噴霧干燥雞血漿蛋白粉的免疫營養(yǎng)功效及應(yīng)用研究進(jìn)展

呂永彪，王建霞，馮 平，張 俊，呂小東，江國永，成國祥（上海杰隆生物制品股份有限公司）

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噴霧干燥雞血漿蛋白粉的免疫營養(yǎng)功效及應(yīng)用研究進(jìn)展

呂永彪，王建霞，馮 平，張 俊，呂小東，江國永，成國祥
（上海杰隆生物制品股份有限公司）

噴霧干燥雞血漿蛋白粉是一種廣泛用于仔豬教保料的優(yōu)質(zhì)蛋白原料。安全的噴霧干燥雞血漿蛋白粉可以作為仔豬促生長抗生素的有效替代品。本文通過討論噴霧干燥雞血漿蛋白粉免疫營養(yǎng)功效以及在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用，為其在生產(chǎn)實(shí)踐應(yīng)用中提供理論和科學(xué)依據(jù)。

噴霧干燥雞血漿蛋白粉；營養(yǎng)價(jià)值；免疫調(diào)控；腸道屏障；細(xì)胞因子；超級(jí)蒸汽魚粉

噴霧干燥雞血漿蛋白粉（SDCP）采集經(jīng)檢疫合格的雞新鮮血液，經(jīng)抗凝、冷卻、過濾、分離、納濾、高壓均質(zhì)、噴霧干燥、包裝等工藝流程生產(chǎn)的高品質(zhì)蛋白質(zhì)飼料原料。具有適口性好，蛋白質(zhì)含量高、氨基酸平衡且利用率高等優(yōu)點(diǎn)，尤其是加工過程中保留了原血漿中各種功能性成份的活性，能有效防止仔豬的腸道感染，降低免疫刺激，是有效防止仔豬斷奶后生長停滯和腹瀉的乳豬功能性蛋白質(zhì)飼料。其粗蛋白中特異性免疫球蛋白IgG含量高達(dá)14％以上，能達(dá)到交叉保護(hù)功能，克服了常規(guī)豬血漿蛋白粉蛋氨酸含量較低的缺點(diǎn)，氨基酸平衡更佳。安全的噴霧干燥雞血漿蛋白粉可以作為仔豬促生長抗生素的有效替代品［1］。

上海杰隆生物制品股份有限公司（杰隆生物）是國內(nèi)首家推出噴霧干燥雞血漿蛋白粉的公司，為更加全面的闡明SDCP的營養(yǎng)功效，這幾年做了許多SDCP基礎(chǔ)性研究。2014年杰隆生物獲得SDCP國際PCT專利，該專利覆蓋了全球80％的人口。2014年杰隆生物作為SDCP農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)起草單位，起草了SDCP的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。并與四川農(nóng)業(yè)大學(xué)陳代文教授的研發(fā)團(tuán)隊(duì)合作，對(duì)SDCP在斷奶仔豬中的營養(yǎng)價(jià)值評(píng)定、免疫營養(yǎng)作用機(jī)理方面進(jìn)行了全面的研究，并從分子營養(yǎng)和腸道免疫上闡明SDCP的營養(yǎng)價(jià)值。2015至2016年先后在美國動(dòng)物營養(yǎng)的權(quán)威雜志《American Journal of AnimalScience》發(fā) 表了《Spray-dried chicken plasma improves intestinal digestive function and regulates intestinal selected microflora in weaning piglets》［2］和《Dietary spray-dried chicken plasma improves intestinal barrier functionand modulates immune status in weaning piglets》［3］，在國內(nèi)核心期刊《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》發(fā)表了《噴霧干燥雞血漿蛋白粉在仔豬上的營養(yǎng)價(jià)值評(píng)定》［4］。

本文主要綜述了最近幾年杰隆生物利用SDCP所做的斷奶仔豬腸道免疫營養(yǎng)基礎(chǔ)性研究以及在斷奶仔豬上應(yīng)用，并將SDCP與豬血漿蛋白粉（SDPP）、超級(jí)蒸汽魚粉進(jìn)行營養(yǎng)成分比較，為實(shí)際生產(chǎn)中合理利用這種新型功能性動(dòng)物蛋白原料提供參考。

