響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲草菌絲液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素培養(yǎng)基

秦 鵬，王 龍，趙玉卉，韓融冰，路等學(xué)（甘肅省科學(xué)院，生物研究所，甘肅蘭州730000）

響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲草菌絲液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素培養(yǎng)基

秦 鵬，王 龍，趙玉卉，韓融冰，路等學(xué)*
（甘肅省科學(xué)院，生物研究所，甘肅蘭州730000）

探究利用響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲草液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素的條件，以提高蟲草素積累量。以蟲草素積累量為指標(biāo)，同時測定對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率，利用Plackett-Burman實驗篩選影響蟲草素積累量的關(guān)鍵因素，再以最陡爬坡實驗逼近最大蟲草素積累量響應(yīng)區(qū)域，最后應(yīng)用Box-Behnken方法優(yōu)化培養(yǎng)基；對蟲草素積累量和對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明：在25℃，無光照，160 r/min，pH自然，5 mL/100 mL接種量，優(yōu)化培養(yǎng)基為：KNO30.04 g/100 mL，酵母浸膏1.50 g/100 mL，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.03 g/100 mL，KH2PO40.2 g/100 mL，葡萄糖3.82 g/100 mL，ZnSO4·7H2O 0.06 g/100 mL，MgSO4·7H2O 0.13 g/100 mL，維生素B10.08 g/100 m，蟲草素積累量達(dá)到852.621 μg/mL；在同等條件下，利用優(yōu)化培養(yǎng)基發(fā)酵8 d+靜置10 d后，蟲草素積累量達(dá)到936.225 μg/mL。在本實驗多組分的條件下，菌絲體產(chǎn)率小于0.857 g/100 mL時，蟲草素生成的效率較高，而菌絲體產(chǎn)率大于1.703 g/100 mL時，蟲草素積累量開始下降；發(fā)酵第8 d蟲草素積累量和菌絲體產(chǎn)率存在極顯著相關(guān)關(guān)系。

響應(yīng)面，蛹蟲草，液體發(fā)酵，蟲草素，菌絲體

蟲草素（cordycepin）即3’-脫氧腺苷（3’-deoxyadenosine），屬嘌呤類生物堿，有抗腫瘤［1-2］、抑菌抗炎和提高免疫力等功效［3-4］，療效顯著，但化學(xué)合成難度大，使其國際市場上的價格很高。蟲草素主要

通過蛹蟲草培養(yǎng)物中獲得，而天然冬蟲夏草子實體不含蟲草素，其菌絲體發(fā)酵液中含極少量的蟲草素［5］。蛹蟲草菌絲體將90%以上的蟲草素分泌到培養(yǎng)基中［6］，液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素具有周期短、發(fā)酵過程易控制等優(yōu)點，液體發(fā)酵培養(yǎng)基對提高蟲草素產(chǎn)率至關(guān)重要，雷坤等用優(yōu)化培養(yǎng)基進(jìn)行液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素的研究，產(chǎn)率比優(yōu)化前提高124%［7］，蔡水淋等用響應(yīng)面法優(yōu)化液體培養(yǎng)基，蟲草素產(chǎn)率較優(yōu)化前提高108.3%［8］；研究報道遮光［9］、搖床+靜置兩段培養(yǎng)［10］能顯著提高蟲草素積累量，本研究采用遮光培養(yǎng)方式，實驗亦證實搖床+靜置培養(yǎng)方式能提高蟲草素積累量。雖然蟲草素的研究有很多進(jìn)展，但蟲草素的產(chǎn)率和生產(chǎn)成本一直都是蟲草素工業(yè)化生產(chǎn)的瓶頸。因此，本實驗對蛹蟲草液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化并進(jìn)一步實驗明確發(fā)酵第8 d蟲草素積累量和菌絲體產(chǎn)率之間的關(guān)系，為提高蟲草素產(chǎn)率、降低生產(chǎn)成本提供新的研究思路和實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蛹蟲草菌 購自中科院微生物研究所菌種保藏中心；蟲草素標(biāo)準(zhǔn)品 中國藥品生物制品檢定所；甲醇 色譜純，德國默克公司；KNO3、酵母浸膏、ZnSO4· 7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、葡萄糖、維生素B1市售分析純；水 市售純凈水。

