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    微生物在油菜秸稈資源化中的應(yīng)用研究進(jìn)展

    2018-12-27 05:18:32豪,鄒
    中國飼料 2018年23期
    關(guān)鍵詞:丁醇木質(zhì)素資源化

    李 豪,鄒 偉

    (四川理工學(xué)院生物工程學(xué)院,四川自貢 643000)

    油菜是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一,2016年我國油菜種植面積已達(dá)710萬hm2,油菜籽產(chǎn)量約為 1400萬 t(陳艷軍,2017),油菜秸稈年產(chǎn)量約為3780萬t[按油菜草谷比2.7(畢于運(yùn),2010)推算]。由于體積大、重量輕,收獲時(shí)間通常與水稻種植相沖突等因素,油菜秸稈常常被直接丟棄和焚燒處理(張蓓蓓等,2017)。廢棄秸稈不僅占用土地空間、浪費(fèi)資源,而焚燒后可能會加重部分地區(qū)霧霾污染(汪玉芳,2013)。研究表明:油菜秸稈含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和微量元素 (牛文娟,2015),具有巨大的資源潛力(表1)。因此,油菜秸稈的資源化利用勢在必行。目前,油菜秸稈資源化處理方法多種多樣,常見的有:物理處理法如制作燃料碳,化學(xué)處理法如氨化處理,生物處理法如腐熟還田、發(fā)酵產(chǎn)秸稈飼料、食用菌基料和污水處理 (韋波,2015;劉標(biāo)等,2014;饒嬋,2012)等。這其中生物處理法以其高效率、低成本、無污染的優(yōu)點(diǎn),一直是油菜秸稈資源化研究的熱點(diǎn),而微生物在生物處理法中起重要作用。本文主要綜述了微生物在油菜秸稈資源化中的應(yīng)用研究進(jìn)展。

    1 油菜秸稈成分特征

    由于油菜的種類以及栽種地域不同,油菜秸稈間成分存在部分差異。油菜秸稈的主要成分是粗纖維,占 40% ~ 51%(Abreu 等,1998)。 與大豆、玉米、小麥秸稈相比,油菜秸稈粗蛋白質(zhì)較高,營養(yǎng)物質(zhì)豐富,是良好的動物飼料(烏蘭等,2010)。同時(shí),油菜秸稈不同部位化學(xué)成分也有差異,桿部的纖維素含量一般較高,而穗部半纖維素和木質(zhì)素含量較高(趙蒙蒙等,2011)。 Petersson 等(2007)比較了油菜、冬黑麥和蠶豆秸稈的化學(xué)成分,發(fā)現(xiàn)油菜秸稈葡聚糖、木聚糖、木質(zhì)素和灰分含量較高,分別達(dá)到干重的27.3%、15%、14.2%和9.6%??傮w來說油菜秸稈營養(yǎng)豐富,具有巨大的資源潛力。

    2 微生物在油菜秸稈中的應(yīng)用

    2.1 微生物降解油菜秸稈 微生物降解油菜秸稈主要依靠其自身分泌的各種功能酶如纖維素酶、木質(zhì)素酶等完成(蘭曉玲等,2013)。由于秸稈中纖維素、木質(zhì)素和半纖維素相互緊緊包裹使得酶難以接近,通常在微生物處理前需要配合一定的化學(xué)或物理預(yù)處理技術(shù)。目前已篩選得到油菜秸稈降解菌主要有霉菌、放線菌、芽孢桿菌等(張輝等,2011)。油菜秸稈降解菌常見為纖維素降解菌、木質(zhì)素降解菌等。Tuyen等(2013)利用白腐真菌發(fā)酵油菜秸稈,20 d時(shí)木質(zhì)素降解率達(dá)58.07%,發(fā)酵玉米稈和稻草時(shí)木質(zhì)素的降解率為16.3%和64.1%。陳麗園等(2007)從還田處理30 d的油菜秸稈中得到一株分解纖維素能力較強(qiáng)的菌株,發(fā)酵第10天CMC酶活達(dá)到最大為1064.88U/mL。以上均為單菌降解油菜秸稈研究,但油菜秸稈成分復(fù)雜,分解過程通常需要多種酶共同完成,而單一菌種分泌的酶系往往不全,因此可利用多菌株混合培養(yǎng)發(fā)酵,增加降解效率。陳朝瓊等(2011)從腐爛秸稈土壤中篩得降解油菜秸稈的優(yōu)勢菌群,其纖維素酶活性達(dá)924 U/mL,發(fā)酵油菜秸稈14 d后秸稈、纖維素、木質(zhì)素降解率分別為71%、82%、53%。郭豪等(2013)將篩得的芽孢桿菌、鏈霉菌、米根霉和木霉制成混合菌劑并發(fā)酵油菜秸稈14 d后秸稈、纖維素和半纖維素降解率分別為28.3%、33.1%和23.7%,與市售腐熟劑的處理效果相當(dāng)。

