魯敏,王恩怡,李科科,郭天佑,賀中翼,高鵬
(山東建筑大學(xué) 藝術(shù)學(xué)院,山東 濟(jì)南 250101)
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毛白楊受大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫抗逆性分析研究
魯敏,王恩怡,李科科,郭天佑,賀中翼,高鵬
(山東建筑大學(xué) 藝術(shù)學(xué)院,山東 濟(jì)南 250101)
SO2-Pb復(fù)合污染;機(jī)理機(jī)制;生態(tài)修復(fù);T檢驗分析
大氣污染是人類所面臨的環(huán)境危機(jī)之一,并且成為人類社會可持續(xù)發(fā)展的主要障礙[1]。SO2是目前大氣污染中主要污染物之一,不僅危害人體健康,而且威脅環(huán)境安全[2-3]。大氣中適宜濃度范圍內(nèi)的SO2能夠作為補(bǔ)充S元素的一種途徑,促進(jìn)植物生長,但超過一定濃度闕值會對植物造成葉片灼傷等傷害[4]。此外,在工業(yè)化進(jìn)程中,大氣重金屬也是危害嚴(yán)重的大氣污染物之一,因其長期潛伏性、不可逆性及累積性等特點已成為不可忽視的環(huán)境問題[5]。隨著含Pb物質(zhì)的廣泛開發(fā)利用,大量重金屬Pb排放到大氣當(dāng)中,威脅人類健康和環(huán)境安全[6]。
在自然環(huán)境中,多數(shù)情況下的污染是以一種元素或化學(xué)物為主的多種污染物,即復(fù)合污染。大氣復(fù)合污染是指在某一區(qū)域范圍內(nèi),同時存在多種不同類型的污染物,并且這些污染同時作用對環(huán)境所造成污染。目前,大氣中一次污染和二次污染的復(fù)合污染,尤其是無機(jī)物與重金屬混合的復(fù)合污染,對生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和人類的生存發(fā)展造成了比單一污染物更為巨大的危害[7]。大氣SO2-Pb復(fù)合污染嚴(yán)重威脅著人們的生命安全和健康,尋求解決大氣SO2-Pb復(fù)合污染的有效治理措施已成為城市生態(tài)環(huán)境建設(shè)中關(guān)注的重點和亟待解決的問題。
植物不僅對一定濃度范圍內(nèi)的大氣污染物有較強(qiáng)抵抗力,而且具有很強(qiáng)的吸收凈化能力[8]。隨著大氣污染研究的不斷深入,植物生態(tài)修復(fù)作為一種經(jīng)濟(jì)、安全、持續(xù)且極具發(fā)展?jié)摿Φ男迯?fù)工程技術(shù),已成為修復(fù)大氣化學(xué)污染的重要途徑[9]。揭示植物抗性機(jī)理機(jī)制對大氣污染的植物生態(tài)修復(fù)具有重要意義。隨著對大氣污染研究的不斷深入,利用對大氣污染具有較高抗逆性的植物凈化單一大氣污染的研究已經(jīng)無法滿足當(dāng)今世界對于大氣污染研究的需求[10]。因此,開展植物對大氣復(fù)合污染的研究將成為今后改善大氣環(huán)境質(zhì)量和空氣污染控制研究的熱點。
煉油廠是以釋放大氣SO2-Pb復(fù)合污染物為主的重污染企業(yè)。毛白楊(Populustomentosa)適應(yīng)性強(qiáng),耐干旱,抗污染能力強(qiáng),是北方應(yīng)用最廣泛的鄉(xiāng)土植物和城市綠化樹種,其在濟(jì)南煉油廠污染區(qū)內(nèi)大量種植并正常生長,說明毛白楊對SO2-Pb復(fù)合污染具有很強(qiáng)的抗逆性和耐脅迫的能力。為此,選擇污染區(qū)域中抗污、吸污能力強(qiáng)的毛白楊,通過對其葉片的相關(guān)生理指標(biāo)的變化進(jìn)行T檢驗分析,探索毛白楊對大氣SO2-Pb復(fù)合污染的響應(yīng)機(jī)制,揭示毛白楊對SO2-Pb復(fù)合污染抗逆性強(qiáng)的原因,進(jìn)一步從細(xì)胞水平反映毛白楊對大氣SO2-Pb復(fù)合污染抗性機(jī)理機(jī)制,為提高超量積累植物對大氣污染的生態(tài)修復(fù)功能積累試驗參數(shù),為優(yōu)化培育富集能力強(qiáng)的植物及生態(tài)修復(fù)技術(shù)提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。
1.1試驗材料
試驗于夏末秋初(2013年9月)時期,選擇在濟(jì)南煉油廠污染區(qū)內(nèi)生長的毛白楊為試驗材料,這一時期毛白楊生理活動最旺盛,新陳代謝速率最快,木質(zhì)化程度最高,葉片內(nèi)污染物積累量也最高。
1.2試驗設(shè)計
由于目前研究手段難以模擬真實大氣環(huán)境條件,開展大氣的復(fù)合污染研究只能利用真實的大氣環(huán)境。因此,本研究采用現(xiàn)場采樣的方法,分別以濟(jì)南煉油廠(36°42′N,117°10′E)周邊區(qū)域和濟(jì)南百合園林集團(tuán)苗圃(36°41′N,117°15′E)為污染區(qū)和非污染區(qū),對SO2-Pb復(fù)合污染區(qū)和非污染區(qū)的毛白楊進(jìn)行采樣。濟(jì)南市煉油廠東部緊鄰濟(jì)南市鋼鐵廠,緊鄰經(jīng)十路、G2高速公路等濟(jì)南交通主干道,是進(jìn)行大氣SO2-Pb復(fù)合污染研究的理想地區(qū)。距離煉油廠10 km的濟(jì)南百合園林集團(tuán)苗圃與其土質(zhì)接近、氣候及其他自然條件相似。