1　噴霧干燥雞血漿蛋白粉的營養(yǎng)價(jià)值

噴霧干燥雞血漿蛋白粉作為一種優(yōu)質(zhì)的蛋白原料，其粗蛋白高達(dá)70％以上，賴氨酸∶蛋氨酸∶色氨酸∶蘇氨酸=100∶36∶30∶91，與豬的理想蛋白質(zhì)氨基酸模式較接近；SDCP的表觀消化能為16.02 MJ/kg，表觀代謝能為15.39 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)的表觀消化率和真消化率分別為87.58％和91.11％；除了甘氨酸外，所有氨基酸的標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率（SID）都高于80％。因此，SDCP屬于優(yōu)質(zhì)且易消化的動(dòng)物性蛋白質(zhì)原料。

2　噴霧干燥雞血漿蛋白粉免疫調(diào)控機(jī)理

2.1噴霧干燥雞血漿蛋白粉改善養(yǎng)分的吸收

噴霧干燥雞血漿蛋白粉含有多種營養(yǎng)物質(zhì)且含量很高，其消化率高、適口性較好，因而能整體上提高仔豬飼料營養(yǎng)的全價(jià)性和平衡性。通過對(duì)飼喂SDCP仔豬的血清生化指標(biāo)研究發(fā)現(xiàn)，SDCP能降低仔豬血清中尿素氮的水平，而血清尿素氮濃度是飼料蛋白質(zhì)利用率的指標(biāo)，表明較多的飼料蛋白質(zhì)被機(jī)體利用，體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積增加。飼喂SDCP 試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)料肉比沒有顯著影響，但在飼喂期間免疫系統(tǒng)活性較低，這樣被用于免疫應(yīng)答的營養(yǎng)物就更少，這說明有降低料肉比的趨勢，因此飼料轉(zhuǎn)化率更高。此外，我們的研究還表明，飼喂SDCP的豬群在空腸中淀粉酶、胰蛋白酶、麥芽糖酶活性更高。因此，通過SDCP增加消化酶活性可能為提高養(yǎng)分消化率作出了貢獻(xiàn)。

2.2噴霧干燥雞血漿蛋白粉對(duì)腸道菌群的影響

在胃腸道中微生物的種類影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化率和腸道健康狀況［5］。大腸桿菌通常被認(rèn)為是有害的腸道細(xì)菌并引起腸道如腹瀉等健康問題。噴霧干燥動(dòng)物血漿蛋白粉（SDAP）已被報(bào)道具有降低腹瀉率和改善豬腸道健康的作用［6］。我們的研究結(jié)果表明，SDCP能顯著減少在回腸和盲腸食糜中大腸桿菌的數(shù)量，增加乳酸桿菌的數(shù)量，這可能是斷奶仔豬飼喂SDCP后降低腹瀉率的原因之一。SDCP可以通過其部分免疫球蛋白的抗微生物效果或通過防止致病細(xì)菌粘附到胃腸道黏膜上而達(dá)到這一目的［7］。

2.3噴霧干燥雞血漿蛋白粉對(duì)血清生化和免疫狀態(tài)的影響

當(dāng)肝細(xì)胞受損或細(xì)胞膜的通透性增加，存在于肝細(xì)胞中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）會(huì)釋放進(jìn)入血液循環(huán)，從而導(dǎo)致血清中ALT和AST的活動(dòng)的增加，這反映了肝代謝狀況和細(xì)胞的健康狀況［8］。作為解毒防御屏障的主要場所，肝容易出現(xiàn)斷奶應(yīng)激損傷。仔豬飼喂SDCP血清ALT的活性較低表明血漿蛋白可以對(duì)肝提供健康保護(hù)，這與血清中總蛋白增加相吻合。

杰隆生物的SDCP中IgG含量在14％以上，這可能是血漿蛋白粉提高自主生產(chǎn)性能和健康狀況的原因之一。然而，由于腸道閉合和腸道成熟，3～4周齡的豬通過小腸吸收IgG是不太可能的［9］。相反，有可能是IgG與該管腔腸道菌群相互作用來調(diào)節(jié)宿主的免疫反應(yīng)。

分泌型免疫球蛋白A（sIgA），由存在于腸固有層漿細(xì)胞分泌的。它是形成腸的局部免疫屏障的主要成分，并發(fā)揮著對(duì)腸保護(hù)不可或缺的作用［10］。腸道中sIgA的含量被用來作為評(píng)估與早期斷奶仔豬腸道黏膜免疫的一個(gè)指標(biāo)。早期斷奶仔豬的研究報(bào)道，飼喂血漿蛋白會(huì)降低固有層細(xì)胞密度［11，12］，由此表明在腸道中的sIgA含量降低。這與飼喂SDCP的結(jié)果一致。

