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    飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道健康的影響

    2016-08-10 06:16:03翟少偉史慶超陳學(xué)豪
    水生生物學(xué)報(bào) 2016年4期
    關(guān)鍵詞:抗菌肽羅非魚抗氧化

    翟少偉 史慶超 陳學(xué)豪

    (集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 廈門 361021)

    飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道健康的影響

    翟少偉 史慶超 陳學(xué)豪

    (集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 廈門 361021)

    為研究飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚(GIFT, Oreochromis niloticus)腸道健康指標(biāo)的影響, 實(shí)驗(yàn)將平均體重為(12.01±0.03) g/尾的320尾吉富羅非魚, 隨機(jī)分為4組, 每組4個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)20尾魚, 分別投喂抗菌肽Surfactin添加水平為0(對(duì)照組)、50、100和200 mg/kg的試驗(yàn)飼料7周。結(jié)果顯示: 與對(duì)照組相比, 吉富羅非魚飼料中添加抗菌肽Surfactin可使腸道皺襞高度顯著增加(P<0.05), 肌層厚度無(wú)顯著變化(P>0.05); 大腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05), 乳酸桿菌數(shù)量顯著增加(P<0.05), 細(xì)菌總數(shù)無(wú)顯著變化(P>0.05); 顯著提高腸道總抗氧化能力水平、谷胱甘肽過氧化物酶活性和超氧化物歧化酶活性(200 mg/kg抗菌肽添加組除外)(P<0.05), 顯著降低腸道丙二醛水平(P<0.05), 對(duì)過氧化氫酶活性無(wú)顯著影響(P>0.05); 吉富羅非魚腸道健康指標(biāo)以50 mg/kg抗菌肽Surfactin添加組最佳。試驗(yàn)表明, 吉富羅非魚飼料中適量添加抗菌肽Surfactin可增加腸道皺襞高度、調(diào)節(jié)腸道菌群和提高腸道抗氧化能力而改善腸道健康狀態(tài)。

    抗菌肽; 吉富羅非魚; 腸道健康

    近年來(lái), 抗菌肽(Antimicrobial peptides, AMPs)作為飼用抗生素替代品的研究與應(yīng)用成為飼料添加劑研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。目前, 應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物飼料的抗菌肽主要從動(dòng)物中提取或基因重組表達(dá)所得, 對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)或免疫能力具有明顯效果[1—3]。而微生物自然分泌的抗菌肽類物質(zhì)報(bào)道較少。隨著該領(lǐng)域研究的不斷深入, 微生物源AMPs的高效抗菌作用越來(lái)越引起人們的重視[4]。Surfactin是芽孢桿菌屬不同菌株次級(jí)代謝產(chǎn)生的一種脂肽類物質(zhì), 不僅具有廣譜抗菌作用, 而且對(duì)病毒、支原體和原蟲等也有抑制效果; 因其還具有很強(qiáng)的表面活性作用, 又被稱為表面活性素[5—7]。研究表明, 抗菌肽Surfactin添加到飼料中, 可提高羅非魚(Oreochromis niloticus)腸道消化酶活性, 改善血液生化指標(biāo), 調(diào)節(jié)脂肪代謝, 改善肝胰臟功能, 提高生長(zhǎng)性能[8—11];可提高中華鱉(Pelodiscus sinensis)稚鱉增重率, 調(diào)節(jié)血液生化指標(biāo)[12]。此外, NT-6抗菌脂肽(Surfactin、Fengycin和Iturin混合物)可促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)生長(zhǎng), 提高機(jī)體免疫, 抑制養(yǎng)殖水體病原菌增殖[13, 14]。但還鮮見抗菌肽Surfactin對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物腸道健康影響的報(bào)道。腸道健康是水產(chǎn)動(dòng)物健康養(yǎng)殖的關(guān)鍵, 其對(duì)于機(jī)體的整體健康起到非常重要的作用, 腸道病變往往引起魚體其他器官(如肝胰臟)的損傷和功能障礙, 進(jìn)而影響自身健康和水環(huán)境“健康”[15, 16]。通過測(cè)定腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化、腸道生長(zhǎng)發(fā)育、腸道黏膜免疫、腸道微生態(tài)、腸道黏膜屏障等方面的生理生化指標(biāo)可反映水產(chǎn)動(dòng)物的腸道健康狀況[15—19]。鑒于此, 本試驗(yàn)旨在通過吉富羅非魚飼料中添加不同水平的抗菌肽Surfactin, 研究腸道消化酶活性、腸道細(xì)菌數(shù)量以及腸道抗氧化能力等腸道健康指標(biāo)的變化, 為其在漁用飼料中的應(yīng)用提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)用魚為吉富羅非魚, 購(gòu)于福建省漳州市水產(chǎn)開發(fā)中心。暫養(yǎng)2周后, 將320尾健康健壯、均重為(12.01±0.03) g的吉富羅非魚隨機(jī)分為4組, 每組4個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)20尾魚, 對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料,其他組分別飼喂在基礎(chǔ)飼料中添加50、100和200 mg/ kg抗菌肽Surfactin的試驗(yàn)飼料, 試驗(yàn)期為7周。

