遺傳性結(jié)直腸癌基因檢測及其在臨床上的應(yīng)用規(guī)范化問題

姜烈君　陸曉旭　黃華藝，2

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遺傳性結(jié)直腸癌基因檢測及其在臨床上的應(yīng)用規(guī)范化問題

姜烈君1陸曉旭1黃華藝1，2

［摘要］遺傳性結(jié)直腸癌是一類多因素遺傳特征家族性疾病，包括Lynch綜合征、家族結(jié)直腸腺瘤性息肉和MYH相關(guān)性息肉，約占所有結(jié)直腸癌的5%。Lynch綜合征（又稱遺傳性非息肉性結(jié)直腸癌）是因無效的錯誤配對修復(fù)（mismatch repair，MMR）而導(dǎo)致微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）的一系列相關(guān)癌癥，常由MMR基因（MLH1、MSH2、MSH6和PMS2）突變引起。家族性結(jié)直腸腺瘤性息肉（familial adenomatous polyposis，F(xiàn)AP）是APC基因突變引起的廣泛性結(jié)腸息肉病。而MUTYH基因突變可引起MYH相關(guān)性息肉（MYH?associated polyposis，MAP）。為了規(guī)范對遺傳性結(jié)直腸癌的分子診斷技術(shù)流程，美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和基因組學(xué)會制定檢測大綱以供各相關(guān)實驗室參考。本文對該大綱進行歸納并結(jié)合我國的大綱進行討論。

［關(guān)鍵詞］遺傳性結(jié)直腸癌；家族性腺瘤樣息肉；Lynch綜合征；MYH相關(guān)性息肉；基因檢測

作者單位：1.廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，廣西，南寧530021
2.美國羅斯威爾帕克癌癥研究所腫瘤外科，紐約，布法羅14263

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）可分為散發(fā)性、家族性或遺傳性幾種特征。約20%～30% CRC為多因素遺傳特征家族性疾病，因遺傳獲得的高度外顯率單基因突變約占所有CRC的5%。Lynch綜合征、家族結(jié)直腸腺瘤性息肉（familial adenoma?tous polyposis，F(xiàn)AP）和MYH相關(guān)性息肉（MYH?associated polyposis，MAP）為3種常見遺傳性CRC，約占所有CRC的5%。隨著分子診斷技術(shù)水平的發(fā)展和測序成本的降低，遺傳性CRC基因的臨床檢測發(fā)展迅速。為幫助臨床發(fā)現(xiàn)和確診遺傳性CRC患者群體，美國醫(yī)學(xué)遺傳和基因組學(xué)會（American College of Medical Genetics and Genom?ics，ACMG）與美國病理學(xué)家學(xué)會（College of American Pathologists，CAP）于2014年發(fā)布了遺傳性結(jié)直腸癌基因診斷技術(shù)標準和大綱［1］。本文就指南中遺傳性CRC突變基因的檢測策略、方法、結(jié)果解釋進行概括，并結(jié)合我國的相關(guān)標準進行討論。

1　Lynch綜合征的基因檢測

Lynch綜合征為遺傳性CRC的常見類型，占所有CRC的3%，常伴其他腫瘤且80%的病例可發(fā)展成CRC，平均發(fā)病年齡為61歲，為常染色體顯性遺傳。多數(shù)患者自父母獲得某個突變的錯誤配對修復(fù)基因（mismatch repair，MMR）［2］。MMR蛋白在細胞周期調(diào)控和遺傳物質(zhì)維護中發(fā)揮重要作用，MMR缺失或缺陷導(dǎo)致組織特異性腫瘤的易感性大大增加。MMR基因（MLH1、MSH2、MSH6和PMS2）突變?yōu)槌Ｒ姷?種致病基因，其他基因（PMS1、TGFBR2、MLH3、EpCAM、BRAF）突變也可見，任何一種MMR基因缺失均可導(dǎo)致Lynch綜合征。在腫瘤組織中，MMRs基因突變導(dǎo)致高頻微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）［3］。但有MMR基因突變的易感個體，可能終身都不會患CRC。

