青海都蘭野生反芻獸和嚙齒動物布魯菌病血清學(xué)檢查

羅建軍，肖　峰，蘇貴軍，王曉潤（.青海省都蘭縣動物疫病預(yù)防控制中心，青海都蘭8600；.青海省動物疫病預(yù)防控制中心，青海西寧8000）

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青海都蘭野生反芻獸和嚙齒動物布魯菌病血清學(xué)檢查

羅建軍1，肖峰1，蘇貴軍1，王曉潤2
（1.青海省都蘭縣動物疫病預(yù)防控制中心，青海都蘭816100；2.青海省動物疫病預(yù)防控制中心，青海西寧810001）

摘要：采集青海省都蘭縣境內(nèi)動物血清：野生馬鹿15份，野生巖羊6份，野生黃羊血清20份，高原鼠兔100份，喜馬拉雅旱獺20份進(jìn)行布魯菌病檢測，結(jié)果：被檢野生馬鹿血清15份，試管凝集陽性反應(yīng)的2份，占13.3%，虎紅凝集試驗(yàn)陽性反應(yīng)1份，占6%；被檢野生巖羊6份，試管凝集陽性反應(yīng)1份，占16.7%，虎紅凝集試驗(yàn)為陰性反應(yīng)；被檢野生黃羊血清20份，試管凝集陽性反應(yīng)的3份，占15%，虎紅凝集試驗(yàn)陽性反應(yīng)1份，占5%；被檢高原鼠兔血清100份，試管凝集陽性反應(yīng)的3份，占3%，虎紅凝集試驗(yàn)有陽性反應(yīng)1份，占1%；被檢喜馬拉雅旱獺20只，試管凝集陽性反應(yīng)的1只，占5%，虎紅凝集試驗(yàn)為陰性反應(yīng)。

關(guān)鍵詞：野生反芻獸；嚙齒動物；布魯菌病；血清學(xué)檢測

布魯菌病（Brucella），是動物和人類共患的一種高度接觸性傳染病，其病原是布魯菌屬菌。目前，我國和世界上很多國家的家畜布魯菌病雖已得到有效凈化或成功的控制，然而野生動物布魯菌病的存在仍構(gòu)成了對畜牧業(yè)和人類健康的潛在威脅，其重要性日益增加。為更好地防控此病，2013年6月我們對青海省海西州都蘭縣境內(nèi)的8個(gè)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)的野生反芻獸和嚙齒動物進(jìn)行了布魯菌病血清學(xué)檢測。根據(jù)相關(guān)國外資料介紹，野生動物布魯菌病的傳染源可成為家畜布魯菌病的來源，因?yàn)椴剪斁稍诿浇槔ハx草原革蜱（扁虱）體內(nèi)繁殖，且存活的時(shí)間較長，感染布魯菌的野生動物可通過草原革蜱（扁虱）寄生家畜感染，可長期保持對家畜的致病力；所以，在放牧地區(qū)防控家畜的布魯菌病的傳播中，搞清野生動物布魯菌的感染也是一個(gè)很重要的方面。

1　材料

1.1血清樣品通過都蘭縣巴隆國際狩獵場，采集野生馬鹿（Red deer）血清15份，野生巖羊（Blue sheep）血清6份，野生黃羊（The antelope）血清20份，（均頸靜脈采血），在都蘭縣境內(nèi)8鄉(xiāng)、鎮(zhèn)荒漠型草場采集高原鼠兔（Ocliotcnacu-ryoniae）（摘眼法采血）采集血清100份，喜馬拉雅旱獺（Mcrmota himalayana）（股動脈采血）血清20份。

1.2診斷液購自青島易邦生物工程有限公司的獸用布魯菌病試管凝集抗原與對照陰、陽性血清，批準(zhǔn)文號獸藥生字（2006）150138011，和獸用布魯菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原，批準(zhǔn)文號獸藥生字（2006）130138017，試驗(yàn)用平板玻璃板，按需要數(shù)量的10 mL玻璃試管，移液器，移液嘴等試驗(yàn)器械。

2　檢測方法

對被檢的反芻獸、嚙齒動物的血清進(jìn)行虎紅平板凝聚試驗(yàn)和試管凝集反應(yīng)的檢查

2.1血清虎紅平板凝集試驗(yàn)劃出4 cm的若干小格，分別標(biāo)記待檢血清號。取待檢血清0.03 mL用移液器加入相應(yīng)小格，然后用移液器依次滴加抗原0.03 mL與其相混合，等待4 min后觀察結(jié)果，同時(shí)作陰、陽性血清對照，每份血清在規(guī)定的4 min內(nèi)出現(xiàn)凝集反應(yīng)判為陽性，不出現(xiàn)凝集反應(yīng)判為陰性。

