應(yīng)用CLSI EP9-A2文件對(duì)不同血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)

張　磊，任曉艷，何　超，李　琳，李燕平

(蘭州大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科　730000)

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應(yīng)用CLSI EP9-A2文件對(duì)不同血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)

張磊，任曉艷，何超，李琳，李燕平△

(蘭州大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科730000)

摘要:目的通過(guò)對(duì)不同血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果的方法學(xué)比對(duì)，探討不同檢測(cè)系統(tǒng)各參數(shù)測(cè)定結(jié)果間的可比性。方法參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)的EP9-A2文件，以SYSMEX XE-2100血細(xì)胞分析儀為參比儀器，2臺(tái)邁瑞B(yǎng)C-5380儀器為待評(píng)儀器，用臨床新鮮抗凝全血對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算相關(guān)系數(shù)(r)和回歸方程，以及各項(xiàng)目在不同醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的偏差，以1/2CLIA′88相對(duì)允許誤差(TEa%)作為標(biāo)準(zhǔn)判斷偏差是否可接受。結(jié)果2臺(tái)BC-5380分別與XE-2100儀器間測(cè)定結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r>0.975。在不同的Xc處，其中WBC為2.0×109/L和4.0×109/L；RBC為3.5×1012/L、5.5×1012/L、6.0×1012/L；Hb為160 g/L，偏差均大于1/2CLIA′88 TEa%；但這些項(xiàng)目1/2CLIA′88絕對(duì)允許誤差(TEa)均落在偏差的95%可信區(qū)間內(nèi)，說(shuō)明是由抽樣誤差所引起，表明待評(píng)方法的偏差可接受；其余項(xiàng)目偏差均可接受。結(jié)論2臺(tái)邁瑞B(yǎng)C-5380血細(xì)胞分析儀分別與XE-2100在WBC、RBC、Hb、PLT等4個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果具有可比性。

關(guān)鍵詞:血細(xì)胞分析儀；比對(duì)試驗(yàn)；EP9-A2文件

目前，隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，血細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的分析儀器之一。同一實(shí)驗(yàn)室擁有多種品牌、不同型號(hào)、不同分析原理的血細(xì)胞分析儀已非常普遍，而不同儀器對(duì)同一標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果不可避免地存在系統(tǒng)誤差，以致對(duì)臨床的診療工作造成影響[1]?！夺t(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》要求對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同的檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行定期比對(duì)，以保證檢測(cè)結(jié)果的一致性[2]。本文參照2002年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)批準(zhǔn)的EP9-A2文件要求[3]，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室3臺(tái)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行了比對(duì)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料采用真空采血管采集臨床患者新鮮全血標(biāo)本2 mL，以EDTA-K2抗凝。按照CLSI EP9-A2文件提供的推薦測(cè)定范圍，選擇標(biāo)本(高、中、低值)，分析物濃度盡可能在報(bào)告的濃度范圍內(nèi)均勻分布，所有標(biāo)本從采集到檢測(cè)完成時(shí)間均在2 h內(nèi)。

1.2儀器與試劑日本SYSMEX XE-2100 1臺(tái)(用X表示)、深圳MINDRAY BC-5380 2臺(tái)(分別編號(hào)為BC-5380-1、BC-5380-2，用Y1、Y2表示)。各臺(tái)血細(xì)胞分析儀所用試劑、校準(zhǔn)物和質(zhì)控品均為原裝配套。

1.3方法

1.3.1比對(duì)項(xiàng)目白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)。

1.3.2確定參比儀器按照CLSI EP9-A2文件，選取XE-2100血細(xì)胞分析儀為參比儀器，該儀器使用配套試劑，定期用原裝配套校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)；每個(gè)工作日用配套低、中、高3個(gè)濃度的全血質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，結(jié)果良好；定期參加衛(wèi)生部和本省臨檢中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果優(yōu)秀。

1.3.3試驗(yàn)條件依據(jù)相關(guān)文件要求，參與比對(duì)的3臺(tái)儀器至少每半年進(jìn)行1次校準(zhǔn)[4]，各儀器均按使用說(shuō)明書定期維護(hù)、保養(yǎng)。每天開(kāi)機(jī)后進(jìn)行空白允許值及各自質(zhì)控檢測(cè)，并保證均在控。

1.3.4試驗(yàn)方法每天選取8份樣本，同時(shí)用各儀器按常規(guī)樣本檢測(cè)方法測(cè)定其各項(xiàng)參數(shù)，每份樣本測(cè)2次，其測(cè)定順序?yàn)?1～8、8～1。連續(xù)測(cè)定5 d，共40份樣本，記錄測(cè)定結(jié)果。各儀器的檢測(cè)模式均為全血模式。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

1.4.2樣本濃度(X值)合適范圍取2次測(cè)定的平均值,對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行相關(guān)性分析,計(jì)算相關(guān)系數(shù)(r)。EP9-A2文件要求r≥0.975時(shí),則認(rèn)為X分布范圍合適,直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠；r<0.975時(shí),則必須分析更多的樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)濃度分布范圍，再重新分析全部數(shù)據(jù)。