    表1 不同品種油菜秸稈化學(xué)成分表

    2.2 生物乙醇和生物丁醇發(fā)酵 油菜秸稈化學(xué)成分中一半是纖維素和半纖維素,將大分子纖維素和半纖維素降解為小分子六碳糖和五碳糖,可作為廉價(jià)底物發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇、丁醇等 (覃央央,2017)。通常發(fā)酵油菜秸稈生產(chǎn)乙醇的菌種為酵母菌,例如雷韜(2016)利用K氏酵母發(fā)酵乙醇時(shí),酒精產(chǎn)率為9.7701%,與理論值相差0.57%。油菜秸稈的預(yù)處理技術(shù)是發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的關(guān)鍵,如果秸稈預(yù)處理后還含有部分大分子物質(zhì),可以采用酵母菌結(jié)合曲霉共同發(fā)酵 (杜蘇萌等,2012;Yu 等,2009)。 為提高發(fā)酵效率,李文(2014)將酵母菌固定化后用于乙醇發(fā)酵,120 h后乙醇濃度為28.94 g/L,乙醇產(chǎn)率為76%。覃央央(2017)將油菜秸稈用食鹽水漂洗后再烘干粉碎,放入微波反應(yīng)器加入糖化液糖化后接入丙酮丁醇梭菌發(fā)酵能夠生產(chǎn)丁醇,丁醇得率為66%左右。田磊(2015)利用玉米秸稈發(fā)酵產(chǎn)丁醇,在經(jīng)過抑制劑脫除后丁醇產(chǎn)量為10.8 g/L。胡金峰(2014)利用蔗渣生物發(fā)酵產(chǎn)丁醇時(shí)脫毒后丁醇濃度能達(dá)12 g/L。這些研究為油菜秸稈轉(zhuǎn)化為生物燃料提供了理論支撐。

    2.3 生物質(zhì)能源 沼氣作為能源具有熱值高、能量轉(zhuǎn)化率高和污染小等特點(diǎn)(高鑫,2013)。白娜等(2011)將油菜秸稈僅經(jīng)簡單粉碎處理后進(jìn)行沼氣發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)油菜秸稈的產(chǎn)氣潛力為0.47 L/g。羅義軒等(2013)將豌豆、高粱、蠶豆和油菜四種秸稈接種厭氧污泥在35℃恒溫發(fā)酵時(shí),油菜秸稈總產(chǎn)氣量為1303.5 mL,僅次于豌豆秸稈,油菜秸稈產(chǎn)氣率為191.7 mL/g。油菜秸稈產(chǎn)氣速率較慢,可能與油菜秸稈木質(zhì)素含量較高有關(guān),但其產(chǎn)氣總量可觀,可以作為產(chǎn)沼氣原料。羅彬等(2014)利用纖維素分解產(chǎn)甲烷菌群在CSTR厭氧反應(yīng)器中分解油菜秸稈41 d,厭氧消化產(chǎn)甲烷時(shí),能產(chǎn)生大量的沼氣,50 g干秸稈能產(chǎn)氣13200 mL,產(chǎn)氣效率達(dá)264 mL/g。孫全平等(2014)利用油菜秸稈厭氧發(fā)酵日產(chǎn)氣量最高達(dá)4.25 L/d,最高累積產(chǎn)氣量達(dá)70.665 L,產(chǎn)氣潛力達(dá)到0.37 L/g。