SPJ-150生化培養(yǎng)箱 上海君竺儀器制造有限公司；HZQ-QX臥式空氣恒溫?fù)u床 北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司；Waters 1525高效液相色譜儀，配二極管陣列檢測器（2998 PDA）和在線脫氣機 美國Waters公司；0.22 μm有機相過濾器 上海密粒膜分離技術(shù)有限公司；ELGA MK2超純水器 北京格瑞恩科技發(fā)展有限公司；微波爐 美的集團(tuán)。

1.2 實驗方法

1.2.1 培養(yǎng)基與培養(yǎng)方法 斜面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂。種子培養(yǎng)基：市售純凈水。初始培養(yǎng)基：葡萄糖2.5 g/100 mL，酵母浸膏1 g/100 mL，市售純凈水。液體發(fā)酵培養(yǎng)基：市售純凈水。培養(yǎng)基初始pH均為自然，121℃滅菌30 min。

斜面菌種活化三次后轉(zhuǎn)接到平皿培養(yǎng)基，20℃黑暗條件下培養(yǎng)9 d，用打孔器取同一半徑上相同大小（約3 mm）的6個菌塊，分別轉(zhuǎn)接到平皿培養(yǎng)基中，置于5、10、15、20、25、30℃下黑暗培養(yǎng)9 d。

斜面菌種活化三次后轉(zhuǎn)接到裝種子培養(yǎng)基的100 mL/250 mL三角瓶中，置搖床160 r/min，25℃黑暗培養(yǎng)3 d制成種子懸液，以5 mL/100 mL接種量將種子懸液接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基，于160 r/min、25℃黑暗條件下置搖床培養(yǎng)8 d。

1.2.2 蟲草素的提取與菌絲體產(chǎn)率的測定 微波提取方法：將發(fā)酵菌懸液用微波提?。?00 W，1 min）后于三層紗布過濾，收集濾液，用于胞內(nèi)與胞外總蟲草素的測定，該方法經(jīng)實驗后確定。

HPLC法測定蟲草素條件：Zorbax SB C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為甲醇/水（15∶85）；流速1 mL/min；柱溫35℃；進(jìn)樣量20 μL；檢測波長260 nm，該方法由參考文獻(xiàn)［11］并實驗后確定；同時，將過濾得到的菌絲體置于烘箱中，于80℃下烘干至恒重，用于菌絲體產(chǎn)率的測定。

1.2.3 培養(yǎng)溫度的確定 對每個溫度下的菌落直徑測量三次，測量的夾角為60度，取均值作為溫度對菌株影響的指標(biāo)，每個溫度實驗重復(fù)3次。

1.2.4 Plackett-Burman實驗設(shè)計 通過參考相關(guān)研究［12-16］并進(jìn)行了單因素實驗，確定了Plackett-Burman實驗設(shè)計因素的水平，因素水平見表1。采用n=12的Plackett-Burman實驗設(shè)計對影響蟲草素積累量的8個因素進(jìn)行研究，同時測定對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率，實驗重復(fù)3次。

表1 Plackett-Burman實驗設(shè)計因素水平Table1 Levels of factors for Plackett-Burman design

1.2.5 最陡爬坡實驗 Plackett-Burman實驗設(shè)計篩選出3個關(guān)鍵因素，利用最陡爬坡實驗逼近蟲草素積累量最大值響應(yīng)區(qū)域，明確95%置信水平下的關(guān)鍵因素的設(shè)計中心點，關(guān)鍵因素質(zhì)量濃度依效應(yīng)值大小確定，爬坡方向為蟲草素積累量增加的方向，同時測定了對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率。其他5個因素依正效應(yīng)的取高水平質(zhì)量濃度，負(fù)效應(yīng)的取低水平質(zhì)量濃度，最陡爬坡實驗設(shè)計水平見表2。

