缺血性腦卒中患者血漿脂蛋白相關磷脂酶A2水平的測定及研究

陳偉明 文學 林濤 陳志健 羅德宏 龐文沖

[摘要] 目的 分析不同時期缺血性腦卒中患者血漿脂蛋白相關磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平變化及其臨床意義。 方法 將本院2012年1月～2015年2月神經內科收治的100例缺血性腦卒中患者根據(jù)疾病所處時期分為急性期組（22例）、恢復期組（60例）及后遺癥期組（18例），同時將同期健康體檢者100例設為健康對照組，比較不同組別年齡、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）及Lp-PLA2濃度的差異，采用Logistic分析法分析動脈粥樣硬化的危險因子。 結果 ①缺血性腦卒中患者TC、HDL-C及LDL-C水平與健康對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）；急性期組、恢復期組及后遺癥期組的TC、HDL-C及LDL-C比較，差異無統(tǒng)計學意義（P均>0.05）。②缺血性腦卒中患者外周血清Lp-PLA2濃度高于健康對照組（P<0.05），且病程越短差異越明顯。③經Logistic分析法分析得知，TC、LDL-C及Lp-PLA2均是導致動脈粥樣硬化的危險因素。④Lp-PLA2濃度變化與年齡不具相關性，與吸煙、TC、LDL-C成正相關。 結論 Lp-PLA2可成為預測動脈斑塊形成的重要因子，其濃度變化與缺血性腦卒中病程長短具有良好相關性。

[關鍵詞] 缺血性腦卒中；血漿脂蛋白相關磷脂酶A2；預測

[中圖分類號] R743.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）03（a）-0061-04

[Abstract] Objective To analyze the change of plasma lipoprotein associated phospholipase A2（Lp-PLA2） level in ischemic stroke patients（ACI） at different stage and its clinical meaning. Methods 100 patients with ischemic stroke in our neurology department from January 2012 to February 2015 were divided into acute stage group（n=22），convalescence group（n=60） andsequelae stage（n=18） according to disease period that they located.100 healthy examined patients at the same time were selected as control group.The difference of age，total cholesterol （TC），high-density lipoprotein（HDL-C），low-density lipoprotein（LDL-C） and Lp-PLA2 concentration between two groups were compared.The risk factors of atherosclerosis were analyzed by using Logistic analysis method. Results ①TC，HDL-C and LDL-C in ischemic stroke patients had statistical significance difference compared with that in control group （P<0.05）；TC，HDL-C and LDL-C among acute stage，convalescence and sequelae stage had no statistical significance（P>0.05）.②Lp-PLA2 concentration in peripheral blood of ischemic stroke patients was higher than that of the control group（P<0.05），and with the shorter course of disease，the difference was more obvious.③Logistic analysis method showed that all of TC，LDL-C and Lp-PLA2 were risk factors that leaded to atherosclerosis.④There had no relationship between Lp-PLA2 concentration change，but had positive relationship with smoking，TC and LDL-C. Conclusion Lp-PLA2 can be an important factor to predict the formation of artery plaque and its concentration change has better relationship with illness course of ACI.

[Key words] Ischemic stroke patients；Plasma lipoprotein associated phospholipase A2；Prediction

動脈粥樣硬化是缺血性腦卒中最重要的病因和危險因素，更有學者視其為缺血性腦卒中的前兆，動脈硬化程度可通過頸動脈硬化情況進行評估。有文獻[1]顯示，頸動脈斑塊與心腦血管事件具有顯著相關性，因此通過研究頸動脈硬化的危險因素可達到防治缺血性腦卒中的目的。脂蛋白相關磷脂酶A2（lipoprotein-phospholipase A2，Lp-PLA2）是磷脂酶的重要亞型，源自巨噬細胞及淋巴細胞，大量文獻證實其對動脈粥樣硬化具有明顯觸發(fā)效應[2]。然而目前尚未有相關文獻分析不同病程與Lp-PLA2的關系，本課題為此進行一系列研究，具體情況如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2012年1月～2015年2月神經內科收治的100例缺血性腦卒中患者，其中男性66例，女性34例，年齡（61.15±7.99）歲，病程3個月～4年，平均（12.78±3.2）個月。根據(jù)病程長短將其分為急性期組（22例）、恢復期組（60例）及后遺癥期組（18例）。選擇同期本院健康體檢者100例設為健康對照組，其中男性59例，女性41例，年齡（58.82±9.23）歲，各組在年齡、性別方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P均>0.05），具有可比性。本研究方案經醫(yī)院倫理學委員會審查批準，所有受試對象均知情同意。

1.2 納入標準

①符合2010年《中國急性缺血性腦卒中診治指南》關于腦卒中的診斷標準，并經CT或MRI證實的患者；②無感覺、失語及認知功能障礙者；③無其他精神、神經系統(tǒng)疾病者；④自愿參加本研究項目者。

1.3排除標準

①出血性腦卒中、梗死后腦出血者；②腔隙性腦梗死、無癥狀性腦梗死者；③動脈炎所致的腦梗死者；④有明確栓子來源的腦栓塞，包括房顫、感染性心內膜炎、空氣、脂肪、癌細胞等者；⑤先天發(fā)育異常所致的腦梗死，如血管畸形或動脈瘤等者；⑥各種凝血機制異常及高黏血癥所致的腦梗死者；⑦嚴重心、肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，自身免疫性疾病等者；⑧臨床及生化資料不完善者。