    2.4 油菜秸稈飼料 油菜秸稈木質(zhì)化程度高、秸稈粗硬、適口性差,動物直接采食難度大(Ramirezbribiesca等,2011)。 目前可通過氨化、復(fù)合青貯、微貯等方式提高油菜秸稈的營養(yǎng)價(jià)值和適口性。孟春花等 (2016)將粉碎的油菜秸稈用30%的水和不同比例的碳酸氫銨進(jìn)行氨化處理時(shí),氨化21 d后的秸稈粗蛋白質(zhì)增加2倍以上,粗脂肪下降70%,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維下降10%以上。陳麗園等(2010)比較了改良氨化、混合青貯、商業(yè)微貯劑和自篩菌株發(fā)酵對油菜秸稈纖維素降解效果,發(fā)現(xiàn)混合青貯的纖維素降解率最高,為84.50%,結(jié)合混合青貯和改良氨化處理后得到的秸稈飼料能夠代替山羊20%的日糧。才旦等(2006)將油菜秸稈制成草粉與菌粉混合在塑料袋中進(jìn)行發(fā)酵,最終油菜秸稈粗蛋白質(zhì)提高了33.15%,粗脂肪下降了38.31%,可用此油菜秸稈替代30%的飼料飼喂豬,顯著降低飼養(yǎng)成本。另外,油菜秸稈可以直接粉碎后與其他植物混合發(fā)酵,油菜秸稈與皇竹草按3∶7混合,添加150 mg/kg乳酸糞球菌進(jìn)行混合青貯后,可顯著提高飼料的干物質(zhì)、有機(jī)物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中洗纖維和酸洗纖維的消化率,促進(jìn)錦江黃牛生長和生產(chǎn)性能 (許蘭嬌等,2016)。由于油菜秸稈成分復(fù)雜、木質(zhì)素含量高等,發(fā)酵飼料采食過程容易染菌造成二次污染,若要大面積推廣還需進(jìn)一步深入研究。

    2.5 腐熟還田 腐熟還田是一種較為簡易可行的油菜秸稈處理方式。油菜秸稈中富含氮、磷、鉀等元素,腐熟還田后能提高土壤肥力,改善土壤和農(nóng)田系統(tǒng),具有減少化肥使用和提高農(nóng)作物產(chǎn)量的作用(王旭等,2016)。油菜秸稈由于纖維素含量高,自然分解過程耗時(shí)較長,需要加入多種微生物混合的腐熟劑才能加速腐熟進(jìn)度(Blazier等,2008)。不同腐熟劑對油菜秸稈腐熟效果不同,腐熟10 d后腐解效果相差最大為34.49%,說明腐熟劑能使秸稈快速腐熟,縮短腐解時(shí)間,提高秸稈的利用率(柳玲玲等,2014)。使用復(fù)合菌劑腐熟并還田處理能降低土壤pH和容重,提高有機(jī)質(zhì)和全氮含量,增加土壤養(yǎng)分,油菜產(chǎn)量能提高5.33%(呂黎等,2014)。油菜秸稈的腐熟還與其所處位置相關(guān),油菜秸稈在表層腐解最快,地下10 cm時(shí)最慢,地下20 cm時(shí)居中。地表微生物種類多、活動頻繁且夏季地表溫度高,所以地表腐解最快(胡宏詳?shù)龋?012)。

    2.6 堆肥 堆肥是指利用自然界廣泛存在的微生物,人為的將有機(jī)物生物降解為穩(wěn)定的腐殖質(zhì)的過程,是一種使固體廢料無害化、資源化的方法。施用油菜秸稈堆肥不僅能促進(jìn)水稻生長、提高產(chǎn)量(增產(chǎn)產(chǎn)幅達(dá)4.7% ~18.2%),還能調(diào)節(jié)土壤酸堿度,促進(jìn)pH較低的水稻土中養(yǎng)分釋放和養(yǎng)分平衡(汪根法,2012)。由于堆肥制作時(shí)惡臭難聞且伴有污水產(chǎn)生,目前利用油菜秸稈制作堆肥的主要研究方向在縮短堆肥堆制時(shí)間和加快腐熟進(jìn)度。汪季濤等(2006)確定油菜秸稈堆肥發(fā)酵條件即粒徑長度為5 cm,C/N比值為25,含水量為70%,氮源為雞糞。堆肥中常見微生物包括細(xì)菌、酵母菌和纖維素分解菌等,其中細(xì)菌是堆肥中的主要微生物菌群。研究發(fā)現(xiàn)在堆肥中引入嗜溫細(xì)菌、嗜溫放線菌、高溫酵母菌和分解纖維素的霉菌,可以有效加快堆肥腐熟進(jìn)度(蘭時(shí)樂等,2010)。

