流水線系統(tǒng)中全自動(dòng)生化分析儀的比對(duì)研究

程余恒

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院/四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，成都 610072)

?

·論著·

流水線系統(tǒng)中全自動(dòng)生化分析儀的比對(duì)研究

程余恒

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院/四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，成都 610072)

目的對(duì)雅培流水線7臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)和偏差分析，探討同一檢測(cè)項(xiàng)目在不同生化分析儀測(cè)定結(jié)果的可比性。方法將第6臺(tái)作為參比系統(tǒng)，其余6臺(tái)作為待檢系統(tǒng),首先進(jìn)行精密度分析，在精密度達(dá)到要求后，用不同濃度的新鮮混合血清標(biāo)本，分別在不同儀器上測(cè)定，對(duì)各項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)和偏差分析，采用醫(yī)學(xué)決定水平的系統(tǒng)誤差(SE)作為方法學(xué)比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)，以1/2CLIA′88允許總誤差范圍為標(biāo)準(zhǔn)，判斷不同檢測(cè)系統(tǒng)的臨床可接受性。結(jié)果總蛋白、清蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、總膽紅素、尿素氮、肌酐、葡萄糖、尿酸、鉀、鈉、磷、總膽固醇、三酰甘油的SE%均在1/2CLIA′88規(guī)定的允許范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果處于臨床接受水平；氯、鈣的SE%在允許范圍外，結(jié)果沒(méi)有可比性，通過(guò)自建檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)，結(jié)果達(dá)到可比。結(jié)論通過(guò)定期對(duì)流水線不同生化分析儀測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì)和偏差分析，有助于確保同一實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)的恒定及其結(jié)果的溯源性，為臨床提供更為可靠準(zhǔn)確的結(jié)果。

全自動(dòng)生化流水線；比對(duì)；CLIA′88；醫(yī)學(xué)決定水平；臨床可接受性

全自動(dòng)生化分析流水線是通過(guò)信息網(wǎng)絡(luò)和自動(dòng)化，將分析前后標(biāo)本處理系統(tǒng)和不同的分析儀器進(jìn)行連接和整合，形成檢驗(yàn)過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化[1-2]。本科于2013年開(kāi)始使用雅培全自動(dòng)生化分析流水線系統(tǒng)，其中包括了7臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，該系統(tǒng)優(yōu)化了生化室工作流程，大大提高工作效率，減少人為誤差、干預(yù)，提高了生化檢驗(yàn)質(zhì)量，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。另一方面，本科已通過(guò)實(shí)驗(yàn)室ISO15189認(rèn)可，按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)EP9-A文件的要求，應(yīng)對(duì)不同生化分析儀檢測(cè)的常規(guī)生化項(xiàng)目結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，但目前對(duì)全自動(dòng)生化分析儀流水線系統(tǒng)中各個(gè)儀器比對(duì)的相關(guān)報(bào)道較少。因此，本研究按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法規(guī)′88(CLIA′88)要求，對(duì)流水線中7臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行比對(duì)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源選擇本院門(mén)診或住院患者，每天收集8份不同濃度的新鮮患者血清(在檢測(cè)線性范圍內(nèi)含有高、中、低值)，排除脂血、溶血標(biāo)本，每例標(biāo)本分裝成2份，按照檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行保存，檢測(cè)時(shí)間至少為5 d。

1.2儀器與試劑流水線7臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，將第6臺(tái)作為參比系統(tǒng)X，試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均為雅培原裝產(chǎn)品；其余6臺(tái)作為待檢系統(tǒng)Y，試劑、配套校準(zhǔn)品為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品，質(zhì)控品為伯樂(lè)質(zhì)控品。

1.3方法(1)對(duì)流水線7臺(tái)儀器進(jìn)行一次全面保養(yǎng)，確認(rèn)儀器處于良好狀態(tài)，同時(shí)確保用于儀器上的水質(zhì)優(yōu)良，周圍環(huán)境狀態(tài)良好。(2)對(duì)參比系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)和校準(zhǔn)確認(rèn)，同時(shí)檢測(cè)質(zhì)控品，確認(rèn)質(zhì)控值在控。(3)對(duì)待檢系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)和校準(zhǔn)確認(rèn)，檢測(cè)質(zhì)控品，確認(rèn)質(zhì)控值在控。(4)標(biāo)本的檢測(cè)。每天用參比系統(tǒng)和待檢系統(tǒng)同時(shí)分析新鮮標(biāo)本8份，在同一天,2 h內(nèi)完成，每份標(biāo)本測(cè)定2次，第1次測(cè)定順序?yàn)?～8，第二次測(cè)定順序相反，為8～1。