    1.2 試驗(yàn)飼料

    基礎(chǔ)飼料根據(jù)SC/T 1025-2004《羅非魚配合飼料》標(biāo)準(zhǔn)[20]配制, 其組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表 1(風(fēng)干基礎(chǔ))。根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)的添加水平, 在基礎(chǔ)飼料中添加抗菌肽Surfactin(由福建正源飼料有限公司提供,有效含量為80%)制作試驗(yàn)飼料。各種飼料原料經(jīng)粉碎后過篩, 混合均勻后加工成3 mm直徑的顆粒飼料, 室溫自然風(fēng)干后于-20℃冷藏保存。

    表 1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平Tab. 1 The ingredients and nutrient levels of the basal diet

    1.3 飼養(yǎng)管理

    試驗(yàn)魚飼養(yǎng)于開有循環(huán)系統(tǒng)的養(yǎng)殖室水族箱內(nèi), 水族箱體積約為100 L, 規(guī)格為120 cm×60 cm× 70 cm。試驗(yàn)用水為曝氣自來(lái)水, 光源為自然光源。水族箱水溫保持在22—28℃, pH 7.4±0.3, 溶氧度大于7.0 mg/L, 氨氮濃度小于0.2 mg/L。每天分別在07:00、13:00和19:00定時(shí)飽食投喂, 每次投喂量為魚體重的3.0%—5.0%。每次投喂30min后, 用虹吸管吸取剩余飼料和糞便, 每日的換水量約為30%。試驗(yàn)過程中用增氧機(jī)持續(xù)增氧。試驗(yàn)期間,吉富羅非魚生長(zhǎng)正常, 成活率為100%。

    1.4 樣品采集與組織勻漿的制備

    試驗(yàn)魚于試驗(yàn)結(jié)束后禁食24h, 對(duì)每缸所有魚稱重并記錄總重, 每缸隨機(jī)取6尾, 用適量濃度的丁香酚麻醉, 解剖試驗(yàn)魚分離腸道, 除去腸道粘連的脂肪, 并用冷卻的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.86%生理鹽水沖洗干凈, 裝于凍存管中保存于-80℃冰箱內(nèi), 用于腸道抗氧化指標(biāo)的測(cè)定。另外每缸隨機(jī)撈取6尾魚, 其中3尾用于腸道細(xì)菌的培養(yǎng)與計(jì)數(shù), 剩余3尾用于腸道組織形態(tài)切片的觀察。

    從-80℃冰箱中取出腸道組織樣品置于冰上解凍, 制備10%的組織勻漿液。剪取1—3 g腸道組織,用冰浴過的生理鹽水漂洗去除組織上的血液, 用濾紙拭干后稱重, 再放入勻漿玻璃管中, 按組織∶生理鹽水=1∶9加入0.86%冰冷生理鹽水, 用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿(10s/次, 間隙30s), 連續(xù)勻漿3—5次。最后把制備好的組織勻漿在4℃離心機(jī)下離心(3000 r/min,10min), 所得上清液分裝到離心管中以備測(cè)定。

    1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

    腸道組織切片制作及有關(guān)指標(biāo)測(cè)定 腸道組織切片的制作參考翟秋玲等[17]的方法并略作修改, 主要步驟如下: 將試驗(yàn)魚腸道樣品用PBS沖洗干凈后, 取前腸中間部分0.5 cm, Bouin氏液(飽和苦味酸水溶液75 mL+甲醛25 mL+冰醋酸5 mL)固定24h, 取出后置于75%的酒精中浸泡, 更換數(shù)次以去除樣品中苦味酸的黃色, 然后經(jīng)乙醇溶液(70%—85%—95%—100%)梯度洗脫, 二甲苯透明, 石蠟包埋, 在室溫下切成6 μm的切片, 蘇木精-伊紅(HE)染色, 封片。每個(gè)腸道樣品取5張切片, 每個(gè)切片選取5個(gè)完整、走向平直的腸皺襞位置, 采用光學(xué)顯微鏡(奧林巴斯BX80-JPA)拍照, 于200倍下測(cè)量5腸皺襞高度及肌層厚度, 而后使用Image-pro plus 6.0圖像分析軟件進(jìn)行圖像數(shù)據(jù)測(cè)量。

