李秋馨
[摘要] 目的 探討溶血標(biāo)本對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響。 方法 選擇我院2015年1~6月60名體檢者作為研究對象,將其隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組、對照組,實(shí)驗(yàn)組使用人工方法將血液溶血,作為溶血標(biāo)本,對照組試管里的血液不采用任何方法,作為正常標(biāo)本。檢測兩組血清中的ALP、AST、ALT、LDH、CK、BUN、GLU、CHOL、TG、K+、Cr、UA等12項(xiàng)生化檢驗(yàn)指標(biāo)。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組的血清ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+測定結(jié)果明顯高于對照組(P<0.05),兩組的BUN、GLU、TG、Cr、UA測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論 溶血標(biāo)本對生化檢驗(yàn)結(jié)果均有一定的影響,在檢驗(yàn)過程中應(yīng)盡可能地采取一些措施以避免溶血標(biāo)本的出現(xiàn),若已出現(xiàn)溶血標(biāo)本,可以采用空白樣品以便減少對檢測結(jié)果的影響,必要時(shí)可以重新采集新鮮血清。
[關(guān)鍵詞] 溶血標(biāo)本;生化檢驗(yàn);影響
[中圖分類號] R446.11+2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721(2016)03(c)-0135-03
[Abstract] Objective To explore the influence of hemolysis specimen on biochemical test result. Methods From January to June 2015,60 people for physical examination were selected as research object and they were randomly divided into experimental group and control group.In experimental group,artificial method was used to conduct blood hemolysis,and the blood was used as a hemolysis specimen,while control group,blood in test tube did not give any method,and the blood was used as a normal specimen.The biochemical detection indexes of serum alkaline phosphatase (ALP),aspartate transaminase (AST),alanine aminotransferase (ALT),lactate dehydrogenase (LDH),creatine kinase (CK),blood urea nitrogen (BUN),glucose (GLU),cholesterol (CHOL),triglyceride (TG),K+,creatinine (Cr),and uric acid (UA) and so on was tested between two groups respectively. Results In experimental group,the test result of serum ALP,AST,ALT,LDH,CK,CHOL,and K+ was obviously higher than that in control group (P<0.05).There was no statistical difference of the test result of BUN,GLU,TG ,Cr,UA between two groups (P>0.05). Conclusion The hemolysis specimen has a certain influence on the biochemical test result.In the process of detection,some measures are conducted as much as possible to avoid hemolysis.If hemolysis occurs,blank sample can be substituted aiming at reducing influence on test result.If necessary,fresh serum can be recollected.
[Key words] Hemolysis specimen;Biochemical test;Influence
近幾年來,臨床診療對生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性越來越重視?;颊邫z驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度與儀器的精密度、系統(tǒng)偏差以及干擾等因素有密切的關(guān)系。由于各種各樣的全自動(dòng)分析器械使用的標(biāo)準(zhǔn)化及普遍化,生化檢驗(yàn)的偶然誤差、系統(tǒng)誤差都得到很好的控制。其中,干擾對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響被廣泛關(guān)注,尤其是溶血[1]。溶血標(biāo)本是生化檢驗(yàn)中最常見的影響結(jié)果的因素,主要是由于在檢驗(yàn)中未按照操作規(guī)程實(shí)時(shí)操作、采血不當(dāng),甚至是試管不清潔等[2]。有研究顯示,溫度以及反應(yīng)時(shí)間也可能會(huì)影響生化檢驗(yàn)結(jié)果[3]。本研究探討溶血標(biāo)本對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響,現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇我院2015年1~6月60名體檢者作為研究對象,年齡19~45歲,平均(35.42±10.23)歲;男27名,女33名。將其隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、對照組。兩組在性別構(gòu)成、年齡、文化水平等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