MMR基因突變可發(fā)生于任何種族，4種基因中有多達2 000多種不同突變類型，其中MLH1基因875個、MSH2基因860個、MSH6基因290個、PMS2基因111個。突變類型有錯義、無義、剪接位點或調(diào)節(jié)類型。大片段缺失分別占MLH1和MSH2突變的5%～10%和17%～50%。鮮見MSH6 和PMS2大片段缺失和重復(fù)，未發(fā)現(xiàn)突變熱點。我國對MMR基因的突變情況也有報道。聶辰等［4］對北京地區(qū)94例結(jié)直腸癌患者的組織標本研究發(fā)現(xiàn)遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌（Lynch綜合征）的發(fā)病率為13.83%，MSH2基因突變所占比例達84.62%，與遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌國際合作組織提供的數(shù)據(jù)（40%）相比高于世界每年新發(fā)病例的水平，且MSH2基因突變致病尤為突出。劉曉紅等［5］對100例連續(xù)的結(jié)直腸癌患者進行Lynch綜合征的初步篩查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)9%的病例出現(xiàn)MMR蛋白缺失表達，以MLH1和MSH2蛋白缺失表達為主，1例患者存在BRAF突變。

1.1檢測標準

ACMG制定的檢測標準為符合以下任何一項者，需進行MSI檢測：（1）50歲以下CRC患者；（2）同時或異時CRC或有其它遺傳性非息肉CRC相關(guān)腫瘤；（3）60歲以下CRC患者，伴腫瘤浸潤淋巴細胞；（4）CRC及一代親屬中有50歲以下CRC或遺傳性非息肉病變CRC相關(guān)腫瘤診斷史；（5）CRC且2個一代或二代親屬中有50歲以下CRC或遺傳性非息肉病變CRC相關(guān)腫瘤診斷史。我國于2004年發(fā)布了中國人遺傳性大腸癌的篩檢標準［6］：家系中至少有2例組織病理學(xué)明確診斷的CRC，其中的2例為父母與子女或同胞兄弟姐妹的關(guān)系，并且符合以下一條：（1）至少1例為多發(fā)性大腸癌患者（包括腺瘤）；（2）至少1例大腸癌發(fā)病早于50歲；（3）家系中至少1人患遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌（hereditary nonpolyposis colorectal cancer，HNPCC）相關(guān)腸外惡性腫瘤（包括胃癌、子宮內(nèi)膜癌、小腸癌、輸尿管或腎盂癌、卵巢癌、肝膽系統(tǒng)癌）。相比之下，ACMG的篩檢范圍更廣泛，減少漏診的可能性。

1.2檢測策略

2004年我國遺傳性大腸癌協(xié)作組制定的篩查策略制定了中國人HNPCC家系篩查標準［6］：在實驗室條件允許的情況下，符合中國人HNPCC篩檢標準的家系均應(yīng)該進行hMLH1、hMSH2基因的免疫組織化學(xué)研究和MSI檢測。兩者均陰性者，可無需進行突變檢測分析；兩者之一為陽性者，則需進入下一步的hMLH1和hMSH2基因種系突變（germline mutation）檢測分析。而ACMG推薦的檢測策略更為詳細、實用，流程如圖1［1］所示。

ACMG推薦，高度懷疑為Lynch綜合癥患者需做MMR蛋白免疫組化（immunohistochemistry，IHC）染色和MSI分析。

（1）如果檢測結(jié)果提示微衛(wèi)星穩(wěn)定或低頻率微衛(wèi)星不穩(wěn)定，且IHC檢測結(jié)果為有MMR蛋白表達，則無Lynch綜合征。

