散結(jié)乳癖膏治療卵巢囊腫模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究*

侯惠玲靳瑾健關(guān)宏郭皓

散結(jié)乳癖膏治療卵巢囊腫模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究*

侯惠玲①靳瑾?、陉P(guān)宏①郭皓①

【摘要】目的：通過觀察散結(jié)乳癖膏治療卵巢囊腫模型大鼠在治療前后血清中促黃體生成素及促卵泡刺激素含量，客觀評價其治療卵巢囊腫的療效，為中醫(yī)藥治療卵巢囊腫提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：選取雌性未孕大鼠64只，采取手術(shù)的方法造模，從中選取造模成功大鼠，外敷散結(jié)乳癖膏（高、中、低劑量），連續(xù)6周，處死大鼠，觀察移植物外觀測量，取血后用放射免疫法檢測大鼠體內(nèi)促黃體生成素及促卵泡刺激素的含量。結(jié)果：散結(jié)乳癖膏可使模型大鼠的卵巢體積縮小，同時，散結(jié)乳癖膏高、中、低劑量組促黃體生成素及促卵泡刺激素含量與模型組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)論：散結(jié)乳癖膏可降低大鼠血清中促黃體生成素及促卵泡刺激素的含量，對卵巢囊腫大鼠有一定的治療作用，為今后臨床用藥提供新的思路。

【關(guān)鍵詞】散結(jié)乳癖膏； 卵巢囊腫； 促卵泡刺激素； 促黃體生成激素

First-author’s address：Qiqihaer Medical University，Qiqihaer 161006，China

卵巢囊腫是一種常見的良性腫瘤［1］，常見于20～50歲婦女，中醫(yī)稱之為“腸覃”，性質(zhì)和形態(tài)各有不同，多見為囊性囊腫，早期多無明顯癥狀，常在婦科檢查時偶然發(fā)現(xiàn)［2-3］，有一定的惡性比例，會引起內(nèi)分泌失調(diào)、甲亢和多血癥等［4-5］。目前，西醫(yī)的治療方法為手術(shù)切除［6］，即卵巢囊腫切除術(shù)，應(yīng)用腹腔鏡為主要的治療手段［7-8］。對于大部分女性來說會造成很大的心理負(fù)擔(dān)并很容易復(fù)發(fā)；從中醫(yī)角度來說，臟腑功能失調(diào)與氣血運(yùn)行不暢都會導(dǎo)致局部器官發(fā)生病變，而由于卵巢特殊的生理位置，其為肝經(jīng)經(jīng)過之處，故中醫(yī)上認(rèn)為卵巢與肝脾臟腑關(guān)系密切［9］，從而在治療方面，逐漸采用中醫(yī)中藥治療，并取得了顯著的治療效果，主要以活血化瘀、疏肝理氣為主［10-12］。

本實(shí)驗(yàn)的藥物為外用試劑，通過手術(shù)的方法對大鼠進(jìn)行造模后治療，采用放射免疫療法檢測大鼠體內(nèi)激素含量變化，評估藥物對卵巢囊腫的影響，對今后的臨床用藥和治療有重大意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及藥物 雌性Wistar大鼠，未孕，80只，體重（200±20）g，由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，合格證號為CXK（吉）2011-0004。散結(jié)乳癖膏：深黃色膏狀，由黑龍江省鶴翔制藥有限責(zé)任公司提供，批號為D120504號。對照品基質(zhì)（賦形劑），蜂蠟麻油等容積混合物，由黑龍江省鶴翔制藥有限責(zé)任公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥劑量 根據(jù)造模結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，選取造模成功的動物48只，隨機(jī)分組。（1）散結(jié)乳癖膏高劑量組：8只，每天固定時間外敷給藥2.52 g/kg大鼠。（2）散結(jié)乳癖膏中劑量組：8只，每天固定時間外敷給藥1.26 g/kg大鼠。（3）散結(jié)乳癖膏低劑量組：8只，每天固定時間外敷給藥0.63 g/kg大鼠。（4）賦形劑對照組：8只，每天固定時間外敷給藥2.52 g/kg大鼠。（5）陽性藥組：8只，每天固定時間給藥炔雌醇環(huán)丙孕酮1 mL/100 g大鼠。（6）模型對照組：8只，僅常規(guī)喂養(yǎng)，不作處理。（7）空白對照組：取未造模的動物8只，僅常規(guī)喂養(yǎng)，不作處理。共計七組，每天外敷給藥一次后敷以油紙和紗布，并用無刺激性透明膠布固定，單籠飼養(yǎng)，連續(xù)6周。