以廠區(qū)為中心,100 m范圍為界,分別在東、南、西、北四個方位各選擇2個采樣點進(jìn)行采樣,每個采樣點分別選取有代表性的3株樹齡相近、健康程度相近、長勢良好的毛白楊作為生物學(xué)重復(fù)。對樹冠周圍及上、中、下各部位進(jìn)行多點采樣,每株選取生長正常且具有大致相同數(shù)量葉片的一年生枝條4枝。非污染區(qū)采樣點選取與采樣方法同污染區(qū)。將污染區(qū)和非污染區(qū)剪取的枝條編號,在相同條件下離體水培一周。
隨機(jī)從污染區(qū)4個方向每個采樣點混合均勻的12個枝條中分別選取1個枝條,將選出的8個枝條組成一個污染物樣品小組,其他兩個小組采用同樣的方法選取,把每組枝條的葉子分別混合均勻,組成污染區(qū)的3個樣品。非污染區(qū)樣品選取方法同污染區(qū)。將污染區(qū)和非污染區(qū)的毛白楊樣品隨機(jī)組合成3組,每組由污染區(qū)和非污染區(qū)2個樣品組成。實驗時,采取葉子,用去離子水洗滌,晾干備用。
1.3生理指標(biāo)測定方法
1.4統(tǒng)計分析方法
利用Excel和SPSS19.0統(tǒng)計分析軟件對毛白楊生理指標(biāo)測定的實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行平均值計算和T檢驗分析。
2.1毛白楊生理指標(biāo)測定值
實驗測得不同采樣點毛白楊葉片生理指標(biāo)的含量(見表1),其中所得數(shù)據(jù)均為測量平均值。
表1 毛白楊在污染區(qū)和非污染區(qū)中生理指標(biāo)的測定值
2.2毛白楊受大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫抗逆生理指標(biāo)T檢驗分析
T檢驗即差異的假設(shè)檢驗或稱差異顯著性檢驗,在實際工作中應(yīng)用很廣[17]。比較不同立地條件下植物生長的差異以及不同環(huán)境因子對植物生長的影響,都可以使用數(shù)理統(tǒng)計學(xué)中的差異顯著性檢驗的方法。其實質(zhì)是解決兩個或多個總體的同一特征之間是否有顯著差異的問題。
2.2.1葉綠素含量變化分析
葉綠素作為綠色植物的主要光合色素,是綠色植物進(jìn)行光合作用固定生物能源的重要物質(zhì)。綠色植物葉片內(nèi)葉綠素的含量與光合作用的速率緊密相關(guān),植物體內(nèi)的葉綠素一直處于合成與分解的過程中,葉綠素含量受到很多因素的影響[12]。相關(guān)研究表明,葉綠素可以作為評價植物耐逆境脅迫強(qiáng)弱的生理指標(biāo)。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉綠素含量(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表2)。
表2 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊葉綠素含量的T檢驗分析
表2結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片中葉綠素含量差異極顯著(P值0.006<0.01)。由此可知,在污染區(qū)的毛白楊葉片受到了較嚴(yán)重的損傷,大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊葉片具有較大的影響。大氣SO2-Pb復(fù)合污染通過破壞植物的光合作用場所來影響植物的新陳代謝,影響植物的正常生長。同時,在污染區(qū)現(xiàn)場采樣過程中也發(fā)現(xiàn),距離煉油廠較近的毛白楊葉片表面泛黃,葉尖及葉邊緣出現(xiàn)壞死的組織。
植物體內(nèi)葉綠素的含量直接影響植物能否有效利用光能,光合作用的機(jī)理就是綠色植物將CO2和H2O轉(zhuǎn)變成有機(jī)化合物的過程。植物體內(nèi)葉綠素與其他物質(zhì)一樣,經(jīng)常不斷地進(jìn)行新陳代謝,水分、光照、溫度、濕度、礦質(zhì)元素、外源污染物等外界環(huán)境因子都會影響葉綠體的合成。
2.2.2丙二醛(MDA)含量變化分析
在植物細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基含量處于動態(tài)平衡的狀態(tài),但在逆境環(huán)境下,自由基數(shù)量會急劇增加,平衡狀態(tài)遭到破壞,自由基會氧化膜上的不飽和脂肪酸,并產(chǎn)生大量的MDA[18]。MDA在體內(nèi)自由移動,擴(kuò)散到其它部位,破壞膜結(jié)構(gòu)使膜流動性降低、透性增加以及細(xì)胞代謝失調(diào),使其功能受損,嚴(yán)重時導(dǎo)致細(xì)胞死亡。MDA含量可以表示膜脂過氧化程度以及在逆境環(huán)境下植物對其反應(yīng)的強(qiáng)弱[19]。因此,MDA含量可以作為膜脂過氧化指標(biāo)。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊MDA含量(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表3)。