（2）如果檢測結(jié)果提示高頻率微衛(wèi)星不穩(wěn)定，IHC結(jié)果為MLH1或PMS2缺失，則進行MLH1啟動子“C區(qū)”的甲基化分析與BRAF基因突變p. V600E檢測［7］。BRAF基因突變p.V600E多見于散發(fā)性CRC，罕見于Lynch綜合征腫瘤患者［8］。因此，如檢測到MLH1高甲基化和BRAF突變，則認為是散發(fā)性CRC，無需家系分析。如檢測結(jié)果提示MLH1有高甲基化，但無BRAF突變，正常組織里無高甲基化，則CRC為非MMR缺陷引起；如果正常組織中存在高甲基化，則為遺傳性表觀突變。如檢測結(jié)果提示MLH1甲基化正常且無BRAF突變，進一步進行MLH1基因突變檢測，如檢測到突變則為Lynch綜合征，需進行家系分析；如無MLH1基因突變，則再進行PMS2基因檢測，有突變則為Lynch綜合征，需家系分析，無突變則為Lynch綜合征攜帶未經(jīng)確認的突變。

（3）如果檢測結(jié)果提示高頻率微衛(wèi)星不穩(wěn)定，IHC結(jié)果提示MLH2缺失，或MSH6單一缺失或MSH2/MSH6雙缺失，則進一步進行MSH2基因突變檢測，如有突變則為Lynch綜合征，需家系分析；如無突變則進行EpCAM缺失檢測，如有突變則為Lynch綜合征，需家系分析；無突變者則再進行MSH6基因突變檢測，如有突變則為Lynch綜合征，需家系分析；無突變則為Lynch綜合征攜帶未經(jīng)確認的突變。

1.3MMR基因突變檢測方法

ACMG規(guī)定，檢測樣本應(yīng)同時包含腫瘤和正常組織，新鮮冰凍或石蠟包埋的組織均適用。組織切片先行H&E染色以辨別正常和腫瘤組織的邊界再進行IHC檢測。腫瘤組織提取的DNA用于MSI檢測，血液中提取的DNA可作為正常對照。除PMS2基因外，可用石蠟包埋的組織提取的DNA進行MMR基因突變分析。從病人血液中提取的DNA用于測序分析。

1.3.1MMR蛋白IHC檢測

IHC適用于所有4種MMR基因表達產(chǎn)物分析并應(yīng)同時對其進行檢測。觀察MMR基因蛋白在細胞核和鄰近非腫瘤組織中的表達情況，結(jié)果以MMR基因蛋白存在（陽性）或缺失（陰性）表示。這與我國的標準的模式不同，即把缺失表達MMR蛋白的定為陽性結(jié)果，正常表達MMR蛋白的定為陰性結(jié)果。

1.3.2MSI檢測方法

用PCR檢測MSI，可使用美國國立癌癥研究所（National Cancer Institute，NCI）的微衛(wèi)星重復(fù)序列組套BAT25、BAT26、D2S123、D17S250和D5S346。不建議用BAT26評估Lynch綜合征高危人群，因為BAT26穩(wěn)定性也見于Lynch綜合征微衛(wèi)星不穩(wěn)定性腫瘤中，特別是大片段MSH2缺失。BAT25和BAT26可在同一基因座上呈多態(tài)性，因此歸類為MSI陽性并不正確。

1.3.3MMR基因的突變檢測

MMR基因突變分子檢測為Lynch綜合征的確診方法。

我國2004年大綱推薦用聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象多態(tài)（polymerase chain reaction?single strand con?formation polymorphism，PCR?SSCP）或變性高效液相色譜分析（denaturing high performance liquid chromatography，DHPLC）法，或直接進行DNA序列測定。如上述方法檢測結(jié)果陰性，需考慮大片段缺失的檢測。

ACMG推薦PCR法檢測MMR點突變，數(shù)套引物、PCR條件以及分離檢測方法詳見文獻［1］。dbSNP數(shù)據(jù)庫建立135及1000基因組突變數(shù)據(jù)庫定期更新人類基因組SNPs。實驗室應(yīng)每年在最低引物量的情況下檢測SNPs的出現(xiàn)情況。

