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      蛋白橘皮果膠膠體制備、表征及對紅景天苷體外釋放研究

      2016-09-14 12:24:54彭海龍胡振瀛寧方建余寧翔朱雯婷劉文強(qiáng)南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室江西南昌330047南昌大學(xué)化學(xué)工程系江西南昌33003
      食品工業(yè)科技 2016年8期
      關(guān)鍵詞:橘皮紅景天果膠

      陳 莎,彭海龍,2,*,胡振瀛,寧方建,余寧翔,朱雯婷,劉文強(qiáng),熊 華(.南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江西南昌330047;2.南昌大學(xué)化學(xué)工程系,江西南昌33003)

      蛋白橘皮果膠膠體制備、表征及對紅景天苷體外釋放研究

      陳 莎1,彭海龍1,2,*,胡振瀛1,寧方建1,余寧翔1,朱雯婷1,劉文強(qiáng)1,熊 華1
      (1.南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江西南昌330047;2.南昌大學(xué)化學(xué)工程系,江西南昌330031)

      以牛血清蛋白與橘皮果膠為原料,采用安全無毒的自組裝技術(shù)制備緩釋水凝膠,并以制備過程中兩種原料配比、蛋白濃度與pH進(jìn)行三因素三水平對凝膠粒徑影響的響應(yīng)面分析。在此基礎(chǔ)上,重點研究顯著因子添加橘皮果膠比例對蛋白成膠的影響,并結(jié)合利用流變、圓二、掃描電鏡對其進(jìn)行表征。以紅景天苷為模型檢測其包封效果和體外釋放,結(jié)果表明:橘皮果膠和牛血清蛋白比例為0.5和pH為4.5時加熱粒徑達(dá)到最小259.5 nm,尺寸分布較窄(PDI<0.06),形成良好穩(wěn)定的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)水凝膠;紅景天苷包封率達(dá)到49.88%,在模擬胃腸溶液中具有緩釋效果。本研究的水凝膠可作為紅景天苷以及其他功能性食品的潛在輸送載體。

      牛血清蛋白,橘皮果膠,自組裝,水凝膠,緩釋

      水凝膠因獨特的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),具備良好的滲透性,能夠有效提高載藥量和生物半周期和穩(wěn)定性等,在藥物釋放領(lǐng)域受到極大關(guān)注[1-2]。蛋白質(zhì)富含形成具生物活性水凝膠時非常重要的β-折疊結(jié)構(gòu),被廣泛用作凝膠制備的材料[2]。而蛋白的功能性質(zhì)極大地受到外界條件如pH、離子強(qiáng)度與溫度的影響,容易引起加熱聚集或等電點沉淀[3]。近年來,許多醫(yī)藥領(lǐng)域研究人員對多糖和蛋白質(zhì)自組裝制備了具有綠色無毒,高負(fù)荷,高穩(wěn)定和可控制釋放的水凝膠[4-6]。

      紅景天苷在醫(yī)藥中可用于抗炎癥、抗疲勞、抗衰老、抗抑郁性、抗病毒性、肝保護(hù)性和心血管神經(jīng)保護(hù)性等,同時,在抑制白血病、胃腺癌、腮腺癌、結(jié)腸癌等方面也有一定作用,但存在生物半周期較短和口服生物利用度不高的問題[7-9]。有研究報導(dǎo)利用脂

      質(zhì)體和微粒包裹紅景天苷,但是這些有機(jī)載體存在體內(nèi)體外不穩(wěn)定、可控性釋放較低、包裹藥物易泄漏、安全性等缺陷[10-12]。

      牛血清蛋白(BSA)是食品領(lǐng)域常用的一種模型蛋白,含有583個氨基酸殘基,分子量為66.5,等電點為4.7;在人體內(nèi)能夠很好地被消化吸收,具備低抗原性、低過敏性和高生物降解性[13-14]。橘皮果膠(CPP)是一種從橘皮中提取出來的由α-(1-4)-脫水半乳糖醛酸殘基組成的線性多糖,目前,因為應(yīng)用有限造成大量浪費,成為了許多工廠面臨的巨大問題[15-16]。因此,本文利用BSA和CPP制備一種新型的以天然食品級材料為基礎(chǔ)的傳遞系統(tǒng),以紅景天苷為模型,考察模擬體外的釋放行為,以提高紅景天苷的生物利用效率。

