余萍 李雪龍
摘要:為擴(kuò)大鼠李糖乳桿菌(H0107)在微生態(tài)制劑方面的應(yīng)用,采用對(duì)比試驗(yàn)的方法,通過建立小鼠便秘模型來評(píng)價(jià)其通便效果。試驗(yàn)結(jié)果顯示:鼠李糖乳桿菌安全性高,2.8 g/kg劑量下連續(xù)灌胃7 d無毒性反應(yīng),且對(duì)便秘模型有一定的通便效果。
關(guān)鍵詞:鼠李糖乳桿菌;小鼠模型;對(duì)比試驗(yàn);通便
中圖分類號(hào):Q93 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-1161(2016)05-0048-02
近年來,隨著人們健康意識(shí)的逐步增強(qiáng),食品、保健品、醫(yī)藥的安全性越來越受到人們關(guān)注。目前,含有益生菌的微生態(tài)制劑及食品正作為一個(gè)新領(lǐng)域逐步被研究和開發(fā)。鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)從屬于乳桿菌,具有調(diào)節(jié)微生態(tài)平衡、增強(qiáng)宿主腸道抵抗力、預(yù)防和治療腹瀉、消除過敏態(tài)的功能,可作為益生菌用于生產(chǎn)微生態(tài)制劑和功能性乳制品,在發(fā)酵食品領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
通過建立小鼠便秘模型來評(píng)價(jià)鼠李糖乳桿菌(H0107)的通便效果,為該菌種在微生態(tài)制劑方面的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。
1 材料與方法
1.1 菌種
鼠李糖乳桿菌菌株H0107:分離于嬰兒糞便,研究室保存。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
昆明小鼠(KM)4~5周齡,18~22 g,37只,雄性。
1.3 試劑及儀器
蒸餾水、活性炭粉、鹽酸洛哌丁胺、阿拉伯樹膠、直尺、分析天平、研缽。
1.4 試驗(yàn)方法
1.4.1 試驗(yàn)動(dòng)物分組 根據(jù)體重隨機(jī)對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行分組,分組及給藥方案詳見表1。
1.4.2 試驗(yàn)步驟 墨汁配置:稱取阿拉伯樹膠100 g,加水800 mL,煮沸至溶液透明,稱取活性炭(粉狀)50 g加至上述溶液中,煮沸3次,溶液涼后加水定容到
1 000 mL,于冰箱(4 ℃)中保存,用前搖勻。
鹽酸洛哌丁胺溶液的配制(濃度0.8 mg/mL):取鹽酸洛哌丁胺顆粒10袋(每袋含鹽酸洛哌丁胺1 mg),溶于12.5 mL水,臨用前配制。
建模:小鼠平衡飼養(yǎng)后,根據(jù)方案對(duì)動(dòng)物給藥。給藥7 d后,各組動(dòng)物禁食16 h,但不禁水。模型對(duì)照及鼠李糖乳桿菌組灌胃給予鹽酸洛哌丁胺(8 mg/kg、10 mL/kg)溶液,溶劑對(duì)照組給予蒸餾水。
墨汁推進(jìn)率計(jì)算:給鹽酸洛哌丁胺后0.5 h,治療組給予含鼠李糖乳桿菌的墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠),溶劑和模型對(duì)照組給墨汁灌胃。25 min后處死小鼠,分離小腸系統(tǒng)(上端至幽門、下端至回盲部的腸管),測(cè)量腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長度”。
墨汁推進(jìn)率計(jì)算公式為:
墨汁推進(jìn)率(%)=×100%
2 結(jié)果與分析
應(yīng)用SPSS17.0軟件中的One-Way-Anova程序?qū)δ七M(jìn)率進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
給予鼠李糖期間,鼠李糖各組試驗(yàn)動(dòng)物體重保持增長,未見下降,與溶劑對(duì)照組體重增長趨勢(shì)相同,且動(dòng)物未見異常。說明連續(xù)7 d在2.8 g/kg劑量下,鼠李糖未表現(xiàn)出毒性,安全性高。
由溶劑及模型對(duì)照組墨汁推進(jìn)率(75%,48%)可知,便秘模型造模成功,但各造模組試驗(yàn)動(dòng)物小腸均出現(xiàn)水潴留、腸壁透明現(xiàn)象。此現(xiàn)象的發(fā)生,為鹽酸洛哌丁胺的獨(dú)特作用還是各造模藥物均會(huì)出現(xiàn),需要后續(xù)試驗(yàn)判斷驗(yàn)證。
模型對(duì)照組、鼠李糖乳桿菌(0.8 g/kg)組、鼠李糖乳桿菌(1.6 g/kg)組、鼠李糖乳桿菌(2.8 g/kg)組的墨汁推進(jìn)率分別為48%,59%,55%,55%,說明鼠李糖各組對(duì)便秘模型都有一定的通便效果。
鼠李糖乳桿菌(H0107)各組之間的墨汁推進(jìn)率并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,未表現(xiàn)出量效關(guān)系。這可能是由造模劑量偏大引起的,也可能是由于在0.8 g/kg劑量下,鼠李糖乳桿菌(H0107)已達(dá)到最優(yōu)通便效果造成的,需要后續(xù)試驗(yàn)驗(yàn)證。
3 結(jié)論
通過對(duì)鼠李糖乳桿菌(H0107)進(jìn)行小鼠試驗(yàn),證明鼠李糖乳桿菌(H0107)安全性高,2.8 g/kg劑量下連續(xù)灌胃7 d,無毒性反應(yīng),且對(duì)便秘模型有一定的通便效果。試驗(yàn)結(jié)果為鼠李糖乳桿菌(H0107)在保健品及乳制品中的開發(fā)奠定良好基礎(chǔ)。
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Abstract: In order to extend the application range of LGG(H0107) in probiotics field, taking advantage of the contrast test method,in this paper it evaluated the catharsis effect by establishing constipated mice models. The experimental results showed that: LGG is of high safety; There was non-toxic reaction for rats in the dose of 2.8g/kg by gavage for 7 days; Also it had the catharsis effect to models in constipation.
Key words: LGG; mouse model; contrast test; catharsis