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    果品生物活性物質(zhì)納米粒研究現(xiàn)狀

    2016-08-10 07:25:47周志欽西南大學(xué)園藝園林學(xué)院南方山地園藝學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶400716
    食品科學(xué) 2016年13期
    關(guān)鍵詞:活性成分利用

    胡 艷,周志欽*(西南大學(xué)園藝園林學(xué)院,南方山地園藝學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶 400716)

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    果品生物活性物質(zhì)納米粒研究現(xiàn)狀

    胡 艷,周志欽*
    (西南大學(xué)園藝園林學(xué)院,南方山地園藝學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶 400716)

    摘 要:果品富含各種營養(yǎng)與活性成分,對(duì)人體健康具有重要作用。但天然的活性物質(zhì)存在水溶性差、易降解、不穩(wěn)定、人體吸收和生物利用度低等一系列問題,納米技術(shù)能有效克服這些缺陷。本文全面分析了果品生物活性物質(zhì)納米粒的研究現(xiàn)狀,系統(tǒng)介紹了有關(guān)物質(zhì)納米粒的制備原理、技術(shù)和方法,總結(jié)了納米粒活性物質(zhì)的生物學(xué)功能及其在食品、醫(yī)藥保健和日化產(chǎn)品等領(lǐng)域的應(yīng)用情況,指出了存在的問題并提出了未來研究方向,以期為高效利用果品生物活性物質(zhì)提供新信息。

    關(guān)鍵詞:水果與制品;活性成分;納米粒;生物功能;利用

    引文格式:

    胡艷, 周志欽.果品生物活性物質(zhì)納米粒研究現(xiàn)狀[J].食品科學(xué), 2016, 37(13): 277-286.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201613048. http://www.spkx.net.cn

    HU Yan, ZHOU Zhiqin.Current status of research on nanoparticles containing fruit bioactive compounds[J].Food Science,2016, 37(13): 277-286.(in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201613048. http://www.spkx.net.cn

    果品,包括水果、干果及其制品,富含各種營養(yǎng)與活性成分。從人類健康的角度來講,我們可以把果品的生物活性物質(zhì)定義為“參與人體新陳代謝,調(diào)節(jié)有關(guān)生理活動(dòng),對(duì)人體營養(yǎng)、保健和疾病防治有重要作用的天然功能物質(zhì)”?,F(xiàn)代流行病學(xué)研究已經(jīng)證明,果品中的生物活性物質(zhì)對(duì)延緩衰老、減少患心血管疾病和癌癥的風(fēng)險(xiǎn),預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、白內(nèi)障、阿爾茨海默氏病及肺部疾病等具有重要作用[1-5]。盡管果品生物活性物質(zhì)對(duì)人體健康具有重要作用,但各種活性物質(zhì)的生物利用度和藥效動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)不確定,且每日攝入量沒有一個(gè)科學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)[6]。事實(shí)上,科學(xué)界對(duì)它們的定義和分類迄今也沒有一個(gè)統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)[7-8]。根據(jù)果品生物活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)和功能特性可大致分為維生素、酚類化合物、類胡蘿卜素、萜類、生物堿和膳食纖維等幾大類型[8]。據(jù)現(xiàn)有研究報(bào)道,果品生物活性物質(zhì)的利用存在一系列問題,包括溶解度低、易降解、不穩(wěn)定、人體吸收和生物利用度低等[9]。

    納米材料是指3 個(gè)維度中至少有1 個(gè)維度呈納米級(jí)(1~100 nm)大小的材料,相比于傳統(tǒng)材料,具有一些新的效應(yīng)(量子效應(yīng)、量子隧道效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)和界面效應(yīng))[10]。然而在藥物科學(xué)領(lǐng)域,粒徑小于1 000 nm的粒子因具有特殊的理化性質(zhì)也被歸類為納米粒[11]。納米技術(shù)的概念是由著名的物理學(xué)家Richard Feynman于1959年提出的。納米技術(shù)是指在納米尺度上研究原子、分子結(jié)構(gòu)特性及其相互作用原理,并根據(jù)需要在納米尺度上直接操縱分子、原子乃至電子來制造各種特定產(chǎn)品或創(chuàng)造納米級(jí)加工工藝的一門新興綜合性技術(shù)[12]。納米技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)影響到人類生活的各個(gè)方面[13]。研究證明,納米技術(shù)在提高生物活性物質(zhì)及其產(chǎn)品的水溶性、熱穩(wěn)定性、生物利用度、色澤和風(fēng)味等方面有巨大的潛能,可增強(qiáng)它們對(duì)人類健康的作用。目前,果品生物活性物質(zhì)納米材料的研究已涉及包封技術(shù)、功能特性、產(chǎn)業(yè)利用、安全控制等方面。

    本文的目的是系統(tǒng)總結(jié)果品生物活性物質(zhì)納米粒的研究現(xiàn)狀,介紹有關(guān)的技術(shù)、方法及其原理,回顧有關(guān)產(chǎn)業(yè)的利用情況,分析存在的問題,為果品生物活性物質(zhì)的科學(xué)高效利用提供新信息。

    1 果品生物活性物質(zhì)及其納米粒

    果品是天然生物活性物質(zhì)物最豐富的來源,包含維生素、酚類、萜類、膳食纖維等。臨床研究表明,這些天然的生物活性物質(zhì)對(duì)人體健康的益處顯著高于相應(yīng)的藥物[14]。目前,有關(guān)活性物質(zhì)納米材料的研究已經(jīng)涉及到維生素、酚類化合物、類胡蘿卜素、果膠等,這些活性物質(zhì)在納米粒中的作用主要有兩種,即功能成分和包封載體。部分還可在納米材料合成過程中作還原劑和穩(wěn)定劑,如蘆丁和槲皮素等[15]。

