重癥腦癱兒童外周血中微量營養(yǎng)元素和氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變及意義

湯有才

鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院兒童康復(fù)醫(yī)學(xué)科　鄭州　450052

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重癥腦癱兒童外周血中微量營養(yǎng)元素和氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變及意義

湯有才

鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院兒童康復(fù)醫(yī)學(xué)科鄭州450052

目的檢測重癥腦癱兒童外周血中微量元素和氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變，探討其臨床意義。方法根據(jù)世界衛(wèi)生組織的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選取重癥腦癱患兒和年齡匹配的健康兒童各20例，抽取空腹血，分離血漿和紅細(xì)胞。按照相應(yīng)試劑盒提供的方法分別檢測GSH、GSSG、LPO、ROS和SOD的氧化應(yīng)激指標(biāo)以及微量元素水平并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果重癥腦癱兒童外周血中氧化應(yīng)激指標(biāo)明顯高于健康兒童組，微量元素則明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論微量元素和氧化應(yīng)激損傷參與了兒童重癥腦癱的發(fā)病，加強(qiáng)營養(yǎng)管理可改變患兒的氧化應(yīng)激，可能有利于腦癱的康復(fù)治療。

重癥腦癱兒童；微量營養(yǎng)元素；氧化應(yīng)激狀態(tài)

腦性癱瘓(CP)是由于發(fā)育中的胎兒或嬰幼兒腦部非進(jìn)行性損傷所致的一組持續(xù)存在的中樞性運(yùn)動(dòng)和姿勢發(fā)育障礙、活動(dòng)受限癥候群。由于非自愿的肌肉痙攣和僵直影響吞咽困難，腦癱患兒常有喂養(yǎng)困難[1]，導(dǎo)致營養(yǎng)包括微量元素等的攝入障礙，并嚴(yán)重影響患兒的健康[2]。許多微營養(yǎng)缺乏，如鐵、鈣、銅、鋅、葉酸，維生素A、B6、B12、C和D，可抑制針對入侵病原的特異性抗體的形成，且作為抗氧化劑的成分利于自由基的清除[3]。我們推測，微量元素缺乏和氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變可能參與了小兒腦癱的發(fā)病。本文的目的是檢測腦癱患兒外周血中微量元素水平和氧化應(yīng)激狀態(tài)的改變并探討其臨床意義。

1　資料與方法

1．1臨床資料兒童腦癱20例，年齡 3～11歲(7.6±2.5歲)均為鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院自2014—2016年在兒童康復(fù)科住院的重型患兒。對照組20例，年齡匹配，發(fā)育正常的健康兒童，平均(7.3±2)歲，為幼兒園健康志愿者，與家長簽署知情同意書。

1．2收入標(biāo)準(zhǔn)本研究收入的病例均為重癥腦癱患兒，如5歲以前不能行走但能夠爬或滾；不能握物但能扶物或喪失有作用的運(yùn)動(dòng)功能者。

1．3排除標(biāo)準(zhǔn)排除特殊的慢性疾病，如腎、心或代謝性疾病及胃切除者等。

1．4檢測GSH和GSSG的水平試劑盒購于Cayman Chemical(美國)。收集受試者空腹血標(biāo)本，分離紅細(xì)胞用于測谷胱甘肽(GSH，pmol/mg Hb)和氧化型谷胱甘肽(GSSG，pmol/mg Hb)，按照公司提供的說明書的方法進(jìn)行。

1．5檢測LPO的水平過氧化物酶(LPO，U/ mg Hb)檢測試劑盒購置于上海盈公生物技術(shù)有限公司，按公司提供的說明書的方法進(jìn)行檢測。

1．6檢測ROS的水平收集受試者空腹血標(biāo)本，分離血漿用于測ROS(nmol/mg Hb)，通過分析dichlorofluorescein熒光的方法檢測ROS水平。

1．7檢測SOD(U/mg Hb)的活性水平SOD的活性用Rice-Evans C等的方法[4]，稍加改良。

1．8血清微量元素檢測抽取空腹血，分離血漿檢測血紅蛋白(Hb，g/L)、鐵(SI，μmol/L)、鈣(Ca2+，mmol/L)、銅(Cu2+，μmol/L)和鋅(Zn2+，μmol/L)的濃度。

1．9統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用微軟辦公軟件Excel 2007(微軟公司，Redmond，WA)，通過方差分析(ANOVA)比較組間的平均值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測結(jié)果顯示，與同齡健康兒童比較，重癥腦癱兒童外周血中氧化應(yīng)激指標(biāo)明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　重癥腦癱患兒外周血氧化應(yīng)激指標(biāo)