1.3 方法

1.3.1 造模方法 在臨床上，卵巢囊腫與子宮內(nèi)膜異位癥有較為相似的病理基礎(chǔ)，因此在實(shí)驗(yàn)中可以借助子宮內(nèi)膜異位癥的動物模型來對大鼠進(jìn)行造模用藥［13］。選取雌性未孕并處在動情期規(guī)律的大鼠64只，腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，待大鼠失去意識后，使其置于仰臥位，用橡皮筋固定頭部與四肢。腹部剪毛消毒后，于腹中線上距恥骨聯(lián)合1 cm處行2 cm長的垂直切口，經(jīng)膀胱后側(cè)找到輸卵管，并找出卵巢，挑出左側(cè)子宮角，剝離系膜，結(jié)扎。切除結(jié)扎處子宮組織約10 mm，放入盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中，去除多余脂肪，縱行剖開。剪去一塊0.5 cm×0.5 cm的內(nèi)膜，用鉻線縫合固定在右側(cè)遠(yuǎn)離腹部切口上。常規(guī)消毒，關(guān)腹。

1.3.2 造模成功判斷標(biāo)準(zhǔn) 手術(shù)4周后，開腹，根據(jù)移植物的體積大?。w積增大并大于30 mm以上）、顏色（淡紅色或者暗紅色囊泡）及質(zhì)地（質(zhì)地柔軟、有澄清液體積聚并有血管形成）等判斷是否造模成功。造模成功大鼠見圖1。

1.4 實(shí)驗(yàn)取材及指標(biāo)檢測 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，眼球取血5 mL，分離血清，備用。處死動物，剖腹后測量各組大鼠腹腔內(nèi)移植物情況，并測量體積，用兩腳規(guī)測量移植物的體積（長×寬×高，mm3），記錄其體積為V。采取放射免疫法檢測血清中促黃體生成素和促卵泡刺激素的含量。

圖1 造模成功大鼠

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠腹腔內(nèi)移植物情況 術(shù)后4周，大鼠開腹后可以觀察到有53只移植物明顯的增大，形成透明的薄壁囊泡，表面的血管清晰，囊內(nèi)積聚清亮液體，大多數(shù)為無色透明或含血性液體，病灶結(jié)構(gòu)較清晰，造模成功率為82.0%。

2.2 散結(jié)乳癖膏對卵巢囊腫大鼠體內(nèi)移植物體積的影響 模型組大鼠體內(nèi)移植物體積為（143.39±5.60）mm3，賦形劑組為（141.13±7.98）mm3，散結(jié)乳癖膏高、中、低組分別為（42.43±8.33）、（82.46±8.41）、（110.77±8.61）mm3，陽性藥組為（30.70±9.00）mm3。散結(jié)乳癖膏各劑量組與模型組比較，大鼠移植物體積均有明顯縮小趨勢，且各組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。陽性藥組大鼠移植物體積也明顯縮小，與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

2.3 散結(jié)乳癖膏對于卵巢囊腫大鼠血清促黃體生成素和促卵泡刺激素含量的影響 選取的48只給藥大鼠中有3只大鼠在給藥過程中由于個體體質(zhì)較弱死亡，分別為模型組1只、中劑量組1只和賦形劑組1只。模型組血清促黃體生成素、促卵泡刺激素含量比空白組均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；散結(jié)乳癖膏各劑量組、陽性藥組血清促黃體生成素、促卵泡刺激素含量與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

散結(jié)乳癖膏為外用貼敷劑，藥芯為棕黃色，主要成分為莪術(shù)、姜黃、白芷、天葵子、急性子、木鱉子，氣辛。散結(jié)乳癖膏臨床前藥理實(shí)驗(yàn)表明，此藥有行氣活血，散結(jié)消腫之功效，可以用于氣滯血瘀所致的乳癖。莪術(shù)作為此復(fù)方的主藥，現(xiàn)代藥理硏究表明，莪術(shù)二酮［14］是其發(fā)揮活血化瘀作用的主要成分，有抗血栓和抗血小板聚集的作用。因此，使用散結(jié)乳癖膏治療卵巢囊腫，主要以行氣活血為主［15］，當(dāng)屬中醫(yī)范圍的標(biāo)本兼治［16-17］。

