兩種方法在宮頸癌篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值比較

蘇美鮮，楊玉秀，李鳳巧

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兩種方法在宮頸癌篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值比較

蘇美鮮，楊玉秀，李鳳巧

目的探討兩種方法在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值及可行性。方法選取在我院行宮頸癌篩查的684例患者為研究對(duì)象，分別采用乳頭瘤病毒DNA(HPV-DNA)檢測(cè)和宮頸細(xì)胞DNA定量分析兩種方法進(jìn)行宮頸癌篩查，分析比較兩種方法的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果經(jīng)組織病理檢查，684例患者中，良性644例，惡性40例；其中HPV-DNA檢測(cè)與病理結(jié)果一致者良性465例，惡性38例，診斷準(zhǔn)確率為73.54%(503/684)；宮頸細(xì)胞DNA定量分析與病理結(jié)果一致者良性583例，惡性29例，診斷準(zhǔn)確率為89.47%(612/684)。經(jīng)檢測(cè)，HPV-DNA敏感度為95.00%，高于宮頸細(xì)胞DNA定量分析的72.50%(P<0.01)；宮頸細(xì)胞DNA定量分析的特異性和準(zhǔn)確率均高于HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果(P<0.01)。結(jié)論HPV-DNA檢測(cè)敏感度較高，具有預(yù)警作用，便于預(yù)后觀察；宮頸細(xì)胞DNA定量分析特異性及準(zhǔn)確率較高，適用于宮頸癌和癌前病變的篩查工作。

宮頸癌；HPV-DNA檢測(cè)；宮頸細(xì)胞DNA定量分析

宮頸癌主要發(fā)生在宮頸被覆上皮部位，其組織學(xué)類型常表現(xiàn)為鱗癌、腺癌及腺鱗癌，是由高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染而引起的，且近年發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。因此，宮頸癌和癌前病變的早期發(fā)現(xiàn)對(duì)于宮頸癌的治療有決定性的意義，而有效的篩查方法最為重要[1]。目前，液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)已經(jīng)替代了宮頸涂片，但是應(yīng)用細(xì)胞病理學(xué)篩查宮頸癌無(wú)法預(yù)測(cè)評(píng)估其病變發(fā)展趨勢(shì)。有學(xué)者建議，將HPV-DNA檢測(cè)和宮頸細(xì)胞DNA定量分析應(yīng)用于宮頸癌的早期診斷[2]。本研究探討HPV-DNA檢測(cè)和宮頸細(xì)胞DNA定量分析兩種方法在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值及可行性，報(bào)告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年7月～2014年7月在我院行宮頸癌篩查的684例患者為研究對(duì)象(均行病理檢查)，分別采用HPV-DNA檢測(cè)和宮頸細(xì)胞DNA定量分析兩種方法進(jìn)行宮頸癌篩查。其中，年齡18～68歲；孕次0～9次，平均4次；產(chǎn)次0～5次，平均2次。所有患者一般資料具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)認(rèn)證批準(zhǔn)，患者知情并簽署相關(guān)同意書。

1.2試劑HPV-DNA分型檢測(cè)儀和試劑盒均為上海透景生命科技有限公司產(chǎn)品，全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析儀由北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3方法

1.3.1HPV-DNA檢測(cè)采用HPV基因分型檢測(cè)試劑盒，使用PCR基因芯片技術(shù)，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作，檢測(cè)18種高危型HPV和5種低危型HPV。檢測(cè)方法：將采樣器放于宮頸口處進(jìn)行逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3圈，然后將采樣時(shí)使用的聚酯纖維拭子置于病毒的采樣液中行HPV-DNA檢測(cè)，最后所有患者行病理檢查，并以此檢查作為最終診斷依據(jù)。

1.3.2宮頸細(xì)胞DNA定量分析樣本采集和制備：將TCT檢測(cè)后病變?cè)谖疵鞔_意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)及ASCUS病變以上患者的標(biāo)本再次進(jìn)行制片，用95%乙醇固定，經(jīng)Feulgon染色后進(jìn)行DNA定量分析。DNA倍體檢測(cè)：將制備好的玻片用全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析儀進(jìn)行掃描，掃描時(shí)同一玻片上的淋巴細(xì)胞核DNA含量為參照細(xì)胞的2倍體。

1.4評(píng)價(jià)方法采用敏感度、特異性和診斷準(zhǔn)確率對(duì)兩種檢測(cè)方法進(jìn)行比較。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定性數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，以P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1兩種檢測(cè)方法與病理檢查結(jié)果比較見表1、2。經(jīng)組織病理檢查，684例患者中，良性644例，惡性40例；其中，HPV-DNA檢測(cè)與病理結(jié)果一致者良性465例，惡性38例，診斷準(zhǔn)確率為73.54%(503/684)；宮頸細(xì)胞DNA定量分析與病理結(jié)果一致者良性583例，惡性29例，診斷準(zhǔn)確率為89.47%(612/684)。

表1　HPV-DNA檢測(cè)與病理檢查結(jié)果比較　(例)

表2　宮頸細(xì)胞DNA定量分析與病理檢查結(jié)果比較　(例)