    腸道細(xì)菌的培養(yǎng)與計(jì)數(shù) 腸道菌群樣品采集參考楊偉[19]的方法并略作修改, 具體操作如下:用蒸餾水沖洗魚體表面, 拭干, 再用酒精棉球擦拭魚體表消毒。用已滅菌的解剖工具打開試驗(yàn)魚腹腔, 取出腸道, 酒精擦拭腸道外部, 并以磷酸鹽緩沖溶液(PBS, pH=7.3)沖洗腸道2—3次去除內(nèi)容物, 保留腸壁樣品, 置于無(wú)菌離心管內(nèi)。超凈工作臺(tái)上稱取腸道樣品0.5 g左右, 并以1∶9的質(zhì)量體積比加入預(yù)先配好的無(wú)菌PBS, 冰浴中用滅菌勻漿器5000 r/ min充分勻漿, 制成腸道原液, 然后進(jìn)行梯度稀釋至10-7稀釋液。取適宜梯度稀釋液各100 μL, 分別涂布在準(zhǔn)備好的選擇性培養(yǎng)基MRS培養(yǎng)基、EMB 培養(yǎng)基和TTC培養(yǎng)基平板上(培養(yǎng)基均購(gòu)自廣州環(huán)凱微生物科技有限公司), 每個(gè)稀釋度每種培養(yǎng)基做兩個(gè)重復(fù), 然后將涂布好的平板置于28℃恒溫生化培養(yǎng)箱(科力儀器PYX-250 S-B)中培養(yǎng)24—48h。培養(yǎng)結(jié)束后, 選取細(xì)菌生長(zhǎng)疏密適當(dāng)、菌落清晰的平板進(jìn)行計(jì)數(shù), 并將結(jié)果換算成每克樣品中菌落數(shù)的對(duì)數(shù)值log10 CFU/g 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    腸道抗氧化指標(biāo) 腸道總抗氧化能力(Total antioxidant capacity, T-AOC)、過氧化氫酶(Catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathion peroxide,GSH-Px)活性及丙二醛(Malondialdehyde, MDA)水平等指標(biāo)均采用南京建成生物工程技術(shù)研究所生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定, 測(cè)定步驟詳見說明書。

    1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示,使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA), 采用Duncan's法進(jìn)行多重比較, P<0.05表示差異顯著。

    2 結(jié)果

    2.1 不同水平抗菌肽Surfactin 對(duì)吉富羅非魚腸道組織形態(tài)的影響

    表 2 飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道皺襞高度和肌層厚度的影響Tab. 2 Effects of dietary AMPs-surfactin supplementation on intestinal tract folds height and muscular thickness of GIFT

    由表 2可以看出, 各抗菌肽添加組羅非魚腸皺襞高度顯著高于對(duì)照組(P<0.05), 50 mg/kg添加組腸皺襞高度顯著高于100和200 mg/kg添加組(P<0.05),各處理組肌層厚度無(wú)顯著差異(P>0.05)。

    2.2 不同水平抗菌肽Surfactin 對(duì)吉富羅非魚腸道菌群的影響

    表 3 飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道微生物數(shù)量的影響Tab. 3 Effects of dietary AMPs-surfactin supplementation on intestinal tract microflora of GIFT (lg CFU/g)

    由表 3可知, 與對(duì)照組相比, 各抗菌肽添加組大腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05), 乳酸菌數(shù)量顯著增加(P<0.05); 隨抗菌肽添加水平的升高, 大腸桿菌數(shù)量呈先降低后升高的趨勢(shì), 50 mg/kg添加組數(shù)量最少, 顯著低于100和200 mg/kg添加組(P<0.05); 乳酸菌數(shù)量呈先升高后降低趨勢(shì), 50 mg/kg添加組數(shù)量最高, 顯著高于100和200 mg/kg添加組(P<0.05)。各處理組腸道總菌數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)。