用靶向突變檢測技術(shù)檢測BRAF基因p.V600E錯義突變，如限制酶切技術(shù)、等位基因特異性引物延伸技術(shù)，或?qū)崟r熒光定量PCR。用改良重亞硫酸鹽處理結(jié)合甲基化特異熒光定量PCR，分析MLH1啟動子C區(qū)甲基化，檢測甲基化和非甲基化基因座。

Sanger測序是對MMR基因的所有編碼外顯子進行突變檢測的金標準，在PMS2突變檢測時可用功能基因特異引物長鏈PCR來克服假基因的干擾。下一代測序（next generation sequencing，NGS）可高通量、低成本地對CRC相關(guān)基因進行測序，但PMS2因假基因存在不能用NGS測序。NGS無法檢測所有目的區(qū)（如外顯子缺失或重復(fù)），只能用Sanger測序和其它方法彌補。對NGS中臨床意義未明的序列變異，遵循ACMG對序列變異的解釋。家系研究可闡明錯義突變屬病理性或良性特征。

檢測大片段缺失的主要方法為Southern blot和多重連接依賴的探針擴增技術(shù)（multiplex ligation?dependent probe amplification，MLPA）。MLPA可有效檢測2個或多個連續(xù)外顯子缺失，通過一個缺失外顯子可推斷其他外顯子缺失。若MLPA是初始方法，則Southern blot或?qū)崟r定量PCR法作為確認方法。其它檢測大基因重排的方法包括多重擴增探針雜交法和實時定量PCR。

基因靶向的基于陣列比較基因組雜交技術(shù)（array?base comparative genomic hybridization，aCGH）檢測單個或多個外顯子缺失和重復(fù)：aCGH使用多重探針，靈敏度極高，克服了MLPA法中因SNPs引起的基因座信號丟失的缺點。假陽性結(jié)果可由引物、探針或限制性核酸內(nèi)切酶消化位點引起的SNP造成。證實真陽性通常需使用另一種缺失檢測方法，可用Southern blot和MLPA對同一基因進行缺失分析，也可用定量PCR分析。搜索GenBank dbSNP數(shù)據(jù)庫和選擇無SNP的引物及探針位點可消除假陽性。通過測序可容易地檢測到該外顯子的SNP。對于單一外顯子缺失，可通過第2種方法使用相同引物，檢測另一區(qū)域的序列來證實，如實時定量PCR可作確證方法。

EpCAM基因缺失：常見EpCAM基因的3’端缺失，缺失引起MSH2基因體細胞超甲基化，因為這2個基因在2號染色體上毗鄰。由EpCAM基因缺失引起的腫瘤，IHC分析證實有高頻MSI和MSH2或MSH6缺失。對IHC發(fā)現(xiàn)的MSH2或MSH6缺失，可用Southern blot、MLPA和基因靶向的aCGH檢測EpCAM基因的3’端缺失。

1.4結(jié)果解釋

1.4.1IHC結(jié)果

MMR蛋白（MLH1、MSH2、MSH6和PMS2）染色結(jié)果報告為“某某蛋白存在（陽性）”、“某某蛋白缺失（陰性）”、或“無法解釋”?！盁o法解釋”是指作為內(nèi)標用的陽性對照品不染色（陽性對照物顯陰性結(jié)果）的陰性結(jié)果的腫瘤標本。不推薦定量解釋。

1.4.2PCR法檢測MSI

報告應(yīng)包括微衛(wèi)星分析板的分析結(jié)果和每個基因座的結(jié)果。若MSI不穩(wěn)定重復(fù)序列大于或等于40%則報告為：高頻微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（high fre?quency of micro?satellite instability，MSI?H）；若MSI不穩(wěn)定重復(fù)序列小于40%則報告為：低頻微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（low frequency of micro?satellite instability，MSI?L）；未檢測到不穩(wěn)定重復(fù)序列則報告為微衛(wèi)星穩(wěn)定（micro?satellite stable，MSS）。MSI?H提示Lynch綜合征易感。

