兒童EB病毒感染的EB病毒相關(guān)血清學(xué)特征研究

張雪梅

(解放軍一七四醫(yī)院 兒科,福建 廈門361000)

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兒童EB病毒感染的EB病毒相關(guān)血清學(xué)特征研究

張雪梅

(解放軍一七四醫(yī)院 兒科,福建 廈門361000)

EB病毒感染呈全球性分布，以兒童及青少年居多，其中以傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)多見，具有自限性，部分患者可發(fā)展為EBV相關(guān)性噬血性淋巴組織增生(EBV-HLH)，病情兇險(xiǎn)致死率高達(dá)30%-40%[1]。目前實(shí)驗(yàn)室EB病毒血清學(xué)特異性抗體檢測主要包括針對(duì)EBV衣殼抗原(VCA-IgM、VCA-IgG)、抗EBV核抗原(NA-IgG)以及EBV早期抗原(EA-IgG)，我們回顧性分析我院2013年1月至2014年11月間我院87例EB抗體檢測陽性兒童臨床資料，旨在探討兒童EB病毒感染不同血清學(xué)模式臨床表現(xiàn)以及病毒復(fù)制情況的差異，為兒童EB病毒感染的防治提供研究資料。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選擇2013年1月至2014年11月我院兒科88例EB抗體檢測陽性兒童為研究對(duì)象，其中男59例，女29例，年齡1-9歲，平均5.3±3.2歲。根據(jù)EB四種抗體的檢測情況分為原發(fā)感染組(抗 VCA-Ig M +，抗NA-Ig G-，抗 VCA-Ig G、EA-Ig G +或-)30例，亞急性感染組31例(抗 VCA-Ig M、VCA-Ig G、NA-Ig G +，抗EA-Ig G +或-)，既往感染組(僅抗 VCA-Ig G 或抗NA-Ig G +，其余-)27例。研究對(duì)象的選擇注意排除免疫性及腫瘤性疾病患兒。

1.2方法

清晨空腹抽取非抗凝血及EDTA抗凝血，非抗凝血離心分離血清分別進(jìn)行EB病毒抗體譜的檢測，血生化檢測：谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH))以及EB病毒DNA載量檢測，EB病毒抗體譜的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，試劑由德國歐蒙提供，EB病毒DNA載量檢測采用熒光定量PCR檢測，血生化檢測采用寧波美康生物有限公司產(chǎn)品，全自動(dòng)生化分析儀為HITACHI7600。EB病毒DNA載量檢測全自動(dòng)基因擴(kuò)增儀為ABI7500，試劑由達(dá)安生物有限公司提供。取EDTA抗凝血離心后白細(xì)胞層，DNA病毒載量的計(jì)算采用對(duì)數(shù)值比較。所有實(shí)驗(yàn)室檢測均嚴(yán)格按試劑操作說明書操作，當(dāng)日室內(nèi)質(zhì)量控制保證結(jié)果的有效性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0進(jìn)行分析處理，構(gòu)成比較采用卡方檢驗(yàn)，多組均值比較采用方差分析，組間兩兩比較采用SNK法，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1原發(fā)感染組與亞急性感染組臨床癥狀差異

兩組患者肝脾腫大發(fā)生率原發(fā)感染組高于亞急性感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，發(fā)熱、皮疹、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大的發(fā)生率，兩組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，見表1。

表1　原發(fā)感染組與亞急性感染組臨床癥狀差異(n)

2.2三組不同血清學(xué)模式EB感染患者病毒DNA載量、血生化指標(biāo)比較

三組患者DNA病毒載量、ALT、AST、LDH平均濃度經(jīng)方差分析均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，組間兩兩比較經(jīng)SNK法分析也均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，三組DNA病毒載量、ALT、AST、LDH異常率經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，組間兩兩比較也均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)， 見表2。

表2　三組不同血清學(xué)模式EB感染患者病毒DNA載量、血生化平均濃度及異常指標(biāo)比較

2.3三組研究對(duì)象EBDNA病毒載量與血生化指標(biāo)相關(guān)性分析

三組研究對(duì)象EBDNA病毒載量與血生化指標(biāo)ALT、AST以及LDH經(jīng)pearson相關(guān)性分析均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.69、0.61、073，以LDH較高。見表3。