    2.3 不同水平抗菌肽Surfactin 對(duì)吉富羅非魚腸道抗氧化能力的影響

    由表 4可知, 各抗菌肽添加組吉富羅非魚腸道T-AOC水平和GSH-Px活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05), 50 mg/kg添加組T-AOC水平顯著高于100和200 mg/kg添加組(P<0.05), 50和100 mg/kg添加組GSH-Px活性顯著高于對(duì)照組和200 mg/kg添加組(P<0.05), 且50和100 mg/kg添加組間GSH-Px活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。50和100 mg/kg添加組腸道SOD活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05); 200 mg/kg添加組和對(duì)照組之間、50和100 mg/kg添加組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。各抗菌肽添加組的腸道MDA含量均顯著降低(P<0.05), 50 mg/kg添加組MDA含量最低, 顯著低于對(duì)照組和200 mg/kg添加組(P<0.05)。各處理組腸道CAT活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。

    3 討論

    3.1 抗菌肽Surfactin 對(duì)吉富羅非魚腸道組織形態(tài)的影響

    小腸是魚類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要場(chǎng)所, 腸道的皺襞及絨毛不僅在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收方面起著重要作用, 而且其隨著腸蠕動(dòng)而劇烈強(qiáng)有力的擺動(dòng), 有助于排斥腸壁上有害物質(zhì)的定植, 其對(duì)腸道功能的維持以及腸道健康狀況至關(guān)重要。腸黏膜的肌層厚度反映腸道收縮能力的強(qiáng)弱, 其肌層厚度增加使得腸道收縮力增強(qiáng), 有助于腸道食糜的混勻、消化和排空[21, 22]。

    表 4 飼料中添加抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道抗氧化能力的影響Tab. 4 Effects of dietary AMPs-surfactin supplementation on antioxidant ability in intestinal tract of GIFT

    在本試驗(yàn)中, 吉富羅非魚飼料添加抗菌肽Surfactin可使腸皺襞的高度顯著增加, 且50 mg/kg添加組顯著高于其他添加組, 說明添加一定水平的抗菌肽Surfactin對(duì)腸皺襞絨毛的生長(zhǎng)發(fā)育具有促進(jìn)作用。研究表明, AMPs可以促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞的增殖和胞外基質(zhì)蛋白生成, 修復(fù)腸道損傷[23, 24]; 提高腸道上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的數(shù)量, 提高腸道的免疫屏障功能[22]; 還可優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu), 改善腸道微生態(tài), 對(duì)腸道發(fā)育也有重要的作用[7, 23, 24]。

    3.2 抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚腸道菌群的影響

    研究表明, 在飼料中添加適宜劑量的AMPs可以促進(jìn)動(dòng)物腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌的增殖, 降低腸道中大腸桿菌的數(shù)量[24, 25]。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 飼料中添加抗菌肽Surfactin可顯著增加吉富羅非魚腸道中乳酸菌數(shù)量, 降低大腸桿菌數(shù)量,而不影響腸道總菌數(shù)量。表明抗菌肽Surfactin能夠抑制魚類腸道有害菌, 促進(jìn)腸道有益菌的增殖, 從而改善腸道微生態(tài), 促進(jìn)腸道健康。目前, 大多學(xué)者認(rèn)為Surfactin的抗菌活性與其表面活性作用密切相關(guān), 可通過攻擊病原菌細(xì)胞膜, 造成膜崩解或滲透壓失衡而發(fā)揮抑菌作用[5, 6]; 此外, Surfactin還能通過抑制蛋白質(zhì)合成胞內(nèi)代謝酶的活性, 影響病原菌正常代謝和增殖[5—7]。

    3.3 抗菌肽Surfactin 對(duì)吉富羅非魚腸道抗氧化能力的影響

    在正常生理情況下, 動(dòng)物體內(nèi)自由基處于一種產(chǎn)生和清除的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。SOD、CAT和GSHPx是機(jī)體內(nèi)清除自由基的主要抗氧化酶, 可減少脂質(zhì)過氧化損傷, 維持機(jī)體自由基的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。T-AOC 可以反映機(jī)體的總抗氧化水平, 它通過分解體內(nèi)過氧化物, 阻斷過氧化鏈, 來(lái)清除體內(nèi)自由基和活性氧。MDA是自由基與脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的主要產(chǎn)物, 其含量多少可以間接反映機(jī)體的脂質(zhì)過氧化程度和自由基產(chǎn)生情況[26]。