1.4.3MMR基因的突變檢測

報告應(yīng)包括基因名、突變（核苷酸位置）、氨基酸改變、缺失或插入，以及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物數(shù)量。如有改變應(yīng)注明：有害（病理性的）、良性或結(jié)果未明的改變。

2　家族性腺瘤性息肉?。╢amilial adenoma?tous polyposis，F(xiàn)AP）基因檢測

FAP易轉(zhuǎn)化成CRC，占所有CRC的1%。該病以大量結(jié)直腸腺瘤息肉（〉100顆）為特征，平均發(fā)病年齡16歲，為染色體顯性遺傳病。FAP曾被認為是Gardner綜合征。漸弱型腺瘤息肉?。╝ttenuated ad?enomatous polyposis，AFAP）以結(jié)腸息肉少（平均30顆）和發(fā)病時間晚（平均發(fā)病年齡為40歲）為特征。FAP、AFAP和Gardner綜合征均由腺瘤性息肉病基因（adenomatous polyposis coli，APC）的種系突變引起。APC為抑癌基因，正常APC蛋白與細胞粘附和微管聚合有關(guān)。APC功能喪失導(dǎo)致癌基因c?myc、cyclin?D和其它靶基因的異常轉(zhuǎn)錄。無論被檢者父母、同胞是否患該病，若繼承2種隱性遺傳MUTYH突變基因，其可患腺瘤性息肉。

APC基因種系突變達1 500多種。大部分為點突變，包括核苷酸置換、缺失或插入，多數(shù)APC突變可產(chǎn)生終止密碼，翻譯出無功能的“截短蛋白”。少數(shù)突變?yōu)殄e義突變，誘導(dǎo)FAP發(fā)生。約20%種系突變包含大范圍缺失、插入和復(fù)雜的基因重排。APC基因突變存在民族差異，我國珠珠［9］等對云南5個FAP家系A(chǔ)PC基因突變研究，用DNA測序法查出1個家系的APC基因密碼子1196S＞SX突變，云南省少數(shù)民族家系A(chǔ)PC基因的突變率不高。

FAP新突變率已高達20%，突變檢測可評估遺傳風(fēng)險，但不能明確特定突變與臨床表型的關(guān)系，無法指導(dǎo)FAP臨床診療。APC基因的p.I1307K錯義突變可增加CRC的易感性（10%～20%）［10］，建議存在此突變的個體進行早期篩查。p.E1317Q錯義突變可能與結(jié)直腸腺瘤及CRC易感性相關(guān)。

2.1檢測標準

ACMG的檢測標準為：（1）小于40歲診斷為CRC的患者；（2）一級親屬診斷為CRC的患者；（3）其他的腺瘤或腫瘤患者。FAP測試： 100顆顯性遺傳腺瘤性息肉；AFAP測試：10～100顆顯性遺傳腺瘤性息肉。我國遺傳性大腸癌協(xié)作組制定的檢測指征：大腸內(nèi)彌漫腺瘤性息肉，100顆以上；或腺瘤性息肉不足100顆者，伴有家族史或先天性視網(wǎng)膜色素上皮肥厚。ACMG的檢測標準更為寬泛。

2.2檢測策略

2004年我國遺傳性大腸癌協(xié)作組制定的檢測策略［6］：被診為FAP者應(yīng)進行APC基因的突變檢測。ACMG推薦FAP/AFAP綜合征檢測的方案如圖2［1］所示：使用APC基因全序列檢測FAP。若突變檢測陽性，診斷為FAP/AFAP；對于高危家庭成員，可提供遺傳咨詢。若突變檢測陰性，則進行大片段基因重排檢測?？赡艽嬖谒捎玫臋z測方法未能檢測到患者的APC基因突變，應(yīng)考慮MAP測試（對無或弱的FHx以及較少息肉的患者很重要）。

