規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病的抗體監(jiān)測(cè)與分析

吳植

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300）

規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病的抗體監(jiān)測(cè)與分析

吳植

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300）

豬偽狂犬?。≒orine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒所引起的一種急性熱性傳染病，臨床上多以發(fā)熱和神經(jīng)癥狀為特征，主要引起種豬不育，妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)、死胎和木乃伊胎，新生仔豬和斷奶仔豬死亡，育肥豬生長(zhǎng)緩慢等[1-2]。該病感染率和發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率高達(dá)80%～100%。該病1年4季均可發(fā)生，但以冬春兩季多發(fā)。近年來隨著基因缺失苗免疫接種策略的實(shí)施，偽狂犬病的流行趨勢(shì)有所緩和，但該病的隱性感染現(xiàn)象仍相當(dāng)普遍，造成長(zhǎng)期帶毒排毒[1]。PRV可以侵害免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致豬的免疫應(yīng)答能力降低甚至失敗，嚴(yán)重影響著其他疫苗的免疫效果，實(shí)踐證明有效的開展野毒感染抗體與免疫抗體水平的跟蹤監(jiān)測(cè)，對(duì)保證被檢豬群安全十分重要，為開展該病凈化和制定科學(xué)合理的免疫程序提供依據(jù)。作者采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對(duì)江蘇鹽城某規(guī)?；i場(chǎng)的血清樣品進(jìn)行了跟蹤監(jiān)測(cè)，報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1血清樣品樣品采集時(shí)間為2014年5月至11月，所有樣品來自鹽城市某規(guī)模化豬場(chǎng)，該場(chǎng)基礎(chǔ)母豬存欄數(shù)為500頭，所有豬只采用gE基因缺失活疫苗免疫。采用橫斷面法分別采集公豬、后備豬、不同胎次的種豬、不同生長(zhǎng)階段商品豬的前腔靜脈血分離血清，共采集血清樣品710份，其中種豬血清樣品247份，不同周齡豬群樣品463份，-70℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2檢測(cè)試劑野毒感染抗體（gE抗體）檢測(cè)試劑盒、免疫抗體（gB抗體）檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。嚴(yán)格按照豬偽狂犬病ELISA野毒感染抗體和免疫抗體檢測(cè)試劑盒操作說明書進(jìn)行，使用前所有試劑均恢復(fù)至室溫。

1.3野毒感染抗體監(jiān)測(cè)豬偽狂犬病病毒野毒抗體檢測(cè)采用gE抗體檢測(cè)試劑盒，診斷豬群是否感染豬偽狂犬病野毒株。用樣品與陰性對(duì)照比率（S/N）作為判定標(biāo)準(zhǔn)，即S/N≤0.6判為陽(yáng)性，S/ N＞0.7判為陰性，若0.6≤S/N＜0.7的樣品應(yīng)重測(cè)。

1.4免疫抗體監(jiān)測(cè)在確定豬群PR野毒抗體陰性的情況下，采用gB抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)待檢豬血清進(jìn)行檢測(cè)，可診斷豬群免疫豬偽狂犬病疫苗后產(chǎn)生的抗體水平。判斷標(biāo)準(zhǔn)為：S/N≤0.6判為陽(yáng)性，S/N>0.7判為陰性，若0.6≤S/N<0.7的樣品應(yīng)重測(cè)。

2　結(jié)果

2.1種豬野毒（gE）抗體監(jiān)測(cè)種豬野毒感染抗體監(jiān)測(cè)總樣本數(shù)為247份，其中母豬為239份。第1次監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)該豬場(chǎng)種豬野毒感染較為嚴(yán)重，平均感染率為18.9%，后備豬為25.8%，1～2胎、3～4胎、5胎以上等不同胎次種豬的感染率分別為8.7%、17.8%、23.5%，呈現(xiàn)出胎次越高陽(yáng)性率越高的趨勢(shì)。第2次、第3次監(jiān)測(cè)平均感染率分別下降至12.1%、6.8%，見表1。整個(gè)過程中共采集種公豬血清8份，gE抗體全部為陰性。