    1.1 維生素

    維生素是一種有機(jī)體所必需的但需要量很少的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)[16],可分為水溶性和脂溶性維生素。在13 種維生素中,果品中主要含有6 種維生素,即脂溶性VA(視黃醇)、VE(生育酚)、水溶性VC(抗壞血酸)、VB1(硫胺素)、VB2(核黃素)、VB3(煙酸)。表1總結(jié)了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)和基本生物功能。維生素在維持和調(diào)節(jié)機(jī)體正常代謝中必不可少,VA、VC、VE是重要的抗氧化劑,與許多重大疾病防治有關(guān),B族維生素主要作為輔酶的前體在新陳代謝中發(fā)揮著重要作用。然而,天然維生素在果品食用、加工、貯藏過程中容易失活、分解,化學(xué)性質(zhì)極不穩(wěn)定且生物利用度差。納米粒封裝活性物質(zhì)可有效解決這些問題,許多生物相容性和降解能力較好的納米粒子,如納米脂質(zhì)體、納米乳、固體脂質(zhì)納米載體、微膠粒、生物聚合物納米粒子等均可用作活性物質(zhì)的包封材料[17]。

    VA在蜜橘中的含量為2.77 mg/kg,在紅棗干果中的含量為0.4 mg/kg[18]。這種脂溶性有機(jī)化合物,溶解度差且不穩(wěn)定。Kim等[19]用殼聚糖納米粒包封VA,使VA的溶解度增加了1 600 倍,極大地提高其在化妝品和藥物學(xué)領(lǐng)域的利用效率。Ghouchi-Eskandar等[20]用硅納米粒子包封VA,制得固態(tài)的亞微米乳劑,在40 ℃貯藏條件下其穩(wěn)定性與VA乳液相比提高了3 倍,并且在4 ℃條件下貯藏一個(gè)月也未發(fā)現(xiàn)VA降解,而VA乳液中降解了50%。獼猴桃、核桃、杏仁等均富含VE。VE對(duì)酸和熱不敏感,但對(duì)堿不穩(wěn)定,且難以被消化道吸收。Chen等[21]制備的淀粉VE納米粒具有良好的物理穩(wěn)定性,可改善傳統(tǒng)VE乳液加入到果汁后使果汁分層且變渾濁的現(xiàn)象。Luo Yangchao等[22]用玉米蛋白殼聚糖復(fù)合納米粒包封VE,能有效防止VE在腸胃中不同的pH值條件下發(fā)生降解并提高VE的緩釋性能和改善其對(duì)堿不穩(wěn)定的特性。

    VC在溫州蜜柑果皮中的含量高達(dá)1 420 mg/kg,而蘋果中VC含量僅有40 mg/kg[18]。VC是最熱不穩(wěn)定的維生素之一,在加工過程中易降解。Alishahi等[23]用殼聚糖納米粒封裝VC,增加了VC在消化道中的滯留時(shí)間,可延長至12 h,有效提高吸收效率且能穩(wěn)定釋放。Marsanasco等[24]制備大豆磷脂VC納米粒,將其加入橙汁,在加熱殺菌后和貯藏期間不會(huì)改變橙汁的口感且能保持微生物穩(wěn)定性。堅(jiān)果及核果類水果是VB的重要來源,VB作為功能細(xì)胞關(guān)鍵酶的輔酶發(fā)揮作用,是細(xì)胞生長必不可少的物質(zhì)。Azevedo等[25]用殼聚糖海藻酸鈉納米粒包封VB2,在不同的條件下能可控釋放VB2。此外,維生素還可作修飾納米粒子的活性成分,如用VB修飾銀納米粒子,能顯著增強(qiáng)銀納米的抗菌活性[26]。

    表 1 果品中主要維生素化學(xué)結(jié)構(gòu)式及生物功能Table 1 Structures and physiological functions of major vitamins infruits類型 結(jié)構(gòu)式 生物功能VA H3C CH3CH3CH3CH3OR抗癌,促進(jìn)糖蛋白合成,保護(hù)視力,抑制皮膚角化[19]VEH3C H3C H H O CH3CH3CH3CH3CH3CH3CH3抗氧化,維持生育,調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng),抑制血小板增殖、凝集和血細(xì)胞黏附[21]VC H HHH HO OH OH OH O O增強(qiáng)人體免疫功能,促進(jìn)膠原的形成和類固醇的代謝,預(yù)防和治療缺鐵性貧血、惡性貧血、壞血病,抗衰老、防癌、解毒[23]VB1NH2N N H3C H3C Cl-N+ SOH以輔酶形式參與糖的分解代謝,保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)[18]VB2HO HO OH OH N NN O S O H3C H3C促進(jìn)生長發(fā)育,參與細(xì)胞生長代謝,強(qiáng)化肝功能[25]VB3NCOOH參與肝臟細(xì)胞代謝、DNA修復(fù)、腎上腺類固醇激素的產(chǎn)生[18]

    1.2 酚類化合物

    酚類物質(zhì)是具有一個(gè)或多個(gè)芳香環(huán)連接一個(gè)或多個(gè)羥基的一類化合物,是植物最豐富的次生代謝產(chǎn)物,也是水果、蔬菜和其他植物感官和營養(yǎng)品質(zhì)的重要決定因素[27]。目前,已鑒別出的酚類物質(zhì)超過8 000 種,其中有4 000多種類黃酮。根據(jù)結(jié)構(gòu)式中苯酚環(huán)的數(shù)量可分為幾大類型,主要包括類黃酮、酚酸、單寧、芪類和木質(zhì)素[28],其結(jié)構(gòu)式和基本生物功能如表2所示。酚類物質(zhì)在腸胃中水溶度低、穩(wěn)定性差、被動(dòng)擴(kuò)散且主動(dòng)流出,從而導(dǎo)致了在體內(nèi)的吸收利用率極低[29]。

