中獸藥藥材及粉散制劑的顯微鑒別方法

趙智燦

[中圖分類號]S85 [文獻標識碼]A [文章編號]1003-1650（2016）02-0263-01

中獸藥藥材指的是中藥藥材和飲片。中獸藥粉散劑指的是中藥藥材或飲片經(jīng)粉碎研磨后制成的中藥成方粉散劑和中藥成方超微粉。中獸藥顯微鑒別法指的是利用顯微鏡對中藥藥材、粉末及粉末制劑中藥材的組織、細胞或內(nèi)含物等特征進行鑒別的方法。由于是利用顯微鏡對藥材進行觀察鑒別，所以該方法稱為“顯微鑒別法”。顯微鑒別法是目前《中華人民共和國獸藥典》中中獸藥藥材和中成藥鑒別的主要方法，通過觀察藥材和成方制劑中各藥材特異的組織結構，既可以檢測成方制劑中的所列的所有組分，還可以檢測出制劑中未包含的成分，如添加成方組分外的其他中藥或添加化藥，是中獸藥進行定性判定真假獸藥的主要鑒別方法之一。

藥材經(jīng)過初加工后，原有的外表特征將發(fā)生變化，特別是粉散劑和片劑，這些經(jīng)過藥材經(jīng)過粉碎和研磨后，肉眼很難進行辨別和鑒定。所以在進行顯微鑒別時，就要經(jīng)供試的藥物進行處理，制成適用于顯微鏡鏡檢的切片進行觀察。根據(jù)供試藥材的不同，其制片方法也不一樣，最常用的主要有原藥材的切片顯微鑒別和粉散劑的粉末顯微鑒別。

1.藥材顯微鑒別法

切藥材顯微鑒別法是將藥材的某一部位制成各種切面的切片，通過觀察各種切片中藥材的組織結構對藥材進行鑒別，該方法主要適用于完整藥材的鑒別。

1.1藥材的預處理

首先要對藥材進行清洗，除去藥材表面的泥沙和灰塵，然后選擇藥材欲觀察的部位，將欲觀察的部位切成大小適當?shù)膲K或斷，以長3厘米和寬1厘米為宜。切成的塊或者段切面要平整。在進行切塊或切段時要根據(jù)藥材的質地進行切片，軟硬適中的藥材可以直接進行切塊；對于質地堅硬的要將其軟化后切塊；質地過于柔軟的藥材，可將其浸入乙醇中進行浸泡，待其變硬后進行切片。對于葉子類藥材可用通草或向日葵的莖髓作為夾持物進行切片。

1.2制片方法

藥材的制片方法主要有手工切片和機器切片兩種，即徒手切片和滑走切片機切片。徒手切片是檢驗工作中最常見的切片制片方法，該方法操作簡便、制片迅速，制成的切片可保持其細胞內(nèi)含物的固有形態(tài)，便于進行各種化學反應顯微觀察。徒手切片可以直接有手固定藥材進行切片，也可利用相應的夾持物固定住藥物，利用手持刀片或切片機進行切片?；咔衅瑱C切片時要對切片機進行調(diào)試，直至能切出所需要的切片。在進行切片操作時，為了防止切片粘在刀片上，可在藥材的切面和刀刃之間加水和乙醇使其保持濕潤。切好的切片用毛筆蘸水輕輕從刀片上推入盛有水或50%乙醇的培養(yǎng)皿中。

1.3裝片和觀察

選取制備好的切片置于載玻片上，根據(jù)不同的觀察對象，滴加合適的試液1～2滴，蓋上蓋破片，即可在顯微鏡下觀察。必要時滴加水合氯醛試液進行透化處理后蓋上蓋玻片進行鏡檢。進行透化處理時，將切片放在載玻片上，滴加1～2滴水合氯醛試液，在酒精燈上進行加熱，待邊緣起泡后停止加熱，然后補加水合氯醛試液適量繼續(xù)加熱，直至透化完全為止。透化后放冷，加甘油乙醇試液1-2滴后加封蓋片，貼上標簽。將制備好的切片在顯微鏡下觀察。

2.粉末顯微鑒別法

粉末顯微鑒別法主要用于粉末狀的藥材及中成藥散劑或中藥超微粉的顯微鑒別。藥材要制成粉末后進行鏡檢，中藥成方粉散劑可直接取樣制片后進行鏡檢觀察。

2.1藥材粉末的制備

采用粉末制片觀察藥材時，要對供試藥材進行干燥處理，然后磨或者銼成粉末。粉末制備時，注意取樣的代表性，應注意各部位的全面性，例如：根要切取根頭、根中段及根尾燈部位，必須全部磨成粉，不得丟棄渣頭。并需通過4號篩，混合均勻。干燥時，一般溫度不能超過60℃，避免經(jīng)受高溫，使淀粉糊化，難以觀察其完整性。

2.2制片和觀察

在制片前要將供試粉末藥物進行充分混勻，保證取樣具有代表性，用微量取樣勺挑取供試品的粉末少許，置于載玻片中央偏右的位置，滴加甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他適宜的試液1～2滴，用細玻璃棒充分攪拌，使試液和粉末完全混合。用左手食指與拇指夾持蓋玻片的邊緣，使其左側與藥液層左側接觸，再用右手持小鑷子或解剖針托住蓋玻片的右側輕輕往下放，則液體逐漸擴開充滿蓋玻片下方。如水合氯醛試液少，未能充滿蓋玻片時，為防止氣泡的產(chǎn)生，可以從邊緣的空隙滴加試液。如試液較多，可以用吸水紙吸去多余的試液。必要時可滴加水合氯醛試液進行透化處理后蓋上蓋玻片進行鏡檢。透化方法同藥材制片透化方法。透化后放冷，加甘油乙醇試液1-2滴后加封蓋片，貼上標簽。將制備好的切片在顯微鏡下觀察。

3.鑒別結果判定

在對藥物進行顯微鑒別判定時，一定要按照《中華人民共和國獸藥典》中有關各藥材和中成藥的顯微鑒別規(guī)定進行顯微鑒別。將觀察到的組織結構和獸藥典中規(guī)定的要求進行比較，如符合判定為符合規(guī)定，否則為不符合規(guī)定。為了提高顯微鑒別的正確性，可將供試藥物的中藥對照藥材或已經(jīng)鑒定品種的中藥材進行對照比較，或者參照《中華人民共和國獸藥典中藥顯微鑒別和薄層色譜彩色圖集》中收錄的圖片進行對照比較。