表2 最陡爬坡實驗設(shè)計Table2 Experimental design of steepest ascent method

1.2.6 Box-Behnken實驗設(shè)計 依據(jù)Box-Behnken實驗設(shè)計原理，設(shè)計3因素3水平響應(yīng)面實驗，以最大蟲草素積累量為響應(yīng)目標(biāo)，3因素水平見表3，同時測定

了對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率。

表3 Box-Behnken實驗設(shè)計因素水平Table3 Levels and factors of Box-Behnken design

1.2.7 發(fā)酵第8 d蟲草素積累量和菌絲體產(chǎn)率相關(guān)性分析 對以上實驗得到的32對蟲草素積累量與菌絲體產(chǎn)率進(jìn)行相關(guān)性分析。將32個蟲草素積累量、菌絲體產(chǎn)率從大到小排序，探求兩者的相關(guān)性。

1.3 數(shù)據(jù)處理

溫度對菌株影響的實驗結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，繪圖軟件采用Oringin，數(shù)據(jù)處理軟件采用SPSS的LSD多重檢驗法；Plackett-Burman實驗設(shè)計軟件采用Minitab，Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計軟件采用Design-Expert；相關(guān)性分析實驗的排序、繪圖和相關(guān)性檢驗軟件采用SPSS。

2 結(jié)果與討論

2.1 適宜培養(yǎng)溫度

圖1反映了菌株在不同溫度下的生長情況。25℃為適宜溫度，優(yōu)于其他組（p＜0.01），隨溫度增加，菌落直徑先增長達(dá)到最大值后急劇下降，30℃為菌株的致死溫度。

圖1 溫度對菌株的影響Fig.1 The effect of temperature on strain

2.2 培養(yǎng)基優(yōu)化

2.2.1 Plackett-Burman實驗 每個因素分別取高（+1）低（-1）兩個水平，根據(jù)本研究前期Plackett-Burman實驗的結(jié)論，高低水平濃度比約為1.25倍時只篩選出一個因素，故將比值增至1.5倍，結(jié)果顯示1.5倍為適宜的高低水平比，Plackett-Burman實驗設(shè)計水平見表1，實驗結(jié)果及分析見表4。擬合模型的p= 0.029，R2為0.9723，故用該模型模擬實驗是可靠可信的。結(jié)果顯示：對因素予以高低水平處理篩選出3個關(guān)鍵因素，依次為X7＞X2＞X6，以蟲草素積累量增加為目標(biāo)，高水平比低水平質(zhì)量濃度對蟲草素積累量影響更大的因素依次為X7＞X2＞X4＞X5＞X3，而低水平質(zhì)量濃度有較大影響的因素依次為：X6＞X8＞X1。

2.2.2 最陡爬坡實驗 最陡爬坡實驗和響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化參數(shù)是實驗設(shè)計中非常實用的技術(shù)［17］。最陡爬坡實驗設(shè)計見表2，X7、X2、X4、X5、X3分別取高水平質(zhì)量濃度，X6、X8、X1分別取低水平質(zhì)量濃度，縮小X7、X2、X6高低水平質(zhì)量濃度差后再確定適宜的步長，進(jìn)行最陡爬坡實驗，爬坡方向為蟲草素積累量的增長方向。1～5組的蟲草素積累量分別為為：552.235、566.857、626.025、835.679、685.101 μg/mL，對應(yīng)的菌絲體產(chǎn)率依次為：0.183、0.189、0.945、1.801、1.112 g/100 mL，蟲草素積累量在第4組達(dá)到極大值，故以第4組為響應(yīng)面設(shè)計的中心點。

2.2.3 響應(yīng)面法實驗 采用N=15的Box-Behnken方法設(shè)計實驗，其中12個析因點，其他3個中心點用于估計誤差，因素水平見表3，實驗設(shè)計及結(jié)果見表5，編碼的回歸模型如下所示。Y=835.12-7.78X7-3.03X2-11.28X6+3.62X7X2+2.32X7X6+2.67X2X6-22.05X-15.29X-23.48X

