糞便人輪狀病毒抗原快速檢測在腹瀉患兒診斷中的應用

李容芳，周　睿，何蘭香

(1.廣東省清元市陽山縣婦幼保健院檢驗科　513100;2.廣東省清元市陽山縣疾病預防控制中心檢驗科　513100)

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糞便人輪狀病毒抗原快速檢測在腹瀉患兒診斷中的應用

李容芳1，周睿1，何蘭香2

(1.廣東省清元市陽山縣婦幼保健院檢驗科513100;2.廣東省清元市陽山縣疾病預防控制中心檢驗科513100)

摘要:目的觀察糞便人輪狀病毒(HRV)抗原快速檢測在腹瀉患兒診斷中的應用效果。方法收集2014年1月至2015年12月200例腹瀉患兒的糞便，采用金標免疫層析法檢測HRV抗原。結果200例腹瀉患兒中，糞便HRV陽性129例，陽性率為64.5%。在129例HRV感染患兒中，以6個月至2歲的患兒最多，HRV感染患兒的糞便樣品多為蛋花湯樣糞便。結論糞便HRV抗原快速檢測對輪狀病毒性腹瀉的早期診斷、早期治療有重要的臨床意義，值得在基層醫(yī)院推廣。

關鍵詞:腹瀉；兒童；糞便；人輪狀病毒

根據陽山縣婦幼保健院近幾年的統計情況發(fā)現，人類輪狀病毒(HRV)已經成為引起本院嬰幼兒腹瀉的主要原因，而腹瀉又是導致嬰幼兒死亡的重要原因之一。HRV引起急性胃腸炎，主要經過糞-口途徑傳播，在秋、冬季流行，患者常見于4個月至2歲的嬰幼兒，潛伏期24～72 h。HRV侵犯人體后在小腸黏膜絨毛細胞內增殖，導致細胞溶解死亡，微絨毛萎縮、變短、脫落，繼而腺窩細胞增生，分泌增加。HRV引起患兒腹瀉，嚴重影響患兒的身心健康。而為了快速確定病原體，進行有效、安全的臨床診斷，本院將應用糞便HRV抗原快速檢測法，以便對該病實現早發(fā)現、早治療。本院采取的HRV抗原快速檢測法具有敏感性高、快速、操作簡單等優(yōu)點，在臨床得到廣泛應用，在采集本院收治的200例患兒的糞便后進行檢測，現將結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料檢測對象為本院在2014年1月至2015年12月期間收治的腹瀉患兒200例，其中男132例，女68例，住院120例，門診80例，其中6個月以下31例，6個月至2歲144例，>2～6歲25例。所有患兒的診斷主要依據臨床癥狀和體征，血液檢驗各細胞水平基本正常，白細胞增多，部分患兒伴有發(fā)熱和上呼吸道感染癥狀。采集的糞便為黏糊便，呈淡黃色水樣便或蛋花湯樣酸性便，鏡檢或有脂肪球，但是白細胞較為少見。

1.2檢測試劑檢測試劑購自北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，利用將羊抗A群HRV多克隆抗體直接包被于硝酸纖維素膜上作為檢測線，羊抗鼠IgG包被作為對照線，利用標記膠體金的A群HRV單克隆，采用免疫層析夾心法檢測樣品中的A群HRV。

1.3方法取適量糞便樣品于裝有稀釋液的采便器內，轉動采便棒，直到樣品溶入樣品稀釋液中。然后取出測試卡，將其平放在干燥的平面上。當震蕩混勻之后，旋轉折斷試管上面的蓋帽，垂直滴加3～4滴待測樣液到測試卡的樣品位。開始后要注意計時，時間不能超過20 min，最佳時間為10～20 min。判斷測試結果時注意看測試卡上有無出現2條紅色的線，如果有則為陽性結果，如果測試卡上只出現質控線則顯示為陰性，如果測試卡上沒有出現紅線，則表示測試結果無效，需要重測。

1.4統計學處理采用SPSS13.0統計軟件對數據進行統計學處理，率的比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1不同年齡組檢測結果比較200例患兒中，檢出HRV陽性129例，陽性率為64.5%，其中6個月以下的患兒有13例，占10.1%，6個月至2歲的患兒有106例，占82.2%，>2～6歲的患兒有10例，占7.7%，見表1。6個月至2歲為HRV感染的高發(fā)期，同時對3個年齡組中男、女患兒HRV陽性率進行比較，發(fā)現HRV的感染在性別間差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2不同性狀糞便樣品中HRV陽性率比較129例腹瀉患兒中以蛋花湯樣糞便樣品中的HRV陽性率最高，為48.8%，見表2。在送檢的各種類型的糞便樣品中，蛋花湯便中的HRV陽性率最高，其次是黃色稀水樣便，其余依次為綠色稀便、黃色糊狀便、褐色軟便，可見輪狀病毒性腸炎的大便多為蛋花水樣或黃色稀水樣便。