      1 材料與方法

      1.1 材料與儀器

      牛血清蛋白 含量>98%,上海西格瑪有限公司;橘皮果膠 酯化度50%,雜質(zhì)<10%,上海西格瑪有限公司;胃蛋白酶 酶活力≥250 U/mg,上海西格瑪有限公司;胰蛋白酶 酶活力≥250 U/mg,上海西格瑪有限公司;乙酸鈉、乙酸和氫氧化鈉等試劑 分析純。

      JB-3型磁力攪拌器 上海雷磁新徑儀器有限公司;BS 224S型電子天平 北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;NICOMP 380/ZLS型激光納米粒度儀 美國粒度儀公司;T6型紫外可見分光光度計 北京普析通用儀器有限公司;THZ-82型恒溫振蕩器 常州國華電器有限公司;Anke LXJ-IIB型離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;MOS-450 AF/CD型圓二 法國BioLogic公司;TA DHR-2 type型流變儀 美國TA公司;Quanta 200F型環(huán)境掃描電子顯微鏡 美國FEI公司。

      1.2 實驗方法

      1.2.1 凝膠的制備方法及實驗設(shè)計 凝膠制備方法[5]:BSA溶解于去離子水,配制10 mg/mL的牛血清蛋白水溶液。加入質(zhì)量比MR分別為0.2、0.5和0.8的CPP混勻,混勻過程維持溶液的pH為中性,過夜充分保證水合然后冷凍干燥。用去離子水分別配制蛋白濃度c為3.33、6.66、10 mg/mL的牛血清蛋白果膠混合物(BSACPP),分別調(diào)節(jié)牛血清蛋白果膠pH至5.5、5.0和4.5,平衡之后將溶液置于90℃的水浴中加熱20 min,冷卻后即可得到牛血清蛋白果膠納米凝膠(BSA and CPP hydrogel,BCH)。

      利用Design Expect 8.0(Statease公司)選取牛血清蛋白橘皮果膠質(zhì)量比、蛋白濃度和pH為3個影響因子,以粒徑和分散系數(shù)為指標(biāo),在分別進(jìn)行單因素實驗之后,選取上述3個水平展開,實驗的設(shè)計總共包括17個安排,該實驗的順序完全隨機(jī)。實驗針對牛血清蛋白橘皮果膠混合體系(BSA-CPP)和凝膠體系(BCH),總共給出34個樣品,并進(jìn)行方程擬合和響應(yīng)分析,方差分析用軟件自帶ANOVA來檢驗牛血清蛋白橘皮果膠比例、蛋白濃度和pH變化對粒徑大小的影響是否顯著性差異(p<0.05)。本文重點研究蛋白濃度3.33 mg/mL和pH為4.5條件下,顯著因子果膠添加比例對凝膠形成的影響。

      凝膠平均粒徑及分布的測定采用動態(tài)光散射的方法,采用納米粒度儀測定樣品的平均粒徑(Dh)及多分散系數(shù)(Polydispersity index,PDI),每個樣品平行測定三次以上,粒徑數(shù)據(jù)由儀器自帶軟件NICOMP 1.0進(jìn)行Gaussion分布和Nicomp分布分析。

      1.2.2 流變性質(zhì)的測定 利用流變儀來測試不同果膠添加比例制備凝膠樣品的靜態(tài)流變行為。測定條件[17]:溫度25℃,采用直徑為40 mm、錐度為1%的不銹鋼板,間隙為1 mm,固定頻率為1 Hz,剪切頻率先由0.1 s-1上升到600 s-1(上行曲線),然后由600 s-1遞減到0.1 s-1(下行曲線),來回各持續(xù)10 min,得到樣品的粘度和壓力隨剪切速率來回的變化曲線。

      1.2.3 二級結(jié)構(gòu)的測定 對添加不同果膠比例的BSA、BSA-CPP和BCH樣品進(jìn)行稀釋(蛋白濃度為0.3 mg/mL),使用路徑長度為0.1 mm的石英比色皿進(jìn)行在190~250 nm下的圓二圖譜測定,同時去離子水作空白對照[18]。圖譜轉(zhuǎn)化為包括α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲四種二級結(jié)構(gòu),計算在以下網(wǎng)址獲得:http://dichroweb.cryst.bbk.ac.uk/html/process.shtml.