以表5誤差和實驗值的比率作統(tǒng)計，誤差比率均在0.1%以下，證實該模型預(yù)測的可靠性。方差分析見表6。結(jié)果顯示：回歸模型R2為0.9996，說明模型可以真實反映99.96%的實驗數(shù)據(jù)，矯正決定系數(shù)R2Adj為0.9989，說明在消除自由度影響的前提下，僅有0.11%的變異不能被該模型解釋。模型失擬項p=0.9307大于0.05，說明在三個中心點實驗中，蟲草素積累量的均值和X7、X2、X6存在線性關(guān)系，可將誤差平方和、失擬平方和合并為殘差平方和以便檢驗?zāi)Ｐ惋@著性。模型p值小于0.01，接受回歸系數(shù)不全為零的備擇假設(shè)，回歸模型擬合較好。因此，在本實驗條件下，該模型是可信的，可以很好的預(yù)測和分析蟲草素積累量的變化。

表4 Plackett-Burman實驗設(shè)計及結(jié)果分析Table4 Design and results of analysis of Plackett-Burman design

表5 Box-Behnken實驗設(shè)計及結(jié)果Table5 Results of Box-Behnken design

表6 響應(yīng)面回歸分析Table6 Analysis of variance for response surface design

圖2～圖4是固定回歸模型中X2、X6、X7其中一個因素值后，Y（蟲草素積累量）關(guān)于另外兩個因素的回歸模型而繪制的3D曲面圖。在X7、X2、X6的取值區(qū)間內(nèi)，蟲草素積累量存在極大值點，固定值分別為3.88、1.52、0.03 g/100 mL。從圖上的等高線圖可以看出，最陡爬坡實驗確定的響應(yīng)面設(shè)計中心點已經(jīng)比較接近最大響應(yīng)值區(qū)域，曲面的陡峭程度反映了因素間交互作用的大小，圖2曲面較其他陡峭，X2、X7交互作用明顯于其他。

圖2 Y=f（X2，X7）的響應(yīng)面Fig.2 Response surface plot of Y=f（X2，X7）

圖3 Y=f（X6，X7）的響應(yīng)面Fig.3 Response surface plot of Y=f（X6，X7）

2.2.4 優(yōu)化培養(yǎng)基及模型驗證 分別對X7、X2、X6求一階偏導(dǎo)，聯(lián)立方程可求得蟲草素積累量最大時X7、X2、X6的質(zhì)量濃度：葡萄糖3.82%，酵母浸膏1.50%，七水合硫酸亞鐵0.03%，模型預(yù)測值為837.580 μg/mL，驗證值為852.621 μg/mL，與預(yù)測值的誤差為1.79%。在25℃、無光照、160 r/min，初始培養(yǎng)基中發(fā)酵8 d作為對照組，對照組蟲草素產(chǎn)率為457.906 μg/mL，優(yōu)化

培養(yǎng)基的蟲草素積累量比對照提高86.2%。

圖4 Y=f（X6，X2）的響應(yīng)面Fig.4 Response surface plot of Y=f（X6，X2）

利用優(yōu)化培養(yǎng)基再進(jìn)行搖床培養(yǎng)8 d+靜置培養(yǎng)10 d，蟲草素產(chǎn)率達(dá)到936.225 μg/mL，比對照組和優(yōu)化培養(yǎng)基的蟲草素積累量分別提高了104.5%和9.8%。優(yōu)化培養(yǎng)基組分為：葡萄糖3.82%，酵母粉1.50%，七水合硫酸亞鐵0.03%，KH2PO40.2%，KNO30.04%，ZnSO4· 7H2O 0.06%，MgSO4·7H2O 0.13%，維生素B10.08%。

2.3 蟲草素積累量與菌絲體產(chǎn)率相關(guān)性實驗

按菌絲體產(chǎn)率升序排列后（見圖5），蟲草素積累量亦呈上升趨勢，相對于菌絲體產(chǎn)率，蟲草素積累量的增速較為緩和；菌絲體產(chǎn)率小于0.857 g/100 mL時，菌絲體促進(jìn)蟲草素的效率較高，菌絲體產(chǎn)率高于1.703 g/100mL時，蟲草素積累量開始降低。因此，在復(fù)雜組分的實驗條件下，低菌絲體產(chǎn)率的培養(yǎng)基促進(jìn)蟲草素的效率較高。

