大腸息肉中MGMT、XRCC1的表達(dá)及臨床意義

安艷春， 趙　佳, 董久興， 陳海濱

(1.中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院， 河北 廊坊　065099； 2.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院， 河北 邯鄲　056002)

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大腸息肉中MGMT、XRCC1的表達(dá)及臨床意義

安艷春1， 趙佳1, 董久興1， 陳海濱2

(1.中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院， 河北 廊坊065099； 2.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院， 河北 邯鄲056002)

目的： 觀察MGMT、XRCC1蛋白在大腸息肉中的表達(dá)。方法： 采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)MGMT、XRCC1蛋白在45例大腸增生性息肉組織、50例大腸腺瘤性息肉組織及30例正常大腸黏膜組織中的表達(dá)，探討B(tài)RCA1、BRCA2蛋白表達(dá)與大腸腺瘤性息肉患者的性別、年齡，息肉部位、直徑及是否有蒂的關(guān)系，分析MGMT、XRCC1蛋白在腺瘤性息肉組織中表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果： MGMT、XRCC1蛋白在正常大腸黏膜、大腸增生性息肉以及大腸腺瘤性息肉組織中的表達(dá)依次增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在大腸腺瘤性息肉組織中MGMT、XRCC1蛋白的表達(dá)與息肉的大小及是否有蒂有關(guān)(P<0.05)，與患者的性別、年齡及直徑無關(guān)(P>0.05)；MGMT、XRCC1蛋白在腺瘤性息肉組織中表達(dá)呈正相關(guān)(r=7.356，P<0.05)。結(jié)論： BRCA1、BRCA2蛋白的表達(dá)與大腸腺瘤性息肉有關(guān)。

大腸，腺瘤性息肉； 增生； MGMT蛋白； XRCC1蛋白； 免疫組織化學(xué)

[Abstract]Objective: To observe the expression of MGMT, XRCC1 protein in colorectal polyps. Methods: Immunohistochemical SP was adopted to detect the expression of MGMT, XRCC1 protein in 45 cases of colorectal hyperplastic polyps, 50 cases of colorectal adenomatous polyps and 30 cases of normal colorectal mucosa. The relationship between BRCA1, BRCA2 protein expression and sex, age, polyp location, diameter and the pedicle of colorectal adenomas in patients with colorectal adenoma was explored, and the correlation of MGMT and XRCC1 protein expression in the tissues of the polyps was analyzed. Results: The expression of XRCC1, MGMT protein were increased in turn in normal colorectal mucosa, colorectal hyperplastic polyps and colorectal adenoma tissues, and the difference was statistically significant (P<0.05). The expression of XRCC1 and MGMT protein was related to the size of the polyp and whether there is pedicle or not (P<0.05), but not related to the gender, age and diameter of colorectal polyps (P<0.05). XRCC1, MGMT protein expression was positively correlated with the expression of in the tissues of the adenomatous polyps (r=7.356,P<0.05).Conclusion： BRCA1, the expression of BRCA2 protein is related to the colorectal adenoma polyps.

[Key words]colorectal,hyperplastic polyps; hyperplasia; MGMT protein; XRCC1 protein; immunohistochemistry

大腸癌(colorectal cancer，CRC)是常見惡性腫瘤之一，其治療仍以手術(shù)為主[1]。CRC患者的生存率與腫瘤分期密切相關(guān)，早期CRC術(shù)后5年生存率超過90%，但多數(shù)患者確診時(shí)已處于進(jìn)展期，術(shù)后效果并不理想[2]。大腸腺瘤性息肉是CRC的癌前病變期，CRC的病理類型以腺癌最為多見，主要由腺瘤惡變而來，有學(xué)者認(rèn)為CRC是由多種癌基因與抑癌基因相互作用的結(jié)果[3]。MGMT、XRCC1基因均為交叉修復(fù)基因，在DNA損傷修復(fù)、基因轉(zhuǎn)錄激活、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮著重要作用[4-5]。本文通過觀察大腸息肉中MGMT、XRCC1蛋白的表達(dá)及其與病理特征的關(guān)系，分析MGMT、XRCC1蛋白在CRC預(yù)防和診斷中的作用。

