紫外分光光度法測定咽炎顆粒劑中人參皂苷Re的含量

陳良華，丘　　琴，甄漢深，許玉華（.北海市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 北?！?36000；.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧　53000）

藥學研究

紫外分光光度法測定咽炎顆粒劑中人參皂苷Re的含量

陳良華1，丘琴2，甄漢深2，許玉華2
（1.北海市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 北海536000；2.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧530001）

［目的］建立咽炎顆粒劑中人參皂苷Re的含量測定方法。［方法］采用紫外-可見分光光度法在550 nm處測定人參皂苷Re的含量。［結(jié)果］人參皂苷Re在0.05～0.25μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r2=0.9848），平均加樣回收率為98.52%，RSD= 0.36%（n=6）。［結(jié)論］該法操作簡便快速，專屬性強，適用于咽炎顆粒劑的質(zhì)量控制。

咽炎顆粒劑；人參皂苷Re；含量測定

崗梅，又名崗梅根、點秤星、秤星樹，系冬青科植物梅葉冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的干燥根和莖［1-2］，是我國民間的一種常用中草藥，其性寒、味甘苦，具有清熱解毒、活血生津、消腫止痛等功效。嶺南地區(qū)常用于治療感冒、高熱煩渴、扁桃體炎、咽喉炎等［3］。咽炎顆粒為北海市中醫(yī)醫(yī)院的院內(nèi)制劑，由崗梅單方制成，用于風熱引起的急性咽炎、扁桃體炎、流行性腮腺炎等癥，療效顯著。本實驗以崗梅的主要有效成分人參皂苷Re作為咽炎顆粒劑的質(zhì)量控制指標［4］，建立了本品中人參皂苷Re的紫外-可見分光光度含量測定方法，可用于該制劑的質(zhì)量控制。現(xiàn)報道如下。

1　　實驗材料

1.1儀器紫外-可見分光光度計8453（美國安捷倫公司）；電熱恒溫水浴鍋HWS-26（上海一恒科學有限公司）。

1.2藥材與試藥崗梅飲片購于廣西建一藥業(yè)有限責任公司，經(jīng)本院中藥庫鑒定為冬青科冬青屬植物梅葉冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的根莖；人參皂苷Re對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用）；白糖（市售品）；其他試劑均為分析純。

2　　實驗方法

2.1咽炎顆粒劑的制備取崗梅飲片加水煎煮兩次，第一次2 h，第二次1.5 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入乙醇使成含醇量為60%，攪拌，靜置18 h使沉淀，取上清液回收乙醇，濃縮至相對密度為1.35～1.42的稠膏，加入白糖制成顆粒，干燥60～80℃，即得。每10 g顆粒相當于含原藥材16 g。

2.2含量測定

2.2.1人參皂苷Re對照品溶液的制備取人參皂苷Re對照品5mg（精確至0.1 mg），置10ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，搖勻，作為人參皂苷Re對照品儲備液。

2.2.2供試品溶液的制備取咽炎顆粒1.0 g，精密稱定，加水20ml溶解，以水飽和的正丁醇50m l分3次萃取，再以稀氨水（2→50）50 m l分3次萃洗，最后以正丁醇飽和的水50 m l分3次萃洗，蒸干正丁醇，殘渣以甲醇定容至10ml，作為供試品溶液。

2.2.3最大吸收波長的確定精密吸取0.50ml對照品儲備液于試管中，將試管置于冰水浴中，精密加入8%香草醛乙醇液0.50m l和77%硫酸乙醇溶液5.0ml，搖勻，置60℃恒溫水浴中加熱10 min，立即轉(zhuǎn)移至冰水浴中冷卻15 min，于400～800 nm范圍內(nèi)掃描吸收光譜，確定最大吸收波長為550 nm（見圖1）。

圖1　　對照品溶液的最大吸收光譜

2.2.4標準曲線的繪制精密吸取對照品儲備液0.10 m l、0.20m l、0.30 m l、0.40 m l、0.50 m l于試管中，將試管置于冰水浴中，分別加入甲醇0.40 m l、0.30 m l、0.20m l、0.10 m l、0 m l，加入8%香草醛乙醇液0.50m l和77%硫酸乙醇液5.0m l，搖勻，置60℃恒溫水浴中加熱10 min，立即移入冰水浴中冷卻15 min，550 nm下測定吸光度值，以進樣量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，見圖2。并求得標準曲線回歸方程為：Y=3.8527X+0.0914（r2=0.9848）。結(jié)果顯示，人參皂苷Re 在0.05～0.25μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

圖2　　標準曲線圖

2.2.5精密度實驗精密吸取對照品溶液0.50m l，按上述方法顯色，測定吸光度值6次，吸光度值分別為：0.43146、0.43183、0.43225、0.43106、0.43109、0.43067，RSD=0.13%（n= 6）。精密吸取供試品溶液0.50 ml，按上述方法顯色，測定吸光度值6次，吸光度值分別為：0.81055、0.81144、0.81290、0.81523、0.81431、0.81425，RSD=0.22%（n=6）。表明儀器精密度良好。

2.2.6穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液0.50ml，按上述方法顯色，測定2 h，1 h內(nèi)每5min測定1次，1～2 h每15min測定1次，共測定17次。測定結(jié)果見圖3。

圖3　　人參皂苷Re穩(wěn)定性試驗結(jié)果

2.2.7加樣回收試驗取已知含量的咽炎顆粒6份，分別加入適量的人參皂苷Re對照品溶液，按“2.2.2”項方法制備供試品溶液，依上述方法顯色，測定吸光度值，計算回收率，結(jié)果見表1。

2.2.8樣品含量測定取咽炎顆粒10批，按“2.2.2”項方法制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液0.50 ml，按上述方法顯色，測定吸光度值，計算含量，結(jié)果見表2。

由表2可知，10批咽炎顆粒劑中，人參皂苷Re含量最低為0.27%，最高為0.62%。

表1加樣回收率試驗結(jié)果　?。╪=6）

表2樣品含量測定

（續(xù)表2）

3　小　結(jié)

本試驗采用紫外分光光度法測定咽炎顆粒劑中人參皂苷Re的含量，結(jié)果顯示精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和回收率均較好，方法簡便、靈敏，可用于咽炎顆粒劑的質(zhì)量控制。

［1］祁銀德，任玉鳳.嶺南地區(qū)習用中藥崗梅研究進展［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（3）：29-32.

［2］曾坤，陳良華，丘琴，等.崗梅根的研究進展［J］.中國民族民間醫(yī)藥，2012，21（18）：28-30.

［3］國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草（十三卷）［M］.上海：上?？茖W技術(shù)出版社，1999：5145-5146.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄30.

（編輯陳明偉）

R284.1

A

2095-4441（2016）02-0068-03

2016-03-29

廣西中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥科技專項（編號：GZYZ1132）

丘琴，女，副教授，E-mail：12031983@163.com