高于男性（P＜0.05）。45歲以下TPPA陽性者ANAs陽性率較低，46～75歲TPPA陽性者ANAs陽性率有逐漸增高的趨勢。結(jié)論： 感染梅毒可能增加自身免疫病的風(fēng)險，檢測ANAs有利于評估和防治梅毒感染患者免疫損傷，減少自身免疫病的發(fā)生，但對梅毒的臨床診斷參考意義不大。