圖5 發(fā)酵第8 d的蟲草素積累量與菌絲體產(chǎn)率變化Fig.5 Changes of cordycepin and mycelium by cordyceps militaris at 8th day

經(jīng)分析，原因可能為較多的菌絲體產(chǎn)率在發(fā)酵前期對底物消耗更多，而蟲草素的大量合成在發(fā)酵第6 d，在蟲草素大量合成期，營養(yǎng)組分已經(jīng)消耗殆盡，蟲草素的合成受到影響；此外，另一個原因可能是菌絲體產(chǎn)率越高，對液體培養(yǎng)基中水分的消耗越大，培養(yǎng)基中菌絲體胞外水份越少，菌絲體產(chǎn)生蟲草素后直接分泌到胞外，而蟲草素不再被吸收，胞外蟲草素質(zhì)量濃度達(dá)到飽和，抑制了菌絲體合成和分泌蟲草素。

經(jīng)SPSS相關(guān)性檢驗：發(fā)酵第8 d蟲草素積累量和菌絲體產(chǎn)率在0.01顯著性水平下存在相關(guān)關(guān)系，說明在本實驗條件下，利用菌絲體產(chǎn)率可以間接地預(yù)測蟲草素積累量的變化趨勢，有利于減少生產(chǎn)成本。

2.4 討論

蟲草素分子由一個腺嘌呤基團(tuán)和一個3’脫氧五碳糖基團(tuán)構(gòu)成，蟲草素的分子結(jié)構(gòu)、腺嘌呤核苷、脫氧腺嘌呤核苷和ATP類似，腺嘌呤核苷酸的合成代謝途徑為從頭合成和補救合成，從頭合成為主要的途徑，蟲草素的合成機理尚不明確，其合成途徑是否與腺嘌呤核苷酸的相似或者蟲草素只是腺嘌呤核苷酸合成的副產(chǎn)物，目前，文獻(xiàn)報道證實腺嘌呤、腺苷為蟲草素合成的前體物質(zhì)。此外，蟲草素對于蛹蟲草菌的意義方面的研究很少，文獻(xiàn)報道真菌激發(fā)子可以提高蟲草素產(chǎn)率［18］，是否因為其他真菌的加入激活了某些免疫反應(yīng)而促進(jìn)蟲草素合成和分泌，這方面的研究將對蟲草素積累量的提高產(chǎn)生較好的意義。

對于蛹蟲草液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素，研究報道胞外的蟲草素積累量占總量的70%以上，菌絲體含量很少［19］。而不同液體培養(yǎng)方式對蟲草素積累量的影響也很大［20-21］，靜置培養(yǎng)較搖床培養(yǎng)產(chǎn)蟲草素效率高，本實驗較低菌絲體產(chǎn)率有利于蟲草素的積累結(jié)果亦間接支持了上述結(jié)論；對于培養(yǎng)基組分，蟲草素的合成前體［22-23］、激發(fā)子等能較大程度的促進(jìn)蟲草素的合成，NH4+離子亦能顯著地促進(jìn)蟲草素的合成［24］，硫酸亞鐵能調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄水平，從而提高蟲草素合成，而本實驗結(jié)果顯示FeSO4·7H2O低濃度對蟲草素積累量的影響較大，F(xiàn)an等的實驗的亞鐵離子的添加量與本實驗相近［25］，但本實驗所用組分中的硫酸根離子質(zhì)量濃度較高，據(jù)此推測，高質(zhì)量濃度的硫酸根離子抑制了蟲草素生成。此外，國內(nèi)液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素的產(chǎn)量較低，不同菌株液體發(fā)酵產(chǎn)蟲草素的產(chǎn)量不同，但一般在1 g/L以下［26］，利用本實驗優(yōu)化的培養(yǎng)基生產(chǎn)得到蟲草素積累量接近1 g/L，且8種培養(yǎng)基組分價格低，而且，在本實驗多組分培養(yǎng)基條件下，蟲草素積累量和菌絲體產(chǎn)率呈極顯著相關(guān)關(guān)系，故可用菌絲體產(chǎn)率作為間接指標(biāo)預(yù)測蟲草素積累量變化趨勢，有利于生產(chǎn)成本的控制。