    類黃酮是一類具有黃烷酮核基本骨架(C6—C3—C6)的酚類化合物的總稱,根據(jù)分子結(jié)構(gòu)可進(jìn)一步分為花青素、黃酮、黃烷酮、黃烷醇、異黃酮、黃酮醇[30]。類黃酮是最為常見的一類活性物質(zhì),具有很高的氧化還原電位,因此在許多反應(yīng)過程中可作還原劑、氫供體、單線態(tài)氧猝滅劑及金屬螯合劑。類黃酮被喻為植物的抗毒素,可保護(hù)植物免受紫外線、病原體、寄生蟲和捕食者等的侵害[27]。果品中的類黃酮與人類健康密切相關(guān),可減少癌癥、心臟病、中風(fēng)等重大疾病的發(fā)生率。檸檬中橙皮苷含量為220 mg/kg,紅棗中槲皮素含量為490 mg/kg,蘋果皮中的類黃酮約為275.6 mg/kg[18]。Tzeng等[31]合成了山奈酚納米粒,其抗氧化活性與山奈酚水溶液相比有顯著提高。Kumar等[32]用聚己內(nèi)酯(polycaprolactone,PCL)納米粒負(fù)載槲皮素,提高了槲皮素的物理穩(wěn)定性及緩釋性能,可持續(xù)釋放超過48 h。Jardim等[33]用殼聚糖和硫酸軟骨素作姜黃素的納米載體,增強(qiáng)了對(duì)肺癌細(xì)胞的殺傷力,使癌細(xì)胞的活力降低60.4%。

    酚酸是指同一苯環(huán)上帶有一個(gè)羥基官能團(tuán)的化合物,在植物中一般與糖、有機(jī)酸及各種酯化結(jié)合形式存在[34]。按結(jié)構(gòu)可分為羥基苯甲酸型(沒食子酸、原兒茶酸、香草酸、丁香酸)和羥基肉桂酸型(咖啡酸、阿魏酸、芥子酸、香豆酸)。據(jù)報(bào)道,椪柑果皮中的酚酸含量高達(dá)5 060 mg/g[35]。人類攝入的膳食酚類物質(zhì)中,酚酸占1/3,Clifford[36]研究發(fā)現(xiàn)人們每日攝入的酚酸含量大約為25 mg~1 g,對(duì)人類健康起著至關(guān)重要的作用。Madureira等[37]用殼聚糖納米粒負(fù)載2,5-二羥基苯甲酸和原兒茶酸,其抗氧化活性略有下降,可能與殼聚糖的保護(hù)作用有關(guān)。

    單寧分為縮合單寧和水解單寧,具有螯合金屬離子、蛋白沉淀和生物抗氧化的潛能,對(duì)生物系統(tǒng)有多種多樣的影響。研究最為廣泛的濃縮單寧是表兒茶素和兒茶酸,水解單寧是沒食子酸的衍生物。Aditya等[38]研究了兒茶酸和姜黃素作活性成分的雙重油水乳化液,與游離狀態(tài)相比,其穩(wěn)定性提高20%~40%。

    芪類物質(zhì)是植物在被病原體侵染或各種環(huán)境脅迫下產(chǎn)生的[39],大多以糖基化形式存在于植物體內(nèi)的一類物質(zhì)[40],應(yīng)用最廣泛的是白藜蘆醇。白藜蘆醇是一種眾所周知的抗氧化和抗炎化合物,主要存在于葡萄等漿果類水果中。據(jù)前人研究,白藜蘆醇對(duì)光敏感、容易被降解、口服生物利用度低從而限制了它的臨床應(yīng)用。Pandita等[41]用卵磷脂納米粒負(fù)載白藜蘆醇,可延長體外釋放時(shí)間達(dá)120 h,與白藜蘆醇液體相比,其口服生物利用度提高8.035 倍。Lee等[42]成功制備了白藜蘆醇納米粒子,通過增強(qiáng)其抗氧化和抗炎活性達(dá)到保肝功能。

    木質(zhì)素是由兩個(gè)苯基丙烷單元通過氧化二聚作用產(chǎn)生的,在自然界中多以游離態(tài)形式存在,可用于癌癥臨床化療[43]。木質(zhì)素是存在于植物中唯一數(shù)量較多的含芳香環(huán)的可再生化合物,被視為最豐富的綠色化學(xué)資源之一。Xiong Wenlong等[44]制備的木質(zhì)素/二氧化硅復(fù)合納米粒子,可用作聚合物材料的填料。Yang Weijun等[45]制備的木質(zhì)素納米粒能在各種pH值條件的水溶液中保持穩(wěn)定。

    表 2 果品中主要酚類物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)式及生物功能Table 2 Structures and physiological functions of major phenoliccompounds in fruits類型 結(jié)構(gòu)式 生物功能類黃酮OO調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝,增強(qiáng)機(jī)體的非特異免疫功能和體液免疫功能,降血糖、抗氧化、抗癌、抗炎、抗心血管疾病[27]酚酸COOH R1 R2 R3保護(hù)人體血管內(nèi)皮細(xì)胞,消炎、抗病毒、抗癌、止血[34]單寧OHCO CO CO CO CO OH HO HO HO HO O OO O O O OH OH OH OH OH OH OH OH OH金屬離子螯合劑、蛋白沉淀劑、抗氧化劑[38]芪類R1O OR2OR3抗病毒感染、抗環(huán)境脅迫[39]木質(zhì)素H3CO HO OH OCH3CH2OH CH2OH抗癌[43]