    研究表明, 枯草芽孢桿菌Y-6產(chǎn)生的抗菌肽(活性成分為Surfactin、伊枯草菌素和豐原素)是一種高效的抗氧化劑, 可清除O2-、OH-和H2O2等自由基, 抑制MDA生成[27]。在本研究中, 適量添加抗菌肽Surfatin提高了腸道SOD、GSH-Px活性以及TAOC水平, 降低了MDA水平。這與我們研究Surfactin對(duì)吉富羅非魚肝胰臟抗氧化指標(biāo)影響的結(jié)果類似[11]。Surfactin提高機(jī)體抗氧化能力的作用也在小鼠[28]和肉仔雞[29]中得到證實(shí)。Surfactin提高動(dòng)物抗氧化能力的機(jī)制可能是: (1)通過提高有益菌數(shù)量, 降低有害菌數(shù)量, 減少自由基生成。益生菌具有較強(qiáng)的抗氧化功能, 其能夠釋放SOD、GSHPx和巰基化合物等抗氧化物質(zhì), 清除周圍的活性氧和自由基, 減少脂質(zhì)抗氧化損傷[30]; 此外, 有害菌的減少還可以降低內(nèi)毒素的積累, 降低誘發(fā)氧衍 生為自由基的可能性[31]。(2)其分子中含有疏水性氨基酸, 如亮氨酸和纈氨酸可與氧結(jié)合或抑制脂質(zhì)中氫的釋放, 促進(jìn)肽鏈與脂肪酸之間的相互作用, 從而延緩脂質(zhì)過氧化鏈反應(yīng)[5, 6, 32]; (3)通過分子內(nèi)的谷氨酸和天冬氨酸與Fe2+、Fe3+和Cu2+等金屬離子螯合, 可降低金屬離子的催化活性和氧化反應(yīng)速度,減少自由基生成[28]。值得注意的是腸道MDA水平隨著Surfactin添加水平升高有所上升, 這可能與Surfactin發(fā)揮表面活性作用的方式有關(guān)[33, 34], 也可能與抗菌肽類物質(zhì)具有一定的抗原性有關(guān)[5, 6, 24], 具體原因還有待查明。

    在本試驗(yàn)中, 吉富羅非魚腸道健康指標(biāo)狀況并未隨抗菌肽Surfactin水平的增加而得到進(jìn)一步的改善。這與本課題組研究其對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、脂肪代謝指標(biāo)和肝胰臟生理生化指標(biāo)的影響, 以及對(duì)中華鱉稚鱉增重率和血液生化指標(biāo)作用的結(jié)果類似, 即超過適量添加水平的抗菌肽Surfactin對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的作用效果無(wú)顯著提高[8—12]。這可能主要與抗菌肽Surfactin的表面活性有關(guān)。研究表明, Surfactin的多種生物學(xué)活性以表面活性作用為基礎(chǔ)。當(dāng)發(fā)揮表面活性作用時(shí), 其乳化效果與用量直接相關(guān), 在臨界膠束濃度以下時(shí),其乳化能力隨著用量的增加而增加; 但超過臨界膠束濃度后, 乳化性能趨于穩(wěn)定, 即使加大用量, 乳化效果也不會(huì)有太大變化[33, 34]。

    4 小結(jié)

    在飼料中添加抗菌肽Surfactin可提高吉富羅非魚腸道皺襞高度, 調(diào)節(jié)腸道菌群, 提高腸道抗氧化能力, 而改善吉富羅非魚腸道健康狀態(tài)。在本試驗(yàn)條件下, 50 mg/kg的抗菌肽Surfactin即可對(duì)吉富羅非魚腸道健康指標(biāo)產(chǎn)生有益影響。

    [1]Peng K S, She R P, Yang Y R, et al. Anti-adherence of antibacterial peptides and oligosaccharides and promotion of growth and disease resistance in tilapia [J]. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 2007, 20(4):569—576

    [2]Zhou X X, Wang Y B, Li W F. Effect of feeding apidaecin on common carp (Cyprinus carpio) growth performances and immune function [J]. Aquaculture, 2008, 279:108—112

    [3]Shi Q C. The effects of dietary surfactin supplementation on the growth and intestinal health of GIFT strain of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) [D]. Thesis for Master of Science. Jimei University. Xiamen. 2015 [史慶超. 抗菌肽Surfactin對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)及腸道健康的影響. 碩士學(xué)位論文, 集美大學(xué). 廈門. 2015]

    [4]Hassan M, Kjos M, Nes I F, et al. Natural antimicrobial peptides from bacteria: characteristics and potential applications to fight against antibiotic resistance [J]. Journal of Applied Microbiology, 2012, 113(4): 723—736

    [5]Seydlova G, Svobodova J. Review of surfactin chemical properties and the potential biomedical applications [J]. Central European Journal of Medicine, 2008, 3(2):123—133