2.2試管凝集反應(yīng)檢測抗原使用時(shí)作1∶02稀釋，對所有野生動物的血清用0. 5%苯酚生理鹽水稀釋，搖勻，稀釋度為1∶12.5、1∶25，1∶50和1∶100，1∶200稀釋，同時(shí)設(shè)陰、陽性血清對照，每管各加入布魯菌試管凝集抗原原液0.5 mL試管中，搖勻，放入36℃～37℃的溫箱中24 h，觀察凝集結(jié)果，判定結(jié)果，在1∶50的血清稀釋度發(fā)生兩個(gè)加號（++）以上的凝集反應(yīng)時(shí)判為陽性反應(yīng)，1∶25為可疑。

3　結(jié)果

被檢野生馬鹿血清15份，試管凝集陽性反應(yīng)2份，占13.3%，虎紅凝集試驗(yàn)有陽性反應(yīng)1份，占6%；被檢野生巖羊6份，試管凝集陽性反應(yīng)1份，占16.7%，虎紅凝集試驗(yàn)為陰性反應(yīng)；被檢野生黃羊血清20份，試管凝集陽性反應(yīng)3份，占15%，虎紅凝集試驗(yàn)有陽性反應(yīng)1份，占5%；被檢高原鼠兔血清100份，試管凝集陽性反應(yīng)3份，占3%，虎紅凝集試驗(yàn)有陽性反應(yīng)1份，占1%；被檢喜馬拉雅旱獺20只，試管凝集陽性反應(yīng)1只，占5%，虎紅凝集試驗(yàn)為陰性反應(yīng)。見表1。

表1　都蘭縣野生反芻獸和嚙齒動物布魯菌病檢測

4　結(jié)論

在被檢的15只馬鹿、6只巖羊、20只黃羊、100只鼠兔、20只旱獺中，布魯菌病血清試管凝集反應(yīng)和虎紅平板凝集試驗(yàn)，試管凝集反應(yīng)陽性率均高于虎紅平板試驗(yàn)，分別為13.3%/6%；16.7%/ 0；15%/5%；3/1；5/0。我們用于檢測的兩種血清學(xué)檢測試劑，是用于家畜的布魯菌病診斷，用于野生動物和嚙齒類動物，可能不是最佳的檢測方法，結(jié)合西寧動物檢疫所趙青、賈鴻濱等（1984）在海西州天俊縣用試管反應(yīng)做的80只旱獺，布魯菌感染陽性率為2.5%的結(jié)果，證明青海省境內(nèi)野生動物普遍帶有布魯菌，而感染了布魯菌的野生反芻獸和嚙齒動物通過其體表寄生的蜱蟲而使家畜感染，布魯菌在蜱蟲體內(nèi)存活時(shí)間較長，若在放牧的家畜受到蜱蟲的侵襲，肯定會受到感染，對感染了布魯菌的野生反芻獸和嚙齒動物，在布魯菌病的傳播上，作為布魯菌病自然疫源，具有一定對人和家畜潛在的感染作用。

因此，防控人、家畜布魯菌病，不但要對家畜進(jìn)行布魯菌檢測、免疫，還要進(jìn)行驅(qū)除蜱蟲的工作，以及在蜱蟲活躍的季節(jié)，本地每年4～5月份進(jìn)行避免和野生動物在一個(gè)草場放牧，同時(shí)采取避蜱放牧，這樣可在一定程度上阻斷布魯菌對家畜的侵襲，同時(shí)，需要對廣大牧民養(yǎng)殖戶普及有效的防控布魯菌病的科普知識和措施，做到防患于未然。

參考文獻(xiàn)：

［1］趙青，賈鴻濱.天峻野生旱獺布魯菌病血清學(xué)調(diào)查［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，1994（5）：23-24.

中圖分類號：S858.28

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：0529- 6005（2016）03- 0097- 02

收稿日期：2014-07-14

作者簡介：羅建軍（1974-），男，中級獸醫(yī)師，本科，研究方向?yàn)閯游镆卟》揽兀珽-mail：ghxnabcd@126.com

通訊作者：王曉潤，E-mail：qhxnabcd@126.com