1.4數(shù)據(jù)的收集和處理

1.4.1對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)的初步檢查排除已明確有人為誤差的結(jié)果后，計(jì)算每一樣品每一方法成對(duì)結(jié)果的差值和差值的均值，以4倍各方法差值的均值為判斷限，若各方法中樣品的成對(duì)差值都在限值內(nèi)，說(shuō)明雙份測(cè)定結(jié)果符合要求。

1.4.2檢查X、Y關(guān)系檢測(cè)點(diǎn)有無(wú)離群點(diǎn)先看散點(diǎn)圖有無(wú)明顯離群點(diǎn)。若有，應(yīng)對(duì)X、Y配對(duì)值做離群值計(jì)算，以4倍平均差值為判斷限，所有差值都不應(yīng)超出限值。

1.4.3樣品內(nèi)分析物含量分布是否適當(dāng)?shù)臋z驗(yàn)分布范圍是否合適，可用相關(guān)系數(shù)r做粗略估計(jì)，若r≥0.975或R2≥0.95，則認(rèn)為分析物含量分布范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠，若r<0.975，則應(yīng)再多做檢測(cè)，擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍。

1.4.4計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差(SE)若r≥0.975或R2≥0.95，則以參比系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果為X，以待檢系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果為Y，計(jì)算線性回歸方程。根據(jù)臨床使用要求，將各個(gè)項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平Xc代入回歸方程，計(jì)算待檢系統(tǒng)與參比系統(tǒng)的SE，SE=|Yc-Xc|，SE%=SE/Xc×100%；若r<0.975，則計(jì)算出每份標(biāo)本在參比系統(tǒng)與待檢系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的絕對(duì)偏差，再計(jì)算出相對(duì)偏差。

1.4.5臨床可接受性能判斷以CLIA′88的允許誤差或生物學(xué)變異確定的偏倚為判斷依據(jù)，由方法學(xué)比較評(píng)估的SE或相對(duì)偏差≤1/2CLIA′88的允許誤差或根據(jù)生物學(xué)變異確定的偏倚，認(rèn)為參比系統(tǒng)和待檢系統(tǒng)間的SE或相對(duì)偏差屬臨床可接受水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行直線相關(guān)與回歸分析，計(jì)算參比系統(tǒng)和待檢系統(tǒng)檢測(cè)不同項(xiàng)目的偏差，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1精密度分析以第6臺(tái)為參比系統(tǒng)，其余6臺(tái)為待檢系統(tǒng)，分別進(jìn)行批間精密度分析，以變異系數(shù)(CV)小于1/3CLIA′88允許總誤差作為評(píng)價(jià)精密度的指標(biāo)，結(jié)果均符合精密度的要求。

表1　　各項(xiàng)目回歸方程和相關(guān)系數(shù)

注：TP為總蛋白；ALB為清蛋白；ALT為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；AST為天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶；GGT為γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶；TBIL為總膽紅素；BUN為尿素氮；Cr為肌酐；GLU為葡萄糖；UA為尿酸；K為鉀；Na為鈉；P為磷；Cl為氯；Ca為鈣；TC為總膽固醇；TG為三酰甘油。

2.2回歸方程分析待檢系統(tǒng)(第1臺(tái))和參比系統(tǒng)比對(duì)試驗(yàn)的直線回歸方程和相關(guān)系數(shù),見(jiàn)表1；比對(duì)后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目，經(jīng)校正后求直線回歸方程和相關(guān)系數(shù)，見(jiàn)表2。

2.3兩臺(tái)儀器偏差估計(jì)和可接受性判斷待檢系統(tǒng)和參比系統(tǒng)檢測(cè)各項(xiàng)目相對(duì)偏差(SE%)及臨床可接受性，見(jiàn)表3。

表2　　經(jīng)校正后的回歸方程和相關(guān)系數(shù)

表3　　兩儀器各項(xiàng)目相對(duì)偏差及臨床可接受性

續(xù)表3　　兩儀器各項(xiàng)目相對(duì)偏差及臨床可接受性

3　討　　論

隨著信息系統(tǒng)不斷完善和自動(dòng)化分析儀的廣泛應(yīng)用，流水線作業(yè)逐漸成為臨床實(shí)驗(yàn)室批量標(biāo)本檢測(cè)的一種發(fā)展趨勢(shì)[3-4]。本科引入的雅培全自動(dòng)生化流水線包括了7臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，由于我國(guó)的具體國(guó)情，沒(méi)有采用全封閉系統(tǒng)，而是半開(kāi)放式系統(tǒng)，即使用雅培-中生試劑和定標(biāo)液，伯樂(lè)的質(zhì)控液。按照實(shí)驗(yàn)室ISO15189要求，同一實(shí)驗(yàn)室以不同檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)同一項(xiàng)目時(shí)，應(yīng)定期對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果進(jìn)行分析、評(píng)價(jià)，對(duì)偏差超出允許誤差的檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行校正[5]，使不同儀器測(cè)定結(jié)果具有較好的可比性和一致性。筆者將第6臺(tái)選作參比系統(tǒng)，其余6臺(tái)作為待檢系統(tǒng)，將每一臺(tái)所有生化檢測(cè)項(xiàng)目與第6臺(tái)進(jìn)行比對(duì)，由于篇幅所限，以第1臺(tái)為例進(jìn)行討論。