表3 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊MDA含量的T檢驗分析
表3結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片MDA的含量差異不顯著(P值為0.484>0.05),原因是污染區(qū)毛白楊長期處于污染環(huán)境下自身適應(yīng)了周圍的環(huán)境,同時酶類和非酶類抗氧化防御系統(tǒng)等控制體內(nèi)的調(diào)節(jié)和代謝機(jī)制有效的清除了因脅迫產(chǎn)生的過多自由基,維持其動態(tài)平衡平衡,抑制了MDA的產(chǎn)生,有效的控制體內(nèi)質(zhì)膜透性的變化,使生物膜結(jié)構(gòu)和功能處于平衡穩(wěn)定狀態(tài)。
2.2.3可溶性糖含量變化分析
可溶性糖可以提高細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)的濃度,降低外界環(huán)境對細(xì)胞的損害程度,是植物細(xì)胞內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)[13]。逆境脅迫下,多數(shù)植物通過增加植物體內(nèi)的可溶性糖含量以抵御不良環(huán)境,因此,可溶性糖含量亦可作為評價植物抗逆性的指標(biāo)。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊可溶性糖含量(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表4)。
表4 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊可溶性糖含量的T檢驗分析
表4結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片可溶性糖含量差異不顯著(P值為0.331>0.05)。由于污染區(qū)和非污染區(qū)周邊環(huán)境條件相似,白天光照和溫度較適宜,毛白楊可以積累足夠的代謝物質(zhì)。雖然處于逆境環(huán)境,但是毛白楊體內(nèi)的養(yǎng)分可以充分利用。當(dāng)逆境條件更加嚴(yán)峻時,毛白楊體內(nèi)的糖類發(fā)生水解,一方面為植物體提供能量,另一方面,可以為其他代謝提供中間產(chǎn)物。
2.2.4可溶性蛋白含量變化分析
逆境脅迫下,植物的細(xì)胞膜發(fā)生膜相變,引起細(xì)胞膜上的蛋白某些部位不能處于平衡狀態(tài),不能與膜上磷脂結(jié)合,從而處于游離狀態(tài),成為游離蛋白質(zhì),使可溶性蛋白質(zhì)含量增加。高水平的可溶性蛋白質(zhì)含量可以使植物細(xì)胞滲透勢處于較低水平,降低逆境對細(xì)胞的損傷[13]。由此可知,逆境下植物抗逆性與可溶性蛋白含量密切相關(guān),可溶性蛋白含量衡量植物抗逆性的強(qiáng)弱。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊可溶性蛋白含量(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表5)。
表5 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊可溶性蛋白含量的T檢驗分析
表5結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片內(nèi)可溶性蛋白差異不顯著(P值為0.265>0.05)。說明毛白楊抗逆性較強(qiáng),在多數(shù)逆境環(huán)境下,如干旱、低溫、炎熱等都有可能降低植物體內(nèi)蛋白質(zhì)的含量和活性[14]。蛋白質(zhì)作為一種生物大分子,在植物體內(nèi)承擔(dān)了生理功能,蛋白質(zhì)含量決定了體內(nèi)酶的含量和活性的強(qiáng)弱。污染區(qū)毛白楊葉片體內(nèi)蛋白質(zhì)含量較非污染區(qū)差異不顯著,說明過量硫元素的吸收在一定程度上提高了毛白楊體內(nèi)蛋白質(zhì)的含量,同時可能存在其他調(diào)節(jié)機(jī)制,促進(jìn)了毛白楊體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成,為植物體提供了充足的酶和其他生物大分子物質(zhì),幫助清除植物體內(nèi)的活性氧。