      1.2.4 凝膠微觀結(jié)構(gòu)的觀察 利用掃描電鏡(SEM)觀察凝膠的表面形貌[19]。將冷凍干燥的凝膠樣品,少許撒在貼了雙面膠的樣品臺上,吹去多余粘附物,放置于掃描電子顯微鏡(SEM)10 kV加速電壓低真空模式觀察放大倍數(shù)為6000的樣品結(jié)構(gòu)。

      1.2.5 離子、pH穩(wěn)定性 利用動態(tài)光衍射法測定制備凝膠穩(wěn)定性[5]。將制備果膠凝膠pH分別調(diào)至2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0測定其粒徑及分散系數(shù)。之后另取制備凝膠分別加入0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mol/L NaCl溶液測定其粒徑及分散系數(shù),之后在調(diào)至pH2.0~12.0的凝膠中加入0.15 mol/L NaCl溶液測定其粒徑及分散系數(shù)。

      1.2.6 紅景天苷的包封率測定及模擬胃腸道釋放 紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:稱取0.05 g紅景天苷粉末,溶解于磷酸鹽緩沖液中,定容至50 mL容量瓶中,依次配制為梯度濃度的溶液,分別編號1、2、3、4、5測定紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程為y=4.35226x-0.01325。

      采用離心法[20]測定紅景天苷吸附含量。離心法直接混合5 mL(25 mg)制備凝膠和5 mL配制紅景天苷(總紅景天苷m(Sa)5 mg),搖床適速振蕩48 h,之后離心紫外測定懸浮液紅景天苷含量m’(Sa)。透析袋法則量取5 mL紅景天苷溶液于試管中,加入裝有5 mL制備凝膠的透析袋,之后同上操作,進(jìn)而按下式計算出其包封率(EE):

      參照文獻(xiàn)方法[21]采用紫外透析測定紅景天苷從牛血清蛋白果膠凝膠的模擬胃腸道體外釋放。將吸附紅景天苷牛血清蛋白果膠凝膠以透析袋形式加入SGF(模擬胃液,pH1.2,含1%胃蛋白酶)2 h和SIF(模擬腸液,pH6.8,含1%胰酶)媒介4 h,整個體系保持在37℃水浴溫和攪拌。按照一定時間間隔從體系中取出5 mL用紫外進(jìn)行測定,并重新填充5 mL釋放媒介

      確保溶液濃度一定。同時單獨紅景天苷放入透析袋中相同操作做空白對照。

      1.3 數(shù)據(jù)分析

      本文中所有實驗均重復(fù)3次,采用Origin 8.6 (OriginLab公司)和SPSS 16.0(SPSS公司)對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,樣品平均值之間的差異性通過Duncan法比較(p<0.05)。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 凝膠的粒徑分布分析

      經(jīng)Design Expert軟件可以得到牛血清蛋白BSA和橘皮果膠CPP混合物體系BSA-CPP響應(yīng)方程:粒徑=-26772.42325-1396.93858MR-410.28182c+10887.74362pH+312.74446MR×c-19.16667MR×pH+107.89055c×pH+530.70370MR2-17.39617c2-1081.17333pH2,并且MR、pH、c、MR×pH、pH×c、pH2、c2是顯著影響因子,又以MR、pH影響最為顯著,所以給出質(zhì)量比和pH的交互作用響應(yīng)曲面圖(圖1)。pH影響機(jī)制主要是調(diào)節(jié)pH至蛋白等電點4.7之下,蛋白會發(fā)生陰性至陽性的轉(zhuǎn)變,進(jìn)而與陰性果膠產(chǎn)生同種電荷到異種電荷的增強(qiáng)的靜電作用,粒徑大幅減?。?2]。本文重點研究pH4.5時蛋白果膠帶異種電荷時MR的影響;凝膠響應(yīng)面無法找到合適方程,原因?qū)⑦M(jìn)一步研究。

      由圖1(A)中可以看到,隨著橘皮果膠比例0.2~0.8,體系粒徑先減小后增大,可以推測是蛋白與果膠復(fù)合能力的飽和,多余果膠只能在體系中形成架橋絮凝,進(jìn)而造成體系粒徑的增大[23];圖1(B)中凝膠體系在MR為0.5和0.8時,粒徑隨著pH降低呈現(xiàn)下降趨勢,推測是由于蛋白加熱疏水作用交換二硫鍵冷

      卻導(dǎo)致的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的生成[5],但在添加果膠比例為0.2時,體系粒徑隨著pH的減少先減少后增大,推測比例為0.2的果膠不足以維持蛋白在近等電點下的平衡發(fā)生聚集。