在比對(duì)工作前，首先要求各系統(tǒng)的精密度應(yīng)符合要求[6]，本研究顯示兩臺(tái)儀器精密度均符合要求(CV<1/3CLIA′88允許總誤差)，可以進(jìn)一步做比對(duì)試驗(yàn)。第6臺(tái)生化儀使用原裝進(jìn)口試劑及校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，且多次參加原衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)，結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確度高，故確定為參比系統(tǒng)。通過(guò)檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析得出：TP、ALB、ALT、AST、GGT、TBIL、BUN、Cr、GLU、UA、K、Na、P、TC、TG等15個(gè)項(xiàng)目在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平的SE%均在1/2CLIA′88規(guī)定的允許范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果處于臨床接受水平；Cl、Ca在醫(yī)學(xué)決定水平的SE%均在1/2CLIA′88規(guī)定的允許范圍外，結(jié)果沒(méi)有可比性。應(yīng)根據(jù)生化室《自建檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)程序》的SOP文件，對(duì)這2個(gè)項(xiàng)目重新進(jìn)行的校準(zhǔn)后，重做比對(duì)試驗(yàn)，使檢測(cè)結(jié)果處于臨床可接受水平，從而與第6臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果相一致，才能用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。

本科通過(guò)應(yīng)用新鮮混合血清標(biāo)本建立雅培全自動(dòng)生化分析儀流水線比對(duì)試驗(yàn)，定期進(jìn)行比對(duì)，及時(shí)調(diào)整校正因子，就能確保同一標(biāo)本在不同檢測(cè)儀器上測(cè)定結(jié)果的一致性、結(jié)果的溯源性和臨床可接受性，為患者提供了及時(shí)、穩(wěn)定、可靠的檢測(cè)結(jié)果，充分滿足了臨床需要。

[1]龍峰，段桂開(kāi)．臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化流水線的應(yīng)用[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，35(4)：378-379．

[2]張景洪，王茂水，徐杰．全息條碼技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J]．中國(guó)醫(yī)療設(shè)備，2012，27(3)：100-101．

[3]羅春華，趙武，鮮勝，等．生化免疫分析流水線檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用與評(píng)價(jià)[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2015，30(12)：1243-1245．

[4]張東．檢驗(yàn)科生化流水線的使用與管理對(duì)策[J]．臨床合理用藥雜志，2013，6(19)：174-175．

[5]韓靜，楊桂花，胡梅．不同儀器間5項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的一致性比較[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(9)：1029-1031．

[6]楊有業(yè)，張秀明．臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：135-139．

Comparative study of automatic biochemical analyzers in pipeline system

CHENGYuheng

(DepartmentofClinicalLaboratory,SichuanProvincialAcademyofMedicalSciences/SichuanProvincialPeople′sHospital,Chengdu,Sichuan610072,China)

ObjectiveTo perform the comparison and deviation analysis on the detection results among 7 automatic biochemical analyzers in the Abbott pipeline,and to investigate the comparability of the same item results detected by different biochemical analysis systems.MethodsThe sixth analyzer was used as a reference,the remaining six analyzers as the inspection systems.When the precision reached the requirement,different concentrations of fresh mixed serum samples were detected by different instruments.The detection results of various items were performed the comparison and deviation analysis.The systematic error of medical decision level was served as the standard of methodological comparison.The clinical acceptability of different detection systems was judged with 1/2CLIA′88 allowable total error range as the standard.ResultsTheSE% of TP,ALB,ALT,AST,GGT,TBIL,BUN,Cr,GLU,UA,K,Na,P,TC and TG were in the allowable ranges regulated by 1/2CLIA′88,the test results were in the clinically acceptable levels;theSE% of Cl and Ca were in the outside of the allowable ranges,the results had no comparability,but the results could reach the comparability by calibrating the self-built detection system.ConclusionConducting the comparison and deviation analysis of the results detected by different biochemical analyzers in the pipeline system at regular intervals is conducive to ensure the constancy of detection systems in the same laboratory and the traceability of their results to provide more accurate and reliable results for clinic.

automatic biochemical line;comparison;CLIA′88;medical decision level;clinical acceptability

程余恒，女，技師，主要從事臨床生物化學(xué)研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.020

A

1673-4130(2016)17-2408-03

2016-04-16

2016-06-30)