    2.7 食用菌栽培 油菜秸稈用于食用菌栽培既能減少秸稈的浪費(fèi),又能降低食用菌的栽培成本,是一種具有較好經(jīng)濟(jì)效益的處理方式。目前利用油菜秸稈栽培食用菌的研究主要集中在平菇、金針菇、蟹味菇、草菇和香菇等(宋海燕等,2015;丁倫保,2014)。栽培食用菌的關(guān)鍵技術(shù)是油菜秸稈與其他配料的配比。油菜秸稈可與棉籽殼混合栽培平菇,油菜秸稈組織疏松能增加培養(yǎng)料的通氣性能,可加快平菇菌絲的生長。熊維全等(2010)發(fā)現(xiàn),油菜秸稈的最大添加量為36%,超過36%后出菇時(shí)間延長,產(chǎn)量、外觀均比對照組差。油菜秸稈還可替代棉籽殼栽培糙皮側(cè)耳菌,40%的油菜秸稈替代棉籽殼可促進(jìn)菌絲生長且不影響子實(shí)體生長和產(chǎn)量(杜靜等,2015)。

    3 展望

    當(dāng)前我國油菜秸稈的資源化利用還不夠充分,大量的油菜秸稈仍然被焚燒或自然丟棄,造成環(huán)境污染和浪費(fèi)。油菜秸稈資源化利用方式較多,微生物處理法與化學(xué)和物理方法相比具有投入少、操作簡單和無污染等優(yōu)點(diǎn)。目前大量油菜秸稈降解菌株已經(jīng)被篩選、鑒定,并用到實(shí)際發(fā)酵過程。這類微生物主要是芽孢桿菌、木霉、白腐菌等。由于纖維素、木質(zhì)素和半纖維素的鑲嵌結(jié)構(gòu),使得降解前的預(yù)處理技術(shù)變得極為關(guān)鍵 (盧光新,2012)。多菌株混菌發(fā)酵降解效果一般要優(yōu)于單菌發(fā)酵。油菜秸稈是一種具有巨大潛能的生物質(zhì)原料,利用其水解產(chǎn)物為底物生產(chǎn)生物乙醇或丁醇的主要技術(shù)關(guān)鍵在秸稈預(yù)處理以及解除秸稈水解液中存在的化學(xué)物對發(fā)酵過程的抑制(岳耀峰,2010)。秸稈飼料應(yīng)用時(shí)應(yīng)注重發(fā)酵產(chǎn)物的飼喂安全性,同時(shí)也要注意飼喂的便宜性,減少由于取料帶來的二次發(fā)酵。秸稈腐熟和堆肥這方面研究實(shí)踐較多,應(yīng)注重提高經(jīng)濟(jì)效益,縮短發(fā)酵時(shí)間。食用菌栽培利用要研究適宜的配比,注重減少染菌。

    雖然目前油菜秸稈資源化仍然存在很多問題,如利用率低、經(jīng)濟(jì)效益低、農(nóng)戶對油菜秸稈資源利用意識不強(qiáng)等。同時(shí)油菜秸稈收集較困難,人工收集效率較低,機(jī)械收集花費(fèi)較高,使得秸稈被焚燒或丟棄(彭春艷等,2014)。微生物在油菜秸稈資源化中展現(xiàn)出極大優(yōu)勢和潛力,對解決秸稈過剩帶來的各種問題具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。隨著微生物技術(shù)如代謝工程、酶工程、合成生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,油菜秸稈的可持續(xù)資源化利用也將逐步完善,為我國農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、環(huán)境保護(hù)等方面做出積極貢獻(xiàn)。

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