1.4 檢測方法

1.4.1 Lp-PLA2濃度檢測 收集各組空腹、無菌條件下用無肝素真空采血管采集的肘靜脈血5 ml，在4℃ 14 000 r/min條件下離心5 min，用高壓槍頭吸取離心后的上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）進行檢測，操作步驟嚴格按照說明書進行，試劑盒由天津康爾克生物科技有限公司提供，顯色后采用492 nm波長，TMB反應產物檢測需要450 nm波長。檢測時首先進行空白孔系統(tǒng)調零，用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值（P/N）表示。以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

1.4.2 總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）檢測 收集各組空腹、無菌條件下用無肝素真空采血管采集的肘靜脈血5 ml，分置于常規(guī)非抗凝生化管中，以3000 r/min離心10 min，收集上層血清，置于-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?。采用酶法測定血漿TC，化學遮蔽法測定HDL-C，LDL-C。

1.5 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示。先使用Shapiro-Wilk test對數(shù)據(jù)正態(tài)性進行檢測，并用Levene test分析方差齊性。采用χ2檢驗或LSD-t檢驗，將P<0.05的因素進行Logistic分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1 缺血性腦卒中組與健康對照組基本資料的比較

缺血性腦卒中患者TC、HDL-C及LDL-C與健康對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）（表1）。

2.2缺血性腦卒中患者不同發(fā)病時期基本資料的比較

缺血性腦卒中患者不同發(fā)病時間的TC、HDL-C、LDL-C及性別比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表2）。

2.3 各組Lp-PLA2/內參（IOD比值）的比較

缺血性腦卒中患者外周血清Lp-PLA2濃度高于健康對照組（P<0.05），且隨著發(fā)病時間延長差異越明顯（表3，圖1）。

2.4 Logistic回歸分析

經過Logistic分析法分析后得知TC、LDL-C、Lp-PLA2是導致動脈粥樣硬化的危險因素（表4）。

2.5 Pearson相關性分析

Lp-PLA2濃度變化與年齡不具相關性，與吸煙、TC、LDL-C成正相關，與HDL呈負相關（表5）。

3 討論

動脈粥樣硬化是導致缺血性腦卒中的危險因素，動脈粥樣硬化促使機體無法及時清除生成的自由基，導致自由基在體內濃度堆積，激活一些可損害細胞的物質，導致細胞過早、過度凋亡[3-4]。在此過程中一氧化氮（NO）濃度應激性升高，進一步導致加速血流活性物質的下降，使得過多的膽固醇及脂質代謝產物在血管內堆積而形成斑塊，隨著血管壁的逐漸增厚，管腔空間逐漸縮小甚至完全堵塞，導致腦血管事件發(fā)生。Lp-PLA2作為一種炎性因子被認為與動脈粥樣硬化具有密切關系，Lp-PLA2的主要合成場所在巨噬細胞、單核細胞、淋巴細胞，其濃度分泌受白介素等炎癥介質的調控。Lp-PLA2主要與脂蛋白顆粒相結合而存在于血液循環(huán)中，其中3/4與低密度脂蛋白相結合，余下的1/4與高密度脂蛋白及極低密度脂蛋白相結合，在機體脂質代謝中占據(jù)重要位置[5-7]。有研究人員[8-14]通過動物實驗證實，動脈粥樣硬化模型大鼠外周血清及斑塊Lp-PLA2的蛋白及mRNA濃度均明顯上調，Ninio從單核苷酸多態(tài)性的角度闡述了Lp-PLA2的基因多態(tài)性確與動脈粥樣硬化的發(fā)生具有正相關性；Dohi T等[15]也認為，通過Lp-PLA2的正反饋效應可以加速動脈粥樣硬化進程，且發(fā)現(xiàn)其濃度的上調可進一步導致血栓形成及缺血性事件的發(fā)生。本研究結果顯示，缺血性腦卒中患者外周血Lp-PLA2濃度高于健康對照組，提示Lp-PLA2通過促進動脈粥樣硬化的形成而導致缺血性腦卒中的發(fā)生。隨后的相關性分析顯示，Lp-PLA2濃度變化與年齡不具相關性，與吸煙、TC、LDL-C成正相關，與HDL呈負相關，提示Lp-PLA2是動脈粥樣硬化甚至是缺血性腦卒中的預報因子。

本研究結果顯示，TC、HDL-C、LDL-C指標是動脈斑塊硬化的危險因子，于此同時，通過Logistic分析法得知Lp-PLA2亦是導致動脈斑塊硬化的危險因素。研究不同發(fā)病時期患者，結果顯示，隨著病程的延長Lp-PLA2活性逐漸下降，隨著病程的延長患者病情逐漸穩(wěn)定，提示Lp-PLA2可作為評估患者病情穩(wěn)定性的指標。

本研究僅憑患者病情時期做為分組的標準，并未進行隨機分組，結果可能在一定程度上存在偏倚，另一方面可能與此次入選樣本量較小有關，故有待增加樣本量，進一步擴大研究予以證實Lp-PLA2導致缺血性腦卒中的明確機制，為指導臨床治療提供參考價值。

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（收稿日期：2015-10-12 本文編輯：王紅雙）