板栗花粉生活力及貯藏適宜溫度的研究

鄒仁雙

(遼寧省林業(yè)種苗管理總站，遼寧 沈陽 110036)

板栗花粉生活力及貯藏適宜溫度的研究

鄒仁雙

(遼寧省林業(yè)種苗管理總站，遼寧 沈陽 110036)

摘要以遼栗10號(hào)花粉為試材，采用培養(yǎng)基法和碘-碘化鉀染色法對(duì)其進(jìn)行生活力測定比較，并比較室溫(20～25 ℃)、4 ℃、-20 ℃3 種不同貯藏溫度下花粉生活力的表現(xiàn)。結(jié)果表明：培養(yǎng)基法較碘-碘化鉀染色法更適用于板栗花粉測定，-20 ℃溫度貯藏板栗花粉的效果較好。

關(guān)鍵詞板栗；花粉活力；培養(yǎng)基法；碘-碘化鉀染色法

板栗(Castaneamollissima)屬于山毛櫸科栗屬植物[1]，是我國山區(qū)一種重要木本糧油作物[1]。在板栗生產(chǎn)過程中，授粉是花期非常重要的自然活動(dòng)，花粉生活力會(huì)受到自身?xiàng)l件和環(huán)境的影響而降低，這將直接影響板栗的坐果甚至產(chǎn)量[2,3]。同時(shí)，在雜交育種工作中，花粉攜帶著父本的遺傳信息，是其在進(jìn)行遺傳信息交換的基本載體，在進(jìn)行雜交授粉前，需要對(duì)花粉進(jìn)行采集和保存，用來實(shí)現(xiàn)跨區(qū)域雜交或者解決花期不遇的問題。所以，無論是板栗的生產(chǎn)栽培還是雜交育種實(shí)踐，了解其花粉的活力特性和貯藏特性都是非常重要的。為此，筆者以遼栗10號(hào)的花粉為試料，對(duì)該品種花粉測定和貯藏溫度分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)，以期為板栗的花粉活力測定及其花粉資源的臨時(shí)保存提供參考，為授粉實(shí)踐提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試材為嫁接5年生栗樹，品種為遼栗10號(hào)。在栗樹散粉前，于2014 年6月中下旬采集該品種帶雄花序的枝條于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行水培2 d。采集雄花序，去除花瓣和花絲后收集足量的花粉，并將其分裝至2 mL離心管內(nèi)，分別貯藏在室溫(20～25 ℃)、4 ℃、-20 ℃3種溫度下進(jìn)行保存。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1固體培養(yǎng)基法測定板栗花粉生活力測定的花粉為新鮮花粉，參照胡適宜的方法[4]，并略作修改。依次稱取硼酸和硝酸鉀各0.1 g、硝酸鈣和硫酸鎂各0.2 g，用蒸餾水溶解并定容至100 mL后混勻作為培養(yǎng)基母液。使用時(shí)，將培養(yǎng)基母液中加0.7%瓊脂，加熱完全溶解后倒入9 cm培養(yǎng)皿內(nèi)。完全冷卻后，取少量花粉輕彈至培養(yǎng)基的中部，蓋上培養(yǎng)皿蓋，32 ℃培養(yǎng)24 h?；ǚ勖劝l(fā)后，利用光學(xué)顯微鏡對(duì)花粉的萌發(fā)情況進(jìn)行觀察。每次觀察的視野數(shù)為5～10，合計(jì)觀察花粉粒的個(gè)數(shù)為200～300?；ǚ凵盍τ妹劝l(fā)率表示，即萌發(fā)的花粉數(shù)量與觀察的花粉數(shù)量百分比。重復(fù)3 次。

1.2.2碘-碘化鉀法測定板栗花粉生活力測定的花粉為新鮮花粉，參照王欽麗的方法[5]，并略作修改。依次稱取碘化鉀1 g和碘0.5 g后用20 mL蒸餾水將其完全溶解，用蒸餾水定容至50 mL。滴2滴于粘有花粉的載物片上。32 ℃下靜置5 min后利用光學(xué)顯微鏡觀察其著色情況：變?yōu)榧t色的認(rèn)定為該花粉具有活力，不變?yōu)榧t色的認(rèn)定為無活力。每次觀察的視野數(shù)為5～10，合計(jì)觀察花粉粒的個(gè)數(shù)為200～300?；ǚ凵盍τ妹劝l(fā)率表示，即著色的花粉數(shù)量與觀察的花粉數(shù)量的百分比。重復(fù)3 次。

1.2.3不同貯藏處理比較將花粉分別在室溫(20～25 ℃)、4 ℃、-20 ℃3種不同環(huán)境進(jìn)行貯藏后，定期測定花粉的生活力。測定方法為固體培養(yǎng)基法(測定操作參見見1.2.1)。每個(gè)處理3次重復(fù)。

