吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53表達(dá)及預(yù)后的影響

程國平，吳超琦，范柳倩

(浙江省腫瘤醫(yī)院 病理科，浙江 杭州 310022)

吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53表達(dá)及預(yù)后的影響

程國平Δ，吳超琦，范柳倩

(浙江省腫瘤醫(yī)院 病理科，浙江 杭州 310022)

目的 探究吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53表達(dá)及預(yù)后影響。方法 選取2007年10月～2014年6月浙江省腫瘤醫(yī)院病理科收治的肺癌患91例，46例口服吉非替尼治療的歸入治療組，45例采用紫杉醇聯(lián)合順鉑化療方案治療的歸入對照組。2組患者予以常規(guī)治療以及個體化對癥治療后，均有支氣管鏡活檢、粗針穿刺、胸水細(xì)胞包埋或手術(shù)樣本，進(jìn)行免疫組化染色后對比分析2組Ki-67及p53陽性表達(dá)率、pU值及復(fù)發(fā)率。結(jié)果 與對照組相比，治療組患者的Ki-67及p53陽性表達(dá)率較低(P<0.05)，陰性表達(dá)率較高(P<0.05)，Ki-67及p53pU值較低(P<0.05)，復(fù)發(fā)率較低(P<0.05)。結(jié)論 吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53的基因表達(dá)具有調(diào)控作用，抑制癌細(xì)胞的侵潤和轉(zhuǎn)移，改善臨床療效與預(yù)后。

吉非替尼；肺癌；Ki-67；p53；預(yù)后

肺癌是臨床常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤[1]，起源于支氣管粘膜上皮的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲，又稱為原發(fā)性支氣管肺癌。近年來肺癌的發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢，世界衛(wèi)生組織預(yù)測,至2025年我國肺癌患者將達(dá)到100萬[2]。吉非替尼是一種選擇性表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)[3]，具有抑制癌組織生長、轉(zhuǎn)移以及血管生成，加速腫瘤凋亡的作用。研究顯示，吉非替尼適用于既往接受過化療、晚期以及化療局部轉(zhuǎn)移的非小細(xì)胞肺癌[4]。Ki-67及p53蛋白表達(dá)與肺癌的生物學(xué)行為以及癌癥預(yù)后有緊密聯(lián)系，因此本實(shí)驗(yàn)就吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53表達(dá)及預(yù)后影響進(jìn)行研究分析，為闡明吉非替尼在肺癌臨床治療中的價值提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2007年10月～2014年6月浙江省腫瘤醫(yī)院病理科收治肺癌患91例，男性49例，女性42例，年齡35～82歲，平均年齡(63.74±4.63)歲，其中腺癌45例，鱗癌34例，細(xì)支氣管肺泡癌7例，其余5例。根據(jù)治療方法分配為治療組與對照組，其中治療組46例，男性25例，女性21例，年齡38～82歲，平均年齡(64.62±4.82)歲；對照組45例，男性24例，女性21例，年齡35～80歲，平均年齡(62.81±4.91)歲，2組患者性別、年齡、等一般資料均相仿，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有病例均符合以下條件：①診斷符合《2014第一版NCCN小細(xì)胞肺癌治療指南》[5]中肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)具備以下臨床特點(diǎn)：咳嗽，多為刺激性咳嗽；痰中帶血；胸悶胸痛，病情加重疼痛加??；氣促；發(fā)熱；晚期出現(xiàn)晚期可出現(xiàn)疲乏、體重減輕、食欲下降以及呼吸困難等癥狀，嚴(yán)重惡病質(zhì)；②局限性哮鳴音；聲音嘶??；肩臂疼痛；膈神經(jīng)麻痹；吞咽困難；③MRI以及CT證實(shí)為肺癌；支氣管鏡檢查證實(shí)腫瘤病灶以及位置；痰液細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞；④年齡大于18歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①藥物過敏史，接受免疫抑制劑治療的病例；②風(fēng)濕免疫性疾病、嚴(yán)重高血壓、糖尿病以及嚴(yán)重心、肝、腎等多臟器功能障礙或衰竭；③合并其他惡性腫瘤、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。④治療后無法獲取病理樣本。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：2組病例入院后均進(jìn)行常規(guī)入院檢查，實(shí)施維持點(diǎn)解質(zhì)平衡、抗病毒、吸氧等常規(guī)治療，根據(jù)患者病情、全身狀況以及醫(yī)療設(shè)備制定個體化對癥治療；治療組口服吉非替尼治療，口服吉非替尼片(進(jìn)口藥品：英國 AstraZeneca KK，分裝企業(yè)：阿斯利康制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字J20100014)250 mg，1次/天，每7 d為一個療程。對照組采用紫杉醇聯(lián)合順鉑化療方案，75 g/m2紫杉醇注射液(北京協(xié)和藥廠，國藥準(zhǔn)字H20083786)混合500 mL 5%葡萄糖靜脈滴注，60 mg/m2順鉑注射液(南京制藥廠有限公司，國藥準(zhǔn)字H20030675)混合500 mL 0.9%的氯化鈉注射液內(nèi)靜脈滴注，7 d一個療程，每療程第一天重復(fù)注射治療。