表1　　不同年齡組患兒HRV抗原的檢測結果

注：與6個月至2歲組比較，*P<0.05，#P<0.01。

表2　　129例不同性狀糞便樣品中HRV陽性率比較

3討論

HRV是一種引起腹瀉繼而導致嬰幼兒死亡的主要病原體。HRV的早期預防，早期檢測，早期治療對于治療嬰幼兒腹瀉有重大意義，本院應用檢測糞便上清液中HRV抗原的方法，對HRV具有較高的敏感性和特異性。本研究結果表明，膠體金法HRV檢測試劑盒的應用，特別是在基層醫(yī)院，有著操作簡便、易于推廣等優(yōu)點。盡早準確診斷出引發(fā)患兒腹瀉的原因，找到病原體之后采取對應的治療。

本研究發(fā)現，6個月至2歲是感染HRV的高發(fā)期，而6個月以下的嬰兒和2歲以上的幼兒HRV感染率較低，分析其原因，可能是由于6個月以下的嬰兒大多仍處于母乳喂養(yǎng)時期，可以從母乳中得到免疫保護，而6個月以上是嬰兒喂養(yǎng)方式轉變的時期，部分嬰兒難以從母乳中得到免疫，而這些嬰兒自身免疫能力較低，當病原體進入其身體時很容易引起感染，所以6個月至2歲的嬰幼兒中HRV感染率較高。2歲以上的幼兒自身免疫力已經能夠抵抗部分病原體的侵入，體內也可能有了部分抗原，所以再一次接觸病原體的時候自身免疫可以起一定的保護作用。

對HRV陽性患兒的糞便性狀進行分析，發(fā)現蛋花湯便中的HRV陽性率最高，其次是黃色稀水樣便，其余依次為綠色稀便、黃色糊狀便、褐色軟便。特別是蛋花樣便或稀水樣便鏡檢時，檢測結果顯示無或偶有少量白細胞或少量脂肪球時，還需要進一步檢測HRV以確定是否有病原體，這一點可以指導臨床選用藥物進行治療。所以本院采取的HRV抗原快速檢測對嬰兒腹瀉病原的早期診斷和鑒別診斷有重要的臨床應用價值。

HRV感染性腹瀉日前尚無特效的治療藥物，主要是對癥治療，維持電解質平衡。這就要求盡快檢測出腹瀉患兒是否是由于感染HRV而造成的，檢測糞便HRV抗原便是一種有效的方法。除此之外，世界衛(wèi)生組織(WHO)認為，除了注射疫苗，沒有一種有效方法能夠完全消除HRV的傳播，因此預防顯得極為重要。由于易感人群是4個月至2歲的嬰幼兒，所以要注意加強新生兒父母的預防意識。而HRV感染又有其特殊的季節(jié)性差異及年齡的集中性，所以WHO指出，應當加強對傳染的各個環(huán)節(jié)的管理，采取必要的措施，降低兒童中HRV的感染率，具體措施根據不同地區(qū)根據不同的情況可有不同措施。本院就開展了包括對醫(yī)院各種治療場所的消毒、對廣大群眾的宣傳教育、對易感人群的保護等相關預防措施。

由于嬰幼兒消化系統及免疫系統尚未發(fā)育成熟，對于病原體的抵抗力較低，所以預防嬰幼兒HRV感染，主要從切斷傳播途徑方面入手，做好個人衛(wèi)生，能降低HRV的感染率。除此之外，家長一旦發(fā)現嬰幼兒有腹瀉類似的癥狀，應盡快送往醫(yī)院，對腹瀉患兒進行HRV抗原進行快速檢測，可以及時明確病因，減少不必要的抗生素治療。

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作者簡介：李容芳，女，主管技師，主要從事臨床檢驗研究。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.030

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-1975-02

(收稿日期：2016-01-17修回日期：2016-03-19)

Application of fecal rotavirus antigen rapid detection in diagnosis of children patients with diarrhea

LIRongfang1,ZHOURui1,HELanxiang2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,YangshanCountyMaternalandChildHealthCareHospital,Qingyuan,Guangdong513100,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,YangshanCountyCenterforDiseaseControlandPrevention,Qingyuan,Guangdong513100,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the application effect of fecal human rotavirus(HRV) antigen rapid detection in the diagnosis of children patients with diarrhea.MethodsThe stool specimens in 200 children cases of diarrhea from January 2014 to December 2015 were collected for detecting HRV antigen by using the gold standard immunochromatographic method.ResultsAmong 200 cases of diarrhea,129 cases were stool HRV positive with the positive rate of 64.5%.Among 129 cases of HRV infection,the majority were the children patients aged 6 months to 2 years old.The tools in the children patients with HRV infection were egg flower soup like.ConclusionThe fecal HRV antigen rapid detection has an important clinical significance for the early diagnosis and early treatment of HRV diarrhea,so which is worth being promoted in primary hospitals.

Key words:diarrhea;children;feces；human rotavirus