2結(jié)果與分析

2．1板栗花粉活力測定方法的確定

從表1 可以看出，使用2種方法檢測新鮮板栗花粉生活力均較高，這說明遼栗10號(hào)的花粉散粉初期有較強(qiáng)的授粉能力，但相比之下，固體培養(yǎng)基法較碘-碘化鉀染色法測定的板栗花粉平均活力高18.9 %，固體培養(yǎng)基法較碘-碘化鉀染色法在測定板栗花粉生活力上效果好。可見，把固體培養(yǎng)基法用于花粉生活力測定使花粉生活力表現(xiàn)得更為充分，其結(jié)果更為可靠。

表1　板栗花粉生活力不同測定方法比較

2．2板栗花粉貯藏方法比較

如圖1所示：無論使用何種貯藏方法，隨著時(shí)間的延長，花粉的生活力均在不斷降低；貯藏溫度越低，下降越慢。室溫(20～25 ℃)下，遼栗10號(hào)的花粉生活力下降的最為明顯，10 d后其花粉萌發(fā)率已降低至30%以下，大部分花粉已喪失活力，但短時(shí)間放置5 d，該品種的花粉的活力仍可超出50%，依然可以用于授粉。在4 ℃貯藏條件下，該品種的花粉的生活力下降速度明顯低于室溫放置；該條件下，花粉貯藏25 d后的萌發(fā)率仍可達(dá)到50%，可以作為雌花和雄花花期不遇時(shí)花粉臨時(shí)儲(chǔ)藏的方法。以-20 ℃作為貯藏條件，55 d后花粉的萌發(fā)率依然可以保持在50%以上，貯藏效果明顯好于前2種方法，是花粉貯藏的理想溫度。

3結(jié)論和討論

在生產(chǎn)和育種實(shí)踐中，花粉生活力往往會(huì)受到其內(nèi)在遺傳因子及外部環(huán)境因素的影響。其中環(huán)境因素中合適的溫度、相對(duì)濕度是花粉萌發(fā)的必要條件[2]。不同檢測方法測定花粉的萌發(fā)率盡管不能夠完全等同于其生活力，但在合適的條件下測定結(jié)果仍可以表征其生活力[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明固體培養(yǎng)基法在32 ℃測定板栗花粉生活力時(shí)，花粉萌發(fā)良好，能更準(zhǔn)確地反映花粉的活力，可作為室內(nèi)花粉生活力測定的常規(guī)方法，這為板栗不同種質(zhì)資源花粉的評(píng)價(jià)提供了良好的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

花粉在貯藏過程中，貯藏溫度是影響花粉保存質(zhì)量的必不可少的關(guān)鍵要素，大量的研究結(jié)果表明：貯藏溫度越低，花粉保存的時(shí)間就會(huì)越長，花粉的利用率越高[7]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，-20 ℃保存較4 ℃保存更為持久，花粉活力保存效果更好。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會(huì).中國植物志(第十二卷)[M].北京：科學(xué)出版社，1998

[2] 王欽麗，盧龍斗，吳小琴，等.花粉的保存及其生活力測定[J].植物學(xué)通報(bào)，2002，19(3)：365-373

[3] 藍(lán)上宗.板栗栽培技術(shù)問答[ M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998.22-23

[4] 胡適宜.花粉生活力的測定[J].植物學(xué)通報(bào)，1993，70(2)：60-62

[5]王欽麗，盧龍斗，吳小琴，等． 花粉的保存及其生活力測定[J]．植物學(xué)通報(bào)，2002，19( 3) : 365- 373

[6] 朱軍.遺傳學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：112-113

[7] 王改萍，徐濤，彭方仁.木本植物花粉的保存研究進(jìn)展[J].林業(yè)科技開發(fā)，2007，21(6)：9-11

Viability of Pollen forCastaneamollissimaand its Optimal Temperature for Storage

Zou Renshuang

(Liaoning Provincial Forestry Seed Administration Station,Shenyang 110036，China)

AbstractTaking pollen of Castanea mollissima No. 10 as materials,its viability were determined by adopting iodine-potassium iodide staining. Viability of pollen under three different temperatures (20-25 ℃,4℃ & -20 ℃)was compared.Result shows that using media method is more applicable to determine the pollen of Castanea mollissima,the temperature of -20 ℃ can store optimally the pollen of Castanea mollissima.

Key wordsCastanea mollissima;viability of pollen;media method;iodine-potassium iodide staining

文章編號(hào)：1005-5215(2016)06-0039-02

收稿日期：2016-04-29

作者簡介：鄒仁雙(1978-)，男，遼寧鳳城人，大學(xué)，工程師，主要從事林業(yè)種苗管理工作.

中圖分類號(hào)：S603.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

doi:10.13601/j.issn.1005-5215.2016.06.013