近期免疫營養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞因子在免疫和炎癥反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用，并且它們的平衡對(duì)于防止感染有著很重要的作用［13］。仔豬腸道斷奶時(shí)腸道炎性相關(guān)的細(xì)胞因子的水平上調(diào)，這可能導(dǎo)致腸上皮通透性的增加［14］。飼喂SDCP可降低空腸和回腸內(nèi)黏膜的TNF-α濃度?？寡仔约?xì)胞因子，如IL-10 和IL-4，防止過度活化免疫應(yīng)答和抑制促炎細(xì)胞因子以維持免疫穩(wěn)態(tài)［15］。我們觀察到飼喂SDCP降低了粘膜中IL-10的含量。在斷奶仔豬中負(fù)責(zé)減少促炎癥的機(jī)制和抗炎細(xì)胞因子的可能是SDCP防止免疫系統(tǒng)激活的保護(hù)作用。另一方面，免疫系統(tǒng)的活性降低避免了不必要的能量消耗，從而有更多的能量用于動(dòng)物的生長發(fā)育。

2.4腸道屏障功能相關(guān)指標(biāo)

腸道屏障主要由一層連接在一起的上皮細(xì)胞緊密連接形成。腸上皮是營養(yǎng)物質(zhì)的主要消化和吸收部位。此外，它也可作為防御病原體和管腔抗原的關(guān)鍵點(diǎn)［16］。腸黏膜屏障損傷的特點(diǎn)是腸道通透性的增加，將促進(jìn)腸道細(xì)菌移位及有毒或致敏物質(zhì)從腸道進(jìn)入機(jī)體［17］。因此，一個(gè)完整的腸黏膜屏障是營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和腸道健康的關(guān)鍵。斷奶應(yīng)激對(duì)引起腸屏障功能有著顯著的干擾［18］。目前，我們使用血清D-乳酸濃度和二胺氧化酶的活性這兩個(gè)已確定的指標(biāo)來評(píng)價(jià)腸通透性［19，20］。當(dāng)腸上皮細(xì)胞受傷，白細(xì)胞和損壞的腸內(nèi)皮細(xì)胞的粘附會(huì)增加D-乳酸的活性和濃度［19，20］。在我們的試驗(yàn)中，斷奶仔豬飼喂SDCP會(huì)降低血清中D-乳酸的濃度和二胺氧化酶的酶活性，表明SDCP對(duì)腸道黏膜完整性具有有益的效果。

緊密連接蛋白，如ZO-1、Z0-2、CLDN1、和OCLN等，在兩個(gè)相鄰單元的邊界形成一個(gè)結(jié)構(gòu)，作為上皮細(xì)胞可選擇性滲透的屏障［21］。然而，早期斷奶通過減少緊密連接蛋白誘發(fā)腸黏膜屏障持續(xù)受損［22］。我們目前的研究表明，斷奶仔豬飼喂SDCP能夠增加緊密連接蛋白的mRNA的表達(dá)。此外，腸道微生物群落還影響腸緊密連接蛋白的表達(dá)，大腸桿菌被報(bào)道能使ZO-1、OCLN和CLDN1緊密連接復(fù)合物解離并變得不穩(wěn)定［23］。因此，飼喂SDCP緊密連接蛋白表達(dá)的增加與大腸桿菌數(shù)量的減少是一致的。Mucin2（MUC2）是腸的杯狀細(xì)胞主要分泌粘蛋白中的一個(gè)，也是腸的保護(hù)屏障。飼喂SDCP能夠增加MUC2在回腸的表達(dá)。同時(shí)，Balan等（2011）表明［24］，飼喂綿羊血清免疫球蛋白后增加了粘蛋白（MUC2，MUC3和MUC4）基因的表達(dá)和杯狀細(xì)胞的數(shù)量。因此，我們推測，SDCP誘導(dǎo)MUC2的表達(dá)增加可能取決于免疫球蛋白對(duì)杯狀細(xì)胞計(jì)數(shù)的調(diào)控。此外，促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL1-β和IL6也有報(bào)導(dǎo)過通過SAPK/ JNK或JAK / STAT途徑調(diào)節(jié)MUC2的表達(dá)［25］。TFF因子是上皮復(fù)原必不可少的，從而保持腸黏膜完整性［26］。因此，在目前的研究中TFF3的上調(diào)可能會(huì)有利于黏膜恢復(fù)和腸屏障功能。oll樣受體（TLR2）由特定的微生物啟動(dòng)，據(jù)報(bào)道它可以保護(hù)腸上皮緊密連接相關(guān)的完整性，其中，如TLR2缺乏，小鼠遭受細(xì)菌病原體感染期間通過下調(diào)ZO-1和緊密連接蛋白3使上皮屏障功能受損［27］。因此，喂食SDCP的豬TLR2的表達(dá)增加與緊密連接蛋白基因表達(dá)的增加有關(guān)。