    [6]Chen W C, Juang R S, Wei Y H. Applications of a lipopeptide biosurfactant, surfactin, produced by microorganisms [J]. Biochemical Engineering Journal, 2015,103: 158—169

    [7]Zhai S W, Li J, Shi Q C. Antimicrobial lipopeptide surfactin: antimicrobial activity and applications [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015, 27(5): 1333—1340[翟少偉, 李劍, 史慶超. 抗菌脂肽Surfactin的抗菌活性及應(yīng)用. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(5): 1333—1340]

    [8]Shi Q C, Lu J J, Lu P, et al. Effects of antimicrobial lipopeptides supplementation on growth performance and intestinal digestive enzyme activities of genetic improvement of farmed tilapia (GIFT, Oreochromis niloticus) [J]. Journal of Feed Industry, 2014, 35(12): 6—10 [史慶超,盧俊姣, 陸鵬, 等. 飼料中添加抗菌脂肽對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能和腸道消化酶活性的影響. 飼料工業(yè), 2014,35(12): 6—10]

    [9]Zhai S W, Li J, Sun X W. Effects of surfactin supplementation on growth performance, serum biochemical indexes and lipid metabolism of genetically improved farmed tilapia (Oreochromis niloticus) [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015, 27(12): 3959—3967[翟少偉, 李劍, 孫秀文. 飼料中添加表面活性素對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及脂肪代謝的影響.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(12): 3959—3967]

    [10]Zhai S W, Shi Q C, Lu P, et al. Effects of different types of antimicrobial lipopeptides supplementation on the weight gain rate, serum biochemical indexes and non-specific immune ability of GIFT strain of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) [J]. Guangdong Agriculture Science,2015, (21): 129—133 [翟少偉, 史慶超, 陸鵬, 等. 不同抗菌脂肽添加物對(duì)吉富羅非魚增重率、血清生化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的影響. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015, (21):129—133]

    [11]Zhai S W, Li J, Chen X H et al. Effect of dietary surfactin supplementation on some physiological-biochemical parameters in hepatopancreas of GIFT tilapia [J]. Feed Research, 2015, (23): 46—48, 54 [翟少偉, 李劍, 陳學(xué)豪,等. 飼料中添加表面活性素對(duì)羅非魚肝胰臟生理生化指標(biāo)的影響.飼料研究, 2015, (23): 46—48, 54]

    [12]Zhai S W, Shi Q C, Sun P X, et al. Effect of dietary surfactin supplementation on weight gain rate and blood biochemical parameters of juvenile chinese soft-shelled turtle (Pelodiscus sinensis) [J]. Feed China, 2015, (22): 39—41[翟少偉, 史慶超, 孫培新, 等. 表面活性素對(duì)中華鱉稚鱉增重率及血液生化指標(biāo)的影響. 飼料廣角, 2015, (22):39—41]

    [13]Shi G J, Sun L J, Wang Y L, et al. Effects of antibacterial lipopeptides produced by Bacillus subtilis NT-6 in solidstate fermentation on growth performance and non-specific immunity of Litopenaeus vannamei [J]. Guangdong Agriculture Science, 2014, (22): 99—102, 108 [石廣舉,孫力軍, 王雅玲, 等. 納豆芽孢桿菌NT-6 抗菌脂肽對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及非特異性免疫指標(biāo)的影響. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014, (22): 99—102, 108]

    [14]Shi G J, Sun L J, Wang Y L, et al. Effects of NT-6 antimicrobial lipopeptide on growth performance of Litopenaeus vannamei and Vibrio number during breeding process [J]. Guangdong Agriculture Science, 2014, (12):119—122 [石廣舉, 孫力軍, 王雅玲, 等. NT-6抗菌脂肽對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及養(yǎng)殖源頭弧菌數(shù)的影響. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014, (12): 119—122]

    [15]Zhou X Q. Relationship between Nutrient and Fish In-testi- nal Health [A]. In: Liu J X (Eds.), Advanced Research in Animal Nutrition (2012 edition) [C]. Beijing:China Agriculture Science and Technology. 2012,246—260 [周小秋. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與魚腸道健康的關(guān)系. 見:劉建新, 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究進(jìn)展(012年版). 北京: 中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社. 2012, 246—260]

    [16]Mi H F, Sun R J, Zhang L, et al. Research progress of fish intestinal health [J]. China Feed, 2015, (15): 19—22 [米海峰, 孫瑞健, 張璐,等.魚類腸道健康研究進(jìn)展. 中國(guó)飼料, 2015, (15): 19—22]