    1.3 類胡蘿卜素

    類胡蘿卜素是一種含有8 個(gè)異戊二烯單位的四萜化合物,由兩個(gè)萜縮合而成,是一類重要的天然色素的總稱。胡蘿卜素是合成VA的前體,而且具有抗氧化活性、預(yù)防心血管疾病、增強(qiáng)人體免疫力、防癌抗癌等生物學(xué)作用,是人類飲食的重要成分[46]。根據(jù)類胡蘿卜素分子末端的基團(tuán)可分為非循環(huán)和循環(huán)兩大類,循環(huán)類胡蘿卜素包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu),常以β-紫羅蘭酮為環(huán)[47]。水果中常見的類胡蘿卜素有:α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素、β-隱黃素、番茄紅素、葉黃素、玉米黃素等[48]。長期以來,番茄紅素和β-胡蘿卜素成為研究的核心。近年來,葉黃素、隱黃質(zhì)、玉米黃素等因其具有抗氧化、抗癌、防輻射、抗骨質(zhì)疏松等生物活性也引起了廣泛關(guān)注。目前,從生物對(duì)象中已提取出超過799 種不同的類胡蘿卜素,其中大約有20 種存在于人體內(nèi),最重要的幾種是β-胡蘿卜素、番茄紅素、葉黃素、玉米黃質(zhì)。

    國內(nèi)外關(guān)于類胡蘿卜素納米粒的研究逐漸深入。β-胡蘿卜素極難溶于水且微溶于油,Kim等[49]制備的淀粉β-胡蘿卜素復(fù)合納米粒子可穩(wěn)定分散于水溶液中。Ying Danyang等[50]探究了不同穩(wěn)定劑對(duì)β-胡蘿卜素的納米乳的穩(wěn)定性的影響。Yi Jiang等[51]分別用酪蛋白酸鈉、乳清分離蛋白、大豆分離蛋白封裝β-胡蘿卜素,探究其理化特性。類胡蘿卜素中番茄紅素的抗氧化活性最強(qiáng),Okonogi等[52]用納米脂質(zhì)體輸送番茄紅素,探究其負(fù)載率、釋放率、穩(wěn)定性及納米粒子的粒徑和電荷。Neromea等[53]通過優(yōu)化條件制備了番茄紅素/β-環(huán)糊精復(fù)合物納米粒。葉黃素的生物利用度相對(duì)于其他類胡蘿卜素更低,只有2.0%~9.4%,這是由于葉黃素具有高疏水性的C40類異戊二烯碳骨架,使其在消化液中的溶解度較低,難以被吸收[54]。Arunkumar等[55]報(bào)道的殼聚糖包封葉黃素納米粒子及Kamil等[56]用聚乳酸羥基乙酸共聚物(polylactic-coglycolic acid,PLGA)納米粒子輸送葉黃素均顯著提高了生物利用度,前者是因?yàn)榈头肿託ぞ厶侵械臍湓雍腿~黃素中的碳原子具有相互作用,且低分子質(zhì)量的殼聚糖更容易形成水狀膠體從而增加葉黃素的溶解性,后者選用水溶性的納米粒負(fù)載葉黃素,增加消化道對(duì)葉黃素的吸收,二者均是從改善葉黃素的疏水性方面提其高生物利用度。

    1.4 果膠

    果膠是存在于植物細(xì)胞壁和中胞層中的一種異質(zhì)多糖,主鏈主要由半乳糖醛酸和甲醇組成,其分支由阿拉伯糖、半乳糖等單糖組成[57],其結(jié)構(gòu)如圖1所示。柑橘、蘋果、山楂等果皮中均含有果膠。果膠的功能特性取決于甲酯化程度[58],根據(jù)甲酯化程度可將果膠分為高酯、低酯和酰胺化果膠[59]?,F(xiàn)代科學(xué)研究表明,果膠可降低血脂水平、防止過氧化、緩解腎中毒[60]。果膠因其生物相容性、生物降解能力、無毒等特性在食品和藥物學(xué)領(lǐng)域中常被用作增稠劑、凝膠劑、乳化劑、結(jié)合劑、封裝劑、膨脹劑和泡沫穩(wěn)定劑等[61]。果膠在納米粒制備中主要是作為載體,負(fù)載活性物質(zhì)或藥物。Sharma等[62]制備了硫醇化果膠納米粒子。果膠載藥納米粒子可減輕藥物的毒副作用,增強(qiáng)藥物的靶向性。例如,王彥妹等[63]研究了載藥果膠基納米粒子對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞的靶向性,發(fā)現(xiàn)半乳糖殘基可被HepG2細(xì)胞表面的唾液酸糖蛋白受體特異性識(shí)別,表明果膠基納米粒子具有靶向傳遞藥物的作用。Burapapadh等[64]用果膠納米粒子載藥,增強(qiáng)了難容藥物的溶解度,表明果膠是一種優(yōu)良的載體。此外果膠用于合成碳量子點(diǎn)納米粒不僅光學(xué)性能穩(wěn)定,并且生物相容性好,有望用于細(xì)胞的生物成像[65]。

    2 果品活性物質(zhì)納米粒的封裝技術(shù)

    果品活性物質(zhì)納米粒是指將果品中的活性物質(zhì)載入到生物相容和生物降解的納米粒子中,獲得具有較好水溶性、穩(wěn)定性、生物利用度、循環(huán)時(shí)間和靶向性的納米材料。常用的納米粒子有納米脂質(zhì)體、納米乳劑、固體脂質(zhì)納米粒、膠束、PLGA納米粒子。果品活性物質(zhì)納米粒的制備一般是基于兩種方法[66],即“自上而下”和“自下而上”?!白陨隙隆笔侵笇⒋箢w粒活性物質(zhì)分解成納米級(jí)粒子的物理或化學(xué)過程,如乳化、乳化溶劑蒸發(fā)法[67]?!白韵露稀笔侵笇蝹€(gè)的原子或分子轉(zhuǎn)化成納米級(jí)粒子的過程,如包結(jié)絡(luò)合、層層沉積和自組裝、納米沉淀、復(fù)合凝聚、超臨界流體技術(shù)等[68]。其中乳化、凝聚、超臨界流體技術(shù)可用于親水和親脂化合物的封裝,而包結(jié)絡(luò)合、乳化-溶劑蒸發(fā)、納米沉淀技術(shù)常用于親脂性物質(zhì)的納米化。