表3　三組研究對(duì)象EBDNA病毒載量與血生化指標(biāo)相關(guān)性分析

3討論

EBV屬于皰疹病毒嗜淋巴細(xì)胞 DNA 病毒對(duì)人類普遍易感，尤其兒童，研究顯示[2]：我國3-5歲兒童EBV抗體陽性率高達(dá)80.7%，病癥輕重不一，初次感染以傳染性單核細(xì)胞增多癥多見，部分患兒預(yù)后不良進(jìn)展為EBV相關(guān)的噬血性淋巴組織增生，持續(xù)高熱，肝脾腫大，多系可出現(xiàn)病理損傷，病死率居高不下。

EB病毒感染目前臨床主流的檢測方法為EB病毒抗體譜以及EB病毒DNA載量檢測，根據(jù)EB抗體譜檢測不同EB病毒感染可分為原發(fā)性感染、亞急性感染以及潛伏感染。原發(fā)性感染產(chǎn)生特異性體液、細(xì)胞免疫反應(yīng)，VCA-IgM為EB病毒新近感染的標(biāo)志性抗體，產(chǎn)生于感染4-7天，3-4周后滴度可逐漸降低直至消失，再次感染VCA-IgM不出現(xiàn)升高[3]，EA-IgG則出現(xiàn)在感染的急性期，部分潛伏感染病毒重新激活EA-IgG可呈現(xiàn)陽性結(jié)果。這兩種抗體與EB抗體譜的其他抗體不同，均不具備累積效應(yīng)[4]。VCA-IgG、NA-IgG則對(duì)既往感染的意義較大[5]。發(fā)熱、咽峽炎、頸部淋巴結(jié)腫大為EB病毒感染三聯(lián)征[6]，我們的研究數(shù)據(jù)顯示，在原發(fā)感染以及亞急性感染臨床癥狀比較中肝臟腫大、脾腫大發(fā)生率原發(fā)感染組高于亞急性感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在原發(fā)性感染中患兒肝脾腫大較為常見，這與病毒進(jìn)入B淋巴細(xì)胞增殖并導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞表面抗原改變所引起的強(qiáng)烈細(xì)胞免疫有關(guān)[7]。

EB抗體譜反映機(jī)體的免疫狀態(tài)[8]，DNA病毒載量可較為準(zhǔn)確的反映機(jī)體病毒的復(fù)制情況[9]，但在研究數(shù)據(jù)中顯示各組DNA病毒載量的陽性率均低于相應(yīng)組別抗體譜的陽性率，EB病毒多為潛伏感染，病毒潛伏于淋巴細(xì)胞以及復(fù)層上皮，尤其無癥狀攜帶者，受感染細(xì)胞在循環(huán)池中數(shù)量較少[10]，陽性率低于抗體譜陽性率，而抗體譜涵蓋病程相對(duì)較長也是抗體譜陽性率較高的原因之一，數(shù)據(jù)顯示：三組中EB病毒DNA平均病毒載量以及陽性率均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，原發(fā)感染組、亞急性感染組以及既往感染組依次降低，在血清中DNA病毒載量僅在復(fù)制活躍時(shí)檢出機(jī)率較大，急性感染期(約在病毒感染前幾個(gè)月)DNA病毒陽性機(jī)率較大，病毒載量較高，研究中原發(fā)感染組病毒載量多在3次方，而在亞臨床以及既往感染僅能檢出低病毒載量EBDNA，有研究顯示：在IM中EBDNA病毒載量與病情的嚴(yán)重程度相關(guān)[11]，高病毒載量患者提示機(jī)體的免疫損傷，無法控制病毒的復(fù)制。在我們的研究中：三組中ALT、AST、LDH平均血清濃度以及異常率均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異原發(fā)感染組、亞急性感染組以及既往感染組依次降低，與EBDNA病毒載量呈正相關(guān)。

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文章編號(hào)：1007-4287(2016)07-1136-02

(收稿日期：2015-04-15)