表1　種豬野毒抗體監(jiān)測(cè)

2.2不同周齡豬野毒（gE）抗體監(jiān)測(cè)不同周齡豬野毒抗體監(jiān)測(cè)樣品分3次采集，合計(jì)采集1～4周齡、5～8周齡、9～12周齡、13～16周齡、17～24周齡豬的血清樣品463份。第1次監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除了17～24周齡以野毒感染率隨著周齡的增大而逐漸下降外，3次監(jiān)測(cè)的平均感染率分別為19.2%、11.8%、6.5%，呈下降趨勢(shì)，見表2。

表2　不同周齡豬野毒抗體監(jiān)測(cè)

2.3不同月份豬偽狂犬病的免疫抗體監(jiān)測(cè)豬偽狂犬病的免疫抗體監(jiān)測(cè)樣品分3次共采集108份，第一次監(jiān)測(cè)種豬群的抗體陽(yáng)性率明顯高于仔豬和育成豬，種豬的抗體陽(yáng)性率在85.3%～91.3%，仔豬和育成豬的抗體陽(yáng)性率波動(dòng)較低，為36.9%～83.2%。3次監(jiān)測(cè)的平均陽(yáng)性率分別為66.8%、78.3%、94.8%，見表3。

表3　不同月份豬免疫抗體的陽(yáng)性率

3　討論

野毒感染監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，該規(guī)模化豬場(chǎng)的野毒感染比較嚴(yán)重，種豬感染率平均為18.9%，不同周齡豬感染率平均為19.2%，同期免疫抗體的陽(yáng)性率只有66.8%。謝海波等[2]研究表明，免疫合格率達(dá)到80%以上才能較為有效地預(yù)防豬偽狂犬病的流行。因此立即建議豬場(chǎng)采取加強(qiáng)免疫與淘汰陽(yáng)性帶毒豬等措施后，野毒感染狀況明顯好轉(zhuǎn)，第3次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)野毒感染率均在7%以下。分析各胎次母豬的感染率，整體看來胎次越低，陽(yáng)性率越低，這可能與近年來我國(guó)規(guī)模化豬場(chǎng)對(duì)于種豬選擇使用高質(zhì)量的基因缺失疫苗強(qiáng)化免疫有關(guān)。

免疫抗體檢查結(jié)果表明，1～4周齡豬免疫抗體水平3次檢測(cè)陽(yáng)性率均較高，但是隨著時(shí)間推移陽(yáng)性率逐漸下降，可以推斷該免疫抗體來源于母源抗體。在高強(qiáng)度感染壓力下，筆者建議該規(guī)?；i場(chǎng)在仔豬2～3周齡對(duì)增加一次滴鼻免疫，以防止出現(xiàn)免疫空白期。

目前我國(guó)用于預(yù)防的疫苗主要是基因缺失苗，這種疫苗可以準(zhǔn)確區(qū)分免疫抗體和野毒感染抗體。IDEXX公司研發(fā)的gE抗體檢測(cè)試劑盒能夠快速、方便、準(zhǔn)確的檢測(cè)野毒感染抗體，從而評(píng)估野毒感染狀態(tài)。與之配套的gB抗體檢測(cè)試劑盒也是一種極其敏感的檢測(cè)方法，能夠反映野毒抗體陰性豬群的疫苗免疫水平，這兩種試劑盒的存在和基因缺失疫苗的確實(shí)的免疫效果使得偽狂犬病在豬場(chǎng)的凈化根除成為可能。

[1]吳學(xué)敏，王隆柏，陳如敬，等.規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病的凈化及成效分析[J].福建畜牧獸醫(yī)，2011，33（4）：36-39.

[2]謝海波，何小華.豬偽狂犬病的流行情況和預(yù)防措施[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2001，37（6）：21-23.

S858.28文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

0529-6005（2016）07-0042-02

2015-03-04

江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院橫向課題（00010114024）

吳植（1980-），男，碩士生，研究方向?yàn)楂F醫(yī)微生物與免疫學(xué)，E-mail：yzwuzhi@163.com