    2.1 乳化技術(shù)

    納米乳是由至少兩種不混溶的液體組成的膠體分散體,粒徑介于50~1 000 nm,具有較好的封裝生物活性物質(zhì)的潛能[69]。一般來說,納米乳可分3 種類型,即水包油型納米乳(oil in water nanoemulsion,O/W)、油包水型納米乳(water in oil nanoemulsion,W/O)、雙連續(xù)性納米乳(bicontinuous structure nanoemulsion,B.C)。W/O則常用于封裝水溶性的活性物質(zhì),如酚類。O/W一般用于親脂性的活性成分,如類胡蘿卜素。納米乳的優(yōu)點(diǎn)在于具有較高的動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性,有益于封裝活性成分并在保持產(chǎn)品表面含油量方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[70]。然而,納米乳是一種非均衡系統(tǒng),不能自發(fā)形成,需要機(jī)械裝置或化合物的化學(xué)勢給予能量,如高速或高壓均質(zhì)機(jī)、超聲發(fā)生器、微射流和乳化劑等。

    高壓均質(zhì)乳化技術(shù)是將液態(tài)原料通過一個(gè)限制閥門,在產(chǎn)生的高剪切應(yīng)力下形成細(xì)微的乳化粒子。Chen等[21]利用超高壓均質(zhì)法制備VE納米乳,粒徑為100 nm左右,其水溶性和物理穩(wěn)定性得到顯著提高。Gon?alves等[71]采用高壓乳化技術(shù)制備槲皮素納米粒,極大地提高了槲皮素在水中的溶解度,并且可有效防止槲皮素降解。該研究主要探究了3 種不同的乳化劑對(duì)形成槲皮素納米粒的影響,結(jié)果表明辛烯基琥珀酸酐淀粉不適合用于槲皮素的包封,而卵磷脂的包封率高達(dá)76%,是最合適的乳化劑。β-葡聚糖作穩(wěn)定劑可增強(qiáng)卵磷脂的乳化作用,提高對(duì)槲皮素的包封率。此外加入甘油作助溶劑可提高納米懸浮液的穩(wěn)定性和包封率。自乳化技術(shù)通過表面活性劑在油水界面上吸附,降低界面張力,同時(shí)形成一層保護(hù)膜,使油水充分混溶分散成均勻的液滴,該技術(shù)制備納米粒有助于提高疏水活性物質(zhì)的口服生物利用度。Zhao Guoying等[72]研究表明自乳化制備活性物質(zhì)納米??娠@著提高槲皮素和山奈酚等活性物質(zhì)的水溶性和生物利用度。

    2.2 凝聚技術(shù)

    凝聚技術(shù)是指單一或混合聚電解質(zhì)溶液與活性物質(zhì)的共聚沉形成凝聚層,并逐漸從周圍溶液中分離形成納米復(fù)合體。凝聚過程中加入化學(xué)試劑或酶交聯(lián),可增加凝聚強(qiáng)度,提高活性物質(zhì)負(fù)載率[73]。聚合物間通過靜電作用、疏水作用、范德華力、氫鍵結(jié)合形成復(fù)合聚合物。然而,聚合物類型、濃度、pH值、溫度、離子強(qiáng)度等因素均會(huì)影響聚合物和活性物質(zhì)間的相互作用強(qiáng)度。明膠、阿拉伯樹膠、殼聚糖等常被用作壁材。根據(jù)聚合物類型的數(shù)量,凝聚技術(shù)分為簡單凝聚(只有一種聚合物類型)和復(fù)合凝聚(兩種及以上聚合物類型)。凝聚技術(shù)所制備的納米粒熱力學(xué)穩(wěn)定、熔點(diǎn)和負(fù)載率高,但由于交聯(lián)劑戊二醛的使用使其商業(yè)化具有一定困難。

    凝聚反應(yīng)的主要驅(qū)動(dòng)力是各聚合物之間的靜電作用,同時(shí)疏水作用、氫鍵等次級(jí)作用力也有助于聚合物的形成,通過調(diào)節(jié)pH值使各聚合物帶不同的電荷,從而電荷相互作用發(fā)生聚合反應(yīng)。Azevedo等[25]用離子型聚電解質(zhì)預(yù)凝膠法制備VB2納米粒,海藻酸鈉和殼聚糖作壁材,氯化鈣溶液作離子電解質(zhì),得到的粒子尺寸分布范圍是36.8~171.2 nm,包封率是55%左右。Zheng Liqin等[74]用乙基纖維素包封楊梅果實(shí)多酚,獲得粒子分布在10~97 μm,在模擬消化道中具有良好的穩(wěn)定性和抗氧化活性且釋放率高達(dá)87.37%。

    2.3 包結(jié)絡(luò)合技術(shù)

    包結(jié)絡(luò)合技術(shù)是指將活性物質(zhì)通過氫鍵結(jié)合、范德華力、熵驅(qū)動(dòng)疏水作用封裝進(jìn)含疏水空腔的殼材料的一種包封技術(shù),主要用于封裝揮發(fā)性的有機(jī)分子,如精油和維生素,可用于保持面膜的氣味和香味。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于包封率高、穩(wěn)定性好,但該技術(shù)只適用于少數(shù)特殊的分子化合物,如β-環(huán)糊精。環(huán)糊精及其衍生物由于具有疏水的內(nèi)部空腔和親水的外部骨架,常用于脂溶性小分子的包結(jié)絡(luò)合架[75]。