      圖1 BSA-CPP(R2=0.95)(A)和BCH(R2=0.80)(B)pH與質(zhì)量比的粒徑響應(yīng)圖Fig.1 Diameter-responsibility influenced by pH and mass ratio (MR)of BSA BSA-CPP(R2=0.95)(A)and BCH(R2=0.80)(B)

      圖2 不同CPP添加比例凝膠的流變性質(zhì)研究(a:0.2,b:0.5,c:0.8)Fig.2 Rheological properties of different mass ratio(MR)of CPP∶BSA(a:0.2,b:0.5,c:0.8)

      2.2 橘皮果膠添加對凝膠流變性質(zhì)的影響

      由圖2(A)可以看出,制備凝膠粘度隨剪切速率非線性減小,并且減小速率隨剪切速率的增大而減少,即呈現(xiàn)假塑性流體的流體行為。并且可以發(fā)現(xiàn)體系的剪切上行與剪切下行并不重疊,而是存在著在同一剪切速率下下行粘度小于上行粘度,即剪切滯后的觸變現(xiàn)象,二條線圍成了一定大小的觸變環(huán)。這一現(xiàn)象通常由體系中一些靜電作用、空間位阻作用等形成,可以抵抗外界一定強(qiáng)度的機(jī)械壓力[17]。圖A(a)顯示,在CPP添加比為0.2時,加熱成膠的BCH相比未加熱的蛋白果膠混合物粘度有所下降,甚至不足以抵抗外界的剪切,觸變環(huán)無法閉合。而圖A(b)和(c)顯示在添加CPP比例為0.5和0.8時,BCH凝膠比未加熱的蛋白果膠混合物粘度有所增大。

      由圖2(B)可以看出,混合物體系和凝膠體系只有在外界壓力達(dá)到一定的值才會開始流動,這是屈服-假塑性流體的典型流變行為,通常形成了一定的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)才有此現(xiàn)象。比較圖2B(c)與A(c)可以發(fā)現(xiàn),添加比例為0.8時,混合物體系壓力隨剪切速率變化的滯后圈為順時針,而粘度隨剪切速率變化的滯后圈為逆時針的現(xiàn)象,即負(fù)觸變現(xiàn)象。這種現(xiàn)象出現(xiàn)于高分子對固體粒子吸附不夠強(qiáng)的情況,有絮凝體存在但不沉淀,進(jìn)一步證實了果膠的過量與架橋絮凝現(xiàn)象的存在[24]。

      2.3 橘皮果膠添加對凝膠構(gòu)象的影響

      表1揭示了不同橘皮果膠濃度對于蛋白二級結(jié)構(gòu)的影響:混合體系CPP的添加相比單獨蛋白帶來二級結(jié)構(gòu)主要變化是α-螺旋大幅度轉(zhuǎn)變?yōu)棣?折疊和β-轉(zhuǎn)角,并伴隨無規(guī)則卷曲的輕微變化。添加比例為0.2和0.8時,主要發(fā)生的變化是β-折疊的增加;而添加比例為0.5時β-折疊的增加顯著性變化更小,相對而言β-轉(zhuǎn)角的增加更為顯著;無規(guī)則卷曲隨著CPP添加比例的增加呈現(xiàn)減少,無顯著變化,增加三種變化。凝膠構(gòu)象性質(zhì)是凝膠的重要參數(shù)之一,尤其是蛋白的二級結(jié)構(gòu),β-折疊是蛋白組裝形成三維網(wǎng)絡(luò)凝膠的重要結(jié)構(gòu),而β-轉(zhuǎn)角也被認(rèn)為是蛋白高度有序的產(chǎn)物[25]。推測添加比例0.2和0.8時β-折疊顯著增加原因時果膠的不足或果膠過量會引起蛋白的自組裝或蛋白與果膠的多重組裝促進(jìn)了β-折疊的生成[26]。