2.5腸道發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)

早期斷奶通常會(huì)因?yàn)閿嗄虘?yīng)激而使腸道絨毛高度降低并增加隱窩深度，導(dǎo)致生長性能較差［28］。絨隱比是評(píng)估小腸的養(yǎng)分消化吸收能力的重要參數(shù)。豬飼糧添加SDCP在十二指腸和空腸中具有更大的絨毛長度和絨隱比并可以減少空腸中隱窩的深度。增加絨毛高度，降低隱窩深度可以提高絨毛的吸收表面積，這樣更加有利于小腸對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用。

仔豬的胃腸發(fā)育是由外部和內(nèi)在因素調(diào)控［28］。內(nèi)在因素調(diào)控主要參與腸上皮細(xì)胞增殖和分化的調(diào)解。胰島素樣生長因子-1（IGF-1）是腸細(xì)胞生長、分化和屏障功能的重要調(diào)節(jié)因子［29-31］。

飼喂SDCP在空腸增加了IGF-1的表達(dá)，這可能局部的促進(jìn)腸道的增長和結(jié)構(gòu)的完整。同時(shí)，大量的研究報(bào)道了GLP-2增加了黏膜厚度和質(zhì)量［32］和促進(jìn)腸道消化吸收功能［33，34］。這些證據(jù)表示，GLP-2是一種強(qiáng)效的腸道營養(yǎng)因子以及腸道生長和功能的度量。飼喂SDCP仔豬的空腸和回腸中GLP-2基因的表達(dá)水平更高。表皮生長因子（EGF）已證實(shí)在刺激腸上皮增殖、分化和成熟中發(fā)揮重要作用［35-37］。EGF也被發(fā)現(xiàn)可以減少腸道上皮的腸致病性菌定植，而豬飼喂SDCP顯示EGF在回腸具有較高的表達(dá)水平，這與檢測飼喂SDCP可以減少大腸桿菌群相一致。

3　噴霧干燥雞血漿蛋白粉（SDCP）與豬血漿蛋白粉（SDPP）的比較

杰隆生物與四川農(nóng)業(yè)大學(xué)進(jìn)行了較多的產(chǎn)學(xué)研合作，對(duì)SDCP在斷奶仔豬作用的機(jī)理上做了深層次的探究，根據(jù)我們對(duì)SDCP與SDPP的對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)：

SDCP提高了仔豬消化酶（如胰蛋白酶、淀粉酶和麥芽糖酶等）的活性，改善了仔豬小腸對(duì)養(yǎng)分的消化吸收功能。SDCP提高了仔豬血清中免疫球蛋白IgG的水平，顯著降低了回腸和盲腸中大腸桿菌的含量。緩解肝臟的損傷，提高腸道屏障功能以及降低斷奶對(duì)免疫系統(tǒng)的過度激活，促進(jìn)機(jī)體生長。斷奶后2周，SDPP組日增重提高26％，采食量提高20％。SDPP+SDCP組日增重提高18.08％，采食量提高16.13％。SDCP組日增重提高11.86％，采食量提高8.96％。如果以SDPP對(duì)仔豬生長性能的營養(yǎng)效價(jià)為100％，則SDCP相對(duì)于SDPP對(duì)仔豬的生長性能的營養(yǎng)效價(jià)為88％（表1）。SDCP與SDPP對(duì)仔豬生長的效價(jià)相差10％左右。

SDPP中營養(yǎng)成分尤其是必需氨基酸和某些未知的促生長因子與仔豬的需求是同源的，并且SDPP的氨基酸比例與仔豬理想氨基酸模型接近，仔豬更愛吃，更利于吸收。這也是SDPP對(duì)仔豬生長性能優(yōu)于SDCP的重要原因。

眾所周知，豬的第一限制性氨基酸是Lys，因此豬在生長期特別地需要Lys，生長速度越快需要的Lys量就越高。如果添加SDCP必須考慮在日糧中多添加合成的Lys。反之，相同比例的SDPP 和SDCP的日糧中，含SDPP的日糧要添加更多的Met，而SDCP日糧因?yàn)楹虬被岜容^多，可以節(jié)約一定成本。