2.3檢測方法

2.3.1點突變檢測

涉及PCR法、引物設(shè)計、PCR產(chǎn)物、基因篩查、Sanger測序和NGS。大部分APC基因突變是點突變，直接測序法靈敏度最高，大部分實驗室把DNA直接測序（Sanger和NGS）列為標準方法。

2.3.2大范圍突變檢測

可用基因靶向aCGH分析方法。

2.4結(jié)果解釋

約80% FAP發(fā)生基因突變，F(xiàn)AP基因突變檢測陽性結(jié)果可診斷CRC。APC基因突變檢測用于疾病診斷和發(fā)病前期的篩查，外顯率100%。用于產(chǎn)前診斷要求有患病家族史，樣品為羊水細胞和絨毛膜。

3　MYH相關(guān)的結(jié)直腸息肉（MYH?associat?ed polyposis，MAP）基因檢測

MYH相關(guān)息肉是由MUTYH基因的雙等位基因突變引起，這種突變的個體60歲時患CRC的外顯率高但不全是CRC，為常染色體隱性遺傳，通常無確切家族史。MAP引起的CRC約占所有CRC 的0.7%，占家族性或早發(fā)CRC（息肉數(shù)量〈15～20顆）的2%。MAP患者息肉數(shù)量不固定，雙等位基因突變在息肉數(shù)15～100顆的患者中占30%，在息肉數(shù)大于100的患者中達7%，雙等位基因突變也見于無息肉患者。由于MAP家族史不顯著，AFAP、FAP新突變的發(fā)生率高，多腺瘤息肉患者應(yīng)同時檢測MUTYH和APC基因突變。

MUTYH是堿基切除修復(fù)基因，在DNA復(fù)制時，MUTYH通過切除與8?羥鳥嘌呤錯配的腺嘌呤殘基修復(fù)DNA。含MUTYH等位基因突變的腫瘤組織有大量的APC基因體細胞突變。MUTYH基因突變見于多數(shù)種族中，特定種族存在若干主要突變，如p.Y90X和p.E499X，國內(nèi)尚未見有報道。目前已知100多種MUTYH基因突變，約有1%～2%普通人群攜帶MUTYH基因突變［11］。

3.1檢測標準

（1）診斷為CRC，年齡在40歲以下；（2）息肉數(shù)量10顆以上，且APC基因突變檢測陰性；（3）有CRC家族史且屬隱性遺傳，包括伴隨息肉和無息肉的CRC。

3.2檢測策略

MAP綜合征的推薦檢測方案如圖2［1］所示：建議在進行MUTYH基因全序列檢測前先進行p.Y165C和p.G382D檢測。若檢測到等位基因突變，可診斷為MAP，為后代和親屬提供測試以確定攜帶者。若2種突變檢測均陰性，則根據(jù)臨床表現(xiàn)及家族史決定是否行MUTYH基因全序列檢測。若檢測到一種雜合子突變，下一步則進行MUTYH基因全序列檢測。如檢測到等位基因突變可診斷為MAP；如檢測到一種雜合子突變，病人至少為MAP的攜帶者，此時可能存在所使用的測試方法無法檢測出MUTYH突變，考慮進行FAP檢測，為親屬提供篩查與遺傳咨詢；如陰性，根據(jù)FHx與臨床表現(xiàn)篩查，考慮進行FAP檢測。

3.3檢測方法

大部分MUTYH基因突變?yōu)辄c突變，包括無義、錯義和小片段插入或缺失。在MUTYH基因中未見大的缺失或復(fù)制被報道。

用PCR法檢測點突變。限制性片段長度多態(tài)性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）是檢測p.Y165C和p.G382D突變最常用的方法。高壓液相色譜、焦磷酸測序和等位基因特異引物伸展等技術(shù)也可用于p.Y165C和p.G382D突變檢測。多數(shù)靶向方法對MUTYH基因突變的檢測率非常靈敏，可達99%。意義未明的SNPs與突變極為相似，可導(dǎo)致結(jié)果假陰性。也可用Sanger測序和NGS檢測點突變。MUTYH基因全序列檢測可檢出高達99%的突變，Sanger測序法不適用于檢測雜合子單個外顯子以及多個外顯子缺失和重復(fù)。