1.4.3線性回歸計(jì)算斜率b、截距a及線性回歸方程Y=bX+a。

1.4.4方法間相對(duì)偏差根據(jù)臨床使用要求,將各項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)代入回歸方程,計(jì)算Y與X之間預(yù)期偏差(Bc)，Bc=|Y-Xc|，相對(duì)偏差(Bc%)=(Bc/Xc)×100%。以Bc%≤1/2 CLIA′88相對(duì)允許總誤差(TEa%)作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4.5方法間絕對(duì)偏差按該文件所給公式計(jì)算Bc的95%可信區(qū)間(95%CI)，即在Xc處的絕對(duì)偏差，Ea=1/2TEa，絕對(duì)允許誤差TEa=TEa%×Xc，以1/2 CLIA′88絕對(duì)允許TEa作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4.6臨床可接受性能判斷Bc%≤1/2TEa%，表明待評(píng)方法的檢測(cè)結(jié)果與參比方法一致；反之，則不具可比性。1/2TEa(可接受誤差，Ea)落在Bc的95%CI內(nèi)，表明待評(píng)方法的偏差可接受；Ea大于Bc的95%CI上限，表明預(yù)期偏差很可能(>97.5%)小于Ea，說(shuō)明待評(píng)方法的性能等同于參比方法；Ea小于Bc的95%CI下限，表明預(yù)期偏差很可能(>97.5%)大于Ea，說(shuō)明待評(píng)方法的性能和參比方法不相等。

2結(jié)果

表1　　各項(xiàng)目方法內(nèi)測(cè)定結(jié)果的離群值篩查對(duì)照表

表2　　各項(xiàng)目方法間測(cè)定結(jié)果的離群值篩查對(duì)照表

2.2儀器的相關(guān)性所有項(xiàng)目參比方法與待評(píng)方法間相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.975，表明X的分布范圍合適，數(shù)據(jù)滿足要求，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率b和截距a可靠，見(jiàn)表3、4。

表3　　BC-5380-1各項(xiàng)目相關(guān)系數(shù)及直線回歸方程

表4　　BC-5380-2各項(xiàng)目相關(guān)系數(shù)及直線回歸方程

2.3可接受性評(píng)估結(jié)果見(jiàn)表5～7。

表5　　不同儀器的臨床可接受性能評(píng)價(jià)

注：*表示臨床不可接受。

表6　　BC-5380-1的臨床可接受性能評(píng)價(jià)

表7　　BC-5380-2的臨床可接受性能評(píng)價(jià)

3討論

血細(xì)胞分析儀具有操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、精密度高、性能穩(wěn)定及報(bào)告結(jié)果快捷等特點(diǎn)，已經(jīng)逐漸取代傳統(tǒng)手工方法，成為臨床實(shí)驗(yàn)室的重要檢測(cè)手段。目前，許多醫(yī)院都有數(shù)臺(tái)血細(xì)胞分析儀，因此，如何保證不同檢測(cè)系統(tǒng)間測(cè)定結(jié)果的可比性成為實(shí)驗(yàn)室管理的熱點(diǎn)問(wèn)題[5]。血細(xì)胞分析儀之間的比對(duì)研究已經(jīng)不少[6-8]，血細(xì)胞分析結(jié)果只有溯源至參考方法，才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和不同儀器間的可比性[9]。

本試驗(yàn)按照CLSI EP9-A2文件要求，選擇可溯源的XE-2100血細(xì)胞分析儀作為參比儀器，對(duì)3臺(tái)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)分析。研究結(jié)果表明，各儀器間WBC、RBC、Hb、PLT等4個(gè)比對(duì)項(xiàng)目在2次重復(fù)測(cè)定方法內(nèi)及方法間均無(wú)離群值，提示儀器有良好的精密度；且所有項(xiàng)目參比方法與待評(píng)方法間r均大于0.975，表明X的分布范圍合適，樣本數(shù)據(jù)滿足要求，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距均可靠；BC-5380-1的WBC，BC-5380-2的WBC、RBC、Hb分別在各自不同醫(yī)學(xué)決定水平處Bc%>1/2TEa%，但這些項(xiàng)目1/2TEa均落在Bc95%CI內(nèi)，說(shuō)明是抽樣誤差所造成，表明待評(píng)方法的偏差可接受，其余項(xiàng)目均Bc%≤1/2TEa%?？傊琗E-2100分別與BC-5380-1、BC-5380-2血細(xì)胞分析儀之間具有可比性，可以為臨床提供準(zhǔn)確可靠的報(bào)告，滿足臨床要求。

綜上所述，比對(duì)試驗(yàn)是目前實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)結(jié)果可比性的重要途徑。定期對(duì)不同血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)是保證各儀器間檢測(cè)結(jié)果具有可比性的重要手段[10]?！夺t(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》[11]和《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》[12]中均要求每個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)在實(shí)施比對(duì)前應(yīng)按照CLSI EP9-A2文件進(jìn)行全面的性能評(píng)價(jià)或驗(yàn)證。通過(guò)對(duì)不同血細(xì)胞分析儀的比對(duì)分析，可以對(duì)其進(jìn)行校準(zhǔn)、保養(yǎng)、維護(hù)及建立科室比對(duì)制度。用參比儀器監(jiān)測(cè)其他儀器，及時(shí)避免系統(tǒng)誤差，有效保證不同儀器間測(cè)定結(jié)果的可比性，確保臨床實(shí)驗(yàn)室為臨床醫(yī)師提供可靠穩(wěn)定的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.035

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)14-1988-03

(收稿日期：2016-01-22修回日期：2016-04-13)

△通訊作者，E-mail：liyanping814@sina.com。