    [17]Zhai Q L, Zhang C X, Sun Y Z, et al. Effects of tributyrin and mannan-oligosaccharide on growth performance,body composition and intestinal health indices of tawny puffer (Takifugu flavindus) [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2014, 26(8): 2197—2208 [翟秋玲, 張春曉, 孫云章, 等. 三丁酸甘油酯和甘露寡糖對(duì)菊黃東方鲀生長(zhǎng)性能、體組成及腸道健康指標(biāo)的影響. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2014, 26(8): 2197—2208]

    [18]Wang M Q, Huang X L, Jin M, et al. Improvement effect of dietary plant essential oil on growth performance and intestinal health of Litopenaeus vannamei [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015, 27(4): 1163—1171[王猛強(qiáng), 黃曉玲, 金敏, 等. 飼料中添加植物精油對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及腸道健康的改善作用. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(4): 1163—1171]

    [19]Yang W. Effects of dietary amylase/amylopectin ratios on the growth, feed utilization and intestinal health of tilapia,Oreochromis niloticus [D]. Thesis for Master of Science. Jimei University. Xiamen. 2012 [楊偉. 飼料中直鏈/支鏈淀粉比對(duì)羅非魚生長(zhǎng)、飼料利用及腸道健康的影響.碩士學(xué)位論文, 集美大學(xué). 廈門. 2012]

    [20]The Ministry of Agriculture of the People's Republic of China. SC/T 1025—2004 Formulated Feed of Tilapia [S]. China Standard Press. 2004 [中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部. SC/T 1025—2004羅非魚配合飼料. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社. 2004]

    [21]Zheng Y H, Peng C, Wu X F, et al. Effects of hydrolyzed yeast on growth performance, lipids metabolism and intestinal structure of largemouth bass (Micropterus salmoides) [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015,27(5): 1605—1612 [鄭銀樺, 彭聰, 吳秀峰, 等. 酵母酶解物對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)性能、脂類代謝及腸道組織結(jié)構(gòu)的影響. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(5): 1605—1612]

    [22]Li Y L, Gao Q P, Shuai K, et al. Effects of soybean meal replacement by fermented soybean meal on growth performance and intestinal tissue structure of common carp (Cyprinus carpio) [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015, 27(2): 469—475 [李云蘭, 高啟平, 帥柯, 等.發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能和腸道組織結(jié)構(gòu)的影響. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(2): 469—475]

    [23]Ostaff M J, Stange E F, Wehkamp J. Antimicrobialpeptides andgutmicrobiota in homeostasis and pathology [J]. Embo Molecular Medicine, 2013, 5(10):1465—1483

    [24]Wang S, Thacker P A, Watford M, et al. Functions of antimicrobial peptides in gut homeostasis [J]. Current Protein and Peptide Science, 2015, 16: 582—591

    [25]Xiao H, Shao F Y, Wu M M, et al. The application of antimicrobial peptides as growth and health promoters for swine [J]. Journal of Animal Science and Biotechnology,2015, 6(1): 19

    [26]Wu K, Huang X S, Jin J N, et al. Effects of feeding with faba bean (Vicia faba) on the antioxidant capability and immune functions of grass carp (Cenopharyngodon idellu) [J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2015, 39(2):250—258 [吳康, 黃曉聲, 金潔南, 等. 飼喂蠶豆對(duì)草魚抗氧化能力及免疫機(jī)能的影響. 水生生物學(xué)報(bào), 2015,39(2): 250—258]

    [27]Zhang J, Ding H Y, Qi X Y, et al. Antioxidant activities in vitro of antimicrobial peptide produced by Bacillus subtilis Y-6 [J]. Journal of Nuclear Agricultural Sciences,2011, 25(3): 518—522, 558 [張捷, 丁韓英, 戚向陽(yáng), 等.枯草芽孢桿菌Y-6產(chǎn)抗菌肽的體外抗氧化效果研究. 核農(nóng)學(xué)報(bào), 2011, 25(3): 518—522, 558]

    [28]Yal??n E, ?avu?oglu K. Structural analysis and antioxidant activity of a biosurfactant obtained from Bacillus subtilis RW-I [J]. Turkish Journal of Biochemistry Turk Biyokimya Dergisi, 2010, 35(3): 243—247

    [29]Du H M, Lu Z X, Wang T. Effect of antimicrobial peptides on antioxidant capacity and biochemical indicators in broilers [J]. Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2010, 42(6): 8—13 [都海明, 陸兆新, 王恬. 抗菌脂肽對(duì)肉雞抗氧化能力及血清生化指標(biāo)的影響. 畜牧與獸醫(yī), 2010, 42(6): 8—13]