表1 散結(jié)乳癖膏對卵巢囊腫大鼠血清促黃體生成素、促卵泡刺激素含量的影響（±s） mIU/mL

表1 散結(jié)乳癖膏對卵巢囊腫大鼠血清促黃體生成素、促卵泡刺激素含量的影響（±s） mIU/mL

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

組別 劑量 促黃體生成素 促卵泡刺激素模型組（n=7） 等體積 5.53±0.26△△1.83±0.09△△賦形劑組（n=7） 2.52 g/kg 5.38±0.08△△1.80±0.12△△散結(jié)乳癖膏高劑量組（n=8） 2.52 g/kg 4.80±0.39**△1.55±0.06**△散結(jié)乳癖膏中劑量組（n=7） 1.26 g/kg 4.94±0.35**△△1.61±0.08**△△散結(jié)乳癖膏低劑量組（n=8） 0.63 g/kg 5.22±1.16*△△1.73±0.04*△△陽性藥組（n=8） 1 mL/100 g 4.50±0.12**1.51±0.08**空白組（n=8） 等體積 4.42±0.19 1.47±0.06

在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，衡量卵巢功能的重要指標(biāo)為基礎(chǔ)性激素水平，例如雌激素、孕激素、促卵泡刺激素和促黃體生成素等，卵巢功能性囊腫可為下丘腦-垂體-卵巢軸功能紊亂的結(jié)果［18-19］。聯(lián)合觀察幾種激素的水平變化，可以更好的了解卵巢功能。如果促黃體生成素和促卵泡刺激素同時高于上限3個周期以上，是卵巢儲備功能下降以及到了后期的表現(xiàn)［20-21］，因此如想改善卵巢的儲備功能，治療由于儲備功能導(dǎo)致的卵巢囊腫，降低促卵泡刺激素和促黃體生成素的水平是必不可少的。

本實(shí)驗(yàn)研究表明散結(jié)乳癖膏高、中和低劑量組可明顯減小卵巢囊腫大鼠體內(nèi)移植物體積，對于大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞有一定的選擇性抑制作用，為其治療卵巢囊腫提供了形態(tài)學(xué)的依據(jù)。同時，降低血清中促卵泡刺激素和促黃體生成素的含量，以此調(diào)整性腺軸的功能，從而改善卵巢囊腫細(xì)胞的紊亂，發(fā)揮其治療的目的。對于此藥物更為具體的治療機(jī)制，以及是否能治療其他由于痰凝血瘀所致的婦科疾病，需要更進(jìn)一步的研究。

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①齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院 黑龍江 齊齊哈爾 161006

②齊齊哈爾農(nóng)墾管理局中心醫(yī)院

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.20.008

收稿日期：（2016-05-31） （本文編輯：蔡元元）

*基金項(xiàng)目：齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院院內(nèi)科研基金資助項(xiàng)目（QY2015Q-04）

通信作者：郭皓

Experimental Study of Sanjierupi Ointment for Ovarian Cyst Model Rats

HOU Hui-ling，JIN Jin-jian，GUAN Hong，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（20）：033-035

【Abstract】Objective：To evaluate the effects of Sanjierupi Ointment on ovariancyst in serum model rat by observing the content of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone before and after the treatment，in order to provide experimental basis.Method：The female unfertilized 64 rats were taken，using the surgical method to select the successful model rats.The building successful rats were selected and topical application of Sanjierupi Ointment in abdominal（high，middle and low doses），after 6 weeks，put to death in the rat，the execution of the grafts was observed and taken blood from eyes to detect LH and FSH by radioimmunoassav.Result：Sanjierupi Ointment reduced the model rat ovarian volume.At the same time，the content of LH and FSH of the high，middle and low doses group compared with the model control group，there had significant differences（P＜0.05）.Conclusion：Sanjierupi Ointment can reduce the content of LH and FSH，it has certain treatment function for ovarian cyst，and it can provide new ideas for future clinical treatment.

【Key words】Sanjierupi Ointment； Ovarian cyst； Follicle-stimulating hormone； Luteinizing hormone