1　材料和方法

1.1標(biāo)本來源

選擇2013年1月～2014年10月收治的大腸息肉患者95例，在電子結(jié)腸鏡下切除大腸息肉，切除的組織標(biāo)本病理學(xué)檢查，大腸增生性息肉45例，大腸腺瘤性息肉50例；另取30例大腸外傷患者的正常黏膜組織作為對(duì)照。

1.2方法

1.2.1免疫組化學(xué)染色所有標(biāo)本均采用免疫組化SP法對(duì)進(jìn)行MGMT、XRCC1染色，MGMT、XRCC1單克隆抗體,DAB試劑等均購(gòu)于北京邁新公司，所有操作按試劑說明進(jìn)行。

1.2.2結(jié)果判定MGMT、XRCC1的陽(yáng)性染色結(jié)果為細(xì)胞核內(nèi)呈棕黃色顆粒，隨機(jī)選擇5個(gè)400倍

視野，觀察200個(gè)細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10%為陰性表達(dá)，>10%為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，MGMT、XRCC1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率用百分比表示，數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1MGMT、XRCC1蛋白表達(dá)

MGMT、XRCC1蛋白在正常大腸黏膜、大腸增生性息肉以及大腸腺瘤性息肉組織中的表達(dá)依次增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1和圖1。

表1　3種大腸組織中MGMT及XRCC1表達(dá)

圖1　MGMT及XRCC1蛋白在3種大腸組織中的表達(dá)(SP，×400)Fig.1　MGMT and XRCC1expression in three kinds of colorectal tissue

2.2MGMT、XRCC1蛋白的表達(dá)與大腸腺瘤性息肉病理特征的關(guān)系

大腸腺瘤性息肉組織中MGMT蛋白、XRCC1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與息肉直徑、有無蒂有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與年齡、性別、發(fā)病部位無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3大腸腺瘤性息肉組織中MGMT及XRCC1表達(dá)的相關(guān)性

MGMT、XRCC1蛋白在腺瘤性息肉組織中表達(dá)呈正相關(guān)(r=7.356，P<0.05)。

表2　MGMT、XRCC1的表達(dá)與大腸腺瘤性息肉病理特征的關(guān)系

3　討論

MGMT、XRCC1基因均為抑癌基因，其編碼的蛋白均可與其它腫瘤抑制因子和信號(hào)傳感因子等組成復(fù)合物，在基因轉(zhuǎn)錄、DNA損傷修復(fù)及重組中扮演重要作用。XRCC1基因和MGMT同屬DNA損傷修復(fù)基因，其編碼的蛋白能切除損傷的堿基達(dá)到修復(fù)受損DNA的作用，XRCC1與肺癌、食管癌、胃癌、前列腺癌等發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)[7]。MGMT基因定位于人類染色體10q26,全長(zhǎng)170 kb，由5個(gè)外顯子，4個(gè)內(nèi)含子組成，MGMT序列有相對(duì)穩(wěn)定性特征，從結(jié)腸桿菌到哺乳動(dòng)物均含有結(jié)構(gòu)一致的 “異亮氨酸-脯氨酸-半胱氨酸-組氨酸-精氨酸”活性序列，活性位點(diǎn)位于145半胱氨酸殘基上[8]。大腸癌相關(guān)基因受損傷后，MGMT、XRCC1蛋白及其他分子共同感應(yīng)受損DNA，并將受損信號(hào)傳給下游基因，使受損DNA進(jìn)行修復(fù)[9]。結(jié)直腸增生性息肉-結(jié)直腸腺瘤性息肉-結(jié)直腸癌是大腸癌發(fā)生的一種重要途徑，約一半以上大腸癌由結(jié)直腸息肉發(fā)展而來[10]。