    [30]Wang J B, Chu J L, Qi L L, et al. The relationship between probiotics and animal intestinal free radical [J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2014, 26(12):3545—3549 [王進(jìn)波, 初佳麗, 齊莉莉, 等. 益生菌與動(dòng)物腸道自由基的關(guān)系. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2014, 26(12):3545—3549]

    [31]Wang T, Du H M, Lu Z X. Advance of antimicrobial lipopeptide and its application in animal production [A]. In: Liu J X (Eds.), Advanced Research in Animal Nutrition (2012 edition) [C]. Beijing: China Agriculture Science and Technology. 2012, 327—337 [王恬, 都海明, 陸兆新. 抗菌脂肽及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展. 見:劉建新, 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究進(jìn)展(2012年版). 北京: 中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社. 2012, 327—337]

    [32]Xiao M Z, Jin X B, Zhu J Y. Antioxidant mechanism and application prospective of antibacterial peptides [J]. Food Science, 2010, 31(11): 312—315 [肖明珠, 金小寶, 朱家勇. 抗菌肽抗氧化作用機(jī)制及其應(yīng)用前景. 食品科學(xué),2010, 31(11): 312—315]

    [33]Li Y, Zou A H, Ye R Q, et al. Effects of molecular struc-ture on surfactin micellization activity [J]. Acta Physico-Chimica Sinica, 2011, 27(5): 1128—1134 [李翌, 鄒愛華,葉汝強(qiáng), 等. 表面活性素分子結(jié)構(gòu)對(duì)其膠束化行為的影響. 物理化學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 27(5): 1128—1134]

    [34]Sahnoun R, Mnif I, Fetoui H, et al. Evaluation of Bacillus subtilis SPB1 lipopeptide biosurfactant toxicity towards mice [J]. International Journal of Peptide Research and Therapeutics, 2014, 20(3): 333—340

    EFFECT OF DIETARY ANTIMICROBIAL PEPTIDES-SURFACTIN SUPPLEMENTATION ON PARAMETERS OF INTESTINAL HEALTH INDICES OF GENETICALLY IMPROVED FARMED TILAPIA (GIFT, OREOCHROMIS NILOTICUS)

    ZHAI Shao-Wei, SHI Qing-Chao and CHEN Xue-Hao
    (Fisheries College of Jimei Univeristy, Xiamen 361021, China)

    A 7-week feeding trial was conducted to evaluate effects of antimicrobial peptides-surfactin on intestinal health indices of genetically improved farmed tilapia (GIFT, Oreochromis niloticus). Three hundred and twenty fish with initial average weight of (12.01±0.12) g were randomly divided into four treatment groups with four replicates and 20 fish in each replicate. The fish were fed experimental diets supplemented with 0 (control group), 50, 100, and 200 mg/kg antimicrobial peptides-surfactin, respectively. Surfactin supplementation increased intestinal folds height of GIFT (P<0.05), but did not impact the muscular thickness (P>0.05). Surfactin supplementation significantly decreased the number of Escherichia coli of GIFT (P<0.05) and significantly increased the number of Lactobacillus (P<0.05). There was no significant difference in the total bacterial number among all treatment groups (P>0.05). Surfactin supplementation significantly increased the total antioxidant capacity level and activities of glutathion peroxidase and superoxide dismutase (except 200 mg/kg Surfactin supplementation group) (P<0.05) but significantly decreased the content of malondialdehyde (P<0.05). Surfactin supplementation had no effect on catalase activity (P>0.05). The intestinal health parameters of 50 mg/kg antimicrobial peptides-surfactin supplementation group were the best among all supplementation groups. In conclusion, surfactin supplementation at 50 mg/kg could improve intestinal health status of GIFT by increasing the intestinal folds height and regulating intestinal microbial population and antioxidant ability.

    Antimicrobial peptides; Genetically improved farmed tilapia; Intestinal health

    S963

    A

    1000-3207(2016)04-0823-07

    10.7541/2016.106

    2015-12-29;

    2016-01-11

    “十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國(guó)家科技計(jì)劃課題“功能性肽產(chǎn)品的創(chuàng)制與應(yīng)用”(2013BAD10B03)資助 [Supported by Key Project of National Science and Technology R&D Program During the Twelfth Five-Year Plan Period “Development and Application of Functional Peptide Products”(2013BAD10B03)]

    翟少偉 (1973—), 男, 河北晉州人; 博士, 副教授; 主要研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料資源開發(fā)。E-mail: shaoweizhai@163.com

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