在植物處于正常生理狀況下,細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子等活性氧的產(chǎn)生和清除處于動態(tài)平衡,此時活性氧在細(xì)胞內(nèi)的水平很低,對細(xì)胞不會造成傷害[18]。當(dāng)植物受到逆境脅迫時,超氧陰離子的平衡狀態(tài)被破壞。超氧陰離子作為植物體內(nèi)電子的受體,具有活性強(qiáng)和氧化性強(qiáng)的特點,過量的超氧陰離子具有毒性,導(dǎo)致膜脂過氧化,破壞膜的完整性,使一些保護(hù)酶的活性降低[14]。膜系統(tǒng)對機(jī)體有很強(qiáng)的保護(hù)作用,它的損傷會導(dǎo)致機(jī)體的部分生理生化紊亂,其次,部分生物功能分子也遭受超氧陰離子的破壞,從而使植物受到嚴(yán)重?fù)p傷,長時間、高強(qiáng)度的逆境脅迫會導(dǎo)致植物死亡。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊超氧陰離子產(chǎn)生速率(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表6)。
表6 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊超氧陰離子)產(chǎn)生速率的T檢驗分析
2.2.6抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性變化分析
APX在植物葉片內(nèi)主要用于清除體內(nèi)自由基,催化H2O2生成H2O和O2[20]。APX也是植物抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)(ASA-GSH)的重要組分,是酶類抗氧化系統(tǒng)的重要抗氧化酶之一。由于酶促反應(yīng)的專一性較強(qiáng),清除活性氧的種類因酶的種類而異。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊A(yù)PX活性變化(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表7)。
表7結(jié)果表明,污染物區(qū)與非污染區(qū)毛白楊體葉片內(nèi)的APX活性差異顯著(P值為0.048<0.05),說明污染區(qū)毛白楊葉片內(nèi)的APX活性在SO2-Pb復(fù)合污染脅迫條件下被抑制。ASA-GSH是清除葉片葉綠體內(nèi)由光合作用等產(chǎn)生的H2O2的主要途徑,由于受脅迫葉綠素減少,光合作用減弱,APX活性相對減弱。另外,與其他抗氧化酶類相比,APX穩(wěn)定性較差,特別是在缺少電子供體的條件下,在酶促反應(yīng)過程中,當(dāng)抗壞血酸未被復(fù)合利用時APX會失活,污染脅迫可能使植物體內(nèi)ASA含量降,低抑制了APX活性;雙胺苯、羥基脲素和羥胺等物質(zhì)在H2O2存在時會對APX產(chǎn)生特異性抑制,污染脅迫可能促生這類物質(zhì)。
植物體內(nèi)抗氧化酶類系統(tǒng)其抗氧化功能具有整體性,在清除自由基的選擇具有多樣性,一種或一類抗氧化酶類活性被抑制相應(yīng)地作用于同種活性氧的酶類活性會增強(qiáng)。SO2-Pb復(fù)合污染脅迫下,毛白楊葉片內(nèi)其他酶類或非酶類抗氧化機(jī)制開啟清除過多活性氧。
表7 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊A(yù)PX活性的T檢驗分析
2.2.7過氧化物酶(POD)活性變化分析
植物受逆境脅迫,產(chǎn)生活性氧的同時,在POD以及其它酶類的相互作用下,能有效的清除部分活性氧,使體內(nèi)活性氧數(shù)量降低,處于一個機(jī)體所能承受水平,不會引起膜脂過氧化以及其它傷害[15]。將在污染區(qū)和非污染區(qū)中毛白楊的POD活性變化(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表8)。
表8 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊POD活性的T檢驗分析
表8結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片體內(nèi)的POD活性差異不顯著(P值為0.293>0.05)。POD主要存在于一些老化的組織,其在植物幼齡時期的組織中出現(xiàn)較少,活性也較低。由于POD能增加木質(zhì)化程度,在污染區(qū)與非污染區(qū)的采樣中,污染區(qū)毛白楊葉片內(nèi)POD要高于非污染區(qū)。說明在污染區(qū)的毛白楊老化的速度高于非污染區(qū),其木質(zhì)化程度較高。
2.2.8游離氨基酸含量變化分析
游離氨基酸等小分子物質(zhì)由于其具有表征植物細(xì)胞逆境響應(yīng)的功能,是良好的脅迫應(yīng)答因子[21]。將污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊游離氨基酸含量(見表1)作為兩個隨機(jī)變量,對其進(jìn)行T檢驗分析(見表9)。