3.4結(jié)果解釋

MUTYH基因突變檢測用于疾病確診及攜帶者檢查。對于雜合子若共同突變中只有一項陽性，或突變檢測陰性，則行MUTYH基因測序。

4　報告格式和其它

分子遺傳學(xué)測試報告應(yīng)該提供如下信息：病人和醫(yī)生的信息、測試操作者、測試結(jié)果和解釋、進一步的建議和補充信息。理想的報告模板，應(yīng)該包含基因名字、突變的核苷酸位置、氨基酸的改變、缺失或插入和轉(zhuǎn)錄物數(shù)量等，還要注明所發(fā)現(xiàn)的改變屬病理性、無害或目前無法解釋。設(shè)計分子遺傳學(xué)測試報告模板，旨在提高臨床決策，讓實驗室和開單臨床醫(yī)師之間更有效地溝通，并評估使用該模板生成的分子檢測報告的實用性和有效性。

5　小結(jié)

對于可疑的遺傳性結(jié)直腸癌家系來說最好的方法是通過分子遺傳學(xué)檢測證實這個家族中是否具有遺傳性結(jié)直腸癌胚系突變，然后將家系資料交給腫瘤遺傳學(xué)專家和相關(guān)人員進行遠期評價，一旦遺傳性結(jié)直腸癌得到確診，家族中患病高危人群應(yīng)該得到重視，予以早期、連續(xù)監(jiān)測和早期手術(shù)有重要意義。而對已有臨床癥狀體征的患者，進行分子遺傳學(xué)檢測對診斷起確定作用。雖然我國遺傳性大腸癌協(xié)作組制定了遺傳性CRC篩檢標準的實施方案，但不夠全面和詳細，ACMG關(guān)于遺傳性結(jié)直腸癌的分子遺傳學(xué)檢測的指南，對檢測策略和檢測方法進行了詳細討論。盡管遺傳性結(jié)直腸癌篩查檢測的臨床實施關(guān)鍵的問題已經(jīng)解決，但是，測試方法無法檢測出來的突變及攜帶未經(jīng)確認的突變的具體臨床應(yīng)用還需要研究者們進一步交流完善。

參考文獻

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講座

Genetic testing of inherited colorectal cancer and its laboratory standards in clinical application

JIANG Liejun1，LU Xiaoxu1，HUANG Huayi1，2
（1. Department of Laboratory Medicine，the People’s Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region，Nanning，Guangxi，China，530021；2. Department of Surgical Oncology，Roswell Park Cancer Institute，Buffalo，New York，USA，14263）

［ABSTRACTS］Inherited colorectal cancer (Lynch syndrome, familial adenomatous polyposis, and mut Y homolog (MYH)?associated polyposis) is a type of multifactor inherited familial diseases which accounts for about 5% of all colorectal cancers. Lynch syndrome is typically recognized as an assemblage of associated cancers characterized by defective mismatch repair (MMR) leading to microsatellite instability (MSI) usually caused by the mutation of the MMR gene (MLH1, MSH2, MSH6, and PMS2). Familial adenomatous polyposis (FAP) is caused by mutations in the APC gene while MYH?associated polyposis (MAP) is caused by mutations in the MUTYH gene. In order to assist clinical laboratories to develop and validate testing for this group of inherited colorectal cancers in China, this paper discusses the technical standards and guidelines for genetic testing of inherited colorectal cancer established by China’s peers in reference to the standards and guidelines developed by American College of Medical Genetics and Genomics.

［KEY WORDS］Inherited colorectal cancer；Familial adenomatous polyposis；Lynch syndrome；MYH?associated polyposis；Genetic testing

通訊作者：黃華藝，E?mail：Huayi.Huang@Roswellpark.org