本研究通過觀察95例大腸息肉患者組織中MGMT、XRCC1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)，發(fā)現(xiàn)兩種蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別隨著大腸病變惡性度的增加呈遞增趨勢(shì)，二者的高表達(dá)與大腸腺瘤性息肉的大小及有蒂無蒂有關(guān)?？梢姸唠S著大腸息肉的惡性度升高而呈遞增趨勢(shì)，提示大腸正常組織MGMT、XRCC1基因表達(dá)很低，但當(dāng)基因損傷而發(fā)生結(jié)直腸息肉后，機(jī)體啟動(dòng)基因修復(fù)系統(tǒng)，使MGMT、XRCC1表達(dá)升高，當(dāng)結(jié)直腸增生性息肉繼續(xù)發(fā)展為腺瘤性息肉時(shí)，此2種基因代償性表達(dá)升高。進(jìn)一步證實(shí)在大腸息肉的發(fā)生、發(fā)展過程中基因修復(fù)通路激活，可導(dǎo)致MGMT、XRCC1蛋白的表達(dá)增加。

綜上所述，MGMT、XRCC1蛋白隨著大腸息肉的惡性程度增加而表達(dá)增高，說明與CRC關(guān)系密切，二者可能通過對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行調(diào)節(jié)，修復(fù)受損DNA、穩(wěn)定染色質(zhì)、基因轉(zhuǎn)錄的激活等影響CRC的發(fā)生、發(fā)展，但有待進(jìn)一步證實(shí)。

[1]Zhao P，Dai M，Chen W，et al. Cancer trends in China[J]．Jpn J Clin Oncol， 2010 (4)：281-285．

[2]汪露,江濱.大腸癌篩查方法研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2014(5):236-239.

[3]韓英,李世榮,盛劍秋.開展大腸腫瘤“伺機(jī)性篩查”提高早診早治水平 [J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志， 2010(7)：581-583.

[4]Vollebergh MA,Jonkers J,Linn SC.Genomic instability in breast and ovarian cancers:translation into clinical predictive biomarkers[J].Cell Mol Life Sci, 2012 (2):223-245.

[5]Roy R,Chun J,Powell SN.BRCA1 and BRCA2:different rolesin a common pathway of genome protection[J].Nat Rev Cancer, 2012 (1):68-78.

[6]Win AK，Young JP，Lindor NM，et al．Colorectal and other cancer risks for carriers and noncarriers from families with a DNA mismatch re-pair gene mutation: a prospective cohort study[J]．J Clin Oncol， 2012 (9):958-964．

[7]侯立朝，王海久，樊海寧，等．胃腸減壓在擇期結(jié)直腸癌術(shù)后有效性和安全性的 Meta 分析[J]．中國(guó)全科醫(yī)學(xué)， 2012(6):2071．

[8]Lin CC,Lai YL,Lin TC,et al.Clinicopathologic features and prognostic analysis of MSI-high colon cancer[J].Int J Colorectal Dis, 2012 (3): 277-286.

[9]楊靖,石新麗,李莎, 等.DNA損傷的同源重組修復(fù)機(jī)制[J].西部醫(yī)學(xué), 2013(10):1586-1589.

[10]杜桂清.結(jié)腸息肉278例臨床病理分析[J].貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2010(2):188-189.

(2016-02-02收稿，2016-07-01修回)

中文編輯： 吳昌學(xué)； 英文編輯： 劉華

Expression of MGMT, XRCC1 in Colorectal Polyps and Clinical Significance

AN Yanchun1,ZHAO Jia1, DONG Jiuxing1, CHEN Haibin2

(1.CentralHospitalofChinaNationalPetroleumLorporation,Langfang065099,Hebei,China;2.AiffiliatedHospitalofHebeiUniversityofEngineering,Handan056002,Hebei,China)

R735.34

A

1000-2707(2016)08-0984-03

10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.08.030

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-08-23網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160823.1343.028.html