1.2.2 檢測方法：所有病例均有腫瘤組織進(jìn)行活檢，采取免疫組化法進(jìn)行肺癌細(xì)胞株中Ki-67及p53 mRNA的表達(dá)，按照常規(guī)方法進(jìn)行脫水并對標(biāo)本實(shí)施10%福爾馬林液固定石蠟包埋處理。采用北京中杉生物技術(shù)提供的濃縮型兔抗人Ki-67及p53多克隆抗體和二步法免疫組化廣譜檢測試劑盒，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，對制成的免疫組化片結(jié)果進(jìn)行判讀，并分類記錄。

患者治療后進(jìn)行3個月～1年的隨訪，以電話、門診以及登門訪問等形式進(jìn)行，記錄復(fù)發(fā)例數(shù)并計(jì)算復(fù)發(fā)率。

2 結(jié)果

2.1 肺癌細(xì)胞株中Ki-67及p53的表達(dá) 治療后與對照組相比，治療組Ki-67及p53陽性表達(dá)率較低(P<0.05)，陰性表達(dá)率較高(P<0.05)，見表1。治療后與對照組相比，治療組Ki-67及p53pU值較低(P<0.05)。見表2。其免疫組化圖片分別見圖1、圖2。

表1 治療后2組患者Ki-67及p53表達(dá)比較[n(%)]

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

表2 治療后2組患者pU值比較

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

圖1 Ki-67在肺癌病例中的表達(dá)Fig.1 Expression of Ki-67 in lung cancer cases

圖2 p53蛋白病例中的表達(dá)Fig.2 Expression of p53 protein in lung cancer cases

2.3 預(yù)后評價 治療后與對照組相比，治療組復(fù)發(fā)率較低(χ2=5.080，P<0.05)。見表3。

表3 治療后2組患者復(fù)發(fā)率比較 [n(%)]

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

3 討論

肺癌是當(dāng)今危害人類健康的惡性腫瘤之一，在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率位居首位，其中約80%肺癌患者屬于非小細(xì)胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer，NSCLC)。據(jù)研究統(tǒng)計(jì)，全世界發(fā)生的肺癌病例超過130萬人，新發(fā)生癌癥中12%為肺癌患者[6]。臨床傳統(tǒng)的化療和放療治療方案特異性較低，毒副作用嚴(yán)重侵害患者的正常細(xì)胞組織，含鉑化療5年內(nèi)生存率僅為15.7%。肺癌具有許多突變的基因亞型，臨床上靶向治療相關(guān)的基因成為研究重點(diǎn)，特異性較高的分子靶點(diǎn)有效延長肺癌患者生存時間，提高患者生活質(zhì)量，降低對正常組織細(xì)胞的毒副作用。研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)，吉非替尼是一種選擇性表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)[7]，該酶常見于表達(dá)上皮來源的實(shí)體瘤。抑制EGFR酪氨酸激酶活性作用從而阻礙腫瘤的生長，預(yù)防轉(zhuǎn)移以及血管生成，加速腫瘤細(xì)胞凋亡進(jìn)程。