注：GSH：谷胱甘肽；GSSG：氧化型谷胱甘肽；LPO：過氧化物酶；ROS：活性氧；SOD：超氧化物岐化酶

2．2微量元素指標(biāo)檢測另外，我們對重癥腦癱兒童外周血中常用微量元素指標(biāo)也進(jìn)行了檢測，與同齡健康兒童比較，指標(biāo)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2　重癥腦癱患兒外周血微量元素指標(biāo)

注：Hb：血紅蛋白；Fe2+：鐵離子；Ca2+：鈣離子；Zn2+：鋅離子；Cu2+：銅離子

3　討論

腦性癱瘓臨床表現(xiàn)輕重不一，但目前還沒有一個(gè)很精確的描述程度的標(biāo)準(zhǔn)，世界衛(wèi)生組織將運(yùn)動(dòng)障礙程度分為4級(jí)，本研究收入的均為3～4級(jí)運(yùn)動(dòng)障礙者，屬于重型小兒腦癱。本文對重型小兒腦癱和健康兒童間的氧化應(yīng)激(oxidative stress)狀態(tài)進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，微量元素明顯降低，氧化應(yīng)激明顯失衡，CP組明顯高于對照組。

氧化應(yīng)激是指機(jī)體的氧化還原平衡被打破，使內(nèi)環(huán)境傾向于氧化狀態(tài)，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞的炎性浸潤，并產(chǎn)生大量的氧化中間產(chǎn)物，是自由基對機(jī)體的一種負(fù)面調(diào)節(jié)，被認(rèn)為是導(dǎo)致衰老和多種疾病的重要因素。氧化應(yīng)激反應(yīng)在許多疾病中發(fā)揮重要作用，參與疾病的發(fā)病過程。如允許這種情況長時(shí)間存在，勢必引起細(xì)胞功能的損害，一旦損害形成就不再被正常的代償機(jī)制修復(fù)[5]。

營養(yǎng)與氧化應(yīng)激之間的關(guān)系是雙重的，營養(yǎng)素在代謝過程中可產(chǎn)生自由基和活性氧，而金屬微量元素，如銅離子和鐵離子，反過來促進(jìn)生成活性氧。另外，合理的營養(yǎng)膳食可提高機(jī)體的抗氧化能力。SOD一種很重要的金屬酶，可以保護(hù)脂質(zhì)細(xì)胞膜免受氧化損害。在紅細(xì)胞內(nèi)，SOD依賴銅并因此用作銅缺乏的指標(biāo)。大宗病例研究顯示過多攝入微量元素，如鐵和鋅，可影響銅的吸收和(或)代謝[6]，并因此導(dǎo)致銅缺乏。

考慮到本文列舉的結(jié)果，需要進(jìn)一步研究導(dǎo)致重癥腦癱兒童外周血中氧化應(yīng)激增高的具體機(jī)制。我們認(rèn)為某些微量元素缺乏可能是導(dǎo)致重癥腦癱兒童外周血中氧化應(yīng)激增高的原因之一。良好的營養(yǎng)管理有利于維持微量元素的穩(wěn)定，進(jìn)而減少由于微量元素缺乏導(dǎo)致的氧化應(yīng)激損傷，促進(jìn)腦癱兒童的康復(fù)。

[1]Rosenbaum P．The natural history of gross motor development in children with cerebral palsy aged 1 to 15 years[J]．Dev Med Child Neurol，2007，49(10)：724．

[2]Strauss DJ，Shavelle RM，Reynolds RD，et al．Survival in cerebral palsy in the last 20 years：signs of improvement?[J]．Dev Med Child Neurol，2007，49(2)：86-92．

[3]Prasad AS，Beck FW，Bao B，et al．Zinc supplementation decreases incidence of infections in the elderly：effect of zinc on generation of cytokines and oxidative stress[J]．Am J Clin Nutr，2007，85(3)：837-844．

[4]Rice-Evans C，Miller NJ．Total antioxidant status in plasma and body fluids[J]．Methods Enzymol，1994，234(1)：279-293．

[5]Jackson AA．Severe malnutrition．In：Warrell DA，Cox TM，F(xiàn)irth JD，eds．Oxford Textbook of Medicine[M]．4th ed．New York：Oxford University Press，2003：1 580．

[6]Schoendorfer NC，Tinggi U，Sharp N，Boyd R，Vitetta L，Davies PSW．Micronutrient intakes in enterally and orally fed children with severe cerebral palsy[J]．e-SPEN，2011，6(1)：e259-e262．

(收稿2016-01-12)

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1673-5110(2016)18-0093-02