依次從60名體檢者中抽取6 ml血液,平均放入兩支試管中,每支試管的血液為3 ml。實(shí)驗(yàn)組:使用人工方法將血液溶血,25℃下分離,30 min后,1100 r/min,離心10 min,取1 ml的分離血清作溶血標(biāo)本備用[4];對照組:試管里的血液不采用任何方法,血清自然分離,在相同的條件下離心,取1 ml的分離血清作正常標(biāo)本備用。
1.3 觀察指標(biāo)
檢測兩組血清中的堿性磷酸酶(ALP)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、尿素氮(BUN)、葡糖糖(GLU)、總膽固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、鉀離子(K+)、肌酐(Cr)、血尿酸(UA)等12項(xiàng)生化檢驗(yàn)指標(biāo),其步驟均嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書進(jìn)行。使用迅達(dá)903分析儀和配套的試劑測定K+,每一份溶血血清、正常血清一共需要進(jìn)行10次測定,取其平均值,分別計(jì)算60例標(biāo)本的各項(xiàng)指標(biāo)其測定的平均值。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
使用SPSS 10.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)組血清ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+ 的測定結(jié)果明顯高于對照組(P<0.05);兩組BUN、GLU、TG、Cr、UA的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。
3 討論
溶血主要包括體內(nèi)溶血和體外溶血,其中造成體內(nèi)溶血的因素主要是藥物的毒性反應(yīng)、生物因素(包括瘧疾等)、物理因素(包括血管手術(shù)等)、配血不合適導(dǎo)致的輸血反應(yīng);造成體外溶血的因素主要有化學(xué)因素(包括血樣接觸了活性劑)、代謝因素(包括遺傳疾病導(dǎo)致血細(xì)胞增加)、物理因素(包括冷凍等)[5-7]。引起標(biāo)本溶血的原因主要有:①采血過程中,體檢者的血管不很清晰,導(dǎo)致不能順利進(jìn)行靜脈穿刺采血;若使用一次性的注射器采樣后,再注射到促凝的采血管中時(shí),會(huì)導(dǎo)致血液在注入試管中時(shí)產(chǎn)生大量氣泡,管內(nèi)壓力增大造成溶血。②標(biāo)本在運(yùn)輸以及混勻的過程中出現(xiàn)較大的震蕩。③強(qiáng)力地震蕩血液或者剝離血液凝塊。④使用留置針采樣也是造成標(biāo)本溶血最常見的原因。體外溶血可通過樣品制備技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化加以克服,在采血過程中需嚴(yán)格按照操作技術(shù)規(guī)范來執(zhí)行[8-9]。①采血器具必須干凈、清潔;②注射針頭不可使用乙醇對其消毒;③止血帶不能扎太久、太緊;④血液注入試管不宜太快,以免血泡過多引起血細(xì)胞破裂;⑤血液不能放進(jìn)冷凍室,避免血液融化后引起溶血;⑥血液存放時(shí)間不可太長,主要是防止其他物質(zhì)甚至是消毒液流入標(biāo)本,對檢驗(yàn)結(jié)果造成影響;⑦血液標(biāo)本采取后,需盡早將血清自然分離出來,室溫放置在30 min~1 h內(nèi)可以分離血清;⑧若標(biāo)本在離心前自行凝集,不可以用器物剝離;⑨離心時(shí)間控制在5~10 min,轉(zhuǎn)速控制在1000~1200 r/min;⑩為提高結(jié)果的準(zhǔn)確性,若條件許可,溶血標(biāo)本可以重新采集等。細(xì)胞內(nèi)液中某些物質(zhì)如ALP、AST、ALT、LDH、CK、K+、CHOL等的含量是細(xì)胞外液中濃度的22~160倍,只要輕微溶血就會(huì)造成檢測結(jié)果明顯的變化,另外,血紅蛋白可干擾膽固醇的酶法測定[10]。
本研究結(jié)果顯示,溶血標(biāo)本的ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+的測定結(jié)果明顯高于正常標(biāo)本(P<0.05),而溶血對BUN、GLU、TG、Cr、UA的測定結(jié)果影響不大,主要原因:紅細(xì)胞中,ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+等濃度較高的物質(zhì)進(jìn)入血清中。其中紅細(xì)胞內(nèi)LDH的活性是血漿中的180倍,AST、ALT、CK分別是血漿中的38、7、15倍,造成了分析的濃度比實(shí)際濃度高,因此結(jié)果偏高[11-13]。溶血對BUN、GLU、TG、Cr、UA的測定結(jié)果影響不大,原因是:①這些生化指標(biāo)受溶血的影響不大[14-15];②正負(fù)干擾相互抵消(血紅蛋白對吸光度的增加屬于正干擾;溶血導(dǎo)致的稀釋作用屬于負(fù)干擾)[16-17]。
總之,溶血標(biāo)本對生化檢驗(yàn)結(jié)果均有一定的影響,需要檢驗(yàn)工作者對溶血標(biāo)本有深入的掌握及了解,在檢驗(yàn)過程中應(yīng)盡可能地采取一些措施以避免溶血標(biāo)本的出現(xiàn),若已出現(xiàn)溶血標(biāo)本,可以采用空白樣品以便減少對檢測結(jié)果的影響,必要時(shí)可以重新采集新鮮血清,這對確保提高生化檢驗(yàn)指標(biāo)的準(zhǔn)確性有非常重要的意義。
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(收稿日期:2015-12-01 本文編輯:許俊琴)