表9 大氣SO2-Pb復(fù)合污染對毛白楊游離氨基酸含量的T檢驗分析
表9結(jié)果表明,污染區(qū)和非污染區(qū)毛白楊葉片內(nèi)游離氨基酸含量差異顯著(P值為0.037<0.05)。污染區(qū)毛白楊由于受到大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫,抗性機(jī)制開啟,葉片內(nèi)的游離氨基酸含量升高,對細(xì)胞起到保護(hù)作用。游離氨基酸的存在可以增加毛白楊葉片細(xì)胞基質(zhì)內(nèi)的濃度,穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)。同時氨基酸具有良好的親水性,減少細(xì)胞水分流失,降低蒸騰速率和呼吸速率,保證細(xì)胞內(nèi)外的電解質(zhì)平衡。
上述研究表明:
著(P值>0.05),說明毛白楊通過體內(nèi)代謝調(diào)節(jié)機(jī)制降低了大氣SO2-Pb復(fù)合污染對其細(xì)胞的損傷程度,維持細(xì)胞滲透壓平衡,從而減少污染脅迫對正常的生命活動的干擾程度,由此表明毛白楊對大氣SO2-Pb復(fù)合污染抗性較強(qiáng)。
② 毛白楊由于長期處于污染環(huán)境下自身適應(yīng)了周圍的環(huán)境,同時酶類和非酶類抗氧化防御系統(tǒng)等控制體內(nèi)的調(diào)節(jié)和代謝機(jī)制有效的清除了因脅迫產(chǎn)生的過多自由基,維持其數(shù)量動態(tài)平衡平衡,抑制了MDA的產(chǎn)生狀態(tài);
③ 大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫條件下,S元素的吸收在一定程度上增加了毛白楊體內(nèi)蛋白質(zhì)的含量,同時由于養(yǎng)分充足毛白楊體內(nèi)的糖類發(fā)生水解,來平衡細(xì)胞滲透壓;
(2) 大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫條件下,經(jīng)T檢驗與對照區(qū)相比,游離氨基酸含量和APX活性差異顯著(P值<0.05)。
① 大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫下,抗性機(jī)制開啟,細(xì)胞基質(zhì)內(nèi)游離氨基酸含量增加,使細(xì)胞滲透壓處于平衡狀態(tài),維持細(xì)胞穩(wěn)定;
② 大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫下,葉綠素及電子供體受損,APX活性相對減弱,其他酶類或非酶類抗氧化機(jī)制開啟清除過多活性氧。
(3) 大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫條件下,經(jīng)T檢驗與對照區(qū)相比,葉綠素含量差異極顯著(P值<0.01)。說明大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫會使毛白楊葉片葉綠素含量下降進(jìn)而影響其葉片光合作用。
針對大氣SO2-Pb復(fù)合污染脅迫對細(xì)胞的直接傷害與間接傷害,活性氧增加、膜質(zhì)過氧化、葉綠素含量下降等,毛白楊通過激活抗氧化物酶系統(tǒng)(POD等)來清除活性氧,利用生物小分子(可溶性糖、蛋白、游離氨基酸)來修復(fù)和穩(wěn)定受損的細(xì)胞質(zhì)膜系統(tǒng),對大氣SO2-Pb復(fù)合污表現(xiàn)出較強(qiáng)抗性。但大氣SO2、Pb兩種污染物對毛白楊的相互作用類型以及對毛白楊抗性的影響還有待探究。
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(學(xué)科責(zé)編:吳芹)
Study on resistance of Populus tomentosa under atmospheric compound pollution of SO2-Pb stress
Lu Min, Wang Enyi, Li Keke,etal.
(School of Arts, Shandong Jianzhu University, Jinan 250101, China)
compound pollution of SO2-Pb; mechanism; eco-recovery; T-test analysis
2015-11-09
山東省住房和城鄉(xiāng)建設(shè)廳科技計劃項目(2013KY006)
魯敏(1963-),女(滿族),教授,博士,主要從事污染大氣和污水的植物凈化與修復(fù)技術(shù)及吸污防污植物的選擇與應(yīng)用等方面的研究. E-mail:lumin@sdjzu.edu.cn
1673-7644(2016)03-0212-07
X171.4,X173
A