    包結(jié)絡(luò)合技術(shù)實(shí)質(zhì)上是一個(gè)主體和客體相互識(shí)別的過程,作為主體的環(huán)糊精具有兩親結(jié)構(gòu),通過分子間疏水作用與不同的疏水性化合物,形成高度穩(wěn)定的包結(jié)絡(luò)合物。然而,環(huán)糊精的疏水內(nèi)腔的大小決定了其對(duì)所包封的化合物具有選擇性,適合封裝單環(huán)芳烴、筒狀或球狀分子。Chakraborty等[76]采用包結(jié)絡(luò)合技術(shù)制備了白楊素β-環(huán)糊精納米粒子,不僅增強(qiáng)了白楊素的溶解性,同時(shí)增強(qiáng)了抗氧化活性。

    2.4 納米沉淀技術(shù)

    納米沉淀技術(shù)又稱溶劑置換技術(shù),是一種基于有機(jī)相(有機(jī)溶劑、聚合物、活性物質(zhì))在水相中的自乳化過程,包括有機(jī)相中聚合物的沉積和有機(jī)溶劑在水相介質(zhì)中擴(kuò)散[77],最終形成聚合物納米粒。通常,當(dāng)溶有聚合物和活性物質(zhì)的有機(jī)相與大量水相混合時(shí),有機(jī)相會(huì)不斷擴(kuò)散并開始自乳化,當(dāng)有機(jī)溶劑逐漸揮發(fā),聚合物和活性物質(zhì)的濃度超過其熱力學(xué)溶解度極限便會(huì)開始沉淀形成納米粒,粒徑分布為100~300 nm。常用的可生物降解的聚合物有PCL、聚乙烯吡絡(luò)烷酮(polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乳酸(polylactic acid,PLA)、PLGA、丙烯酸樹脂(acrylic acid polymers)等。納米沉淀技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、對(duì)設(shè)備要求不高、穩(wěn)定性好、包封率高,但所選取的有機(jī)溶劑必須與水易混容,因此納米沉淀技術(shù)常用于封裝親脂性化合物。

    da Rosa等[78]用玉米蛋白納米粒負(fù)載酚類化合物,通過納米沉淀法獲得納米粒子在6 ℃和20 ℃條件下穩(wěn)定貯藏90 d,在72 h內(nèi)的釋放率達(dá)到50%。Yen等[79]以PVP為親水載體采用納米沉淀技術(shù)制備了姜黃素納米粒子,體外研究表明增強(qiáng)了姜黃素的抗氧化活性和抗癌活性,為臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。Luo等[80]用聚乙烯亞胺(polyethyleneimine,PEI)-PLGA、PLGA、殼聚糖、聚環(huán)氧乙烷(polyethylene oxide,PEO)-聚環(huán)氧丙烷(poly[oxy(methyl-1,2-ethanediyl)],PPO)-聚環(huán)氧乙烷(PEO-PPO-PEO)、聚酰胺-胺樹枝狀分子(polyamidoamine(PAMAM) dendrimers)5 種聚合物納米粒子包封山奈酚,通過細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn),與單獨(dú)的山奈酚相比,PLGA-PEI、殼聚糖和PAMA樹枝狀分子山奈酚納米粒子對(duì)細(xì)胞活力的影響不明顯,而PEO-PPO-PEO和PLGA山奈酚納米粒顯著降低了細(xì)胞活力。

    2.5 乳化溶劑揮發(fā)技術(shù)

    乳化溶劑揮發(fā)技術(shù)是在溶劑揮發(fā)技術(shù)的基礎(chǔ)上修改的,即溶解在有機(jī)相的聚合物在水相中經(jīng)均質(zhì)乳化后,隨著有機(jī)溶劑的蒸發(fā)逐漸析出形成納米粒的技術(shù)[81]。作用機(jī)理是聚合物溶液在有表面活性劑存在的條件下被均質(zhì)機(jī)、超聲波或旋渦混合器等產(chǎn)生的剪切應(yīng)力破碎成微液滴,隨著有機(jī)溶劑的蒸發(fā),活性物質(zhì)均勻的分散在聚合物基質(zhì)網(wǎng)絡(luò)中。制備過程中溫度、有機(jī)相和水相的黏度、分散劑的類型和含量、攪拌速率都可影響納米粒的尺寸。為得到粒徑較小的粒子,常用高壓均質(zhì)法和聲波降解法[82]用的聚合物有PLA、PLGA、PCL、乙基纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、聚羥基丁酸、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)等。利用乳化-溶劑蒸發(fā)技術(shù)可制備納米分散體、納米乳劑和混懸劑。

    Cheong等[83]用乳化-溶劑蒸發(fā)技術(shù)制備α-生育酚納米分散體,粒徑分布在90~120 nm之間,具有較好的穩(wěn)定性。該法的缺點(diǎn)是乳化過程需要高能量,且只有親脂活性物質(zhì)能封裝在其中。Arunkumar等[84]用乳化超聲-溶劑蒸發(fā)技術(shù)制備了PLGA-PEG包封的葉黃素納米粒,粒徑分布范圍為80~500 nm,穩(wěn)定釋放率達(dá)66%,顯著提高了葉黃素的水溶性、生物利用度及其抗癌活性。

    2.6 超臨界流體技術(shù)

    超臨界流體是介于液體和氣體之間的一種狀態(tài),其溫度和壓力在熱力學(xué)臨界點(diǎn)之上,如二氧化碳、水、丙烷、氮?dú)獾染蛇_(dá)到超臨界狀態(tài)[85]。臨界流體展現(xiàn)的特性介于液體和氣體之間,如溶解能力高、密度低、黏度低、擴(kuò)散率高、傳質(zhì)率高。將活性物質(zhì)和聚合物溶解在超臨界流體中,溶液通過噴嘴擴(kuò)張,噴射過程中超臨界流體被蒸發(fā),溶解在其中的粒子最后沉淀。超臨界流體技術(shù)包括快速膨脹法(rapid expansion of supercritical solution,RESS)、氣體抗溶法(gas anti-solvent,GAS)、超臨界流體抗溶劑法(supercritical antisolvent,SAS)、超臨界流體乳液萃取法(supercritical fluid emulsion extraction,SFEE)、氣相過飽和法(precipitation from gas saturated solution,PGSS)和反應(yīng)法(solution enhanced dispersion by supercritical fluid,SEDS)[86]。該技術(shù)適用于包封熱敏感性化合物,可避免活性物質(zhì)納米產(chǎn)品的熱降解或氧化,并且能減少有機(jī)溶劑污染和降低毒性。