3 結(jié)論

本實驗的條件為：25℃，無光照，160 r/min，pH自然，液體發(fā)酵培養(yǎng)8 d；經(jīng)Plackett-Burman實驗篩選出三個關(guān)鍵因素，葡萄糖、酵母浸膏和FeSO4·7H2O，前兩個組分的高質(zhì)量濃度對蟲草素積累量的影響較大，F(xiàn)eSO4·7H2O低質(zhì)量濃度影響較大；經(jīng)優(yōu)化后的培養(yǎng)基為：葡萄糖3.82%，酵母浸膏1.50%，七水合硫酸亞鐵0.03%，KH2PO40.2%，KNO30.04%，ZnSO4·7H2O 0.06%，MgSO4·7H2O 0.13%，維生素B10.08%，經(jīng)搖床發(fā)酵8 d+靜置培養(yǎng)10 d后，蟲草素積累量達(dá)到936.225 μg/mL。在本實驗復(fù)雜組分的條件下，菌絲體產(chǎn)率小于0.857 g/100mL時，菌絲體促進(jìn)蟲草素的效率較高，菌絲體產(chǎn)率高于1.703 g/100mL時，蟲草素積累量開始降低，因此，較低菌絲體產(chǎn)率促進(jìn)蟲草素分泌，較高菌絲體產(chǎn)率抑制蟲草素的分泌。

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Liquid fermentation media for promoting cordycepin production by Cordyceps militaris mycelium using response surface methodology

QIN Peng，WANG Long，ZHAO Yu-hui，HAN Rong-bing，LU Deng-xue*
（Institute of Biology，Gansu Academy of Sciences，Lanzhou 730000，China）

Liquid fermentation media was optimized for promoting the yield of cordycepin by cordyceps militaris mycelium using response surface methodology and the corresponding yield of mycelium were measured.Firstly，factors playing important roles in the cordycepin production were selected based on Plackett-Burman design.Then the path of steepest ascent was undertaken to approach the optimal region of the cordycepin production.Finally，the optimal levels of those main factors were further optimized by using Box-Behnken design.All above experiments were repeated to analize the correlation between cordycepin and mycelium production.Fermentation conditions were temperature 25℃，dark，rotation speed 160 r/min，natural pH，inoculating amount 5 mL/100 mL.Optimal media was KNO30.04 g/100 mL，yeast extract 1.50 g/100 mL，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.03 g/100 mL，KH2PO40.2 g/100 mL，Glucose 3.82 g/100 mL，ZnSO4·7H2O 0.06 g/100 mL，MgSO4·7H2O 0.13 g/100 mL，Vitamin B10.08 g/100 mL.Cordycepin production reached 852.621 μg/mL.Then，using the optimal media on the same conditions，cordycepin production was optimized with 8 days'shaking-flask and 10 days'static culture and reached 936.225 μg/mL.The results of relationship between the yield of cordycepin and mycelium showed that when the yield of mycelium was less than 0.857 g/100 mL，it was more efficient that mycelium produced cordycepin.When the yield of mycelium was more than 1.708 g/100mL，the yield of cordycepin started descending.Production of cordycepin and mycelium at 8th day had significant correlations.

response surface method；cordyceps militaris；liquid fermentation；cordycepin；mycelium

TS201.3

A

1002-0306（2016）08-0185-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.08.030

2015－07－24

秦鵬（1984-），男，碩士，助理研究員，研究方向：食（藥）用蕈菌學(xué)，E-mail：kingkerberos@163.com。

*通訊作者：路等學(xué)（1962-），男，碩士，高級工程師，研究方向：食用蕈菌學(xué)，E-mail：ludengxue@126.com。

甘肅省科學(xué)院青年科技創(chuàng)新基金項目（2014QN-07）；甘肅省科學(xué)院與中科院合作項目（2012HZ-02）。