Ki-67是一種核蛋白有NKI-67基因編碼，臨床在病理免疫組化中提示細(xì)胞增殖活躍程度，Ki-67蛋白參與mRNA的轉(zhuǎn)錄，其活性降低，使mRNA活性降低，合成受限，在細(xì)胞增殖各期均有表達(dá)。Ki-67能夠客觀反映腫瘤細(xì)胞的增殖情況，可以作為影響預(yù)后的因素[8]。研究顯示，Ki-67的過度表達(dá)誘發(fā)細(xì)胞無限制增生而引發(fā)腫瘤，病理結(jié)果中指數(shù)高提示腫瘤分化程度高，侵潤增加[9]，轉(zhuǎn)移部位增多，預(yù)后差；反之，證實(shí)腫瘤分化程度低，侵潤以及轉(zhuǎn)移較少，預(yù)后良好。p53是一種臨床發(fā)現(xiàn)較早的腫瘤抑制基因之一，參與細(xì)胞增殖和分化的調(diào)控，p53蛋白具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期以及預(yù)防細(xì)胞癌變的作用[10]。p53是一種最容易發(fā)生突變的抑癌基因，與腫瘤的形成密切相關(guān)[11-13]。p53蛋白從一定程度上維持基因組的穩(wěn)定性，防治腫瘤細(xì)胞突變轉(zhuǎn)移。 機(jī)體內(nèi)許多細(xì)胞健康的信號的傳遞由p53蛋白參與進(jìn)行。若機(jī)體出現(xiàn)細(xì)胞受損，p53蛋白參與修復(fù)，加速細(xì)胞在細(xì)胞凋亡中的死亡。研究顯示，p53蛋白具有抑制癌細(xì)胞生長的作用，對癌癥的發(fā)生發(fā)展以及預(yù)后相關(guān)性[14]，p53陽性表達(dá)化療療效明顯低于陰性表達(dá)者。本研究表明，與對照組相比，治療組患者的Ki-67及p53陽性表達(dá)率較低(P<0.05)，陰性表達(dá)率較高(P<0.05)，Ki-67及p53 pU值較低(P<0.05)，本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化檢測結(jié)果的對比分析Ki-67及p53定量反映免疫組化顯色反應(yīng)的陽性強(qiáng)度，結(jié)果表明證實(shí)吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53的基因表達(dá)具有調(diào)控作用，抑制癌細(xì)胞的侵潤和轉(zhuǎn)移，加速癌細(xì)胞死亡，改善臨床療效。隨訪中發(fā)現(xiàn)治療后與對照組相比，治療組復(fù)發(fā)率較低(P<0.05)。吉非替尼耐受性較好，患者生活質(zhì)量也得到改善[15]。

本研究通過對本院腫瘤科收治肺癌患81例的病理染色、Ki-67及p53陽性表達(dá)率、pU值、隨訪復(fù)發(fā)率進(jìn)行研究，證實(shí)了吉非替尼對肺癌患者Ki-67及p53的基因表達(dá)具有調(diào)控作用，抑制癌細(xì)胞的侵潤和轉(zhuǎn)移，改善臨床療效與預(yù)后，對患者延長生存更有價值適宜臨床推廣應(yīng)用。下一步研究將對治療后患者延長隨訪時間，從患者生活質(zhì)量作進(jìn)一步研究。

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(編校：王冬梅)

Effect of Ki-67 and p53 expression and prognosis in patients with lung cancer by Iressa

CHENG Guo-pingΔ, WU Chao-qi, FAN Liu-qian

(Department of Pathology, Cancer Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310022, China)

ObjectiveTo investigate the effect of Ki-67 and p53 expression and prognosis in patients with lung cancer by Iressa.Methods91 cases of lung cancer in Cancer Hospital of Zhejiang Province from October 2007 to June 2014 were randomly divided into 45 cases in control group and 46 cases in treatment group. Two groups of patients were treated with conventional therapy and individual symptomatic treatment; The treatment group was treated with oral administration of Iressa, two groups of patients were selected according to the condition of each patient lobe or lung resection, chemotherapy regimen of paclitaxel combined with cisplatin. After the end of treatment, two groups were compared, the positive expression rate of pU, Ki-67, p53 and the recurrence rate were compared.ResultsCompared with control group, the positive expression rate of Ki-67 and p53 in treatment group was lower (P<0.05), the negative expression rate was higher (P<0.05), Ki-67 and p53pU were lower (P<0.05), and the recurrence rate was lower (P<0.05).ConclusionIressa has regulation function in patients with lung cancer by the gene expression of and Ki-67 and p53, which can inhibit the invasion and metastasis of cancer cells, improve the clinical efficacy and prognosis.

Iressa; p53; lung cancer; Ki-67; prognosis

程國平，通信作者，男，本科，主管技師，研究方向：腫瘤病理，E-mail：cgpzjhz@126.com。

R734.2

A

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.03.25