    Alessi等[87]運(yùn)用SAS技術(shù)制備了槲皮素納米粒,并通過羅賓遜狀態(tài)方程優(yōu)化了制備條件。Lévai等[88]SFEE技術(shù)制備槲皮素納米懸浮液,獲得粒子平均粒徑在100 nm左右,槲皮素包封率達(dá)到70%,與SAS方法相比,槲皮素沒有結(jié)晶出現(xiàn)。Mattea等[89]研究了β-胡蘿卜素在SFEE中的沉淀過程,結(jié)果表明CO2與有機(jī)相液滴的飽和引起的快速抗溶劑效應(yīng),在這過程中不斷發(fā)生液滴飛落,而且殘留的有機(jī)溶劑消除比較緩慢。

    3 果品活性物質(zhì)納米材料的用途

    果品活性物質(zhì)因其重要的生物功能被用作功能性食品配料或生產(chǎn)藥物和化妝品[90],80%以上的食用活性物質(zhì)和超過30%的藥物都是由天然生物活性物質(zhì)生產(chǎn)的[91]。納米材料在電子、農(nóng)業(yè)、紡織、食品、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用已經(jīng)是一個(gè)事實(shí),并且對(duì)食品相關(guān)的行業(yè)有深遠(yuǎn)影響。

    3.1 醫(yī)療保健

    果品活性物質(zhì)來源廣泛,有防治疾病的功能,可作為功能食品或藥品,對(duì)人體醫(yī)療保健有重要作用。例如,類胡蘿卜素、多酚、維生素、類黃酮等在醫(yī)療保健中可作抗氧化劑、抗炎劑和抗癌劑等。VA及其衍生物(維甲酸、棕櫚酸視黃酯)被廣泛用于醫(yī)藥領(lǐng)域,尤其是維甲酸,是現(xiàn)代治療皮膚病的有效成分。果品中類黃酮的生物和藥理活性吸引了廣泛關(guān)注,類胡蘿卜素是重要的天然抗氧化劑,據(jù)報(bào)道葉黃素可增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、防治乳腺癌和動(dòng)脈粥樣硬化,但水溶性和生物利用度限制了它們?cè)卺t(yī)療保健領(lǐng)域的應(yīng)用。

    果品活性物質(zhì)的活性在光和熱的條件下極不穩(wěn)定,Kim等[92]用糖納米粒包封視黃醇,不僅增加了視黃醇的溶解性和穩(wěn)定性,還可用于醫(yī)療領(lǐng)域治療皮膚病。Ramalho等[93]用PLGA納米粒子作VD的輸送載體,用于癌癥的治療。Arunkumar等[84]用PLGA-PEG聚合物負(fù)載葉黃素,獲得了親水性好、生物利用度高、生物活性穩(wěn)定的葉黃素納米膠囊,以小鼠和肝癌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,證明了葉黃素納米膠囊可抗惡性腫瘤細(xì)胞增生,其半抑制濃度為10.9 μmol/L。番茄紅素和β-胡蘿卜素納米粒子可用于生產(chǎn)保健食品,防治膽固醇積累[94-95],Song Guobin等[96]研究表明,單寧納米膜具有廣譜抗菌性和良好的生物相容性,可用于創(chuàng)傷治療。

    3.2 食品

    在食品行業(yè),許多活性物質(zhì)納米材料已用于食品、飲料、營養(yǎng)保健品和包裝材料等[97]。例如,一些食品和飲料中加入VA、VC、VE等活性物質(zhì)納米粒以滿足人們對(duì)健康飲食的需求。活性物質(zhì)包裝材料需要使被包封的活性物質(zhì),如維生素、類黃酮等在最佳狀態(tài)下釋放到食品中[98]。目前,一些含有納米添加劑的食品和保健品在市場上也有銷售,如含鐵的營養(yǎng)性飲料、維生素微粒、含礦物質(zhì)和植物化學(xué)物質(zhì)的油、含氧化鋅的早餐谷物。納米材料在食品中的應(yīng)用越來越多,一些納米級(jí)的食品添加劑已經(jīng)運(yùn)用了數(shù)十年,如二氧化硅,還有用于食品包裝的銀納米粒子[99]。

    Darchivio等[28]將VE納米乳加入果汁飲料中,具有良好的穩(wěn)定性且未改變果汁的外觀特性。眾所周知,肉類在冷凍或冷藏過程中容易發(fā)生脂肪氧化反應(yīng),從而影響其顏色、風(fēng)味和營養(yǎng)。Elbarbary等[100]制備了殼聚糖VC納米復(fù)合物,粒子直徑分布在23.2~82.0 nm,研究表明殼聚糖VC納米復(fù)合物具有很強(qiáng)的抗氧化和減少脂肪氧化的活性,可用于脂肪類食品的貯藏。Song Guobin等[96]研究表明單寧納米薄膜可用于食品保存。Pando等[101]將白藜蘆醇類脂質(zhì)體納米粒作為添加劑加入酸奶,結(jié)果表明,酸奶的質(zhì)地沒有被改變且酸奶的功能特性得到了豐富。

    3.3 化妝品

    納米粒子已用于多種日化產(chǎn)品,如除臭劑、肥皂、牙膏、抗皺面霜、潤膚膏、口紅、眼影、指甲油、香水等[102]。果品中許多生物活性物質(zhì)可抗氧化,防止紫外輻射從而對(duì)人體皮膚起到保護(hù)作用,如維生素和白藜蘆醇。敏感的活性物質(zhì)在貯藏過程中易發(fā)生化學(xué)降解和酶降解。Mao Haiquan等[103]用納米包封法封裝VC,使其免遭降解,為其在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用提供了新方法。