因此，杰隆生物對(duì)SDAP在教槽料以及乳豬料配方中推薦試驗(yàn)方法如下：

以原配方中SDPP添加量為3.5％計(jì)。按照SDCP與SDPP效價(jià)比為1∶1.14的比例，用SDCP替代原配方中SDPP用量的一半而不影響仔豬生產(chǎn)性能。則總的SDAP添加比例提高為3.75％，其中SDPP的比例為1.75％，SDCP的比例為2％，并根據(jù)仔豬生長需要適量添加Lys和Met。

為開發(fā)生物安全性產(chǎn)品，將SDCP推廣到大型豬場及種豬場的教槽料中，可以使用SDCP替代全部的SDPP，日糧添加建議比例為4％（相當(dāng)于添加3.5％的SDPP），并根據(jù)需要適量調(diào)整配方中Lys 和Met的用量。

4　噴霧干燥雞血漿蛋白粉與超級(jí)蒸汽魚粉的比較

魚粉作為一種優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)原料也廣泛地應(yīng)用在畜禽飼料中。相比與魚粉而言，SDCP的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在：SDCP的蛋白含量高于進(jìn)口魚粉，高達(dá)70％左右，超級(jí)蒸汽魚粉蛋白含量約為64％。SDCP中富含免疫球蛋白IgG，可以提高機(jī)體免疫力，魚粉中不含有。SDCP中蛋氨酸為1.65％高于SDPP（0.71％），蛋氨酸+胱氨酸為3.74％，明顯高于進(jìn)口魚粉的2.29％，更有利于動(dòng)物健康生長；SDCP中精氨酸含量明顯高于進(jìn)口魚粉，精氨酸可以提高肥育豬瘦肉率以及母豬的產(chǎn)子數(shù)和抗病能力。另外蘇氨酸和色氨酸等必需氨基酸含量都明顯優(yōu)于進(jìn)口魚粉。SDCP氨基酸SID都在80％以上，有效磷含量高。血漿蛋白粉蛋白消化率高于魚粉的蛋白消化率。SDCP的適口性比進(jìn)口魚粉/豆粕好。而且SDCP生物安全性高。

鑒于SDCP在營養(yǎng)成分上要明顯高于蒸汽魚粉，為探究SDCP與魚粉在實(shí)際飼喂效果上是否具有差異性，我們開展了以SDCP替換魚粉對(duì)斷奶仔豬生長性能影響的對(duì)比試驗(yàn)［38］。試驗(yàn)于2015年12月在上海某豬場開展，對(duì)照組日糧飼喂基礎(chǔ)日糧，其中魚粉添加5％，SDCP組以SDCP替換基礎(chǔ)日糧中全部魚粉。試驗(yàn)共2個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)11頭。教槽料從7日齡開始預(yù)飼喂，21日齡開始試驗(yàn)，42日齡結(jié)束試驗(yàn)，試驗(yàn)期21d。試驗(yàn)結(jié)果詳見表2。

由表3可知，對(duì)照組與SDCP組比較，以SDCP組日增重為100％計(jì)，各階段魚粉的營養(yǎng)效價(jià)：21d～31d魚粉的營養(yǎng)效價(jià)為SDCP的95％；31d～42d魚粉的營養(yǎng)效價(jià)為SDCP的83.8％；21d～42d魚粉的營養(yǎng)效價(jià)為SDCP的87.9％。

由此可見，SDCP在營養(yǎng)價(jià)值和飼喂效果上要遠(yuǎn)好于超級(jí)蒸汽魚粉，在教槽料、保育料中完全具有全部替換魚粉的可行性。

5　雞血漿蛋白粉應(yīng)用展望

噴霧干燥雞血漿蛋白粉近期的相關(guān)研究表明，無論其與豬血漿蛋白粉相比還是與超級(jí)蒸汽魚粉相比其均有一定的優(yōu)勢，可見噴霧干燥雞血漿蛋白粉是一種優(yōu)質(zhì)的功能性蛋白原料，可以作為優(yōu)質(zhì)蛋白原料緩解目前我國蛋白質(zhì)資源尤其是動(dòng)物源性功能蛋白匱乏的緊張局面。而目前豆粕、進(jìn)口魚粉均處于較高價(jià)位區(qū)間，噴霧干燥雞血漿蛋白粉作為一種的新型優(yōu)質(zhì)功能性蛋白質(zhì)原料在教保料降低配方成本上具有一定的價(jià)格優(yōu)勢；同時(shí)它在水產(chǎn)飼料和寵物飼料上的應(yīng)用也有廣闊前景。

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1001-0769（2016）08-0056-04