      而在加熱成膠之后,添加果膠質(zhì)量比0.2時,α-螺旋繼續(xù)下降,β-折疊、β-轉(zhuǎn)角變化不大,無規(guī)則卷曲顯著提高,推測這是果膠濃度過低不足以維持蛋白接近等電點的加熱變性聚集造成的。而在CPP添加比例為0.5時,混合體系至凝膠體系過程由α-螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)棣?折疊的變化在疏水作用力下增大,無規(guī)則卷曲含量顯著減少,伴隨β-轉(zhuǎn)角略微降低。而當(dāng)CPP添加比例達(dá)到0.8時,β-折疊和β-轉(zhuǎn)角在混合體系基礎(chǔ)上繼續(xù)增加,但同時無規(guī)則卷曲含量也在升高,推測是多重吸附的凝膠增強(qiáng)了體系的有序性,但同時可能存在多種復(fù)合物的生成。

      2.4 凝膠的粒徑分析和形貌觀察

      表1 圓二牛血清蛋白、不同含量橘皮果膠蛋白果膠混合物和復(fù)合膠的二級結(jié)構(gòu)Table1 Second structure of BSA,BSA-CPP and BCH with different mass ratio(MR)of CPP∶BSA from CD

      表2 不同橘皮果膠添加比例的蛋白果膠混合體系和凝膠體系的峰值分布Table2 Peak distribution of BSA-CPP and BCH system with different mass ratio(MR)of CPP∶BSA

      表2是凝膠添加不同橘皮果膠比例加熱前和加熱后的粒徑分布峰值表。其中比例為0.5時呈現(xiàn)單分散體系Gussian分布,具備較小粒徑分布系數(shù)(PDI<0.06),呈現(xiàn)良好單分散性;而果膠比例為0.2和0.8時呈現(xiàn)出多分散體系Nicomp分布,進(jìn)一步證實了果膠不足與過量引起的除復(fù)合體系之外蛋白自組裝及二重復(fù)合體系的生成[22]??砂l(fā)現(xiàn)在添加果膠比例為0.2

      和0.5的體系都呈現(xiàn)單峰分布,而添加果膠比例0.8時出現(xiàn)雙峰,推測小峰是蛋白果膠復(fù)合物峰,而大峰是多余果膠自纏繞形成[17]。

      圖3中A、B、C圖分別為加入CPP比例0.2、0.5和0.8制備凝膠的掃描電鏡圖,可以看到在圖A中凝膠結(jié)構(gòu)確實有所破壞,證實了加入果膠比例0.2不足以維持蛋白在接近等電點的加熱;而加入CPP比例0.5時形成良好三維網(wǎng)狀凝膠結(jié)構(gòu)體系;當(dāng)體系加入多大蛋白質(zhì)量比為0.8時,凝膠明顯發(fā)生了多層吸附現(xiàn)象。

      圖3 不同橘皮果膠質(zhì)量添加比制備凝膠的掃描電鏡圖Fig.3 SEM of BCH with with different mass ratio(MR)of CPP∶BSA

      2.5 凝膠的離子及pH穩(wěn)定性

      凝膠實際應(yīng)用易受pH和離子強(qiáng)度的影響而限制其使用。蛋白果膠凝膠隨著鹽濃度粒徑變化與PDI變化如圖4(A)所示,凝膠在添加0~0.25 mol/L的鹽溶液粒徑變化不大,而且保持著小于0.2的良好PDI指數(shù),說明凝膠在此離子強(qiáng)度范圍內(nèi)可保持穩(wěn)定。

      圖4 BCH凝膠粒徑與分布系數(shù)的離子強(qiáng)度依賴性(A)和pH依賴性(B)Fig.4 The iconic strength(A)and pH dependence(B)of Dh and PDI of BCH

      圖4(B)是制備凝膠在pH2.0~12.0的粒徑值和分散系數(shù),可以發(fā)現(xiàn),凝膠在pH2.0~12.0保持較小且穩(wěn)定的分散系數(shù);而凝膠粒徑值在pH2.0強(qiáng)酸性條件下較大,推測是果膠微水解的原因[20],在pH4.0~12.0會隨著pH逐漸增大發(fā)生輕微的增加,結(jié)合文獻(xiàn)判斷這是隨著堿性的增強(qiáng)果膠羧基充分質(zhì)子化溶脹造成[27]。相對單獨蛋白體系和蛋白果膠混合體系,制備凝膠取得了一定穩(wěn)定性的提高,這要歸功于蛋白質(zhì)加熱過程中的疏水作用和二硫鍵交換,促進(jìn)了其分子間交聯(lián)的不可逆性和形成穩(wěn)定交聯(lián)三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[5]。