    4 果品活性物質(zhì)納米材料的安全問題

    果品活性物質(zhì)納米材料具有優(yōu)于傳統(tǒng)活性物質(zhì)的性質(zhì),如生物活性強(qiáng)、生物利用度高、可控釋放和傳送等,為人類帶來了極大地健康利益。與此同時(shí),由于我們?nèi)狈?duì)納米材料與人類健康和環(huán)境影響的相關(guān)知識(shí),也帶來了一系列安全、環(huán)境、倫理道德、管理等問題[104]。越來越多的科學(xué)證據(jù)表明納米材料可能會(huì)導(dǎo)致胃腸道的氧化損傷和炎癥反應(yīng),一般情況下,納米粒子不會(huì)表現(xiàn)出明顯的毒性,長期接觸納米材料會(huì)導(dǎo)致急性中毒,如肝臟和腎臟的損傷,癌癥發(fā)生等[105-107]。要判斷產(chǎn)品中是否包含納米粒子或是否用納米技術(shù)生產(chǎn)加工是件非常困難的事情。由于對(duì)風(fēng)險(xiǎn)的認(rèn)識(shí)不足,目前沒有規(guī)章制度控制或限制納米材料的生產(chǎn)。

    公眾對(duì)納米技術(shù)的認(rèn)知和接受程度是影響納米技術(shù)在食品工業(yè)中應(yīng)用的一個(gè)重要因素,就如轉(zhuǎn)基因食品一樣[108]。對(duì)于消費(fèi)者來說,他們更能接受將納米技術(shù)應(yīng)用在食品的外部,如食品包裝材料,而不是直接進(jìn)入人體的食品。本課題組分析了納米技術(shù)在果蔬產(chǎn)品中應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn),表明現(xiàn)在關(guān)于納米粒子是否會(huì)從包裝材料遷移到食品中的研究還相對(duì)較少[12]。我們應(yīng)該吸取歐洲國家關(guān)于轉(zhuǎn)基因爭論的經(jīng)驗(yàn),更多的關(guān)注消費(fèi)者對(duì)食品納米技術(shù)的態(tài)度。此外,政府應(yīng)該合理的設(shè)立規(guī)章制度和應(yīng)用標(biāo)簽來管理納米產(chǎn)品,以便消費(fèi)者自主選擇。

    5 結(jié) 語

    果品活性物質(zhì)納米材料具有廣泛的生物功能,可作抗氧化劑、抗菌劑、免疫調(diào)節(jié)劑等,對(duì)人體營養(yǎng)、保健和疾病防治具有重大作用。許多行業(yè)利用活性物質(zhì)作原材料生產(chǎn)相關(guān)的產(chǎn)品,如食品行業(yè)用活性物質(zhì)作天然的食品添加劑。然而活性物質(zhì)自身的理化特性,如溶解度低、生物利用度差、易降解失活等,限制了其利用。納米包封技術(shù)為果品中活性物質(zhì)的利用創(chuàng)造了一種新的形式和方法。

    利用納米技術(shù)提高果品活性物質(zhì)的口服生物利用度和減少納米粒子生物毒性是促進(jìn)果品活性物質(zhì)納米材料在商品中應(yīng)用的前提保證。今后,在果品活性物質(zhì)納米粒制備方面,應(yīng)該更加注重探索綠色方法合成果品活性物質(zhì)納米材料,減少有機(jī)溶劑的使用,確保安全、無毒、高效。在應(yīng)用方面,可著重于改善食品貯藏壽命、質(zhì)量、安全和開發(fā)生物傳感器用于檢測被污的食品。鑒于我們對(duì)納米材料的安全性了解甚少,在納米材料的使用越來越廣泛的同時(shí),應(yīng)該加強(qiáng)安全控制,建立全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估系統(tǒng)。同時(shí),開發(fā)分析檢測工具用于檢測和表征食品、藥品和化妝品中是否含有納米材料,探究其動(dòng)力學(xué)和毒理學(xué)特征。果品活性物質(zhì)納米材料將影響人類生活的各個(gè)方面,技術(shù)的優(yōu)化和安全控制將進(jìn)行深入探究。

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    DOI:10.7506/spkx1002-6630-201613048

    中圖分類號(hào):S66

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1002-6630(2016)13-0277-10

    收稿日期:2015-09-29

    作者簡介:胡艷(1991—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)楣窢I養(yǎng)與質(zhì)量安全。E-mail:huyanswu@163.com

    *通信作者:周志欽(1964—),男,教授,博士,研究方向?yàn)楣窢I養(yǎng)與質(zhì)量安全、園藝植物資源與利用。E-mail:zzqswu@yahoo.com

    Current Status of Research on Nanoparticles Containing Fruit Bioactive Compounds

    HU Yan, ZHOU Zhiqin*
    (Key Laboratory of Horticulture for Southern Mountainous Regions, Ministry of Education, College of Horticulture and Landscape Architecture, Southwest University, Chongqing 400716, China)

    Abstract:Fresh fruits and their derived products are rich in nutrients and various bioactive compounds which are important to human health.However, many problems exist with fruit bioactives, such as low solubility, easy degradation, instability,slow absorption and weak bioavailability.Nanotechnology can overcome these defects effectively.In this paper, the current status of research on nanoparticles containing fruit bioactive compounds is reviewed.The principles, techniques and methods for preparing fruit bioactive nanoparticles are discussed.Their biological functions and applications in foods, medicines and health products and cosmetics are systematically summarized.In addition, existing problems and future research directions are proposed with an attempt to provide new information on the utilization of fruit bioactive compounds.

    Key words:fresh fruits and products; bioactive compounds; nanoparticles; biological functions; utilization

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