2.2兩組檢測(cè)方法敏感度、特異性和診斷準(zhǔn)確率比較見表3。經(jīng)檢測(cè)，HPV-DNA敏感度為95.00%，高于宮頸細(xì)胞DNA定量分析的72.50%；宮頸細(xì)胞DNA定量分析的特異性和準(zhǔn)確率均高于HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果。

表3　兩組檢測(cè)方法敏感度、特異性和準(zhǔn)確率比較

3　討　論

宮頸癌的發(fā)病過程是多因素、多步驟、多途徑的，其涉及到抑制癌基因細(xì)胞的失活和癌基因細(xì)胞的激活，染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)量發(fā)生變化，從而產(chǎn)生非整倍體，而宮頸病變的標(biāo)志是非整倍體[3]。因此，可通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNA含量來診斷是否屬于腫瘤細(xì)胞。

TCT檢測(cè)能夠清晰觀察患者細(xì)胞結(jié)構(gòu)和形態(tài)的變化，且可以避免丟失刮板上的大量細(xì)胞，其在敏感度和準(zhǔn)確率方面較巴氏刮片有了很大的提高，但是在判讀涂片的時(shí)候容易受到外界因素的影響，從而導(dǎo)致陰性率較高，極易將宮頸癌和癌前病變漏檢[4]。HPV-DNA檢測(cè)的核酸雜交法主要有直接核酸探針法、靶DNA擴(kuò)增法和雜交信號(hào)放大法三種，其中直接核酸探針法最為常用。由于常規(guī)的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)對(duì)于HPV感染容易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性的結(jié)果，所以HPV-DNA檢測(cè)常用雜交捕獲法[5]。本次研究數(shù)據(jù)顯示，HPV-DNA敏感度為95.00%，高于宮頸細(xì)胞DNA定量分析的72.50%，說明HPV-DNA檢測(cè)適用于預(yù)后觀察。同時(shí)，HPV-DNA檢測(cè)還具有早期跟蹤及預(yù)警的作用，特別是不能確定宮頸細(xì)胞發(fā)生炎癥還是產(chǎn)生癌前病變時(shí)就要通過HPV-DNA檢測(cè)來鑒別。

宮頸細(xì)胞DNA定量分析可以精確地測(cè)定出細(xì)胞核DNA的倍體值，獲得腫瘤的生物學(xué)特征，而判讀涂片時(shí)采用自動(dòng)化分析，其可在很大程度上降低人為因素造成的誤差。染色體的重組、片段增多或缺失和染色體數(shù)目發(fā)生變化，均能導(dǎo)致非整倍體的擴(kuò)增，最終產(chǎn)生腫瘤。本研究數(shù)據(jù)顯示，宮頸細(xì)胞DNA定量分析的特異性和準(zhǔn)確率分別為90.53%、89.47%，高于HPV-DNA檢測(cè)，說明宮頸細(xì)胞DNA定量分析適用于宮頸癌和癌前病變的篩查工作。此外，本研究?jī)煞N檢測(cè)方法下均產(chǎn)生誤診現(xiàn)象，其主要原因是：①激素治療、放射治療、激素水平紊亂、缺乏維生素B12及HIV病毒和HPV病毒感染均可以導(dǎo)致非整倍體的擴(kuò)增，但將這些影響因素排除后細(xì)胞可以恢復(fù)到正常整倍體。②細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)不掃描成團(tuán)細(xì)胞和重疊細(xì)胞，從而造成誤診。③檢測(cè)人員操作不當(dāng)，使DNA分子與較多的染色劑相結(jié)合，從而出現(xiàn)惡性或良性腫瘤的誤診。

綜上所述，HPV-DNA檢測(cè)敏感度較高，具有預(yù)警作用，便于觀察；宮頸細(xì)胞DNA定量分析特異性及準(zhǔn)確率較高，適用于宮頸癌和癌前病變的篩查工作。

[1]趙春蘭，張會(huì)辰，王建，等．宮頸細(xì)胞DNA定量分析、HPV-DNA檢測(cè)與液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J]．河北醫(yī)藥，2013，35(6)：860-863．

[2]陽(yáng)艷，吳緒峰，張敦蘭．DNA定量分析和高危型HPV-DNA檢測(cè)在ASCUS分流診斷中的意義[J]．腫瘤防治研究，2013，40(7)：671-674．

[3]鐘萍萍，顧依群，王軍，等．DNA定量分析在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J]．中華病理學(xué)雜志，2013，42(7)：469-470．

[4]張文娟，東燕，孫緒蘭，等．子宮頸癌篩查方法的應(yīng)用及研究進(jìn)展[J]．現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，12(23)：4597-4600．

[5]賈詠存．應(yīng)用細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合HR-HPV檢測(cè)篩查宮頸癌[J]．河北聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2012，14(1)：18-19．

(2016-03-25收稿2016-05-17修回)

(本文編輯貢樹基)

546100廣西壯族自治區(qū)來賓市人民醫(yī)院婦科

[中國(guó)圖書資料分類號(hào)]R 737.33B

10.16485/j.issn.2095-7858.2016.03.057