      2.6 牛血清蛋白果膠凝膠包裹紅景天苷的包測封率定及釋放

      通過離心法測得凝膠包裹紅景天苷的包封率(EE)為49.88%±0.59%。就紅景天苷從凝膠中的釋放,本文模擬胃腸道進(jìn)行了釋放研究,研究結(jié)果見圖5,同時紅景天苷單獨釋放作為對照。可以發(fā)現(xiàn),單獨紅景天苷在模擬胃腸道中釋放迅速,并且基本呈現(xiàn)零級釋放,并且在3.5 h達(dá)到近100%的釋放。而紅景天苷從制備凝膠中,前2 h在胃消化液的釋放明顯較緩慢,而后在模擬腸液中速度有所增大,6 h后達(dá)到了80.24%的最大釋放。

      釋放的階段性,推測原因為果膠在胃液中果膠有所水解,但分子量達(dá)上千道爾頓的蛋白及其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)還是足以阻擋紅景天苷的釋放;而在腸道中,凝膠在經(jīng)歷了果膠的水解和脫離后蛋白消化迅速,紅景天苷大量從中釋放。結(jié)果表明凝膠可以有效延長活性成分的生物半周期,提高特別是靶向腸道的作用效率。

      圖5 紅景天苷從制備凝膠及空白在模擬胃消化液(前2 h)與腸消化液(后4 h)的累積釋放Fig.5 Accumulated release of salidroside from BCH and control in SGF(first 2 h)and SIF(later 4 h)

      3 結(jié)論

      研究了不同橘皮果膠濃度對牛血清蛋白成膠的影響,并且利用安全無毒自組裝方法制備了一種腸道靶向控制釋放載體凝膠。結(jié)果表明:蛋白與橘皮果膠質(zhì)量比為0.5時,能夠制得粒徑小、流變性質(zhì)和結(jié)構(gòu)構(gòu)象穩(wěn)定的果膠嵌入型三維結(jié)構(gòu)蛋白凝膠;而在添加比例為0.2或0.8時,體系易因果膠不足或過量發(fā)生蛋白自組裝或果膠蛋白的多重吸附現(xiàn)象,成為多分散體系。制備凝膠應(yīng)用于功能性食品紅景天苷的載藥包封率達(dá)到49.88%,模擬體外釋放具備胃腸道緩釋功能,并且具備一定的pH與離子穩(wěn)定性,在食品及其他領(lǐng)域具潛在價值。

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      Research on preparation,characterization of bovine serum albumin and citrus peel pectin hydrogel and release for salidroside in vitro

      CHEN Sha1,PENG Hai-long1,2,*,HU Zhen-ying1,NING Fang-jian1,YU Ning-xiang1,ZHU Wen-ting1,LIU Wen-qiang1,XIONG Hua1
      (1.State Key Laboratory of Food Science and Technology,Nanchang University,Nanchang 330047,China;2.Department of Chemical Engineering,Nanchang University,Nanchang 330031,China)

      A novel slow release hydrogel was prepared by bovine serum albumin(BSA)and citrus peel pectin via self-assembly.The significant influence on the diameter of hydrogel was found and discussed by three factors Mass ratio(MR)of pectin and BSA,protein concentration,and pH at three level in the preparation of the hydrogel.Combined with the characterization of rheology,CD and SEM,the paper further focused on investigating the effective factor MR of CPP and BSA.The results showed that mixture of pectin and BSA reached the smallest particle size 259.5 nm with a narrow size distribution(PDI<0.06)and formed a good and stable hydrogel with three-dimensional network structure when heated with mass ratio(MR)of CPP:BSA 0.5 at pH4.5.The result indicated that the hydrogels(BCH)had a high encapsulation efficiency(EE,49.88%)and slow release under simulated gastric and intestinal fluid condition when salidroside was used as a model molecule,which showed that this novel hydrogel might be a potential deliver carrier for salidroside or other functional food agents.

      bovine serum albumin;citrus peel pectin;self-assembly;hydrogels;slow release

      TS218

      A

      1002-0306(2016)08-0139-06

      10.13386/j.issn1002-0306.2016.08.020

      2015-09-29

      陳莎(1992-),女,碩士研究生,研究方向:食品科學(xué),E-mail:251761607@qq.com。

      *通訊作者:彭海龍(1979-),男,博士,講師,主要從事新劑型和功能食品方面的研究,E-mail:peng_hailong@aliyun.com。

      國家自然科學(xué)基金(21201098);江西省自然科學(xué)基金(20151BAB203029)。

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